氣相色譜法測(cè)定復(fù)方天牛膠囊中龍腦的含量

氣相色譜法測(cè)定復(fù)方天牛膠囊中龍腦的含量

復(fù)合田膠囊由龍眼菜、蜈蚣、人參、婆羅洲、婆羅西翁等30多種藥物組成。具有清熱解毒、活血化瘀、止痛止痛的功效。對(duì)血管瘤和胃癌也有一定的抑制作用，并且有明顯的輻射敏感性。它對(duì)帶狀皰疹也有治療作用。其中冰片主要含龍腦、異龍腦,參照相關(guān)文獻(xiàn)采用氣相色譜法測(cè)定龍腦含量,為原標(biāo)準(zhǔn)增加了含量測(cè)定,可以較好地控制藥品質(zhì)量。1藥品理學(xué)成分測(cè)定GC-14C氣相色譜儀(日本島津);HH.SY-B/C系列電熱恒溫水浴鍋(上海博訊有限公司);對(duì)照品龍腦(批號(hào)為110881-200504)和內(nèi)標(biāo)水楊酸甲酯(批號(hào)為110881-200504)均由中國(guó)藥品生物制品檢定所提供,含量測(cè)定用;乙酸乙酯為分析純。復(fù)方天仙膠囊由吉林省白山藥物研究所提供(批號(hào)為200701041,200701051,200701061)。2方法和結(jié)果2.1空氣空氣過(guò)濾器色譜柱:毛細(xì)管柱AgilentDB-WAX(30m×0.25mm×0.25μm),載氣:氮?dú)?流速:氫氣40mL/min,空氣500mL/min,柱溫:130℃,進(jìn)樣口:200℃,檢測(cè)器:FID,溫度:200℃,量程∶1,分流比∶10∶1。理論板數(shù)按龍腦峰計(jì),應(yīng)不低于5000,龍腦峰和內(nèi)標(biāo)峰的分離度應(yīng)符合要求。2.2溶液的制備2.2.1內(nèi)標(biāo)溶液的制備取水楊酸甲酯適量,精密稱定,加乙酸乙酯制成每1mL含0.5mg的溶液既得。2.2.2對(duì)照溶液的制備取龍腦對(duì)照品約12.5mg。精密稱定,置25mL量瓶中,加內(nèi)標(biāo)溶液溶解并稀釋至刻度,搖勻既得。2.2.3內(nèi)標(biāo)超聲預(yù)處理取本藥品內(nèi)容物0.5g,精密稱定,置碘量瓶中,精密加入內(nèi)標(biāo)溶液10mL,超聲處理(超聲功率為250W,頻率為40kHz)10min,搖勻,濾過(guò),既得。2.2.4樣品的陰性處理按處方組成比例,取除冰片外的其余藥味,按工藝要求,制成不含冰片的陰性樣品,再按供“2.2.3”的方法制成陰性樣品對(duì)照液。2.3方法研究2.3.1供試品與陰性對(duì)照品色譜條件精密吸取對(duì)照品溶液、供試品溶液、陰性對(duì)照液及空白溶劑各1μL,分別注入氣相色譜儀,分別測(cè)得氣相色譜圖(見(jiàn)圖1),供試品色譜中,在與龍腦對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上有相應(yīng)的色譜峰,而陰性對(duì)照在與對(duì)照品相應(yīng)的保留時(shí)間附近無(wú)干擾。2.3.2標(biāo)準(zhǔn)曲線及峰面積比值精密稱取龍腦適量,加乙酸乙酯分別制成每1mL含龍腦0.13012,0.26025,0.5205,1.041,1.712mg和水楊酸甲酯1.0211mg的混合溶液,分別精密吸取1μL,注入氣相色譜儀,測(cè)定,計(jì)算峰面積比值為0.1955、0.3887、0.7820、1.6117和2.4627。以對(duì)照品進(jìn)樣量(μg)為橫坐標(biāo),峰面積比值為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,得回歸方程為:Y=1.4482X+0.0269(r=0.9988),表明龍腦在0.13012～1.712μg范圍內(nèi),與龍腦和內(nèi)標(biāo)峰面積的比值呈良好的線性關(guān)系。2.3.3儀器精密度試驗(yàn)精密吸取供試品溶液1μL,連續(xù)進(jìn)樣6次,測(cè)定其峰面積比值,結(jié)果RSD=1.61%(n=6),結(jié)果表明所用儀器精密度良好。2.3.4穩(wěn)定性試驗(yàn)取供試品溶液,分別于0、4、8、12、18、24h進(jìn)樣測(cè)定,結(jié)果峰面積比值的RSD=1.39%,表明溶液24h內(nèi)穩(wěn)定。2.3.5重復(fù)試驗(yàn)取樣品依法獨(dú)立測(cè)定6次,龍腦平均含量2.45(mg/粒),RSD=0.67%(n=6),結(jié)果表明,本法重現(xiàn)性良好。2.3.6加樣回收和加內(nèi)標(biāo)回收率試驗(yàn)精密稱取已測(cè)知含量的樣品0.25g(含量:龍腦10.56mg/g)6份,另取龍腦對(duì)照品24.34mg,加內(nèi)標(biāo)溶液定容到100mL容量瓶中,精密吸取10mL,分別加入上述樣品中,依法分別測(cè)定,計(jì)算回收率,準(zhǔn)確度較好,結(jié)果見(jiàn)表1。2.3.7樣品測(cè)定結(jié)果按上述色譜條件和含量測(cè)定方法,精密測(cè)定3批樣品,計(jì)算每粒含量,見(jiàn)表2。3討論3.1龍腦和內(nèi)標(biāo)的分離測(cè)得其理論板數(shù)按龍腦峰計(jì)算N=47691.711,在此條件下,樣品可以得到很好的分離,龍腦和內(nèi)標(biāo)的分離度為11.0。參照中國(guó)藥典2005年版一部龍腦所規(guī)定的理論板數(shù),暫定理論板數(shù)以龍腦峰計(jì)算應(yīng)不低于5000。3.2超聲用量的選擇取樣:0.5077g,0.5015g,0.5045g分別置具塞錐形瓶中,各精密加入內(nèi)標(biāo)溶液10mL,分別超聲5、10、15min,放冷,搖勻,濾過(guò),取續(xù)濾液,注入氣相色譜儀中,按內(nèi)標(biāo)法以峰面積計(jì)算,得龍腦含量為2.43mg/粒、2.44mg/粒、2.44mg/粒,含量無(wú)差異,本實(shí)驗(yàn)選擇超聲10min。3.3龍腦的最低限度通過(guò)對(duì)以上樣品含量測(cè)定,每粒含龍腦的量在2.40～2.65mg之間,