高中-高考生物專(zhuān)題復(fù)習(xí)-基因工程與細(xì)胞工程課件_第1頁(yè)
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專(zhuān)題十六基因工程與細(xì)胞工程專(zhuān)題十六基因工程與細(xì)胞工程1知識(shí)體系構(gòu)建核心考點(diǎn)1基因工程與蛋白質(zhì)工程核心考點(diǎn)2細(xì)胞工程知識(shí)體系構(gòu)建核心考點(diǎn)1基因工程與蛋白質(zhì)工程核心考2知識(shí)體系構(gòu)建知識(shí)體系構(gòu)建3DNA連接酶基因表達(dá)載體的構(gòu)建基因細(xì)胞的全能性、細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞增殖動(dòng)物細(xì)胞核的全能性給小鼠注射抗原產(chǎn)生專(zhuān)一抗體的雜交瘤細(xì)胞DNA連接酶基因表達(dá)載體的構(gòu)建基因細(xì)胞的全能性、細(xì)胞膜的流動(dòng)4基因工程與蛋白質(zhì)工程核心考點(diǎn)1基因工程與蛋白質(zhì)工程核心考點(diǎn)151.掌握基因工程的3種基本工具(1)限制性核酸內(nèi)切酶:識(shí)別特定核苷酸序列,并在特定位點(diǎn)上切割DNA分子。(2)DNA連接酶:①E·coliDNA連接酶只能連接黏性末端;②T4DNA連接酶能連接黏性末端和平末端。(3)載體:①能在宿主細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定存在并大量復(fù)制;②有一個(gè)至多個(gè)限制酶切割位點(diǎn);③具有特殊的標(biāo)記基因——以便對(duì)含目的基因的受體細(xì)胞進(jìn)行篩選。要點(diǎn)整合11.掌握基因工程的3種基本工具要點(diǎn)整合16提醒

(1)限制酶≠DNA酶≠解旋酶限制酶是切割某種特定的脫氧核苷酸序列,并使兩條鏈在特定的位置斷開(kāi);DNA酶是將DNA水解為基本組成單位;解旋酶是將DNA的兩條鏈間的氫鍵打開(kāi)形成兩條單鏈。(2)使用限制酶的注意點(diǎn)①一般用同種限制酶切割載體和目的基因。②不同的限制酶也能切割出相同的黏性末端。(3)DNA連接酶≠DNA聚合酶DNA連接酶連接兩個(gè)DNA片段,而DNA聚合酶只能將單個(gè)脫氧核苷酸添加到脫氧核苷酸鏈上。提醒(1)限制酶≠DNA酶≠解旋酶72.理清基因工程的操作流程(1)獲取目的基因的3種途徑①?gòu)幕蛭膸?kù)中獲取。②利用PCR技術(shù)擴(kuò)增。③化學(xué)方法人工合成。2.理清基因工程的操作流程8提醒

(1)PCR技術(shù)擴(kuò)增①原理:DNA雙鏈復(fù)制。②條件:模板DNA、引物、脫氧核苷酸、熱穩(wěn)定性DNA聚合酶。(2)化學(xué)方法人工合成已知核苷酸序列的較小基因,直接利用DNA合成儀用化學(xué)方法合成,不需要模板。提醒(1)PCR技術(shù)擴(kuò)增(2)化學(xué)方法人工合成9(2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建——重組質(zhì)粒的構(gòu)建①基因表達(dá)載體的組成(2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建——重組質(zhì)粒的構(gòu)建10②構(gòu)建過(guò)程提醒

