XX版藥典與2020版微生物對(duì)比課件

XX版藥典與2020版微生物對(duì)比2023/10/7XX版藥典與2020版微生物對(duì)比XX版藥典與2020版微生物對(duì)比2023/10/6XX版藥典1

起草的指導(dǎo)思想

一、以科學(xué)發(fā)展觀為統(tǒng)領(lǐng)，服務(wù)于資源節(jié)約型社會(huì)、環(huán)境友好型社會(huì)的要求；落實(shí)科學(xué)監(jiān)管理念，著力解決發(fā)展中的問(wèn)題。二、與時(shí)俱進(jìn)，廣泛吸納先進(jìn)技術(shù)與成果；堅(jiān)持自主與創(chuàng)新；積極推進(jìn)藥品標(biāo)準(zhǔn)化戰(zhàn)略，提高我國(guó)藥品標(biāo)準(zhǔn)總體水平，著力提升《中國(guó)藥典》在國(guó)際社會(huì)中的地位和作用，提高綜合競(jìng)爭(zhēng)力，促進(jìn)醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展，為構(gòu)建社會(huì)主義和諧社會(huì)作出貢獻(xiàn)。XX版藥典與2020版微生物對(duì)比起草的指導(dǎo)思想

一、以科學(xué)2

2010年版無(wú)菌檢查法增修訂內(nèi)容XX版藥典與2020版微生物對(duì)比2010年版無(wú)菌檢查法增修訂內(nèi)容XX版藥典與20203

一、進(jìn)一步確定了無(wú)菌檢查法的定義：無(wú)菌檢查法系用于檢查要求無(wú)菌的藥品、醫(yī)療器具、原料、輔料、及其他品種是否無(wú)菌的一種方法。

二、進(jìn)一步明確了無(wú)菌檢查保障

1、檢驗(yàn)全過(guò)程必須嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作，防止再污染

，但采用的措施不得影響微生物的生長(zhǎng)。2、無(wú)菌檢查要進(jìn)行環(huán)境檢測(cè)增加了日常檢驗(yàn)還需進(jìn)行環(huán)境檢測(cè)。2、無(wú)菌檢查人員必須具備微生物專業(yè)知識(shí)，并經(jīng)過(guò)無(wú)菌技術(shù)的培訓(xùn)。XX版藥典與2020版微生物對(duì)比一、進(jìn)一步確定了無(wú)菌檢查法的定義：XX版藥典與2024

三、培養(yǎng)基增修訂內(nèi)容⒈刪去硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基和改良馬丁培養(yǎng)基的使用范圍(用于培養(yǎng)好氧菌、厭氧菌及用于培養(yǎng)真菌)⒉刪去選擇性培養(yǎng)基使用的表面活性劑種類對(duì)氨基苯甲酸、聚山梨酯-80等。理由經(jīng)驗(yàn)證試驗(yàn)選擇適宜的中和劑、滅活劑和表面活性劑

XX版藥典與2020版微生物對(duì)比三、培養(yǎng)基增修訂內(nèi)容⒈刪去硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基和5

培養(yǎng)基適用性檢查增修訂內(nèi)容

3、培養(yǎng)基靈敏度試驗(yàn)

⑴刪除菌懸液制備中黑曲霉菌懸液的制備“（用管口帶有薄的無(wú)菌棉花或紗布能過(guò)濾菌絲的無(wú)菌毛細(xì)吸管）”修改為“用適宜的方法吸出孢子懸液”。

⑵增加在稀釋液0.9%無(wú)菌氯化鈉溶液中加入0.05％v/v）聚山梨酯80。

XX版藥典與2020版微生物對(duì)比

培養(yǎng)基適用性檢查增修訂內(nèi)容

3、培6

四、試驗(yàn)稀釋液、沖洗液增修訂為

⒈增加根據(jù)供試品的特性，可選用其他經(jīng)驗(yàn)證過(guò)的適宜的溶液作為稀釋液、沖洗液。⒉試驗(yàn)中使用的中和劑、滅活劑和表面活性劑除證明其有效性外還應(yīng)證明對(duì)污染的微生物無(wú)影響修改為無(wú)毒性。

XX版藥典與2020版微生物對(duì)比四、試驗(yàn)稀釋液、沖洗液增修訂為XX版藥典與2020版微生7五、方法驗(yàn)證試驗(yàn)增修訂內(nèi)容⒈試驗(yàn)菌株

刪除銅綠假單胞菌增加大腸埃希菌及大腸埃希菌菌液的制備(同金黃色葡萄球菌)。⒉薄膜過(guò)濾法供試品用量將規(guī)定量供試品按薄膜過(guò)濾法過(guò)濾

修改為取每種培養(yǎng)基規(guī)定接種的供試品總量。

XX版藥典與2020版微生物對(duì)比五、方法驗(yàn)證試驗(yàn)增修訂內(nèi)容⒈試驗(yàn)菌株刪除銅綠假單胞菌增8六、供試品的無(wú)菌檢查增修訂內(nèi)容⒈檢驗(yàn)量

直接接種法除另有規(guī)定外，每份培養(yǎng)基接種的供試品量按表2、表3規(guī)定刪除采用直接接種法時(shí)的規(guī)定。⒉陰性對(duì)照

無(wú)菌試驗(yàn)中若使用表面活性劑等應(yīng)證明其有效性且對(duì)微生物生長(zhǎng)無(wú)影響修改為無(wú)毒性。

XX版藥典與2020版微生物對(duì)比六、供試品的無(wú)菌檢查增修訂內(nèi)容⒈檢驗(yàn)量X9

⒊薄膜過(guò)濾法

①增加了抗生素供試品濾膜選擇的指導(dǎo)應(yīng)選擇低吸附的濾器及濾膜。②若需要沖洗濾膜,每張濾膜每次沖洗量一般為100ml，且沖洗量不宜過(guò)大修改為總沖洗量不得超過(guò)1000ml。

⑴水溶液供試品含抑菌成分需用適量的沖洗液沖洗膜修改為所用的沖洗量、沖洗方法同方法驗(yàn)證試驗(yàn).

