春砂礫揮發(fā)性有機物的提取與分析

春砂礫揮發(fā)性有機物的提取與分析

杏仁是姜科豆腐的一種水果。這是著名的“四大南藥”之一。它具有益氣、鎮(zhèn)痛、健脾、消食、安肝、止吐的功效。作為一種香食品的原料，它不僅可以作為一種香料，還可以在飲料和保健品的領域廣泛傳播。國內文獻報道,對春砂仁有效成分提取的方法主要有水蒸汽蒸餾、超臨界萃取、溶劑熱萃取和微波提取法。水蒸汽蒸餾法因溫度高、所需時間長而難于獲得完整的低沸點的成分;超臨界萃取法由于設備投資大而在操作時有一定的局限性。本研究分別選用有機溶劑熱浸法和微波浸提法提取春砂仁中的有效成分,并對這二種方法的提取效果進行比較;采用GC-MS檢測了該二種方法提取所得的揮發(fā)性物成分,采用NIST數(shù)據庫檢索并確定了化合物的結構,經色譜峰面積歸一化法測定了其化合物的百分含量。為確立簡單、有效的提取春砂仁揮發(fā)性成分的方法和合理利用春砂仁資源提供了依據。1材料和方法1.1試驗材料主要原料:春砂仁-產自廣東陽春;乙醚:分析純。1.2主要設備和設備微波爐、高速離心機、電熱恒溫鼓風干燥箱、日本島津(SHIMADZU)GC-MS/QP2010型氣相色譜-質譜聯(lián)用儀。1.3方法1.3.1春砂仁提取方法1.3.1.提取液和乙醇春砂仁粉碎過20目篩,稱取30g并量取90mL乙醚于混合于150mL三角瓶,加塞密封,于34.5℃恒溫水箱中保溫2h后取出過濾,濾渣用少量乙醚沖洗2次,合并提取液并在34.5℃恒溫水浴揮去乙醚,最后在34.5℃干燥箱中恒溫干燥2h。1.3.1.微波處理-干燥春砂仁粉碎過20目篩,稱取30g并量取180mL乙醚于250mL三角瓶,加塞密封,放入微波爐中,800W功率微波處理20s后取出,用水冷卻至室溫,傾出乙醚提取液,過濾,提取液在34.5℃恒溫水箱中水浴揮去乙醚,在34.5℃干燥箱中恒溫干燥2h。1.3.2gc/ms色譜條件提取物用適量乙醚稀釋后,4000r/min離心分離20min,取上清液進GC-MS檢測。色譜條件:選用DB-5石英毛細管(30m×0.25mm×0.25μm)色譜柱,進樣量1.0μL。載氣:He,流速:1mL/min,柱溫:80℃,進樣口溫度:280℃,分流比為20:1。程序升溫:80℃持續(xù)2min;7℃/min升溫至160℃,持續(xù)2min;10℃/min升溫至280℃,持續(xù)4min。質譜條件:EI離子源,電子能量70eV,質量掃描范圍50~500m/z;離子源溫度200℃,溶劑峰切除時間2.5min,質譜檢測起測時間3.0min。2結果與分析2.1發(fā)性成分的提取效果有機溶劑熱浸法和微波浸提法對春砂仁揮發(fā)性成分的提取效果見表1。表1可以看出:二種提取方法提取的揮發(fā)性成分提取率均沒有明顯區(qū)別,但微波浸提省時省力。2.2揮發(fā)性物質的組成測定有機溶劑熱浸法和微波浸提法提取的樣品分別進樣分離后,按1.3.2中的條件進行GC-MS檢測,總離子流色譜圖分別見圖1、圖2,用峰面積歸一化法測定各成分的相對百分含量,采用NIST數(shù)據庫檢索并確定了化合物的結構,鑒定出60個春砂仁揮發(fā)性物質的結構和和相對含量。由表2可見,有機溶劑熱浸法和微波浸提法提取的揮發(fā)性物質的所含成分和含量總體上差異并不顯著,所鑒定的成分和含量都與文獻報道中基本相同。2.3百分含量占總鑒定的化合物含量據文獻報道,春砂仁中的乙酸龍腦酯、樟腦、龍腦、古巴烯、匙葉桉油烯等是主要的藥理活性成分。有機溶劑熱浸法與微波浸提法中主要藥理活性的8個成分,在二者中的百分含量占總鑒定的化合物含量見表3。從表3中可以看出:兩種提取方法得到的提取物,主要藥理活性的8個成分乙酸龍腦酯、樟腦、龍腦、石竹烯古巴烯、匙葉桉油烯、豆甾醇、α-甜沒藥醇的含量差異不大,這8個成分的總提取率占揮發(fā)性成分的總量也比較接近,分別是63.13(%)和58.76(%),說明有機溶劑熱浸法和微波浸提法都適合春砂仁中揮發(fā)性物質的提取。3質的理想提取方法春砂仁揮發(fā)性物質所含化學成分復雜。有機溶劑熱浸法與微波浸提法都是春砂仁中揮發(fā)性物質的理想提取方法;對其化學成分進行詳細分析,發(fā)現(xiàn)其中乙酸龍