(1)基因工程中的載體與細(xì)胞膜上的載體不同。(2)啟動(dòng)子、終止子①啟動(dòng)子(DNA片段)≠起始密碼子(位于mRNA上)。②終止子(DNA片段)≠終止密碼子(位于mRNA上)。(3)目的基因插入位置:?jiǎn)?dòng)子與終止子之間。②構(gòu)建過(guò)程提醒(1)基因工程中的載體與細(xì)胞膜上的載體不同。11(3)根據(jù)受體種類(lèi)確定基因工程的受體細(xì)胞①植物:植物體細(xì)胞或受精卵——導(dǎo)入方法常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、花粉管通道法、基因槍法(本法針對(duì)單子葉植物)②動(dòng)物:受精卵或體細(xì)胞——導(dǎo)入方法為“顯微注射法”③微生物:細(xì)菌——導(dǎo)入方法為“感受態(tài)法”(4)目的基因的檢測(cè)與鑒定的方法①檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞:DNA分子雜交技術(shù)。②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA:分子雜交技術(shù)。③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì):抗原—抗體雜交技術(shù)。④個(gè)體生物學(xué)水平鑒定:根據(jù)表達(dá)性狀判斷。(3)根據(jù)受體種類(lèi)確定基因工程的受體細(xì)胞123.理清蛋白質(zhì)工程基因合成新的蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)脫氧核苷酸序列3.理清蛋白質(zhì)工程基因合成新的蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)脫氧核苷酸序列13考向設(shè)計(jì)21.(2014·江蘇,23)下列關(guān)于基因工程技術(shù)的敘述,錯(cuò)誤的是(多選)A.切割質(zhì)粒的限制性核酸內(nèi)切酶均特異性地識(shí)別6個(gè)核苷酸序列B.PCR反應(yīng)中溫度的周期性改變是為了DNA聚合酶催化不同的反應(yīng)C.載體質(zhì)粒通常采用抗生素合成基因作為篩選標(biāo)記基因D.抗蟲(chóng)基因即使成功地插入到植物細(xì)胞染色體上也未必能正常表達(dá)答案解析12345√√√考向設(shè)計(jì)21.(2014·江蘇,23)下列關(guān)于基因工程技術(shù)14解析A項(xiàng),限制性核酸內(nèi)切酶大多特異性地識(shí)別6個(gè)核苷酸序列,但也有少數(shù)限制性核酸內(nèi)切酶能識(shí)別4個(gè)、5個(gè)或8個(gè)核苷酸序列。B項(xiàng),PCR反應(yīng)中溫度周期性變化是為變性、復(fù)性和延伸創(chuàng)造條件。另外,耐高溫的DNA聚合酶只是在延伸階段發(fā)揮催化作用,變性和復(fù)性過(guò)程不需要酶的催化。C項(xiàng),載體質(zhì)粒上的抗生素抗性基因可作為標(biāo)記基因,供重組DNA的鑒定和選擇,而不是抗生素合成基因。D項(xiàng),目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞后不一定能正常表達(dá)。12345解析A項(xiàng),限制性核酸內(nèi)切酶大多特異性地識(shí)別6個(gè)核苷酸序列,152.(2017·南通二模)科學(xué)家利用基因工程技術(shù)將魚(yú)的抗凍蛋白基因?qū)敕?,使番茄的耐寒能力大大提高。在培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因番茄的過(guò)程中,下列操作不合理的是A.可用PCR技術(shù)或逆轉(zhuǎn)錄法獲得抗凍蛋白基因B.利用選擇性培養(yǎng)基對(duì)構(gòu)建的基因表達(dá)載體直接篩選C.利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將基因表達(dá)載體導(dǎo)入番茄體細(xì)胞D.在低溫條件下篩選已導(dǎo)入抗凍蛋白基因的番茄植株答案解析12345√2.(2017·南通二模)科學(xué)家利用基因工程技術(shù)將魚(yú)的抗凍蛋16解析利用逆轉(zhuǎn)錄法可獲得cDNA;構(gòu)建的基因表達(dá)載體不可直接在選擇培養(yǎng)基上進(jìn)行篩選,需要先導(dǎo)入受體細(xì)胞中再進(jìn)行篩選;農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法是將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的常用方法;可利用低溫條件對(duì)耐寒番茄進(jìn)行個(gè)體性狀水平的檢測(cè),篩選成功轉(zhuǎn)基因的耐寒番茄植株。