《中藥分析》1章緒論

《中藥(天然藥物)分析》第一章緒論1中國藥科大學2007年級2010-2011學年第一學期

《天然藥物分析》教學日歷周次（時間）內(nèi)容要求學時一（8.30～9.3）1．緒論2．中藥一般質(zhì)量控制方法1.了解天然藥物分析目的、任務、特點2.掌握藥材砷鹽、重金屬、農(nóng)藥殘留量的檢測方法3二（9.6～9.10）1．光譜分析法的應用2．色譜分析法的應用1．掌握可見-紫外分光光度法的應用2．了解色譜法的發(fā)展，掌握薄層色譜法在天然藥物分析中應用3三（9.13～9.17）

1．氣相色譜法的應用2.高效液相色譜法的應用掌握氣相、液相色譜法在天然藥物分析中的應用32周次（時間）內(nèi)容要求學時四（9.20～9.24）生物堿分析；掌握生物堿類化學成分的主要分析方法3五（9.27～10.1）1.黃酮分析；2.醌類分析1.掌握黃酮類化學成分的主要分析方法2.掌握醌類化學成分的主要分析方法3七（10.11～10.15）1.香豆素分析；2.揮發(fā)油分析1.掌握香豆素類化學成分的主要分析方法；2.掌握揮發(fā)油類化學成分的主要分析方法33周次（時間）內(nèi)容要求學時八（10.18～10.22）1、皂苷分析2、其它類化學成分分析1、掌握皂苷類化學成分主要分析方法2、掌握幾類化學成分分析方法3九（10.25～10.29）1.動物藥分析；2.礦物藥分析1.掌握主要動物藥的分析方法；2.熟悉礦物藥分析方法3十（10.27～10.31）中藥制劑分析掌握中藥制劑的定性、定量分析方法34周次（時間）內(nèi)容要求學時十一（11.1～11.5）中藥制劑分析及中藥制劑穩(wěn)定性掌握中藥制劑的分析步驟的設計熟悉中藥制劑穩(wěn)定性檢測方法2十二（11.8～11.12）各類型中藥制劑分析熟悉各類型中藥制劑分析的特點3十三（11.15～11.19）中藥制劑質(zhì)量標準的制訂中藥制劑質(zhì)量標準的制訂25中國藥科大學2007年級2010-2011學年第一學期

《天然藥物分析》實驗教學日歷周次內(nèi)容要求實驗學時第三周實驗準備1.熟悉中藥制劑分析常用玻璃儀器的名稱；2.完成大黃中有效成分的提取和水解工作。4第五周比色法測定大黃中蒽醌類的含量1.掌握羥基蒽醌苷類及游離羥基蒽醌的性質(zhì)；2.掌握利用比色法測定中藥化學成分的基本原理和操作步驟；3.了解大黃類藥材中有效成分的含量測定方法；

66第七周HPLC法測定梔子藥材中梔子苷的含量

1.掌握高效液相色譜法的基本原理及操作步驟；2.熟悉高效液相色譜法在中草藥有效成分測定中的應用；6第九周GC法測定中藥中揮發(fā)性成分的含量1.掌握氣相色譜法的基本原理及操作步驟；2.熟悉氣相色譜法在中藥揮發(fā)性有效成分含量測定中的應用；6第十一，十三周白芍藥材的質(zhì)量評價研究1.查閱近五年來的有關白芍的定性和定量分析文獻，自行設計實驗方案，評價不同炮制品藥材的質(zhì)量；2.掌握薄層色譜法、高效液相色譜法在中藥質(zhì)量評價中的應用。127第一節(jié)中藥分析的內(nèi)涵

一．中藥分析的意義

中藥分析（AnalysisScienceofChineseMeteriaMedica）是利用物理、化學、物理化學、生物學、藥理學、生物化學及其他相關的方法和技術研究分析中藥（天然藥物）、中藥制劑及其有關聯(lián)產(chǎn)品質(zhì)量的一門科學。亦可稱為生藥分析（PharmacognosticalAnalysis）或天然藥物分析（AnalysisofNaturalMedicinalProducts，orAnalysisofCrudeDrugs）。

8二．中藥分析的研究內(nèi)容和任務（一）研究內(nèi)容1．鑒別中藥真?zhèn)?，解決品種混亂問題

我國中藥品種繁多，明代李時珍撰寫的《本草綱目》已有1892種，《中藥大辭典》收載有5767種，《中華本草》收載8980味；上世紀90年代全國中藥資源普查資料表明，我國目前的中藥資源種類達12807種。如此繁雜的品種，由于歷代本草記載，地方用藥習慣不同，類似品、代用品和民間用藥的不斷涌現(xiàn)，以及同科屬來源的中藥外形相似等原因，使中藥品種混亂現(xiàn)象普遍存在。有關調(diào)查表明，我國中藥中品種較確切的僅有135種。