XX版藥典與2020版微生物對(duì)比⒊薄膜過(guò)濾法XX版藥典與2020版微生物對(duì)比10

⑵裝有藥物的注射器供試品取規(guī)定量，刪去裝上無(wú)菌針頭….修改為排出注射器中的內(nèi)容物至無(wú)菌容器中，若需要可吸入稀釋液或標(biāo)簽所示的溶劑溶解，或非水溶性制劑供試品項(xiàng)下方法操作。

⑶無(wú)菌氣霧劑供試品供試液的制備將供試品置冰室修改為置至少-20℃的冷凍室約1小時(shí)。XX版藥典與2020版微生物對(duì)比⑵裝有藥物的注射器供試品XX版藥典與2020版微生物對(duì)比11

⒋直接接種法刪除β－內(nèi)酰胺類或磺氨類供試品。

XX版藥典與2020版微生物對(duì)比⒋直接接種法刪除β－內(nèi)酰胺類或磺氨類供試品。XX版藥12

表1、表2、表3增修訂表1（第3列）接種每種培養(yǎng)基改為所需的最少檢驗(yàn)數(shù)量

表2

（表題）上市抽驗(yàn)樣品（液體制劑）的最少檢驗(yàn)數(shù)量修改為液體制劑最少檢驗(yàn)量及上市抽驗(yàn)樣品的最少檢驗(yàn)數(shù)量第二列每支樣品接入每管培養(yǎng)基的最少樣品量修改為每支供試品接入每管培養(yǎng)基的最少樣品量第三列最少檢驗(yàn)數(shù)量（瓶或支）≤1全量２0①

修改為供試品最少檢驗(yàn)數(shù)量（瓶或支）１0①

注①每種培養(yǎng)基各接種１０支供試品修改為若供試品每個(gè)容器內(nèi)的裝量不夠接種兩種培養(yǎng)基，那么表中的最少檢驗(yàn)數(shù)量加倍。XX版藥典與2020版微生物對(duì)比表1、表2、表3增修訂表1（第3列）接種每種培13

表3（表題）將上市抽驗(yàn)樣品（固體制劑）的最少檢驗(yàn)量

修改為固體制劑最少檢驗(yàn)量及上市抽驗(yàn)樣品的最少檢驗(yàn)數(shù)量”第三列最少檢驗(yàn)數(shù)量、≤1全量２0①

修改為供試品最少檢驗(yàn)數(shù)量（瓶或支）

１0①

注①每種培養(yǎng)基接種１０支培養(yǎng)基修改為若供試品每個(gè)容器內(nèi)的裝量不夠接種兩種培養(yǎng)基，那么表中的最少檢驗(yàn)數(shù)量加倍。XX版藥典與2020版微生物對(duì)比表3（表題）將上市抽驗(yàn)樣品（固體制劑）的最少檢驗(yàn)量XX版14

微生物限度檢查增修定內(nèi)容XX版藥典與2020版微生物對(duì)比微生物限度檢查增修定內(nèi)容XX版藥典與2020版15

修改內(nèi)容

1、培養(yǎng)條件控制菌培養(yǎng)溫度35℃～37℃修改為30℃～35℃(細(xì)菌、控制菌培養(yǎng)溫度相同)。

修改理由此溫度適于所有中溫菌生長(zhǎng)，一些高溫菌在該溫度下也可以生長(zhǎng)。XX版藥典與2020版微生物對(duì)比修改內(nèi)容1、培16

增修訂內(nèi)容

2、結(jié)果報(bào)告特殊品種可以最小包裝單位報(bào)告特殊品種包括∶藥典規(guī)定微量包裝藥品的檢驗(yàn)量可以酌減。還有一些貴重藥品也應(yīng)考慮檢驗(yàn)量。XX版藥典與2020版微生物對(duì)比

173、檢驗(yàn)量增修訂內(nèi)容

⑴中藥膜劑檢驗(yàn)量50cm2

修改為100cm2。

⑵沙門菌檢驗(yàn)量修改為檢驗(yàn)量為20g或20ml并注明（其中10g用于陽(yáng)性對(duì)照）。XX版藥典與2020版微生物對(duì)比3、檢驗(yàn)量增修訂內(nèi)容⑴中藥膜劑檢驗(yàn)量50cm2修改184、供試液的制備增修訂內(nèi)容

⑴供試品檢查時(shí)使用表面活性劑應(yīng)證明其對(duì)微生物生長(zhǎng)和存活無(wú)影響修改為無(wú)毒性。⑵供試液的制備若需加溫時(shí)，可采用其他經(jīng)驗(yàn)證的方法，但應(yīng)均勻加熱，且溫度不應(yīng)超過(guò)45℃。XX版藥典與2020版微生物對(duì)比4、供試液的制備增修訂內(nèi)容

