醫(yī)學(xué)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn) 抗酸染色+標(biāo)本片_第1頁
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醫(yī)學(xué)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)微生物學(xué)教研室

2011年12月實(shí)驗(yàn)內(nèi)容一、細(xì)菌染色標(biāo)本檢查法抗酸染色法（操作）二、標(biāo)本片觀察：（鉤體

、白色念珠菌，曲霉、枯草芽胞桿菌、）

目的要求掌握抗酸染色技術(shù)掌握鉤體，白色念珠菌、曲霉、枯草桿菌基本形態(tài)分枝桿菌的細(xì)胞壁內(nèi)含有大量的脂質(zhì)，主要是分枝菌酸，它包圍在肽聚糖的外面，所以分枝桿菌一般不易著色，要經(jīng)過加熱和延長染色時(shí)間來促使其著色。但分枝桿菌中的分枝菌酸與染料結(jié)合后，就很難被酸性脫色劑脫色，故名抗酸染色。齊-尼氏抗酸染色法是在加熱條件下使分枝菌酸與石炭酸復(fù)紅牢固結(jié)合成復(fù)合物，用鹽酸酒精處理也不脫色。當(dāng)再加堿性美蘭復(fù)染后，分枝桿菌仍然為紅色，而其他細(xì)菌及背景中的物質(zhì)為蘭色。一、抗酸染色原理抗酸染色材料：標(biāo)本：卡介苗染液：石炭酸復(fù)紅，3%鹽酸酒精，美藍(lán)器具：同革蘭氏染色

實(shí)驗(yàn)方法：1、細(xì)菌涂片標(biāo)本的制備涂片

干燥

固定3、油鏡觀察1）初染：用玻片夾夾持涂片標(biāo)本，滴加石炭酸復(fù)紅2-3滴，在火焰高處徐徐加熱，切勿沸騰，出現(xiàn)蒸汽即暫時(shí)離開，若染液蒸發(fā)減少，應(yīng)再加染液，以免干涸，加熱3-5分鐘，待標(biāo)本冷卻后用水沖洗。2）脫色：3%鹽酸酒精脫色30’’~1’；用水沖洗。3）復(fù)染：用堿性美蘭溶液復(fù)染1’，用水沖洗后用吸水紙吸干。2、染色抗酸染色步驟

1、涂片包括涂片、干燥、固定三步。涂片

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