微生物培訓(xùn)講解課件

微生物相關(guān)知識(shí)培訓(xùn)微生物相關(guān)知識(shí)4目的了解以下內(nèi)容：一、微生物基礎(chǔ)知識(shí)二、微生物污染的相關(guān)知識(shí)三、潔凈室主要微生物污染源及相關(guān)檢測(cè)目的了解以下內(nèi)容：一、微生物基礎(chǔ)知識(shí)5一、微生物基礎(chǔ)知識(shí)

什么是微生物微生物的存在微生物的益處微生物的危害一、微生物基礎(chǔ)知識(shí)什么是微生物6什么是微生物

它們是非常小的單細(xì)胞或多細(xì)胞生物，不借助顯微鏡用肉眼無(wú)法看到。它們對(duì)營(yíng)養(yǎng)的要求非常低。它們是一類繁殖非?？斓纳?。它們非常容易發(fā)生變異。它們無(wú)處不在。大多數(shù)微生物對(duì)人類有益。有些微生物對(duì)人類有害。什么是微生物7微生物的種類具有細(xì)胞結(jié)構(gòu)的微生物沒有細(xì)胞結(jié)構(gòu)的微生物：病毒原核生物：（由原核細(xì)胞構(gòu)成的）真核微生物（由真核細(xì)胞構(gòu)成的）真菌顯微藻類原生動(dòng)物細(xì)菌草履蟲水綿放線菌微生物的種類具有細(xì)胞結(jié)沒有細(xì)胞結(jié)構(gòu)的原核生物：真核微生物真菌8碳疽桿菌大腸桿菌大腸桿菌（帶鞭毛）沙門氏菌一、細(xì)菌：分為桿菌、球菌和螺形菌三類葡萄球菌鏈球菌弧狀菌螺旋菌四聯(lián)球菌碳疽桿菌大腸桿菌大腸桿菌（帶鞭毛）沙門氏菌一、細(xì)菌：葡萄球菌9

細(xì)菌群體形態(tài)1.固體培養(yǎng)菌落：在固體培養(yǎng)基上,由單個(gè)細(xì)胞繁殖形成的肉眼可見的子細(xì)胞群體。菌苔:大量細(xì)胞密集生長(zhǎng),結(jié)果長(zhǎng)成的各“菌落”連接成一片。

2.液體培養(yǎng)基3.半固體培養(yǎng)細(xì)菌群體形態(tài)菌落：在固體培養(yǎng)基上,由單個(gè)細(xì)胞繁殖形成的肉眼10

二、真菌

效應(yīng)：引起物質(zhì)變質(zhì)腐爛的主要原因；發(fā)酵、制藥、食品工業(yè)等中具有重要作用；少數(shù)致病。真菌單細(xì)胞多細(xì)胞酵母菌類酵母菌霉菌黑曲霉菌絲狀真菌二、真菌真單細(xì)胞多細(xì)胞酵母菌類酵母菌霉菌黑曲霉菌絲111.酵母菌固體培養(yǎng)

菌落特征：菌落大而厚，圓形，光滑濕潤(rùn)，粘性，顏色單調(diào)。常見白色、土黃色、紅色。啤酒酵母菌落1.酵母菌固體培養(yǎng)菌落特征：啤酒酵母菌落12霉菌：為絲狀真菌的統(tǒng)稱。凡是在營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)上能形成絨毛狀、網(wǎng)狀或絮狀菌絲體的真菌（除少數(shù)外），統(tǒng)稱為霉菌。2.霉菌

一般情況下，霉菌在潮濕的環(huán)境下易于生長(zhǎng)，特別是偏酸性的基質(zhì)當(dāng)中。菌落特征：霉菌的菌落大、疏松、干燥、不透明，有的呈絨毛狀或絮狀或網(wǎng)狀等，菌體可沿培養(yǎng)基表面蔓延生長(zhǎng)，由于不同的真菌孢子含有不同的色素，所以菌落可呈現(xiàn)紅、黃、綠、青綠、青灰、黑、白、灰等多種顏色。霉菌：為絲狀真菌的統(tǒng)稱。凡是在營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)上能形成絨毛狀、網(wǎng)狀或13微生物的存在----水土壤空氣衣服地板海水油膜廢水排水口洗手池汽油罐嘴頭發(fā)皮膚鼻子腸道食物昆蟲動(dòng)物南極(<00C)火山口(>2500C)無(wú)處不在！微生物的存在----水嘴無(wú)處不在！14微生物的益處啤酒，葡萄酒的生產(chǎn)面包酵母的生產(chǎn)奶酪的生產(chǎn)醋的生產(chǎn)酸奶的生產(chǎn)維生素的生產(chǎn)類固醇的生產(chǎn)抗菌素、干擾素的生產(chǎn)分解廢物，循環(huán)利用幫助腸道中的食物消化除蟲微生物的益處啤酒，葡萄酒的生產(chǎn)分解廢物，循環(huán)利用15微生物的害處1、可引起局部感染----葡萄球菌2、膽道和尿道感染----大腸桿菌3、化膿性感染、中耳炎、肺炎----綠膿桿菌4、結(jié)膜炎----枯草桿菌5、使糖分解，藥液產(chǎn)生有機(jī)酸----酵母菌6、使制劑霉壞，酸敗變質(zhì)----霉菌微生物的害處1、可引起局部感染----葡萄球菌16污染：在生產(chǎn)、取樣、包裝或重新包裝、貯存或運(yùn)輸?shù)炔僮鬟^程中，原輔料、中間產(chǎn)品、待包裝產(chǎn)品、成品受到具有化學(xué)或微生物特性的雜質(zhì)或異物的不利影響。二、微生物污染的相關(guān)知識(shí)污染：在生產(chǎn)、取樣、包裝或重新包裝、貯存或運(yùn)輸?shù)炔僮鬟^程中，17污染的形式和載體:污染的形式:

塵埃粒子微生物污染的載體:空氣、水、表面、人。污染的形式和載體:污染的形式:18微生物的污染途徑a)自身污染：由于患者和員工自身攜帶微生物而污染。b)接觸污染：由于和非無(wú)菌的用具、器械或人的接觸而污染。c)空氣污染：由于空氣中所含微生物的沉降、附著或被吸入而污染。d)其他污染：由于其他因素（如昆蟲）而污染。微生物的污染途徑a)自身污染：由于患者和員工自身攜帶微生19控制微生物的污染途徑

有效地阻止室外的污染侵入室內(nèi)。迅速有效地排除室內(nèi)已發(fā)生的污染?？刂莆廴驹矗瑴p少污染發(fā)生量?？刂莆⑸锏奈廴就緩?0微生物污染的特殊性是能繁殖的活細(xì)胞生物。數(shù)量少而分布不均勻。多數(shù)處于受損傷狀態(tài)。生存環(huán)境的多樣性及復(fù)雜性。微生物污染的特殊性21防止交叉污染？有需要時(shí)要洗手及消毒；盡量減少直接以雙手接觸藥品；接觸產(chǎn)品的表面及用具用后清洗轉(zhuǎn)換產(chǎn)品時(shí)清洗防止交叉污染？有需要時(shí)要洗手及消毒；22三、潔凈室主要微生物污染源

