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選修1:生物技術(shù)實(shí)踐專題4酶的研究與應(yīng)用課題3酵母細(xì)胞的固定化知識回顧:1、洗衣粉中添加________,可以更有效地清除頑漬。常用的酶制劑有_________________四類。2、影響酶活性的因素有_______、________和_________。3、影響洗衣粉洗滌效果的因素有_______。在食品、化工、輕紡、醫(yī)藥等領(lǐng)域大規(guī)模使用酶制劑,說明酶制劑使用有很多優(yōu)點(diǎn),你能舉出一些例子嗎?催化效率高、低能耗、低污染等。酶制劑的使用有缺點(diǎn)嗎?你能舉出一些例子嗎?酶制劑存在的缺陷:
1、通常對強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、高溫和有機(jī)溶劑等條件非常敏感,容易失活;
2、溶液中的酶很難回收,不能被再次利用,提高了生產(chǎn)成本;
3、反應(yīng)后會混在產(chǎn)物中,可能影響產(chǎn)品質(zhì)量。
如果你是工程技術(shù)人員,你如何解決這個(gè)問題?
閱讀P49-50,并思考:1、解決酶應(yīng)用中存在問題的方法是?2、這種方法的優(yōu)點(diǎn)是什么?3、什么是高果糖漿?使用它有何好處?4、生產(chǎn)高果糖漿需要什么酶?其作用是什么?這種酶有何特點(diǎn)?5、了解高果糖漿生產(chǎn)過程。一、固定化酶的應(yīng)用實(shí)例1、固定化酶技術(shù)。即將酶固定在一定空間內(nèi)的技術(shù)(如固定在不溶于水的載體上)。2、固定化酶技術(shù)的優(yōu)點(diǎn):(1)使酶既能與反應(yīng)物接觸,又能與產(chǎn)物分離;(2)固定在載體上的酶可以被反復(fù)利用。3、高果糖漿是果糖含量為42%左右的糖漿。作為蔗糖的替代品,高果糖漿不會像蔗糖那樣誘發(fā)肥胖、糖尿病、齲齒和心血管病,對人的健康有利。你能寫出果糖的分子式嗎?它屬于什么糖?4、生產(chǎn)高果糖漿需要葡萄糖異構(gòu)酶;其作用是將葡萄糖轉(zhuǎn)化為果糖;這種酶穩(wěn)定性好,可持續(xù)發(fā)揮作用。你能寫出方程式嗎?5、固定化酶技術(shù)生產(chǎn)高果糖漿的圖示:注意反應(yīng)柱的各部分名稱。你能說出反應(yīng)柱的優(yōu)點(diǎn)嗎?生產(chǎn)流程含淀粉的漿液α-淀粉酶糊精糖化酶葡萄糖葡萄糖異構(gòu)酶葡萄糖的異構(gòu)化42%~45%轉(zhuǎn)化成果糖果葡糖漿果糖和葡萄糖分離葡萄糖再次異構(gòu)化反復(fù)多次果糖含量70%~90%高果糖漿反應(yīng)柱能連續(xù)使用半年,大大降低了生產(chǎn)成本,提高果糖的產(chǎn)量和質(zhì)量。優(yōu)點(diǎn):練習(xí):1、下列說法不正確的是()A、葡萄糖與固定化葡萄糖異構(gòu)酶接觸,轉(zhuǎn)化成的是果糖B、從固定化酶反應(yīng)柱下端流出的是果糖C、高果糖漿不會像蔗糖那樣誘發(fā)肥胖、糖尿病、齲齒和心血管病D、酶溶解于葡萄糖溶液,可以從糖漿中回收2、研究認(rèn)為,用固定化酶技術(shù)處理污染物是很有前途的。如將從大腸桿菌得到的磷酸三酯酶固定到尼龍膜上制成制劑,可以用來降解殘留在土壤中的有機(jī)磷農(nóng)藥,與用微生物降解相比,其作用不需要適宜的()A、溫度B、PHC、水分D、營養(yǎng)3、目前,日用化工廠大量生產(chǎn)的酶制劑,其中的酶大都來自A、化學(xué)合成B、動物體內(nèi)C、植物體內(nèi)D、微生物體內(nèi)