⑴供試品檢查時(shí)使19

⑶新增貼劑供試液制備

供試液的制備

⑴經(jīng)驗(yàn)證方法制備成供試液在無(wú)菌環(huán)境進(jìn)行。⑵避免粘貼面粘合在一起。⑶置于含有表面活性劑（如聚山梨酯80或卵磷脂）的稀釋劑中，制成供試液。⑷充分振搖。⑸也可采用以其他適宜的方法制備成供試液。XX版藥典與2020版微生物對(duì)比⑶新增貼劑供試液制備供試液的制備XX版20⑷具抑菌活性的供試品增修訂內(nèi)容

刪除應(yīng)消除供試液的抑菌活性修改為當(dāng)供試品具有抑菌活性時(shí)，應(yīng)盡量選擇操作簡(jiǎn)便、快速的方法，應(yīng)避免損傷供試品中污染的微生物。在供試品溶液性狀允許的情況下，應(yīng)盡量選用薄膜過(guò)濾法。XX版藥典與2020版微生物對(duì)比⑷具抑菌活性的供試品增修訂內(nèi)容刪除應(yīng)消除供試液的抑菌21

①離心沉淀集菌法

兩次離心修改為一次離心；500轉(zhuǎn)/分離心，不超過(guò)3分鐘，取全部上清液用于檢查。

影響因素

供試品污染菌特性

適用范圍

⒈僅使用于微生物限度檢查供試液的制備。⒉盡量避免使用，不可使用快速離心。

XX版藥典與2020版微生物對(duì)比①離心沉淀集菌法兩次離心修改為一次22細(xì)菌、霉菌及酵母菌計(jì)數(shù)增修訂內(nèi)容

⒈新增計(jì)數(shù)培養(yǎng)基的適用性檢查⑴菌種

大腸埃希菌（Escherichiacoli）〔CMCC（B）44102〕

金黃色葡萄球菌（Staphylococcusaureus）〔CMCC（B）26003〕

枯草芽孢桿菌（Bacillussubtilis）〔CMCC（B）63501〕

白色念珠菌（Candidaalbicans）〔CMCC（F）98001〕

黑曲霉（Aspergillusniger）〔CMCC（F）98003〕

XX版藥典與2020版微生物對(duì)比細(xì)菌、霉菌及酵母菌計(jì)數(shù)增修訂內(nèi)容23①

增加了菌懸液的制備及保存條件。菌懸液制備后在室溫下放置應(yīng)在2小時(shí)內(nèi)使用，若保存在2～8℃可以在24小時(shí)內(nèi)使用。黑曲霉孢子懸液可保存在2～8℃，在驗(yàn)證過(guò)的貯存期內(nèi)使用，每株試驗(yàn)菌平行制備2個(gè)平皿，混勻，凝固，按規(guī)定條件培養(yǎng)計(jì)數(shù)，同時(shí)用相應(yīng)的對(duì)照培養(yǎng)基替代被檢培養(yǎng)基進(jìn)行上述試驗(yàn)。

②增加了對(duì)照培養(yǎng)。XX版藥典與2020版微生物對(duì)比①增加了菌懸液的制備及保存條件。XX版藥典與202024

2.新增常見干擾物的中和劑和滅活方法參見表1常見干擾物的中和劑或滅活方法

XX版藥典與2020版微生物對(duì)比2.新增常見干擾物25

6、供試品檢查增修訂內(nèi)容

XX版藥典與2020版微生物對(duì)比XX版藥典與2020版微生物對(duì)比26

⑴平皿法刪去采用平皿法進(jìn)行菌數(shù)測(cè)定時(shí)，連續(xù)2～3個(gè)稀釋級(jí)的供試液。

修改為按計(jì)數(shù)方法的驗(yàn)證試驗(yàn)確認(rèn)的程序進(jìn)行供試液制備。

XX版藥典與2020版微生物對(duì)比⑴平皿法刪去采用平皿27

⑵培養(yǎng)時(shí)間修改內(nèi)容除另有規(guī)定外，細(xì)菌培養(yǎng)48小時(shí)改為3天，霉菌、酵母菌培養(yǎng)72小時(shí)改為5天，必要時(shí)，可適當(dāng)延長(zhǎng)培養(yǎng)時(shí)間至7天進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)并報(bào)告。XX版藥典與2020版微生物對(duì)比⑵培養(yǎng)時(shí)間修改內(nèi)容XX版藥典與2020版微生物對(duì)比28菌數(shù)報(bào)告規(guī)則增修訂內(nèi)容

⒈若同稀釋級(jí)兩個(gè)平板的菌落平均數(shù)不小于15，則兩個(gè)平板的菌落數(shù)不能相差1倍或以上。⒉細(xì)菌、酵母菌和霉菌平均菌落數(shù)在30～300、30～100之間的稀釋級(jí)修改為選取菌落數(shù)小于300cfu和100cfu的稀釋級(jí)作為菌數(shù)報(bào)告的依據(jù)。XX版藥典與2020版微生物對(duì)比菌數(shù)報(bào)告規(guī)則增修訂內(nèi)容⒈若同稀釋級(jí)兩個(gè)平板的菌落平29