及相關(guān)檢測(cè)三、潔凈室主要微生物污染源

及相關(guān)檢測(cè)23潔凈室主要微生物污染源

空氣水設(shè)備原輔料人員潔凈室主要微生物污染源空氣24主要的微生物污染源-空氣潔凈度測(cè)定包括：懸浮粒子微生物-浮游菌-沉降菌

-表面微生物

主要的微生物污染源-空氣潔凈度測(cè)定包括：25潔凈區(qū)空氣潔凈度等級(jí)---懸浮粒子潔凈區(qū)空氣潔凈度等級(jí)---懸浮粒子26微生物檢測(cè)菌落：微生物培養(yǎng)后，由一個(gè)或幾個(gè)微生物繁殖而形成的微生物集落，簡(jiǎn)稱CFU，通常用個(gè)數(shù)表示。1.浮游菌1.1定義：1.2濃度：?jiǎn)挝惑w積空氣中含浮游菌菌落的多少，以計(jì)數(shù)濃度表示，單位是個(gè)/m3或個(gè)/L。1.3測(cè)試步驟：（參照GB/T16293-2010）1.3.1采樣器、培養(yǎng)皿進(jìn)入被測(cè)房間消毒滅菌；1.3.2采用儀器經(jīng)消毒后先不放入培養(yǎng)皿，開啟浮游菌采樣器，使儀器中的殘余消毒劑蒸發(fā)，時(shí)間不少于5min,并檢查流量并根據(jù)采樣量調(diào)整設(shè)定采用時(shí)間；1.3.3關(guān)閉浮游菌采樣器，放入培養(yǎng)皿，蓋上蓋子；置采樣口于采樣點(diǎn)后，開啟采樣。微生物檢測(cè)菌落：微生物培養(yǎng)后，由一個(gè)或幾個(gè)微生物繁殖而形成的271.4培養(yǎng)：大豆酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基（TSA），在30-35℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，時(shí)間不少于2d。1.5標(biāo)準(zhǔn):1.4培養(yǎng)：大豆酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基（TSA），在30-35℃282.沉降菌1.1定義：用GB/T16294-2010提及的方法收集空氣中的活微生物粒子，通過專門的培養(yǎng)基，在適宜的生長(zhǎng)條件下繁殖到可見的菌落數(shù)。1.2菌落數(shù)：規(guī)定時(shí)間內(nèi)每個(gè)平板培養(yǎng)皿收集到空氣中沉降菌的數(shù)目，以個(gè)/皿表示。1.3原理：采用沉降法，即通過自然沉降原理收集在空氣中的生物粒子于培養(yǎng)基平皿，培養(yǎng)不少于2d的時(shí)間，讓其繁殖到可見的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)，以平板培養(yǎng)皿中的菌落數(shù)來(lái)判定結(jié)凈環(huán)境內(nèi)的活微生物數(shù)，并以此來(lái)評(píng)定潔凈室的潔凈度。1.4步驟：1.4.1測(cè)試前培養(yǎng)基表面必須嚴(yán)格消毒；1.4.2將已制備好的培養(yǎng)皿按采樣點(diǎn)布置圖逐個(gè)放置，然后從里到外逐個(gè)打開培養(yǎng)皿蓋，使培養(yǎng)基表面暴露在空氣中，在100000級(jí)，10000級(jí)按面積大小一般放2個(gè)培養(yǎng)皿；1.4.4靜態(tài)測(cè)試時(shí)，培養(yǎng)皿暴露時(shí)間為30min以上；動(dòng)態(tài)測(cè)試時(shí)，培養(yǎng)皿暴露時(shí)間不大于4h；2.沉降菌1.1定義：1.2菌落數(shù)：1.3原理：1.4步驟：291.4.5全部采樣結(jié)束后，將培養(yǎng)皿倒置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；1.4.6采用大豆酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基（TSA），在30-35℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，時(shí)間不少于2d。（每批培養(yǎng)基應(yīng)有對(duì)照試驗(yàn)，檢驗(yàn)培養(yǎng)基本事是否污染，每批可選定3只培養(yǎng)皿作對(duì)照培養(yǎng)。）1.4.7沉降菌測(cè)試前，被測(cè)潔凈室已消毒。被測(cè)潔凈室溫濕度須達(dá)到規(guī)定要求，靜壓差、換氣次數(shù)、空氣流速必須控制在規(guī)定值內(nèi)。1.5采樣位置（參照GB/T16292-2010）a)工作區(qū)采樣點(diǎn)位置離地0.8-1.5m左右（略高于工作面）；b)可在關(guān)鍵設(shè)備或關(guān)鍵工作活動(dòng)范圍處增加測(cè)點(diǎn)。1.6標(biāo)準(zhǔn)：1.4.5全部采樣結(jié)束后，將培養(yǎng)皿倒置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；1303.表面微生物3.1采樣位置：關(guān)鍵表面（與產(chǎn)品、容器及密封件直接接觸或暴露于產(chǎn)品、容器及密封件的表面）、一般表面（如設(shè)備的外表面、墻壁等）和地板。3.2測(cè)試方法：擦拭法3.3取樣點(diǎn)：對(duì)于同一潔凈區(qū)，每個(gè)相同的取樣物體在其不同的地方采2個(gè)樣，如墻面2個(gè)采樣點(diǎn)，地面2個(gè)采樣點(diǎn)，潔凈區(qū)主要設(shè)備2個(gè)采樣點(diǎn)。3.4步驟：3.4.1在動(dòng)態(tài)下監(jiān)測(cè)；3.4.2依據(jù)測(cè)試區(qū)域的取樣點(diǎn)數(shù)，制備適量的營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基;3.4.3將滅菌的棉簽用滅菌注射用水潤(rùn)濕（棉簽容易脫落纖維，故在使用前應(yīng)先用注射用水預(yù)先清洗，以免纖維遺留在取樣表面），并將其靠在瓶上擠壓以除去多余的水分;

3.表面微生物3.1采樣位置：關(guān)鍵表面（與產(chǎn)品、容器及密封件31

3.4.4將棉簽按在取樣物表面上，用力使其稍彎曲，平穩(wěn)而緩慢地擦拭取樣表面約25cm2，擦拭過程應(yīng)覆蓋整個(gè)表面;3.4.5翻轉(zhuǎn)棉簽，讓棉簽的另一面也進(jìn)行擦拭。但與前次擦拭移動(dòng)方向垂直;3.4.6擦拭方法如圖：

3.4.7擦拭完成后，將棉簽放入無(wú)菌試管中并密封，檢測(cè)時(shí)，加入15ml滅菌生理鹽水，充分振蕩混勻，取1ml樣液注入到培養(yǎng)平皿中，加入約15ml配置好的營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基充分混勻，待培養(yǎng)基凝固;

3.4.8培養(yǎng)：取樣結(jié)束后將平皿復(fù)倒置于培養(yǎng)箱內(nèi)30-35℃培養(yǎng)72小時(shí)，并以未采樣的營(yíng)養(yǎng)瓊脂平皿作對(duì)照皿。

