藥品檢驗運算方法的驗證與再驗證

藥品檢驗方法的驗證與再驗證制藥企業(yè)藥品檢驗方法的驗證與再驗證管理目的：確認(rèn)所用分析方法的有效性。范圍：所有用于與產(chǎn)品和驗證有關(guān)的分析方法均應(yīng)驗證責(zé)任：質(zhì)量部、工程部負(fù)責(zé)實施。內(nèi)容：1.定義：藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗證是證明采用的方法適合于相應(yīng)檢測要求。2.驗證對象：所有用于與產(chǎn)品和驗證有關(guān)的分析方法.驗證范圍：在建立藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)時，分析方法需經(jīng)驗證；在藥品生產(chǎn)工藝變更、制劑的組分變更、原分析方法進行修訂時，則質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法也需進行驗證。方法驗證理由、過程和結(jié)果均應(yīng)記載在藥品標(biāo)準(zhǔn)起草說明或修訂說明中。.驗證的分析項目：鑒別試驗，雜質(zhì)定量檢查或限度檢查，原料藥或制劑中有效成分含量測定，以及制劑中的其他成分（如防腐劑等）的測定。藥品溶出度、釋放度等功能檢查中，其溶出量等的測試方法也應(yīng)作必要驗證。.驗證的內(nèi)容：準(zhǔn)確度、精密度（包括重復(fù)性、中間精密度和重現(xiàn)性）、專屬性、檢測限、定量限、線性、范圍和耐用性。視具體方法擬訂驗證的內(nèi)容。附表中列出的分析項目和相應(yīng)的驗證內(nèi)容可供參考。6.驗證組織和職責(zé)質(zhì)量保證室：確定分析方法的驗證條件、標(biāo)準(zhǔn)、限度及檢驗方法，起草分析方法驗證的驗證方案，指導(dǎo)驗證。質(zhì)量控制室：負(fù)責(zé)執(zhí)行驗證，檢驗儀器運行和保養(yǎng)，同時培訓(xùn)、考核人員，起草相關(guān)規(guī)程。制藥企業(yè)藥品檢驗方法的驗證與再驗證管理設(shè)備部：負(fù)責(zé)檢驗儀器的安裝調(diào)試和校正管理，檢驗儀器的維修保養(yǎng)。質(zhì)量部：負(fù)責(zé)驗證結(jié)果評價和驗證有關(guān)文件的歸檔管理7.驗證程序分析方法的驗證內(nèi)容8.《中國藥典》檢驗項目及驗證內(nèi)容8.1、準(zhǔn)確度準(zhǔn)確度系指用該方法測定的結(jié)果與真實值或參考值接近的程度，一般用回收率（%）表示。準(zhǔn)確度應(yīng)在規(guī)定的范圍內(nèi)測試。8.1.1.含量測定方法的準(zhǔn)確度制藥企業(yè)藥品檢驗方法的驗證與再驗證管理原料藥可用已知純度的對照品或樣品進行測定，或用本法所得結(jié)果與已知準(zhǔn)確度的另一個方法測定的結(jié)果進行比較。制劑可用含已知量被測物的各組分混合物進行測定。如不能得到制劑的全部組分，可向制劑中加入已知量的被測物進行測定，或用本法所得結(jié)果與已知準(zhǔn)確度的另一個方法測定結(jié)果進行比較。如該分析方法已經(jīng)測試并求出了精密度、線性和專屬性，在準(zhǔn)確度也可推算出來的情況下，這一項可不必再做。8.1.2.雜質(zhì)定量測定的準(zhǔn)確度可向原料藥或制劑中加入已知量雜質(zhì)進行測定。如不能得到雜質(zhì)或降解產(chǎn)物，可用本法測定結(jié)果與另一成熟的方法進行比較，如藥典標(biāo)準(zhǔn)方法或經(jīng)過驗證的方法。在不能測得雜質(zhì)或降解產(chǎn)物的響應(yīng)因子或不能測得對原料藥的相對響應(yīng)因子情況下，可用原料藥的響應(yīng)因子。