12345解析利用逆轉(zhuǎn)錄法可獲得cDNA;構(gòu)建的基因表達(dá)載體不可直接173.(2017·江蘇,33)金屬硫蛋白(MT)是一類(lèi)廣泛存在的金屬結(jié)合蛋白,某研究小組計(jì)劃通過(guò)多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)擴(kuò)增獲得目的基因,構(gòu)建轉(zhuǎn)基因工程菌,用于重金屬?gòu)U水的凈化處理。PCR擴(kuò)增過(guò)程示意圖如右,請(qǐng)回答下列問(wèn)題:(1)從高表達(dá)MT蛋白的生物組織中提取mRNA,通過(guò)_______獲得______用于PCR擴(kuò)增。答案解析cDNA解析由mRNA獲得目的基因片段需通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄,獲得的片段為cDNA。12345逆轉(zhuǎn)錄3.(2017·江蘇,33)金屬硫蛋白(MT)是一類(lèi)答案解析18(2)設(shè)計(jì)一對(duì)與MT基因兩端序列互補(bǔ)配對(duì)的引物(引物1和引物2),為方便構(gòu)建重組質(zhì)粒,在引物中需要增加適當(dāng)?shù)腳__________________位點(diǎn)。設(shè)計(jì)引物時(shí)需要避免引物之間形成_____________,而造成引物自連。答案解析解析為方便構(gòu)建重組質(zhì)粒,宜在引物中增加適當(dāng)?shù)南拗泼肝稽c(diǎn),以便使復(fù)制出的目的基因兩端含限制酶切點(diǎn);設(shè)計(jì)引物時(shí),需避免引物之間堿基互補(bǔ)配對(duì),以防引物間自連。限制性核酸內(nèi)切酶12345堿基互補(bǔ)配對(duì)(2)設(shè)計(jì)一對(duì)與MT基因兩端序列互補(bǔ)配對(duì)的引物(引物1和引19(3)圖中步驟1代表_____,步驟2代表退火,步驟3代表延伸,這三個(gè)步驟組成一輪循環(huán)。答案解析解析圖中步驟1為高溫下實(shí)現(xiàn)DNA變性解鏈。變性12345(3)圖中步驟1代表_____,步驟2代表退火,步驟3代表延20(4)PCR擴(kuò)增時(shí),退火溫度的設(shè)定是成敗的關(guān)鍵。退火溫度過(guò)高會(huì)破壞___________的堿基配對(duì)。退火溫度的設(shè)定與引物長(zhǎng)度、堿基組成有關(guān),長(zhǎng)度相同但__________的引物需要設(shè)定更高的退火溫度。解析PCR擴(kuò)增時(shí),若退火溫度過(guò)高會(huì)破壞引物與模板間的堿基互補(bǔ)配對(duì)。DNA片段中G與C間可形成三個(gè)氫鍵,GC堿基含量越高時(shí),DNA分子越穩(wěn)定,其退火溫度應(yīng)越高。引物與模板GC含量高答案解析12345(4)PCR擴(kuò)增時(shí),退火溫度的設(shè)定是成敗的關(guān)鍵。退火溫度過(guò)高21(5)如果PCR反應(yīng)得不到任何擴(kuò)增產(chǎn)物,則可以采取的改進(jìn)措施有______(填序號(hào):①升高退火溫度②降低退火溫度③重新設(shè)計(jì)引物)。答案解析解析若PCR反應(yīng)得不到任何擴(kuò)增產(chǎn)物,則可通過(guò)降低退火溫度及重新設(shè)計(jì)引物等措施,以便使引物與模板結(jié)合,從而進(jìn)行后序擴(kuò)增過(guò)程。②③12345(5)如果PCR反應(yīng)得不到任何擴(kuò)增產(chǎn)物,則可以采取的改進(jìn)措施224.(2015·江蘇,32)胰島素A、B鏈分別表達(dá)法是生產(chǎn)胰島素的方法之一。