⑶薄膜過(guò)濾法增修訂內(nèi)容

新增內(nèi)容采用其它直徑的濾膜，沖洗量應(yīng)相應(yīng)的進(jìn)行調(diào)整（如使用膜直徑增大沖洗液量也應(yīng)相應(yīng)增加，可保證沖洗液覆蓋整個(gè)濾膜）。

刪去每片濾膜的總過(guò)濾量不宜過(guò)大，修改為總沖洗量不得超過(guò)1000ml。XX版藥典與2020版微生物對(duì)比

⑶薄膜過(guò)濾法增修訂內(nèi)容

新增內(nèi)容采用其它直徑的30

7、控制菌檢查增修訂

⑴增加控制菌檢查用培養(yǎng)基的適用性檢查；檢查項(xiàng)目包括促生長(zhǎng)、抑制及指示能力檢查參照表2

XX版藥典與2020版微生物對(duì)比7、控制菌檢查增修訂XX31

⑵新增培養(yǎng)基適用性檢查方法①液體培養(yǎng)基促生長(zhǎng)能力檢查。②固體培養(yǎng)基促生長(zhǎng)能力檢查。③培養(yǎng)基抑制能力檢查。④液體培養(yǎng)基指示能力檢查。⑤固體培養(yǎng)基指示能力檢查。

試驗(yàn)結(jié)果與對(duì)照培養(yǎng)基比較XX版藥典與2020版微生物對(duì)比⑵新增培養(yǎng)基適用性檢查方法XX版藥典與2020版微生物32控制菌檢查用培養(yǎng)基的適用性檢查控制菌檢查用培養(yǎng)基的促生長(zhǎng)、抑制及指示能力檢查控制菌檢查培養(yǎng)基特性試驗(yàn)菌株大腸埃希菌膽鹽乳糖促生長(zhǎng)能力大腸埃希菌抑制能力金黃色葡萄球菌MUG促生長(zhǎng)能力+指示能力大腸埃希菌曙紅亞甲藍(lán)或麥康凱促生長(zhǎng)能力+指示能力大腸埃希菌大腸菌群乳糖膽鹽促生長(zhǎng)能力大腸埃希菌抑制能力金黃色葡萄球菌乳糖發(fā)酵促生長(zhǎng)能力+指示能力大腸埃希菌曙紅亞甲藍(lán)或麥康凱促生長(zhǎng)能力+指示能力大腸埃希菌

XX版藥典與2020版微生物對(duì)比控制菌檢查用培養(yǎng)基的適用性檢查控制菌檢查用培養(yǎng)基的促生長(zhǎng)、抑33沙門菌營(yíng)養(yǎng)肉湯促生長(zhǎng)能力乙型付傷寒沙門菌四硫磺酸鈉亮綠促生長(zhǎng)能力乙型付傷寒沙門菌抑制能力金黃色葡萄球菌膽鹽硫乳瓊脂或沙門、志賀氏屬瓊脂培養(yǎng)基促生長(zhǎng)能力+指示能力乙型付傷寒沙門菌曙紅亞甲藍(lán)瓊脂或麥康凱瓊脂培養(yǎng)基促生長(zhǎng)能力+指示能力乙型付傷寒沙門菌三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基指示能力乙型付傷寒沙門菌銅綠假單膽鹽乳糖促生長(zhǎng)能力銅綠假單胞菌胞菌抑制能力金黃色葡萄球菌溴化十六烷基三促生長(zhǎng)能力銅綠假單胞菌甲銨瓊脂抑制能力大腸埃希菌綠膿菌素測(cè)定用培養(yǎng)基促生長(zhǎng)能力+指示能力銅綠假單胞菌金黃色葡亞碲酸鹽肉湯促生長(zhǎng)能力金黃色葡萄球菌萄球菌抑制能力大腸埃希菌卵黃氯化鈉瓊脂促生長(zhǎng)能力+指示能力金黃色葡萄球菌或甘露醇鹽瓊脂抑制能力大腸埃希菌梭菌梭菌增菌培養(yǎng)基促生長(zhǎng)能力生孢梭菌哥倫比亞瓊脂促生長(zhǎng)能力生孢梭菌白色念沙氏葡萄糖肉湯促生長(zhǎng)能力白色念珠菌珠菌沙氏葡萄糖瓊脂促生長(zhǎng)能力+指示能力白色念珠菌念珠菌顯色培養(yǎng)基促生長(zhǎng)能力+指示能力白色念珠菌吐溫80玉米瓊脂促生長(zhǎng)能力+指示能力白色念珠菌XX版藥典與2020版微生物對(duì)比沙門菌營(yíng)養(yǎng)肉湯促生34⑶控制菌檢查法增修訂內(nèi)容

①疑似致病菌的確證微生物控制菌檢查中沒(méi)有規(guī)定進(jìn)一步確證疑似致病菌的方法。選擇已被認(rèn)可的菌種鑒定方法。如《伯杰氏細(xì)菌鑒定手》。

②控制菌檢查方法驗(yàn)證刪去陰性菌對(duì)照組。

XX版藥典與2020版微生物對(duì)比⑶控制菌檢查法增修訂內(nèi)容①疑似致病菌的確證XX版藥典35

③大腸菌群檢查用膽鹽乳糖培養(yǎng)基改為乳糖膽鹽。

④改梭菌檢查用庖肉培養(yǎng)基為梭菌增菌培養(yǎng)基。⑤改梭菌培養(yǎng)時(shí)間72～96小時(shí)為48小時(shí)。

XX版藥典與2020版微生物對(duì)比③大腸菌群檢查用膽鹽乳36

增加了白色念珠菌檢驗(yàn)方法

增菌培養(yǎng)沙氏葡萄糖肉湯培養(yǎng)基。分離培養(yǎng)劃線接種于沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基平板上。XX版藥典與2020版微生物對(duì)比增加了白色念珠菌檢驗(yàn)方法增菌培養(yǎng)沙37