9防己類中藥的品種研究

原植物藥材名總生物堿含量防己科防己Stephaiatetrandra粉防己、漢防己1.46%頭花千金藤S.cepharatha木防己2.29%木防己Coocculuscepharatha木防己1.53%中華稱鉤風Diphochiachinensis湘防己0.40%蝙蝠葛Menispermumdiverifdium土防己、北豆根3.22%木通科三葉木通Akebiatrifoliata土防己、木通防己含木通皂苷五葉木通A.quinata木通防己含木通皂苷

10原植物藥材名馬兜鈴酸含量馬兜鈴科廣防己Aristolochiafangchi木防己、水防己3.66%異葉馬兜鈴A.heterophalla漢中防己、漢防己1.92%穆坪馬兜鈴A.moupinensis冕寧防己、理防己3.38%大葉青木香A.austroszechuanica宜賓防己0.65%耳葉馬兜鈴A.tagla防己痕跡量112．定性分析檢查，提高中藥鑒定水平過去中藥鑒定，常以直觀的方法，憑經(jīng)驗進行，而現(xiàn)在對中藥采用定性分析方法越來越多，不少已收載至藥典或其它質(zhì)量標準中，如泡沫試驗、化學顯色反應、沉淀反應、熒光觀察、薄層分析定性檢查等，提高中藥鑒定水平。

123．定量分析應用，更好控制中藥質(zhì)量中藥的定量分析，能使中藥的優(yōu)劣得到確切和客觀的指標。定量分析常強調(diào)要分析中藥的有效成分，通常把具有生物活性并有醫(yī)療作用的化學成分者稱為有效成分或主成分。如生物堿類、黃酮苷類、蒽苷類、強心苷類、皂苷類、揮發(fā)油類、香豆素類、鞣質(zhì)類以及多糖、氨基酸等，中藥中一些生物活性不顯著成分者稱為輔成分，如樹脂、色素、無機鹽等，但這種區(qū)分是相對的。另外所謂有效，也并不能完全代表中藥的療效。由于中藥種類多，所含化學成分復雜，還有不少中藥未作深入研究，對其所含有效成分了解甚少，故也可采用有效部位定量，另外也可選用專屬性化學成分的分析，作為鑒定的指標。

134．關鍵環(huán)節(jié)控制，用于指導生產(chǎn)中藥材生產(chǎn)、流通的各個環(huán)節(jié)，如動植物藥材的種植（或養(yǎng)殖）技術，藥材的生長年限和最佳采收期選擇，產(chǎn)地加工、炮制和飲片生產(chǎn)，貯藏和銷售等都需要品質(zhì)檢測作為保證手段。

中藥制劑生產(chǎn)全過程各環(huán)節(jié)（原料藥材的檢測，原藥材的切制、粉碎和炮制，提取、過濾和濃縮，制劑中間體的制備，輔料的質(zhì)量，成型工藝過程，最終制劑成品）的質(zhì)量監(jiān)測，可及時反饋質(zhì)量信息，用于指導生產(chǎn)，發(fā)現(xiàn)問題，及時解決，以確保產(chǎn)品質(zhì)量。以上生產(chǎn)的環(huán)節(jié)的適時檢測又稱為生產(chǎn)在線分析，已逐步受到廠家和藥品質(zhì)量管理部門的重視。

另外其它的含有中藥或由中藥制取的產(chǎn)品（如保健品、香料、色素等）的質(zhì)量分析，也是中藥分析研究的一個新領域。

14（1）生長期：甘草中的甘草酸一年：5.49%；二年：6.76%；三年：9.84%；四年：10.52%（2）產(chǎn)地：遠志中的遠志皂苷山西運城：11.9%；吉林：10.1%；陜西：5.4%（3）采收：薄荷如以晴天所采含揮發(fā)油為1；則雨后2~3天為晴天的1/4；若雨天采，含量甚微。以晴后一周上午11時至下午2時采揮發(fā)油含量最高。（4）貯藏：穿心蓮2月22月穿心蓮內(nèi)酯12.5mg/g6.4mg/g穿心蓮新酯17.0mg/g8.8mg/g脫氧穿心蓮內(nèi)酯7.8mg/g9.9mg/g

15（5）炮制加工方法：金銀花中氯原酸類成分（%）品種加工方法異氯原酸氯原酸總量忍冬烘干2.224.166.38硫黃熏3.283.406.68細氈毛忍冬生曬0.881.071.95蒸曬1.443.204.64炒曬1.483.094.57硫黃熏2.935.458.38灰氈毛忍冬生曬2.771.624.39蒸曬6.184.9411.12炒曬4.573.778.34硫黃熏6.914.8011.71（注：2000年前各版藥典收載的加工方法為：夏初花開前采收，干燥；或用硫黃熏后干燥。2005版藥典改為：夏初花開前采收，干燥。）165．化學成分分析，尋找新的藥源一般來說，同科屬植物中，往往含有相類似的成分，具有類同的生物活性；同一植物的不同藥用部位常有類同或近似成分。利用定性、定量方法，可以擴大藥源，或從中尋找更優(yōu)良的生藥及原生藥的代用品。另外不同科屬生藥如具有相同成分，也可以開發(fā)利用。