圖1是該方法所用的基因表達(dá)載體,圖2表示利用大腸桿菌作為工程菌生產(chǎn)人胰島素的基本流程(融合蛋白A、B分別表示β--半乳糖苷酶與胰島素A、B鏈融合的蛋白)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:(1)圖1基因表達(dá)載體中沒(méi)有標(biāo)注出來(lái)的基本結(jié)構(gòu)是________。答案解析12345終止子4.(2015·江蘇,32)胰島素A、B鏈分別表達(dá)法是生產(chǎn)胰2312345解析基因表達(dá)載體包含啟動(dòng)子、終止子、目的基因和標(biāo)記基因等。啟動(dòng)子是RNA聚合酶的識(shí)別和結(jié)合位點(diǎn)。氨芐青霉素抗性基因可作為標(biāo)記基因?;蚬こ淌褂玫墓ぞ呙赴ㄏ拗泼负虳NA連接酶。胰島素肽鏈上蛋白酶的切割位點(diǎn)隱藏起來(lái),將無(wú)法被蛋白酶所識(shí)別,防止被水解。溴化氰能切斷肽鏈中甲硫氨酸羧基端的肽鍵,若經(jīng)溴化氰處理相應(yīng)融合蛋白能獲得完整的A鏈和B鏈,表明胰島素A鏈、B鏈上并無(wú)溴化氰作用位點(diǎn),不能將其切斷;同理,β--半乳糖苷酶能被切成“多個(gè)肽段”,表明其具有多個(gè)切點(diǎn)(即“甲硫氨酸”)。胰島素分子含有兩條鏈,至少有2個(gè)游離氨基分別位于2條肽鏈的一端,并且R基團(tuán)中可能也含有游離的氨基。12345解析基因表達(dá)載體包含啟動(dòng)子、終止子、目的基因和標(biāo)24(2)圖1中啟動(dòng)子是_________酶識(shí)別和結(jié)合的部位,有了它才能啟動(dòng)目的基因的表達(dá);氨芐青霉素抗性基因的作用是________________________________________________。答案12345作為標(biāo)記基因,將含有重組RNA聚合質(zhì)粒的大腸桿菌篩選出來(lái)(2)圖1中啟動(dòng)子是_________酶識(shí)別和結(jié)合的部位,有25(3)構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)必需的工具酶有____________________。答案限制酶和DNA連接酶12345(4)β--半乳糖苷酶與胰島素A鏈或B鏈融合表達(dá),可將胰島素肽鏈上蛋白酶的切割位點(diǎn)隱藏在內(nèi)部,其意義在于_________________________________________。防止胰島素的A、B鏈被菌體內(nèi)蛋白酶降解(3)構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)必需的工具酶有___________26(5)溴化氰能切斷肽鏈中甲硫氨酸羧基端的肽鍵,用溴化氰處理相應(yīng)的融合蛋白能獲得完整的A鏈或B鏈,且β-半乳糖苷酶被切成多個(gè)肽段,這是因?yàn)開(kāi)_________________________________________________________。答案β-半乳糖苷酶中含多個(gè)甲硫氨酸,而胰島素A、B鏈中不含甲硫氨酸12345(5)溴化氰能切斷肽鏈中甲硫氨酸羧基端的肽鍵,用溴化氰處理相27(6)根據(jù)圖2中胰島素的結(jié)構(gòu),請(qǐng)推測(cè)每個(gè)胰島素分子中所含游離氨基的數(shù)量。你的推測(cè)結(jié)果是________,理由是______________________________________________________________________。答案至少2個(gè)12345的氨基,氨基酸R基團(tuán)中可能還含有游離的氨基兩條肽鏈的一端各有一個(gè)游離(6)根據(jù)圖2中胰島素的結(jié)構(gòu),請(qǐng)推測(cè)每個(gè)胰島素分子中所含游離285.