感染性疾病及免疫學(xué)檢測

常見病毒性傳染病及其

免疫學(xué)檢測平頂山市婦幼保健院傳染病：是病原體以某種方式進(jìn)入到人體后，并在人體內(nèi)生長繁殖，釋放毒素或?qū)е聶C(jī)體內(nèi)微生態(tài)平衡失調(diào)，給人體的組織和器官造成一定的損傷而引起的疾病。病原體易感人群免疫學(xué)檢驗主要用于：輔助診斷及鑒別診斷判斷療效及預(yù)后流行病學(xué)調(diào)查常用的免疫學(xué)檢測方法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）金標(biāo)法（試紙條、試紙板）化學(xué)發(fā)光法1.電化學(xué)發(fā)光（羅氏）2.微粒子化學(xué)發(fā)光（雅培）免疫印跡法(Westernblotting)

凝集反應(yīng)（梅毒檢測)酶聯(lián)免疫吸附試驗ELISA（enzymelinkedimmunosorbentassay）

是一類常用的免疫酶技術(shù)。是將已知的抗原或抗體吸附在固相載體表面，使抗原抗體反應(yīng)在固相表面進(jìn)行。常用的酶：辣根過氧化物酶(HRP)

堿性磷酸酶（AP）。基本步驟包被封閉孵育洗滌顯色結(jié)果測定

缺點：1只是診斷的輔助手段，特異性和靈敏性有待提高。

2操作過程有些繁瑣，反應(yīng)時間過長，不能一蹴而就。金標(biāo)法原理：金標(biāo)層析法采用雙抗原夾心法免疫測定原理，選擇經(jīng)純化的基因工程制備的抗原，分別作為包被抗原和膠體金結(jié)合抗原。由于層析作用反應(yīng)復(fù)合物沿硝酸纖維膜向前移動，當(dāng)遇到包被抗原時，形成紅色沉淀線。在包被膜上還有一條質(zhì)控線對照，故當(dāng)有兩條紅線時判為陽性，只有一條紅線時，判為陰性。免疫印跡法免疫印跡法(Westernblotting)是一種將高分辨率凝膠電泳和免疫化學(xué)分析技術(shù)相結(jié)合的雜交技術(shù)。免疫印跡法具有分析容量大、敏感度高、特異性強(qiáng)等優(yōu)點，是檢測蛋白質(zhì)特性、表達(dá)與分布的一種最常用的方法。（病毒學(xué)檢測主要用于檢測HIV抗原確證試驗）凝集反應(yīng)

凝集反應(yīng)是指顆?？乖c相應(yīng)抗體結(jié)合反應(yīng)出現(xiàn)的可見性現(xiàn)象。顆?？乖缤暾募?xì)菌、紅細(xì)胞等與相應(yīng)抗體相混合，在一定條件下出現(xiàn)凝集。化學(xué)發(fā)光免疫分析

chemiluminescenceimmunoassay（CLIA）CLIA是將化學(xué)發(fā)光分析和免疫反應(yīng)相結(jié)合而建立的一種新的免疫分析技術(shù)。這種方法兼有發(fā)光分析的高靈敏度和抗原抗體反應(yīng)的高度特異性。CLIA優(yōu)越性高度敏感，可達(dá)pg／ml或pmol水平；特異性強(qiáng)，重復(fù)性好，CV＜5％。測定范圍寬，可達(dá)7個數(shù)量級。試劑穩(wěn)定，無毒害，無污染，有效期長，達(dá)數(shù)月甚至數(shù)年。操作簡單，耗時短，易于自動化。在對環(huán)保很重視的國家，CLIA成了取代RIA的首選方法。常見術(shù)前檢測甲型肝炎抗體（抗HAVIgM）乙肝五項丙型肝炎抗體（抗HCV)梅毒螺旋體抗體人類免疫缺陷病毒抗體（抗HIV）病毒性肝炎