鑒定試驗(yàn)

典型菌落⒈沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基菌落呈乳白色偶見淡黃色，表面光滑有濃酵母氣味，時(shí)間稍久則菌落增大，顏色變深、質(zhì)地變硬或有皺摺。⒉念珠菌顯色培養(yǎng)基

菌落呈綠色或翠綠色菌落生長(zhǎng)。

XX版藥典與2020版微生物對(duì)比

鑒定試驗(yàn)

典型菌落XX版38⒋確認(rèn)試驗(yàn)取1%吐溫80-玉米瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)物進(jìn)行染色，鏡檢及芽管試驗(yàn)。

結(jié)果判斷非革蘭陽(yáng)性菌，顯微鏡下未見厚膜孢子、假菌絲、芽管判未檢出白色念珠菌。XX版藥典與2020版微生物對(duì)比⒋確認(rèn)試驗(yàn)取1%吐溫80-玉米瓊脂XX版藥典與20239

新增微生物限度檢查法指導(dǎo)原則一、抑菌劑效力檢查法指導(dǎo)原則二、藥品微生物檢驗(yàn)替代方法驗(yàn)證指導(dǎo)原則三、微生物限度檢查法應(yīng)用指導(dǎo)原則四、藥品微生物實(shí)驗(yàn)室規(guī)范指導(dǎo)原則XX版藥典與2020版微生物對(duì)比新增微生物限度檢查法指導(dǎo)原則一、抑40一、抑菌劑效力檢查法指導(dǎo)原則⒈指導(dǎo)原則的目的⑴是為測(cè)定滅菌、非滅菌制劑中抑菌劑的活性，以評(píng)價(jià)最終產(chǎn)品的抑菌效力及生產(chǎn)企業(yè)在制劑研發(fā)階段抑菌劑的確定提供指導(dǎo)。⑵為防止藥品由于微生物污染而引起變質(zhì)，對(duì)服用者造成不良反應(yīng)，在藥品生產(chǎn)過(guò)程中加入一定劑量的抑菌劑。⑶抑菌劑不能用于替代藥品生產(chǎn)的GMP管理，不能作為非滅菌制劑降低微生物污染的唯一途徑，也不能作為控制多劑量包裝制劑滅菌前的生物負(fù)載的手段。XX版藥典與2020版微生物對(duì)比一、抑菌劑效力檢查法指導(dǎo)原則⒈指導(dǎo)原41⒉使用范圍及原則

⑴使用范圍如果藥物本身不具有充分的抗菌活性，應(yīng)根據(jù)制劑特性添加適宜的抑菌劑，以防止制劑在正常貯藏和使用過(guò)程中可能發(fā)生的微生物污染和繁殖，對(duì)患者造成傷害。XX版藥典與2020版微生物對(duì)比⒉使用范圍及原則⑴使用范圍如果藥物本身不具有充42

⑵使用原則

所有抑菌劑都具有一定的毒性，添加抑菌劑時(shí)應(yīng)注意以下原則:①抑菌劑的用量應(yīng)為最低有效量。②具有抗菌活性的制劑應(yīng)確認(rèn)其抗菌效力。XX版藥典與2020版微生物對(duì)比⑵使用原則所有抑菌劑都具有一定的毒性，添加抑43

③應(yīng)驗(yàn)證最終容器中的抑菌劑效力在效期內(nèi)不因貯藏條件而降低。④本試驗(yàn)方法和抑菌劑抑菌效力判斷標(biāo)準(zhǔn)用于包裝未啟開的成品制劑。XX版藥典與2020版微生物對(duì)比③應(yīng)驗(yàn)證最終容器中的抑菌劑效力在效期內(nèi)不因貯藏條件而降低44

⒊抑菌劑抑菌效力的測(cè)定

⑴供試品的分類分為四類，但對(duì)于一些抗酸性制劑和含活生物制劑應(yīng)考慮會(huì)降低有益菌的生物活性。見表1XX版藥典與2020版微生物對(duì)比⒊抑菌劑抑菌效力的測(cè)定⑴供試品的分類XX45表1產(chǎn)品分類

類別藥品

1類注射劑、其他非腸道制劑，包括乳劑、耳用制劑、無(wú)菌鼻用制劑及眼用制劑2類局部給藥制劑、非滅菌鼻用制劑及用于黏膜的乳劑3類口服非固體制劑（非抗酸制劑）4類非固體抗酸制劑XX版藥典與2020版微生物對(duì)比表1產(chǎn)46

⑵培養(yǎng)基①培養(yǎng)基的制備胰酪胨大豆肉湯瓊脂培養(yǎng)基胰酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基沙氏葡萄糖肉湯培養(yǎng)基