(2017·蘇州二模)研究人員欲對(duì)擬芥蘭葉片中某種蛋白質(zhì)進(jìn)行改造,使其能結(jié)合空氣中微量的黃色炸藥揮發(fā)分子,導(dǎo)致葉片產(chǎn)生特定顏色變化,從而有助于檢測(cè)公共場(chǎng)所是否存在爆炸物。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:(1)科研人員從上述預(yù)期蛋白質(zhì)的功能出發(fā),設(shè)計(jì)________結(jié)構(gòu),然后推測(cè)相應(yīng)目的基因的__________________序列,最終人工合成目的基因。解析科研人員從預(yù)期蛋白質(zhì)的功能出發(fā),設(shè)計(jì)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu),然后推測(cè)相應(yīng)目的基因的脫氧核苷酸(或堿基)序列,最終人工合成出目的基因。答案解析脫氧核苷酸(或堿基)12345蛋白質(zhì)5.(2017·蘇州二模)研究人員欲對(duì)擬芥蘭葉片中某種蛋白質(zhì)29(2)將目的基因?qū)霐M芥蘭細(xì)胞通常采用____________的方法。首先將目的基因插入到Ti質(zhì)粒的________上,并最終整合到擬芥蘭細(xì)胞染色體的DNA上。解析農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞,并且整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上。根據(jù)農(nóng)桿菌的這一特點(diǎn),如果將目的基因插入到Ti質(zhì)粒的T-DNA上,通過(guò)農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用,就可以把目的基因整合到植物細(xì)胞中染色體的DNA上。答案解析T-DNA12345農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化(2)將目的基因?qū)霐M芥蘭細(xì)胞通常采用___________30(3)在_____和人工控制的條件下,將上述擬芥蘭細(xì)胞培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上,誘導(dǎo)其產(chǎn)生_________,最終形成轉(zhuǎn)基因植株。該過(guò)程的原理是_________________。解析在無(wú)菌條件下,將上述擬芥蘭細(xì)胞培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上,誘導(dǎo)其產(chǎn)生愈傷組織,最終形成轉(zhuǎn)基因植株,該方法為植物組織培養(yǎng),原理是植物細(xì)胞的全能性。答案解析細(xì)胞的全能性12345無(wú)菌愈傷組織植物(3)在_____和人工控制的條件下,將上述擬芥蘭細(xì)胞培養(yǎng)在31(4)在轉(zhuǎn)基因植株附近放置_________,從個(gè)體生物學(xué)水平鑒定出目的基因成功表達(dá)的轉(zhuǎn)基因植株。解析根據(jù)題干信息可知,在轉(zhuǎn)基因植株附近放置黃色爆炸物,從個(gè)體生物學(xué)水平鑒定出目的基因成功表達(dá)的轉(zhuǎn)基因植株。答案解析黃色炸藥12345(4)在轉(zhuǎn)基因植株附近放置_________,從個(gè)體生物學(xué)水32細(xì)胞工程核心考點(diǎn)2細(xì)胞工程核心考點(diǎn)2331.明確細(xì)胞工程技術(shù)的原理(1)植物組織培養(yǎng):

。(2)植物體細(xì)胞雜交:細(xì)胞的全能性、細(xì)胞膜的流動(dòng)性。(3)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng):細(xì)胞的增殖。(4)體細(xì)胞核移植:

。(5)單克隆抗體的制備:細(xì)胞膜的流動(dòng)性,細(xì)胞的增殖。(6)動(dòng)物細(xì)胞融合:細(xì)胞膜的