17（1）不同種金銀花中氯原酸類成分含量（%）品種異氯原酸氯原酸總量忍冬（第一茬）0.991.862.85忍冬（第二茬）2.172.945.11忍冬（第三茬）2.492.274.76忍冬（第四茬）2.231.403.36山銀花2.873.616.48紅腺忍冬3.123.796.91毛花柱忍冬2.361.573.93灰氈毛忍冬2.433.606.03細氈毛忍冬2.614.507.11短柄忍冬5.282.027.30短唇忍冬3.333.016.34大花忍冬1.903.375.27滇西忍冬0.270.260.5318（2）17種鼠尾草屬（Salvia）植物中

丹參酮類和總酚的含量植物名總丹參酮類總酚類丹參1.112.35甘西鼠尾2.211.08褐毛甘西鼠尾1.130.29戟葉鼠尾0.070.82栗毛鼠尾0.570.99黃色鼠尾0.041.49三葉鼠尾1.671.22云南鼠尾0.581.01白花鼠尾1.961.39南丹參0.282.52浙皖丹參0.120.82紫花浙皖丹參0.041.21擬丹參0.461.72紫花擬丹參0.572.28紅根草0.900.44美麗鼠尾0.310.17毛地黃鼠尾0.180.42196．配合藥效測試，推動新藥研究

中藥新藥的研發(fā)過程中，中藥分析是必不可少的手段。不僅新中藥制劑的質(zhì)量標準制定過程，中藥分析是主角，就是在原料藥材的質(zhì)量分析、制劑工藝的優(yōu)選、制劑的穩(wěn)定性考察都要用到中藥分析方法。現(xiàn)已陸續(xù)有中藥藥物代謝動力學及中藥體內(nèi)分析的研究報道，中藥分析已成為藥物研究工作者必備的手段。

207．結合6P管理，全面保證質(zhì)量

目前我國正在實施的藥品管理規(guī)范主要有：1.GAP（中藥材生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范，GoodAgriculturalPractice）、2.GLP（藥品非臨床研究質(zhì)量管理規(guī)范，GoodLaboratoryPracticeforNon-clinicalLaboratoryStudies）、3.GCP（藥品臨床研究與實驗管理規(guī)范，GoodClinicalPracticeforDrugs）、4.GMP（藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范，GoodManufacturingPracticeforDrugs）、5.GSP（藥品經(jīng)營質(zhì)量管理規(guī)范，GoodSupplyPracticeforDrugs）6.GUP（醫(yī)療機構藥劑質(zhì)量管理規(guī)范，GoodUsePractice）。在這些管理規(guī)范中，藥品的質(zhì)量評價和監(jiān)控都是不可缺少的環(huán)節(jié)，尤其是在GAP、GMP中。21（二）研究目標和任務1．著重強調(diào)對中藥及其制劑中所含有效成分或主要化學成分的研究2．著重強調(diào)定量分析研究3．著重強調(diào)現(xiàn)代分析方法的應用4．著重強調(diào)多學科手段對中藥的綜合分析研究22三．中藥分析課程的主要內(nèi)容和要求本課程的基本要求：（1）掌握常用檢測分析方法在中藥分析工作中應用。（2）掌握中藥主要活性成分類型的分析方法，能針對中藥的主要化學成分的結構、理化特征，設計有效的分析方法。（3）掌握常用中藥（中國藥典收載或有效成分較明確的中藥）的質(zhì)量標準及分析方法，能勝任中藥的質(zhì)量分析工作。（4）掌握中藥制劑的分析方法。（5）了解中藥質(zhì)量標準的制訂方法及國外藥典中天然藥物的質(zhì)量標準。

（6）了解常用分析檢測方法和技術在中藥分析應用中的動向和進展。

23四.中藥分析研究的參考書目和期刊1.藥學學報

2.中草藥3.中國中藥雜志4.藥物分析雜志5.中成藥6.中藥材

7.中國藥學雜志8.

《中華人民共和國藥典》9.