②培養(yǎng)基的適用性檢查同控制菌培養(yǎng)基的適用性檢查

XX版藥典與2020版微生物對(duì)比⑵培養(yǎng)基①培養(yǎng)基的制備XX版藥典與2020版微47

⑶抑菌劑效力測(cè)定方法

①菌種菌液制備

菌種同培養(yǎng)基適用性檢查，制劑中常見的污染微生物也可作為試驗(yàn)菌。

菌液制備制成每1ml含菌數(shù)約為108cfu的菌懸液。

②供試品接種影響因素給予指導(dǎo)

容器的材質(zhì)、形狀、體積、封口方式及容器的PH等分別給予了指導(dǎo)。

XX版藥典與2020版微生物對(duì)比⑶抑菌劑效力測(cè)定方法XX版藥典與2020版微生48

③接種菌量接種菌液的體積不得超過(guò)供試品體積的0.5%～1%。④放置20～25℃，避光貯存，貯存溫度的變化應(yīng)盡可能控制在最小范圍，并防止被污染。XX版藥典與2020版微生物對(duì)比③接種菌量接種菌液的體積不得超過(guò)供試品體積的0.5%49

⑷存活菌數(shù)測(cè)定

采用經(jīng)驗(yàn)證的方法進(jìn)行試驗(yàn)，計(jì)算1ml(g)供試品各試驗(yàn)菌所得的菌數(shù)及各間隔時(shí)間的菌數(shù)，并換算成lg值。XX版藥典與2020版微生物對(duì)比⑷存活菌數(shù)測(cè)定XX版藥典與2020版微生物對(duì)比50

⑸結(jié)果判斷結(jié)果符合表3要求，可判斷該產(chǎn)品抑菌效力符合規(guī)定。XX版藥典與2020版微生物對(duì)比⑸結(jié)果判斷結(jié)果符合表3要求，可判斷該產(chǎn)品抑菌效力符51

表3抑菌劑抑菌效力判斷標(biāo)準(zhǔn)

1類供試品

細(xì)菌7天菌數(shù)下降不少于1.0lg，14天菌數(shù)下降不少于3.0lg,14天到28天菌數(shù)不增加。真菌與初始值比，7、14、28天菌數(shù)均不增加。

2類供試品細(xì)菌14天菌數(shù)下降不少于2.0lg，14天到28天菌數(shù)不增加。真菌與初始值比，14、28天菌數(shù)均不增加。

3類供試品細(xì)菌14天菌數(shù)下降不少于1.0lg，14天到28天菌數(shù)不增加。真菌與初始值比，14、28天菌數(shù)均不增加。

4類供試品細(xì)菌，真菌與初始值比，14、28天菌數(shù)均不增加。

注：1、表中“不增加”是指對(duì)前一個(gè)測(cè)定時(shí)間，試驗(yàn)菌增加的數(shù)量不超過(guò)0.5lg。2、0時(shí)菌數(shù)(初試值)供試品加入試驗(yàn)菌，搖勻，立即取樣檢查，培養(yǎng)，計(jì)數(shù)，為0時(shí)菌數(shù)。XX版藥典與2020版微生物對(duì)比表3抑菌劑抑菌效力判斷標(biāo)準(zhǔn)X52二、藥品微生物檢驗(yàn)替代方法驗(yàn)證指導(dǎo)原則⒈目的

⑴是為所采用的試驗(yàn)方法能否替代藥典規(guī)定的方法用于藥品微生物的檢驗(yàn)提供指導(dǎo)。⑵在控制藥品微生物質(zhì)量中，需要采用替代方法時(shí)，應(yīng)進(jìn)行方法的驗(yàn)證，確認(rèn)其應(yīng)用效果優(yōu)于或等同于藥典的方法。XX版藥典與2020版微生物對(duì)比二、藥品微生物檢驗(yàn)替代方法驗(yàn)證指導(dǎo)原則⒈目的X53

⒉微生物檢驗(yàn)的類型及驗(yàn)證參數(shù)

藥品微生物檢驗(yàn)方法主要分兩種類型

定性試驗(yàn)定量試驗(yàn)⒊生物試驗(yàn)的特殊性抽樣誤差操作誤差稀釋誤差培養(yǎng)誤差計(jì)量誤差計(jì)數(shù)誤差藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證指導(dǎo)原則不完全宜于微生物替代方法的驗(yàn)證。XX版藥典與2020版微生物對(duì)比⒉微生物檢驗(yàn)的類型及驗(yàn)證參數(shù)XX版藥典與2020版微生物對(duì)54

表1、不同微生物檢驗(yàn)類型驗(yàn)證參數(shù)表參數(shù)定性檢驗(yàn)定量檢驗(yàn)準(zhǔn)確度－＋精密度－＋專屬性＋＋檢測(cè)限＋－定量限－＋線性－＋范圍－＋耐用性＋＋重現(xiàn)性＋＋注：＋表示需要驗(yàn)證的參數(shù)－表示不需要驗(yàn)證的參數(shù)逐項(xiàng)按替代方法驗(yàn)證的要求進(jìn)行驗(yàn)證和評(píng)價(jià)以便操作者了解方法的關(guān)鍵操作點(diǎn)XX版藥典與2020版微生物對(duì)比表1、不同微生物檢驗(yàn)類型驗(yàn)證參數(shù)表XX版藥典與2055⒋替代方法驗(yàn)證的一般要求