。要點(diǎn)整合1動(dòng)物細(xì)胞核的全能性細(xì)胞的全能性流動(dòng)性1.明確細(xì)胞工程技術(shù)的原理要點(diǎn)整合1動(dòng)物細(xì)胞核的全能性細(xì)胞342.理清植物組織培養(yǎng)的流程2.理清植物組織培養(yǎng)的流程35提醒

(1)條件:無(wú)菌、離體。(2)培養(yǎng)基組成:無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)、有機(jī)營(yíng)養(yǎng)、激素、瓊脂。(3)植物組織培養(yǎng)中添加蔗糖的目的是提供營(yíng)養(yǎng)和調(diào)節(jié)滲透壓。(4)植物組織培養(yǎng)的目的不同,培養(yǎng)階段也就不同:①若生產(chǎn)人工種子,則培養(yǎng)到胚狀體階段。②若提取細(xì)胞產(chǎn)品,則一般培養(yǎng)到愈傷組織階段。③若培育新個(gè)體,則應(yīng)培養(yǎng)到試管苗階段。提醒(1)條件:無(wú)菌、離體。363.理清植物體細(xì)胞雜交技術(shù)(1)酶解方法:用

處理。(2)促融方法:①物理法:離心、振動(dòng)、電激等;②化學(xué)法:聚乙二醇(PEG)。(3)植物體細(xì)胞雜交即將不同種的植物體細(xì)胞,在一定條件下融合成雜種細(xì)胞,并把雜種細(xì)胞培育成新的植物體的過(guò)程,不管是染色體數(shù)、基因型還是染色體組數(shù)都采用直接相加的方法。纖維素酶和果膠酶3.理清植物體細(xì)胞雜交技術(shù)纖維素酶和果膠酶374.理清動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)流程4.理清動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)流程38提醒

(1)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中兩次使用胰蛋白酶的作用不同:第一次:處理剪碎的組織,使其分散成單個(gè)細(xì)胞。第二次:使貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞從瓶壁上脫落下來(lái)。(2)傳代細(xì)胞的特點(diǎn)傳代培養(yǎng)到10代以?xún)?nèi)的細(xì)胞核型穩(wěn)定,10~50代時(shí)部分細(xì)胞核型發(fā)生變化,50代以后遺傳物質(zhì)可能發(fā)生變化。提醒(1)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中兩次使用胰蛋白酶的作用不同:39(3)原代培養(yǎng)與傳代培養(yǎng)的區(qū)別區(qū)分原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)的關(guān)鍵是是否分瓶培養(yǎng)。貼壁生長(zhǎng)到一定程度需要用胰蛋白酶處理,然后再分瓶培養(yǎng),原代培養(yǎng)結(jié)束,開(kāi)始傳代培養(yǎng)。(4)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件①無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境;②特殊營(yíng)養(yǎng):血清、血漿;③適宜的溫度和pH;④氣體環(huán)境:含95%空氣加5%CO2的混合氣體。(3)原代培養(yǎng)與傳代培養(yǎng)的區(qū)別405.理清動(dòng)物體細(xì)胞核移植5.理清動(dòng)物體細(xì)胞核移植41提醒