3.4.4將棉簽按在取樣物表面上，用力使其稍彎曲，平穩(wěn)而緩323.5標(biāo)準(zhǔn)：3.5標(biāo)準(zhǔn)：33主要的微生物污染源-水

《體外診斷試劑生產(chǎn)實(shí)施細(xì)則》第三章《設(shè)施、設(shè)備與生產(chǎn)環(huán)境控制》第二十六條中明確規(guī)定：工藝用水制水設(shè)備應(yīng)滿足水質(zhì)要求并通過驗(yàn)證，其制備、儲(chǔ)存、輸送應(yīng)能防止微生物污染和滋生，并不應(yīng)對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量和性能造成影響。制水設(shè)備應(yīng)定期清洗、消毒、維護(hù)。應(yīng)配備水質(zhì)監(jiān)控的儀器與設(shè)備，并定期記錄監(jiān)控結(jié)果。主要的微生物污染源-水《體外診斷試劑生產(chǎn)實(shí)施細(xì)則34純化水微生物檢測(cè)：標(biāo)準(zhǔn)：細(xì)菌、霉菌和酵母菌總數(shù)每1ml不得過100個(gè)。步驟：取本品10ml，采用薄膜過濾法處理后，取出濾膜，菌面朝上貼于營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基平板上，再同上法操作后取出濾膜，菌面朝上貼于玫瑰紅鈉瓊脂平板上，營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板放入30～35℃培養(yǎng)3天，玫瑰紅鈉瓊脂平板放入23～28℃培養(yǎng)5天后分別計(jì)數(shù)。純化水微生物檢測(cè)：標(biāo)準(zhǔn)：細(xì)菌、霉菌和酵母菌總數(shù)每1ml不得過35主要的微生物污染源-設(shè)備幾乎沒有細(xì)菌不“吃”的東西設(shè)備和器具與藥品直接接觸--設(shè)備和器具的清洗清潔程序必須經(jīng)過驗(yàn)證按清洗周期清洗清洗和存放設(shè)備、器具處應(yīng)與生產(chǎn)區(qū)域潔凈等級(jí)相同主要的微生物污染源-設(shè)備幾乎沒有細(xì)菌不“吃”的東西36主要的微生物污染源-原輔料

包括厡輔料、內(nèi)包裝材料。-厡輔料微生物的限度標(biāo)準(zhǔn)？-內(nèi)包裝材料微生物的限度標(biāo)準(zhǔn)？符合藥典或行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)厡輔料、內(nèi)包裝材料的貯存：-包裝嚴(yán)密，不得破損，污染。-清潔貯存。主要的微生物污染源-原輔料包括厡輔料、內(nèi)包裝材37主要的微生物污染源-人員

No……潔凈區(qū)生產(chǎn)人員要求：進(jìn)入潔凈室必須更換潔凈服；并按照規(guī)定程序進(jìn)出潔凈室；在潔凈區(qū)生產(chǎn)操作動(dòng)作要準(zhǔn)、穩(wěn)、輕、少，減少不必要的談話和活動(dòng)；生產(chǎn)人員應(yīng)定期進(jìn)行微生物基礎(chǔ)知識(shí)培訓(xùn)和衛(wèi)生教育。主要的微生物污染源-人員No……潔凈區(qū)生產(chǎn)人員要求：進(jìn)38手的衛(wèi)生每只手可攜帶40萬(wàn)個(gè)細(xì)菌；剛洗過的手，每平方厘米也可檢驗(yàn)出3200個(gè)細(xì)菌。1～10萬(wàn)個(gè)細(xì)菌/cm2

皮膚表面!手的衛(wèi)生每只手可攜帶40萬(wàn)個(gè)細(xì)菌；剛洗過的手，每平方厘米也可39洗手的重要性:用流水（如自來(lái)水）洗手，能使手上的致病微生物減少80%；用皂液充分洗手，再用自來(lái)水沖洗能使致病微生物減少95%。洗手后正確使用消毒劑能使致病微生物減少到99%。正確洗手的步驟：洗手的重要性:用流水（如自來(lái)水）洗手，能使手上的致病微生物減401.一次更鞋：阻斷外界粘在鞋底的垃圾、顆粒及微生物。相對(duì)而言，腳底是最臟的部分。2.脫去外套：阻斷外界沉降在外套上的顆粒和微生物。3.一更洗手：規(guī)范的洗手能消除手部皮膚的污垢和大部分的微生物。洗手一定要用洗手液和充足的流水。4.二更帶口罩：阻斷鼻腔、呼吸道的微生物發(fā)散，潔凈區(qū)內(nèi)不能脫下口罩帶發(fā)套：阻斷頭發(fā)、頭皮表面的微生物發(fā)散。保證發(fā)套完整的包裹