在生產(chǎn)實(shí)際中使用固定化酶技術(shù)有無不足?如有不足,怎么辦?有。一種酶只能催化一種化學(xué)反應(yīng),而在生產(chǎn)實(shí)際中很多產(chǎn)物的形成都通過一系列的酶促反應(yīng)才能進(jìn)行,所以操作比較麻煩??刹捎霉潭ɑ?xì)胞技術(shù)。二、固定化細(xì)胞技術(shù)1、概念:利用物理或化學(xué)方法將細(xì)胞固定在一定空間的技術(shù)。細(xì)胞中含有一系列酶,在細(xì)胞正常生命活動的過程中,通過代謝產(chǎn)生所需要的代謝產(chǎn)物。閱讀P50:思考第二段的問題2.將酶或細(xì)胞固定化的方法將酶(或細(xì)胞)包埋在細(xì)微網(wǎng)格里將酶(或細(xì)胞)相互連接起來將酶(或細(xì)胞)吸附在載體表面上包埋法化學(xué)結(jié)合法吸附法方法原理適用對象包埋法將聚合物的單體與酶溶液混合,再借助于聚合助進(jìn)劑(包括交聯(lián)劑)的作用進(jìn)行聚合,酶被包埋在聚合物中以達(dá)到固定化酶或細(xì)胞方法原理適用對象化學(xué)結(jié)合法酶蛋白的側(cè)鏈基團(tuán)和載休表面上的功能基團(tuán)之間形成共價(jià)鍵而固定的方法酶物理吸附法通過氫鍵、疏水作用和π電子親和力等物理作用,將酶固定于水不溶載體上。從而制成固定化酶酶酶和細(xì)胞固定方法的選擇①酶適合采用化學(xué)結(jié)合和物理吸附法固定②細(xì)胞適合采用包埋法固定(1)、方法(2)、原因①細(xì)胞個(gè)大,酶分子很?、趥€(gè)體大的細(xì)胞難以被吸附或結(jié)合而個(gè)小的酶容易從包埋的材料中漏出3、固定化細(xì)胞常用的載體常用的不溶于水的多孔性載體有哪些?明膠、瓊脂糖、海藻酸鈉、醋酸纖維素、聚丙烯酰胺等
如果反應(yīng)底物是大分子物質(zhì),能否用固定化細(xì)胞技術(shù)?
為什么?那應(yīng)該采用何種技術(shù)?練習(xí):1.使用固定化細(xì)胞的優(yōu)點(diǎn)是()。A.能催化大分子物質(zhì)的水解B.可催化一系列化學(xué)反應(yīng)C.與反應(yīng)物易接近D.有利于酶在細(xì)胞外發(fā)揮作用2.酶的固定方法不包括()。A.將酶吸附在固體表面上B.將酶相互連接起來C.將酶包埋在細(xì)微網(wǎng)格里D.將酶制成固體酶制劑,如加酶洗衣粉中的酶3、如果反應(yīng)物是大分子物質(zhì),采用那種方法催化受限制()。A.直接使用酶B.使用化學(xué)方法結(jié)合的酶C.使用固定化細(xì)胞D.使用物理吸附法固定的酶4、下列關(guān)于酶和細(xì)胞的固定敘述不正確的是()。A.酶分子很小,易采用包埋法B.酶分子很小,易采用化學(xué)結(jié)合或物理吸附法固定的酶C.細(xì)胞個(gè)大,難被吸附或結(jié)合D.細(xì)胞易采用包埋法固定5.關(guān)于固定化酶的敘述不正確的是()。A.既能與反應(yīng)物接觸,又能與反應(yīng)物分離B.固定在載體上的酶可被反復(fù)利用C.可催化一系列反應(yīng)D.酶的活性和穩(wěn)定性受到限制6、固定化細(xì)胞對酶的活性影響最小,根本原因是()。A.避免了細(xì)胞破碎、酶的提取純化過程B.固定化細(xì)胞在多種酶促反應(yīng)中連續(xù)發(fā)揮作用C.促化反應(yīng)結(jié)束后,能被吸收和重復(fù)利用D.細(xì)胞結(jié)構(gòu)保證了各種酶在細(xì)胞內(nèi)化學(xué)反應(yīng)中有效的發(fā)揮作用三、實(shí)驗(yàn)操作(一)制備固定化酵母細(xì)胞閱讀P50~51思考下列問題:(1)制備過程包括哪幾個(gè)步驟?(2)你認(rèn)為哪個(gè)步驟的操作是最重要的一環(huán)?(3)各步驟應(yīng)當(dāng)分別注意什么問題?1、酵母細(xì)胞的活
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