《中藥材粉末顯微鑒定》2410.《中藥材薄層色譜鑒別》11.《薄層色譜法和薄層掃描法》12.《高效液相色譜法在中藥分析中的應用》13.《藥物分析》14.《礦物藥分析》15.《中成藥分析》16.《中藥制劑分析》17.《分析化學手冊》18.《色譜技術叢書（14本）》25英文期刊1.《PlantaMedica》2.《JournalofChromatographyA，B》3.《PhytochemicalAnalysis》4.《Phytochemistry》5.《AnalyticalChemistry》26第三節(jié)

中藥分析工作的基本程序

一．取樣

（一）藥材取樣法

取樣的基本原理則應是均勻、合理。采用四等分法反復數(shù)次直至最后剩余量足夠試驗為止，即為平均樣品量，平均樣品量一般不得少于實驗所帶要的3倍，即1／3供實驗分析，1/3供復核，1/3則為留樣保存，保存期至少一年。

（二）中藥制劑取樣法

27二．供試品的提取

中藥及中藥制劑所含的化學成分種類較多，為了鑒別測定其中的有效成分或主成分，必須盡可能地排除無效成分和非檢測成分的干擾，以提高分析的準確度和靈敏度。選用適當?shù)姆椒ê驮噭┻M行分析樣品的提取和分離，制備成可進行有效分析的供試溶液，是中藥分析成敗的關鍵步驟之一。

28（一）溶劑提取法

選用適合的溶劑將中藥材和中成藥中的待測成分溶出的方法稱溶劑提取法。所謂適合的溶劑就是對待測成分溶解度大，對不需要的成分溶解度小或不溶的溶劑。

中藥中的化學成分在溶劑中的溶解度與溶劑性質(zhì)有關，一般遵循“相似相溶”的原則。通過對待測主成分的結構分析來選用合適的溶劑。

一般選擇溶劑時，要求溶劑對待測成分溶解度大，而雜質(zhì)溶解度?。凰x擇溶劑不能與中藥中待測成分起化學變化；溶劑要求易得，使用安全。

29

1．常用提取溶劑

（1）極性溶劑：水是典型的極性溶劑，它能溶解離子型成分，如生物堿鹽、有機酸鹽及其它成分（2）非極性溶劑：石油醚、乙醚、氯仿、乙酸乙酯等是常用的非極性溶劑，用以提取低極性成分（3）中等極性溶劑：乙醇、甲醇、丙酮等是常用的中等極性溶劑，它們對中藥各類成分具有較廣泛的溶解性能乙醇是最常用的提取溶劑。甲醇的性質(zhì)與乙醇相似，因有毒，使用時應注意302.常用中藥成分的提取溶劑1）生物堿：氯仿（乙醚）+氨水；堿性較強的生物堿用氯仿（乙醚）+氫氧化鈉（碳酸鈉）溶液；極性較大的生物堿用中（酸）性乙醇、甲醇；酸水或緩沖溶液；混合溶劑乙醚-氯仿-乙醇-10%氨水（25:8:2.5:1）2）黃酮苷：稀甲醇或乙醇3）黃酮苷元：乙醚或乙酸乙酯4）蒽醌苷：甲醇或70%乙醇5）蒽醌苷元：氯仿6）強心苷：50%~80%乙醇317）香豆素苷：用冷石油醚脫脂后，用熱、稀氫氧化鈉溶液提取，提取液酸化后用乙醚提取8）皂苷：用石油醚脫脂后，用80%~95%甲醇或乙醇提取9）皂苷元：不同濃度的礦酸水解后，用石油醚、乙醚、苯、氯仿提取10）水溶性成分（糖、氨基酸等）：水11）揮發(fā)油：水蒸氣蒸餾，或有機溶劑提取322．常用的提取方法

（1）冷浸法：浸泡時間12~24（~48）h在浸泡期間應注意經(jīng)常振搖，浸泡后再稱重。冷浸法的優(yōu)點是適宜遇熱不穩(wěn)定的有效成分，操作簡便，應用較廣。（2）連續(xù)回流法：樣品置索氏提取器中，利用遇熱可以揮發(fā)的溶劑進行反復回流提取。本法提取效率高，所需溶劑少，遇熱易破壞欲測定成分，不宜用此法。（3）超聲波提取法：樣品置適宜容器內(nèi)，加入提取溶劑后，置超聲波振蕩器中進行提取。本法提取效率高，經(jīng)實驗證明一般樣品30min內(nèi)即可完成。另外，為了使待測成分盡可能提取完全，對中藥材的粉碎度有一定要求，提取方法、時間、溫度等的選擇要通過實驗數(shù)據(jù)加以確定。（二）水蒸氣蒸餾法（三）升華法33三．供試溶液的精制

凈化方法要能除去對測定有干擾的雜質(zhì)，而又不損失待測的成分。

凈化分離方法設計主要依據(jù)待測成分和雜質(zhì)在理化性質(zhì)上的差異。同時結合與所要采用的測定方法需求進行選擇。1．溶劑分離法

1）選用幾種極性不同的溶劑，由低極性到高極性進行分步提取分離