應(yīng)明確表明單個雜質(zhì)和雜質(zhì)總量相當(dāng)于主成分的重量比（對或面積比（%）。8.1.3.數(shù)據(jù)要求在規(guī)定范圍內(nèi)，至少用9個測定結(jié)果進行評價。如，設(shè)計3個不同濃度，每個濃度各分別制備3份供試品溶液，進行測定。應(yīng)報告已知加入量的回收率（%）,或測定結(jié)果平均值與真實值之差及其相對標(biāo)準(zhǔn)偏差或可信限。8.2、精密度精密度系指在規(guī)定的測試條件下，同一個均勻供試品，經(jīng)多次取樣測定所得結(jié)果之間的接近程度。精密度一般用偏差、標(biāo)準(zhǔn)偏差或相對標(biāo)準(zhǔn)偏差表示。在相同條件下，由一個分析人員測定所得結(jié)果的精密度稱為重復(fù)性；在同一個實驗室，不同時間由不同分析人員用不同設(shè)備測定結(jié)果之間的精密度，稱為中間精密度；在不同實驗室由不同分析人員測定結(jié)果之間的精密度，稱為重現(xiàn)性。含量測定和雜質(zhì)的定量測定應(yīng)考慮方法的精密度。8.2.1.重復(fù)性制藥企業(yè)藥品檢驗方法的驗證與再驗證管理在規(guī)定范圍內(nèi)，至少用9個測定結(jié)果進行評價，例如，設(shè)計3個不同濃度，每個濃度各分別制備3份供試品溶液，進行測定?；?qū)⑾喈?dāng)于100%濃度水平的供試品溶液，用至少測定6次的結(jié)果進行評價。8.2.2.中間精密度為考察隨機變動因素對精密度的影響，應(yīng)設(shè)計方案進行中間精密度試驗。變動因素為不同日期、不同分析人員、不同設(shè)備。8.2.3.重現(xiàn)性法定標(biāo)準(zhǔn)采用的分析方法，應(yīng)進行重現(xiàn)性試驗，例如，建立藥典分析方法時通過協(xié)同檢驗得出重現(xiàn)性結(jié)果。協(xié)同檢驗的目的、過程和重現(xiàn)性結(jié)果均應(yīng)記載在起草說明中。應(yīng)注意重現(xiàn)性試驗用的樣品本身的質(zhì)量均勻性和貯存運輸中的環(huán)境影響因素，以免影響重現(xiàn)性結(jié)果。8.2.4.數(shù)據(jù)要求均應(yīng)報告標(biāo)準(zhǔn)偏差、相對標(biāo)準(zhǔn)偏差和可信限。8.3、專屬性專屬性系指在其他成分（如雜質(zhì)、降解產(chǎn)物、輔料等）可能存在下，采用的方法能正確測定出被測物的特性。鑒別反應(yīng)、雜質(zhì)檢查、含量測定方法均應(yīng)考察其專屬性。如方法不夠?qū)伲瑧?yīng)采用多個方法予以補充。8.3.1.鑒別反應(yīng)應(yīng)能與可能共存的物質(zhì)或結(jié)構(gòu)相似化合物區(qū)分。不含被測成分的供試品，以及結(jié)構(gòu)相似或組分中的有關(guān)化合物，應(yīng)均呈負(fù)反應(yīng)。8.3.2,含量測定和雜質(zhì)測定色譜法和其他分離方法，應(yīng)附代表性圖譜，以說明方法的專屬性，并應(yīng)標(biāo)明諸成分在圖中的位置。色譜法中的分離度應(yīng)符合要求。在雜質(zhì)可獲得的情況下，對于含量測定，試樣中可加入雜質(zhì)或輔料，考察測定結(jié)果是否受干擾，并可與未加雜質(zhì)或輔料的試樣比較測定結(jié)果。對于雜質(zhì)測定也可向試制藥企業(yè)藥品檢驗方法的驗證與再驗證管理樣中加入一定量的雜質(zhì)，考察雜質(zhì)能否得到分離。在雜質(zhì)或降解產(chǎn)物不能獲得的情況下，可將含有雜質(zhì)或降解產(chǎn)物的試樣進行測定，與另一個經(jīng)驗證了的或藥典方法比較結(jié)果。