⑴適用性驗(yàn)證前，對(duì)替代方法有一個(gè)全面的了解；由替代方法的研發(fā)者提供，或由方法使用者完成。⑵驗(yàn)證應(yīng)至少使用2個(gè)批號(hào)的樣品，每批樣品應(yīng)平行進(jìn)行至少3次獨(dú)立實(shí)驗(yàn)。⑶在開展各參數(shù)驗(yàn)證時(shí)，除規(guī)定的菌株外，還應(yīng)根據(jù)替代方法及樣品的特點(diǎn)增加相應(yīng)的菌株。

XX版藥典與2020版微生物對(duì)比⒋替代方法驗(yàn)證的一般要求

XX版藥典與2020版微56三、藥品微生物限度檢查法應(yīng)用指導(dǎo)原則目的為更好的應(yīng)用微生物限度檢查法及限度標(biāo)準(zhǔn)的合理執(zhí)行提供指導(dǎo)。

用途用于判斷非規(guī)定滅菌制劑及原料、輔料是否符合藥典的規(guī)定，也可用于指導(dǎo)制劑、原料、輔料的微生物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定，及指導(dǎo)生產(chǎn)過(guò)程中間產(chǎn)品微生物質(zhì)量的監(jiān)控。本指導(dǎo)原則將對(duì)標(biāo)準(zhǔn)和方法中的特定內(nèi)容及標(biāo)準(zhǔn)的應(yīng)用做進(jìn)一步的說(shuō)明。XX版藥典與2020版微生物對(duì)比三、藥品微生物限度檢查法應(yīng)用指導(dǎo)原則目的為更好57

1.微生物限度檢查過(guò)程中，如需要使用表面活性劑、滅活劑及中和劑，應(yīng)對(duì)其用量、有效性、無(wú)毒性進(jìn)行確認(rèn)，無(wú)毒性確認(rèn)，試驗(yàn)的菌株應(yīng)包括產(chǎn)品中可能污染的微生物。XX版藥典與2020版微生物對(duì)比1.微生物限度檢查過(guò)程中，如需要使用表面活性劑、滅活劑58

2.檢驗(yàn)方法的選擇

供試液制備應(yīng)盡量選擇微生物限度檢查法中操作簡(jiǎn)便、快速的方法，且應(yīng)避免損傷供試品中污染的微生物。對(duì)于抑菌作用較強(qiáng)的供試品，在供試品溶液性狀允許的情況下，應(yīng)盡量選用薄膜過(guò)濾法進(jìn)行試驗(yàn)。XX版藥典與2020版微生物對(duì)比

2.檢驗(yàn)方法的選擇

593.供試液制備

本指導(dǎo)原則對(duì)離心沉淀法使用范圍、方法及對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果影響的因素進(jìn)行了分析和指導(dǎo)4.驗(yàn)證試驗(yàn)存在的問(wèn)題及處理方法自藥典收載方法驗(yàn)證以來(lái)在實(shí)施過(guò)程中存在一些具體問(wèn)題，對(duì)這些存在問(wèn)題進(jìn)行了指導(dǎo)；進(jìn)行驗(yàn)證試驗(yàn)時(shí)，因沒(méi)有適宜的方法消除供試品中的抑菌作用而導(dǎo)致微生物回收的失敗。XX版藥典與2020版微生物對(duì)比3.供試液制備本指導(dǎo)原則對(duì)離心沉淀法使用范圍、方法及60

⑴處理方法

①應(yīng)采用能使微生物生長(zhǎng)的更高稀釋級(jí)供試液進(jìn)行方法驗(yàn)證試驗(yàn)。②若采用允許的最高稀釋級(jí)供試液進(jìn)行驗(yàn)證試驗(yàn)還存在一株或多株試驗(yàn)菌的回收率達(dá)不到要求。

處理方法應(yīng)選擇回收情況最接近要求的方法進(jìn)行供試品的檢測(cè)。XX版藥典與2020版微生物對(duì)比⑴處理方法XX版藥典與2020版微生物對(duì)比61③在以上情況下，生產(chǎn)單位或研制單位應(yīng)進(jìn)行全面的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估以保證檢驗(yàn)方法的可靠性，從而保證產(chǎn)品質(zhì)量。XX版藥典與2020版微生物對(duì)比③在以上情況下，生產(chǎn)單位或研制單位應(yīng)進(jìn)行全面的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估以保62５.控制菌的確證沒(méi)有規(guī)定進(jìn)一步確證疑似致病菌的方法。僅規(guī)定若供試品檢出疑似致病菌，確證的方法應(yīng)選擇已被認(rèn)可的菌種鑒定方法。XX版藥典與2020版微生物對(duì)比５.控制菌的確證沒(méi)有規(guī)定進(jìn)一步確證疑似致病菌的方法。63⒍微生物限度標(biāo)準(zhǔn)

該指導(dǎo)原則對(duì)標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行中存在的問(wèn)題進(jìn)行了分析和指導(dǎo)；⑴明確了微生物限度標(biāo)準(zhǔn)使用范圍⑵標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行①必檢項(xiàng)目②原則性要求（丸劑、口服片劑、膠囊劑、顆粒劑），應(yīng)對(duì)其被微生物污染的風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行評(píng)估。

XX版藥典與2020版微生物對(duì)比⒍微生物限度標(biāo)準(zhǔn)該指導(dǎo)原則對(duì)標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行中存在的問(wèn)題進(jìn)行64

