索氏抽提法實(shí)驗(yàn)報(bào)告

索氏抽提法試驗(yàn)報(bào)告一、試驗(yàn)?zāi)康牧私馑魇铣樘岱y(cè)定粗脂肪含量的原理；把握索氏抽提法測(cè)定粗脂肪含量操作方法；測(cè)定脂肪的含量，可以作為鑒別樣品品質(zhì)優(yōu)劣的一個(gè)指標(biāo)。二、試驗(yàn)原理脂肪含量的測(cè)定有很多方法，如抽提法、酸水解法、比重法、折射法、電測(cè)和核磁共振法等。目前國(guó)內(nèi)外普遍承受抽提法，其中索氏抽提法〔Soxhletextractormethod〕是公認(rèn)的經(jīng)典方法，也是我國(guó)糧油分折首選的標(biāo)準(zhǔn)方法。本試驗(yàn)承受索氏抽提法中的剩余法，即用低沸點(diǎn)有機(jī)溶劑〔乙醚或石油醚〕回流抽提，除去樣品中的粗脂肪，以樣品與殘?jiān)亓恐?，?jì)算粗脂肪含量。由于有機(jī)溶劑的抽提物中除脂肪外，還或多或少含有游離脂肪酸、甾醇、磷脂、蠟及色素等類脂物質(zhì)，因而抽提法測(cè)定的結(jié)果只能是粗脂肪。三、試驗(yàn)試劑和器材試驗(yàn)材料油料作物種子〔花生〕、中速濾紙.儀器①SZF-06A脂肪儀②枯燥器〔直徑15～18cm，盛變色硅膠〕③不銹鋼鑷子〔長(zhǎng)20cm〕④培育皿⑤分析天平⑥稱量瓶⑦恒溫水浴⑧烘箱⑨樣品篩〔60目〕試劑無(wú)水乙醚或低沸點(diǎn)石油醚〔A.R.〕四、操作步驟預(yù)備①將濾紙切成4cm×4cm，疊成一邊不封口的紙包，用硬鉛筆編寫挨次號(hào)，按挨次排列在培育皿中。將盛有濾紙包的培育皿移入105±2℃烘箱中枯燥2h，取出放入枯燥器中，冷卻至室溫；②按挨次將各濾紙包稱重〔記作a〕、〔稱量時(shí)室內(nèi)相對(duì)濕度必須低于70％〕。包裝和枯燥①將花生研碎,放入105±2℃的烘箱中枯燥3h，移至枯燥器中冷卻至室溫；②稱取約0.5g左右研碎的樣品放入上述已稱重的濾紙包中裝入，封好包口，按挨次號(hào)依次放入稱量瓶中稱重〔記作b〕。抽提①將裝有樣品的濾紙包用長(zhǎng)鑷子放入抽提筒中，向其中注入一次虹吸量的1.67倍的無(wú)水乙醚，使樣品包完全浸沒(méi)在乙醚中；②連接好抽提器各局部，接通冷凝水水流，在恒溫水浴中進(jìn)展抽提，調(diào)整水溫為60〔10min-15min虹吸一次抽提至抽取筒內(nèi)的乙醚用濾紙點(diǎn)滴檢查無(wú)油跡為止〔約需6～12h,本次試驗(yàn)1h〕；③抽提完畢后，用長(zhǎng)鑷子取出濾紙包，在通風(fēng)處使乙醚揮發(fā)〔抽提室溫以12～25℃為宜〕。提取瓶中的乙醚另行回收。稱重①待乙醚揮發(fā)之后，將濾紙包置于65℃烘箱中枯燥15min，放入枯燥器冷卻至恒重為止〔記作c〕。五、試驗(yàn)結(jié)果粗脂肪含量〔％〕

b-cb-cb-a

100式中：a：稱量瓶加濾紙包重〔g〕b：稱量瓶加濾紙包和烘干樣重〔g〕c：稱量瓶加濾紙包和抽提后烘干殘?jiān)亍瞘〕由試驗(yàn)得數(shù)據(jù)：a：稱量瓶加濾紙包重〔g〕b：稱量瓶加濾紙包和烘干樣重〔g〕c：稱量瓶加濾紙包和抽提后烘干殘?jiān)亍瞘〕