(1)選擇受體細(xì)胞為去核卵母細(xì)胞的原因①營(yíng)養(yǎng)豐富;②體積大,易操作;③含有激發(fā)細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)。(2)核移植獲得的克隆動(dòng)物與提供細(xì)胞核的親本性狀可能不同的三個(gè)原因①克隆動(dòng)物遺傳物質(zhì)來(lái)自?xún)蓚€(gè)親本。②發(fā)育過(guò)程中可能發(fā)生基因突變或染色體變異。③外界環(huán)境可能引起不遺傳的變異。提醒(1)選擇受體細(xì)胞為去核卵母細(xì)胞的原因426.關(guān)注制備單克隆抗體??键c(diǎn)(1)3種細(xì)胞特點(diǎn)不同①免疫后的B淋巴細(xì)胞:能分泌抗體,不能大量增殖。②骨髓瘤細(xì)胞:能大量增殖,不能分泌抗體。③雜交瘤細(xì)胞:既能分泌抗體,又能大量增殖。(2)2次篩選目的不同第一次篩選:利用特定選擇培養(yǎng)基篩選,獲得雜交瘤細(xì)胞,即AB型細(xì)胞(A為B淋巴細(xì)胞,B為骨髓瘤細(xì)胞),該細(xì)胞既能分泌抗體又能大量增殖,篩選掉A、B、AA、BB型細(xì)胞。第二次篩選:利用多孔板法和抗原—抗體雜交法篩選,獲得產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞。6.關(guān)注制備單克隆抗體常考點(diǎn)431.(2015·江蘇,20)下圖為制備人工種子部分流程示意圖,下列敘述正確的是A.胚狀體是外植體在培養(yǎng)基上脫分化形成的一團(tuán)愈傷組織B.該過(guò)程以海藻酸鈉作為營(yíng)養(yǎng)成分,以CaCl2溶液作為凝固劑C.可在海藻酸鈉溶液中添加蔗糖,為胚狀體提供碳源D.包埋胚狀體的凝膠珠能夠隔絕空氣,有利于人工種子的儲(chǔ)藏考向設(shè)計(jì)21234答案解析√51.(2015·江蘇,20)下圖為制備人工種子部分流程示意圖44解析A項(xiàng)錯(cuò),胚狀體是愈傷組織再分化得到的;B項(xiàng)錯(cuò),海藻酸鈉是凝固劑;C項(xiàng)對(duì),在海藻酸鈉溶液中添加蔗糖,不僅為胚狀體提供能量,而且是培養(yǎng)物滲透壓的主要調(diào)節(jié)物;D項(xiàng)錯(cuò),凝膠珠具有空間網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),不隔絕空氣。12345解析A項(xiàng)錯(cuò),胚狀體是愈傷組織再分化得到的;12345452.(2016·江蘇,9)下列有關(guān)細(xì)胞工程的敘述,正確的是A.PEG是促細(xì)胞融合劑,可直接誘導(dǎo)植物細(xì)胞融合B.用原生質(zhì)體制備人工種子,要防止細(xì)胞破裂C.骨髓瘤細(xì)胞經(jīng)免疫處理,可直接獲得單克隆抗體D.核移植克隆的動(dòng)物,其線(xiàn)粒體DNA來(lái)自供卵母體答案解析1234√52.(2016·江蘇,9)下列有關(guān)細(xì)胞工程的敘述,正確的是答46解析PEG是促細(xì)胞融合劑,但植物細(xì)胞不能直接融合,需先去壁形成原生質(zhì)體才能融合,A錯(cuò)誤;制備人工種子應(yīng)用完整的植物細(xì)胞,不需制備原生質(zhì)體,B錯(cuò)誤;骨髓瘤細(xì)胞不能產(chǎn)生抗體,C錯(cuò)誤;核移植克隆的動(dòng)物,其線(xiàn)粒體只來(lái)自卵細(xì)胞即線(xiàn)粒體DNA來(lái)自供卵母體,D正確。12345解析PEG是促細(xì)胞融合劑,但植物細(xì)胞不能直接融合,需先去壁473.(2017·南通二模)人絨毛膜促性腺激素(HCG)是女性懷孕后胎盤(pán)滋養(yǎng)層細(xì)胞分泌的一種糖蛋白,制備抗HCG單克隆抗體可用于早孕的診斷。下圖是抗HCG單克隆抗體制備流程示意圖,下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是(多選)A.①過(guò)程的促融劑常用聚乙二醇(PEG),也可用滅活的病毒誘導(dǎo)B.③過(guò)程以抗HCG單克隆抗體為抗原,利用抗原—抗體雜交的原理進(jìn)行檢測(cè)C.給小鼠多次注射HCG的目的是獲得較多的記憶細(xì)胞D.③過(guò)程需要添加抗生素等物質(zhì),目的是防止病毒污染答案解析1234√√53.(2017·南通二模)人絨毛膜促性腺激素(HCG)是女性48解析