ViralHepatitis是由一組嗜肝病毒引起的，以肝臟炎癥和壞死病變?yōu)橹鞯囊环N傳染病。主要表現(xiàn)為明顯的消化道癥狀、全身疲乏無力，肝臟腫大。肝功能異常，部分病例出現(xiàn)黃疸。甲型病毒性肝炎（HAV）HAV屬小RNA病毒，為正單鏈RNA病毒。HAV主要經(jīng)糞-口途徑傳播。潛伏期平均28天。HAV抵抗力較強(qiáng)，60℃加熱10-12h后仍具有感染性，85℃加熱立即滅活，對乙醚、氯仿及PH為3的酸性環(huán)境有抵抗力。HAVIgM：近期感染HAV,發(fā)病2周后陽性率為100%，3個月后轉(zhuǎn)陰。早期診斷。IgG：急性感染后6個月達(dá)高峰，然后逐漸下降，可終身存在。既往感染HAVRNA：早期診斷的特異性指標(biāo)HBV(hepatitisBvirus）乙型肝炎病毒我國流行現(xiàn)狀現(xiàn)有HBV感染者約1.6億HBV顆粒管型小球型大球型HBV特點HBsAg與HBsAbHBeAg與HBeAbHBcAg與HBcAb有包膜雙股DNA病毒三組Ag-Ab系統(tǒng)：HBs-Ag是感染的標(biāo)志見于體液和分泌物中，也可見于唾液、精液、乳汁中介導(dǎo)病毒結(jié)合肝細(xì)胞HBs-Ab3-6個月產(chǎn)生有抵抗力的標(biāo)志阻斷病毒結(jié)合肝細(xì)胞HBeAg病毒復(fù)制的標(biāo)志，傳染性強(qiáng)病毒合成后釋放到血液中治療的參考指標(biāo)HBeAb病毒復(fù)制減少的標(biāo)志，傳染性弱要先于HBsAb出現(xiàn)HBcAg存在于病毒核心，不釋放至血液抗原性強(qiáng)HBcAb出現(xiàn)早，消退晚IgM:近期感染HBVIgG:既往感染HBV臨床組合模式模式HBsAgAnti-HBsHBeAgAnti-HBeAnti-HBc臨床意義1+-+-+俗稱“大三陽”。急性或慢性乙肝；病毒在復(fù)制，傳染性強(qiáng)。2+--++俗稱“小三陽”。急性或慢性乙肝；傳染性低。這種模式在慢性無癥狀攜帶者以及急性感染人群中較常見，病毒復(fù)制可能仍在進(jìn)行。3+---+急性或慢性乙肝感染，有傳染性4---++既往感染5----+處于HBsAg和HBeAg消失與Anti-HBe和Anti-HBs出現(xiàn)之間的一個缺口時期；既往感染6-+--+感染恢復(fù)期；既往感染，有免疫力7-+-++感染恢復(fù)期；既往感染8-+---主動免疫9-----未感染HBV,屬易感者10++-++少見的模式11+----12+-+--13-++-+14+-+++模式HBsAgAnti-HBsHBeAgAnti-HBeAnti-HBc臨床意義乙肝五項少見模式分析單一HBsAg：

主要見于急性HBV感染的最早期，一般隨之出現(xiàn)HBeAg和IgM的Anti-HBc。通常的慢性HBV感染中，HBsAg和Anti-HBc并存者約占95%，HBV慢性感染中不出現(xiàn)Anti-HBc是少見的。單一的HBsAg的異常表現(xiàn)主要由于Anti-HBc的缺失。HBsAg和Anti-HBs并存：在HBV感染恢復(fù)期中約有3%的個例可同時檢出HBsAg和Anti-HBs,然后HBsAg消失而Anti-HBs水平逐漸升高。在慢性HBV感染者中約3%-5%兩者共存，出現(xiàn)Anti-HBs并不表明HBsAg的清除和感染的恢復(fù)，可能由于：1.前后感染兩種亞型HBV，或HBsAg與其抗體之間僅有低親和性反應(yīng)；2.S基因變異，其編碼的HBsAg抗原性改變，原型Anti-HBs不能將其清除；3.α干擾素治療中出現(xiàn)Anti-HBs血清轉(zhuǎn)換，也因S基因的變異，而未能清除HBsAg。4.HBV疫苗接種者中也有少數(shù)個例雖有正常的Anti-HBs應(yīng)答，但仍能感染α決定簇變異的免疫逃逸病毒株，從而出現(xiàn)與HBsAg共存的現(xiàn)象。HBeAg和Anti-HBe并存：一般是處于乙肝e抗原和e抗體轉(zhuǎn)換時期，e抗原和e抗體以抗原抗體復(fù)合物的狀態(tài)共存。Anti-HBe試劑檢測時，血樣中的抗原抗體復(fù)合物同樣可以結(jié)合至包被板上，起到了競爭效果。呈世界性分布極易慢性化，與肝硬化、原發(fā)性肝癌關(guān)系密切HCV（hepatitisCvirus）丙型肝炎病毒HCV特點有包膜的單股正鏈RNA病毒抗HCV抗體非保護(hù)性抗體輸血和非腸道途徑傳播主要檢測IgG丙型病毒性肝炎(HCV)臨床意義HCV是輸血后肝炎和散發(fā)性非甲非乙型肝炎的主要病原。HCV感染后可導(dǎo)致慢性肝炎、肝硬化和肝細(xì)胞癌等多種肝臟疾病?？笻CV陽性而血清中沒有HCVRNA提示既往感染。檢測方法

常用檢測方法為ELISA法，金標(biāo)記免疫層析法和化學(xué)發(fā)光法。檢測方法：ELISA化學(xué)發(fā)光HIV(HumanImmunodeficiencyVirus)

人獲得性免疫缺陷病毒我國歷年艾滋病病毒感染者和病人數(shù)HIV的結(jié)構(gòu)特點HIV-1和H