⑶用于手術(shù)、燒傷及嚴(yán)重創(chuàng)傷的局部給藥制劑應(yīng)符合無(wú)菌檢查法要求。⑷用于創(chuàng)傷程度難以判斷的局部給藥制劑，若沒(méi)有證據(jù)證明藥品不存在安全性風(fēng)險(xiǎn)則應(yīng)符合無(wú)菌檢查法要求。⑸眼用制劑應(yīng)符合無(wú)菌檢查法要求。XX版藥典與2020版微生物對(duì)比⑶用于手術(shù)、燒傷及嚴(yán)重創(chuàng)傷的局部給藥制劑應(yīng)符合無(wú)菌檢查65

⑹含動(dòng)物類原藥材粉的口服中藥制劑要求不得檢出沙門菌。其中的動(dòng)物類原藥材粉是指除蜂蜜、王漿、動(dòng)物角、阿膠外的所有動(dòng)物類原藥材粉，如牡蠣、珍珠等貝類，海蜇、冬蟲夏草、人工牛黃等。⑺制定合理、安全和嚴(yán)格的微生物限度標(biāo)準(zhǔn)

XX版藥典與2020版微生物對(duì)比⑹含動(dòng)物類原藥材粉的口服中藥制劑要求不得檢出沙門菌。其66

四、藥品微生物實(shí)驗(yàn)室規(guī)范指導(dǎo)原則

XX版藥典與2020版微生物對(duì)比四、藥品微生物實(shí)驗(yàn)室規(guī)范指導(dǎo)原則67

⒈目的該指導(dǎo)原則用于指導(dǎo)藥品微生物檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量控制。

⒉藥品微生物的檢驗(yàn)的對(duì)象具特殊性；活的生物、分布不均勻、重現(xiàn)性差必須使用經(jīng)驗(yàn)證的檢測(cè)方法并嚴(yán)格按照藥品微生物實(shí)驗(yàn)室規(guī)范要求進(jìn)行試驗(yàn)。XX版藥典與2020版微生物對(duì)比⒈目的XX版藥典與2020版微生物對(duì)比68⒊藥品微生物實(shí)驗(yàn)室規(guī)范包括以下幾個(gè)方面人員、培養(yǎng)基、菌種、實(shí)驗(yàn)室的布局和運(yùn)行、設(shè)備、文件、實(shí)驗(yàn)記錄、結(jié)果的判斷等。⑴人員從事藥品微生物試驗(yàn)工作的人員應(yīng)具備微生物學(xué)或相近專業(yè)知識(shí)的教育背景

XX版藥典與2020版微生物對(duì)比⒊藥品微生物實(shí)驗(yàn)室規(guī)范包括以下幾個(gè)方面XX版藥典與2020版69

①檢驗(yàn)人員和管理人員培訓(xùn)

進(jìn)行崗前培訓(xùn)檢驗(yàn)人員技能培訓(xùn)熟悉相關(guān)檢測(cè)方法、程序、檢測(cè)目的和結(jié)果評(píng)價(jià)。XX版藥典與2020版微生物對(duì)比①檢驗(yàn)人員和管理人員培訓(xùn)進(jìn)行崗前培訓(xùn)XX版70

管理人員

①其專業(yè)技能和經(jīng)驗(yàn)水平應(yīng)與他們的職責(zé)范圍相符。不斷接受系統(tǒng)的教育與職責(zé)范圍相關(guān)的培訓(xùn)。②客觀評(píng)估檢驗(yàn)人員的能力，必要時(shí)對(duì)其進(jìn)行再培訓(xùn)并重新評(píng)估。

XX版藥典與2020版微生物對(duì)比管理人員XX版藥典與2020版微生物71

⒉培養(yǎng)基

培養(yǎng)基是微生物試驗(yàn)的基礎(chǔ)，直接影響微生物試驗(yàn)結(jié)果。適宜的培養(yǎng)基制備方法、貯藏條件和質(zhì)量控制試驗(yàn)是提供優(yōu)質(zhì)培養(yǎng)基的保證。

該指導(dǎo)原則對(duì)培養(yǎng)基的制備、儲(chǔ)存、滅菌及質(zhì)量控制進(jìn)行了指導(dǎo)。XX版藥典與2020版微生物對(duì)比

⒉培養(yǎng)基

培養(yǎng)基是微生物試驗(yàn)的基礎(chǔ)72

⒊菌種

實(shí)驗(yàn)室菌種的處理和保藏的程序應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)化，⑴使盡可能減少菌種污染和生長(zhǎng)特性的改變。⑵按統(tǒng)一操作程序制備的菌株是微生物試驗(yàn)結(jié)果一致性的重要保證。XX版藥典與2020版微生物對(duì)比⒊菌種實(shí)驗(yàn)室菌種的處73該指導(dǎo)原則對(duì)菌種的來(lái)源、菌種保藏、菌種的傳代和使用、菌種的管理進(jìn)行了詳細(xì)的說(shuō)明和指導(dǎo)。XX版藥典與2020版微生物對(duì)比該指導(dǎo)原則對(duì)菌種的來(lái)源、菌種保藏、菌種的傳代和使用、74

２、菌種保藏的原則

⑴標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株可用于制備每月或每周一次轉(zhuǎn)種的工作菌株.冷凍菌株一旦解凍轉(zhuǎn)種制備工作菌株后,不得重新冷凍或再次使用。⑵工作菌株不可代替標(biāo)準(zhǔn)菌株，標(biāo)準(zhǔn)菌株的商業(yè)衍生物僅可用作工作菌