與植物細(xì)胞融合相比,動(dòng)物細(xì)胞融合還可以用滅活的病毒誘導(dǎo)處理;③過(guò)程以抗HCG單克隆抗體為抗原,利用抗原—抗體雜交的原理進(jìn)行檢測(cè);給小鼠多次注射HCG的目的是獲得較多能產(chǎn)生抗HCG抗體的B淋巴細(xì)胞而不是記憶細(xì)胞;④過(guò)程需要添加抗生素等物質(zhì),目的是防止雜菌污染,而不是病毒污染。12345解析與植物細(xì)胞融合相比,動(dòng)物細(xì)胞融合還可以用滅活的病毒誘導(dǎo)494.(2016·江蘇,28)海帶中含有植物生長(zhǎng)素(IAA)和脫落酸(ABA)等激素,為研究激素對(duì)海帶生長(zhǎng)的影響,某研究組開(kāi)展了系列實(shí)驗(yàn)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:123454.(2016·江蘇,28)海帶中含有植物生長(zhǎng)素(IAA)和50(1)為開(kāi)展海帶的組織培養(yǎng),取海帶的葉狀體基部切塊作為_(kāi)______,轉(zhuǎn)到含激素____________________的培養(yǎng)基上,經(jīng)_______形成愈傷組織,再生成苗。答案解析脫分化解析離體的植物器官、組織稱(chēng)為外植體。組織培養(yǎng)過(guò)程中需經(jīng)過(guò)脫分化和再分化兩個(gè)過(guò)程。培養(yǎng)基中應(yīng)含有生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素。1234外植體生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素5(1)為開(kāi)展海帶的組織培養(yǎng),取海帶的葉狀體基部切塊作為_(kāi)__51(2)下圖為海帶中的IAA和ABA與海帶生長(zhǎng)變化的關(guān)系。海帶增長(zhǎng)率與IAA含量呈_______(填“正相關(guān)”“負(fù)相關(guān)”或“不相關(guān)”),海帶在后期生長(zhǎng)緩慢,原因是___________________。答案解析解析圖中生長(zhǎng)素含量減少,海帶生長(zhǎng)減慢,海帶增長(zhǎng)率與IAA含量呈正相關(guān)。ABA含量的增加,抑制了后期海帶的生長(zhǎng)。IAA降低,ABA增高1234正相關(guān)5(2)下圖為海帶中的IAA和ABA與海帶生長(zhǎng)變化的關(guān)系。海帶52(3)已知海帶成熟區(qū)段各部位ABA的分布無(wú)顯著差異,則其在成熟區(qū)段中的運(yùn)輸方式_____(填“是”或“不是”)極性運(yùn)輸。某研究組參照11月和5月海帶樣品的數(shù)據(jù),配制了兩份IAA+ABA的混合液,研究了在增加紫外光照射條件下,混合液對(duì)單細(xì)胞綠藻生長(zhǎng)的影響,結(jié)果如圖,分析可知IAA和ABA對(duì)綠藻的生理作用分別是_________________________________________。1234IAA促進(jìn)生長(zhǎng),ABA有提高抗紫外光的不是能力答案解析5(3)已知海帶成熟區(qū)段各部位ABA的分布無(wú)顯著差異,則其在成53解析海帶成熟區(qū)段各部位ABA的分布無(wú)顯著差異,說(shuō)明其在成熟區(qū)段中的運(yùn)輸方式不是極性運(yùn)輸。參照11月和5月海帶樣品的數(shù)據(jù),并結(jié)合本小題藻細(xì)胞數(shù)量變化圖分析可知,與正常培養(yǎng)組相比,增加紫外光的實(shí)驗(yàn)組中緩沖液組、11月處理組藻類(lèi)細(xì)胞數(shù)量明顯減少,而5月處理組藻類(lèi)下降不明顯,再對(duì)照海帶樣品生長(zhǎng)曲線(xiàn)圖可知,11月份時(shí),生長(zhǎng)素含量較高,脫落酸含量較低,而5月份時(shí)則相反,

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