0.230.840.48粗脂肪含量〔％〕b-a0.84-0.48100 100b-c0.84-0.2359.02％即本次試驗(yàn)得粗脂肪含量為：59.02％六、留意事項(xiàng)測(cè)定用樣品、抽提器、抽提用有機(jī)溶劑都需要進(jìn)展脫水處理。這是由于：第一，抽提體系中有水，會(huì)使樣品中的水溶性物質(zhì)溶出，導(dǎo)致測(cè)定結(jié)果偏高；其次，抽提體系中有水，則抽提溶劑易被水飽和〔尤其是乙醚，可飽和約2％的水〕，從而影響抽提效率；第三，樣品中有水，抽提溶劑不易滲入細(xì)胞組織內(nèi)部，結(jié)果不易將脂肪抽提干凈；試樣粗細(xì)度要適宜。試樣粉末過(guò)粗，脂肪不易抽提干凈；試樣粉末過(guò)細(xì)，則有可能透過(guò)濾紙孔隙隨回流溶劑流失，影響測(cè)定結(jié)果；索氏抽提法測(cè)定脂肪最大的缺乏是耗時(shí)過(guò)長(zhǎng)，如能將樣品先回流1～2次，然后浸泡在溶劑中過(guò)夜，次日再連續(xù)抽提，則可明顯縮短抽提時(shí)間；YG-Ⅱ型油分測(cè)定器容量大，適合于樣品較多的選種鑒定工作使用，溫度掌握在70℃左右，8h可提取完畢；必需格外留意乙醚的安全使用。抽提室內(nèi)嚴(yán)禁有明火存在或用明火加熱。乙醚中不得含有過(guò)氧化物，保持抽提室內(nèi)良好通風(fēng)，以防燃爆；乙醚中過(guò)氧化物的檢查方法是：取適量乙醚，參加碘化鉀溶液，用力搖動(dòng)，放置1min，假設(shè)消滅黃色則說(shuō)明存在過(guò)氧化物，應(yīng)進(jìn)展處理前方可使用。處理的方法是：將乙醚放入分液漏斗，先以1/5乙醚量的稀KOH溶液洗滌2～3次，以除去乙醇；然后用鹽酸酸化，參加1/5乙醚量的FeSO4或Na2SO3溶液，振搖，靜置，分層后棄去下層水溶液，以除去過(guò)氧化物；最終用水洗至中性，用無(wú)水CaCl2或無(wú)水Na2SO4脫水，并進(jìn)展重蒸餾。七、思考與爭(zhēng)論如何利用剩余法測(cè)定油料作物種子中的粗脂肪含量？答：剩余法測(cè)定油料作物種子中的粗脂肪含量，是用低沸點(diǎn)有機(jī)溶劑〔乙醚或石油醚〕回流抽提，除去樣品中的粗脂肪，以樣品與殘?jiān)亓恐?，?lái)計(jì)算粗脂肪含量。測(cè)定過(guò)程中為什么需要對(duì)樣品、抽提器、抽提用有機(jī)溶劑都要進(jìn)行脫水處理？答：進(jìn)展脫水處理的緣由有三：第一，抽提體系中有水，會(huì)使樣品中的水溶性物質(zhì)溶出，導(dǎo)致測(cè)定結(jié)果偏高；其次，抽提體系中有水，則抽提溶劑易被水飽和〔尤其是乙醚，可飽和約2％的水〕，從而影響抽提效率；第三，樣品中有水，抽提溶劑不易滲入細(xì)胞組織內(nèi)部，結(jié)果不易將脂肪抽提干凈。在試驗(yàn)過(guò)程中安全使用乙醚應(yīng)留意哪些問(wèn)題？答：抽提室內(nèi)嚴(yán)禁有明火存在或用明火加熱。乙醚中不得含有過(guò)氧化物，保持抽提室內(nèi)良好通風(fēng)，以防燃爆。測(cè)定樣品粒子粗細(xì)有什么要求？答：試樣粗細(xì)度要適宜。試樣粉末過(guò)粗，脂肪不易抽提干凈；試樣粉末過(guò)細(xì)，則有可能透過(guò)濾紙孔隙隨回流溶劑流失，影響測(cè)定結(jié)果。八、爭(zhēng)論經(jīng)過(guò)本次利用索氏提取法進(jìn)展花生中脂肪的粗測(cè)定試驗(yàn)，使我較為嫻熟的把握了SZF-06A脂肪儀的使用，并且了解了其工作原理，這對(duì)于以后的學(xué)習(xí)是有很大幫助的。經(jīng)查閱資料得，花生中脂肪的含量或許在50％左右，本次試驗(yàn)的結(jié)果為59.02％，總體來(lái)講，本次試驗(yàn)較為成功，較為粗略地測(cè)量出了花生中脂肪的含量。經(jīng)過(guò)分析后，得出幾點(diǎn)影響試驗(yàn)結(jié)果的因素，如下：虹吸現(xiàn)象不發(fā)生。不發(fā)生虹吸現(xiàn)象的緣由可能是由于：①儀器虹吸管道頂部有破損，因此水不會(huì)出來(lái)，空氣會(huì)進(jìn)去，壓強(qiáng)增大，虹吸現(xiàn)象會(huì)中斷；②虹吸管道在以前試驗(yàn)中操作不當(dāng)，有雜質(zhì)殘留在管道中堵塞了管道，影響虹吸現(xiàn)象的發(fā)生；③儀器內(nèi)壓強(qiáng)過(guò)大，導(dǎo)致無(wú)法造成壓強(qiáng)差，從而不發(fā)生虹吸現(xiàn)象；在使用烘箱烘干剩余殘?jiān)鼤r(shí)，烘干時(shí)間較短，未將殘?jiān)写媪舻乃舾赏耆?，?dǎo)致試驗(yàn)結(jié)果消滅誤差；由于有機(jī)溶劑的抽提物中除脂肪外，還或多或少含有游離脂肪酸、甾醇、磷脂、蠟及色素等類脂物質(zhì)，因而抽提法測(cè)定的結(jié)果只能是粗脂肪，即結(jié)果會(huì)偏理論值較大；試樣粗細(xì)度不夠適宜。試樣粉末有些過(guò)粗有些過(guò)細(xì)，研磨不均勻。過(guò)粗，脂肪不易抽提干凈；試樣粉末過(guò)細(xì)，則有可能透過(guò)濾紙孔隙隨回流溶劑流失，影響測(cè)定結(jié)果；在用濾