用強光照射、高溫、高濕、酸（堿）水解或氧化的方法進行加速破壞，以研究可能的降解產(chǎn)物和降解途徑。含量測定方法應(yīng)比對二法的結(jié)果，雜質(zhì)檢查應(yīng)比對檢出的雜質(zhì)個數(shù)，必要時可采用二極管陣列檢測和質(zhì)譜檢測，進行峰純度檢查。8.4、檢測限檢測限系指試樣中被測物能被檢測出的最低量。藥品的鑒別試驗和雜質(zhì)檢查方法，均應(yīng)通過測試確定方法的檢測限。常用的方法如下。8.4.1.非儀器分析目視法用已知濃度的被測物，試驗出能被可靠地檢測出的最低濃度或量。8.4.2.信噪比法用于能顯示基線噪聲的分析方法，即把已知低濃度試樣測出的信號與空白樣品測出的信號進行比較，算出能被可靠地檢測出的最低濃度或量。一般以信噪比為3：1或2：1時相應(yīng)濃度或注入儀器的量確定檢測限。8.4.3.數(shù)據(jù)要求應(yīng)附測試圖譜，說明測試過程和檢測限結(jié)果。8.5、定量限定量限系指樣品中被測物能被定量測定的最低量，其測定結(jié)果應(yīng)具一定準(zhǔn)確度和精密度。雜質(zhì)和降解產(chǎn)物用定量測定方法研究時，應(yīng)確定方法的定量限。常用信噪比法確定定量限。一般以信噪比為10：1時相應(yīng)濃度或注入儀器的量確定定量限。8.6、線性線性系指在設(shè)計的范圍內(nèi)，測試結(jié)果與試樣中被測物濃度直接呈正比關(guān)系的程度。制藥企業(yè)藥品檢驗方法的驗證與再驗證管理應(yīng)在規(guī)定的范圍內(nèi)測定線性關(guān)系?？捎靡毁A備液經(jīng)精密稀釋，或分別精密稱樣，制備一系列供試樣品的方法進行測定，至少制備5份供試樣品。以測得的響應(yīng)信號作為被測物濃度的函數(shù)作圖，觀察是否呈線性，再用最小二乘法進行線性回歸。必要時，響應(yīng)信號可經(jīng)數(shù)學(xué)轉(zhuǎn)換，再進行線性回歸計算。數(shù)據(jù)要求：應(yīng)列出回歸方程、相關(guān)系數(shù)和線性圖。［醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)搜集整理］8.7、范圍范圍系指能達到一定精密度、準(zhǔn)確度和線性，測試方法適用的高低限濃度或量的區(qū)間。范圍應(yīng)根據(jù)分析方法的具體應(yīng)用和線性、準(zhǔn)確度、精密度結(jié)果和要求確定。原料藥和制劑含量測定，范圍應(yīng)為測試濃度的80%?120%；制劑含量均勻度檢查，范圍應(yīng)為測試濃度的70%?130%,根據(jù)劑型特點，如氣霧劑、噴霧劑，范圍可適當(dāng)放寬；溶出度或釋放度中的溶出量測定，范圍應(yīng)為限度的±20%,如規(guī)定了限度范圍，則應(yīng)為下限的-20%至上限的十20%；雜質(zhì)測定，研究時，范圍應(yīng)根據(jù)初步實測，擬訂為規(guī)定限度的±20%。如果含量測定與雜質(zhì)檢查同時進行，用百分歸一化法，則線性范圍應(yīng)為雜質(zhì)規(guī)定限度的-20%至含量限度（或上限）的+20%.8.8、耐用性耐用性系指在測定條件有小的變動時，測定結(jié)果不受影響的承受程度，為把方法用于常規(guī)檢驗提供依據(jù)。開始研究分析方法時就應(yīng)考慮其耐用性。如果測試條件要求苛刻，則應(yīng)在方法中寫明。典型的變動因素有：被測溶液的穩(wěn)定性，樣品的提取次數(shù)、時間等。液相色譜法中典型的變動因素有：流動相的組成和pH值，不同廠牌或不同批號的同類型色譜柱，柱溫，流速等。氣相色譜法變動因素有：不同廠牌或批號的色譜柱、固定相，不同類型的擔(dān)體，柱溫，進樣口和檢測器溫度等。經(jīng)