食品添加劑的測定-護(hù)色劑的測定

亞硝酸鹽、硝酸鹽含量的測定（離子色譜法）

技能點(diǎn)：標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制亞硝酸鹽和硝酸鹽混合標(biāo)準(zhǔn)中間液的配制四目錄亞硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)儲備液的配制二亞硝酸鹽和硝酸鹽混合標(biāo)準(zhǔn)使用液的配制五儀器準(zhǔn)備一硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)儲備液的配制三儀器準(zhǔn)備一儀器規(guī)格儀器規(guī)格電子天平0.0001g容量瓶100mL、1000mL干燥箱刻度移液管10mL燒杯250mL玻璃棒亞硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)儲備液的配制（100mg/L，以NO2-計，下同）二一級水0.1500g亞硝酸鈉準(zhǔn)確稱取0.1500g于110℃~120℃干燥至恒重的亞硝酸鈉，用水溶解并轉(zhuǎn)移至1000mL容量瓶中，加水稀釋至刻度，混勻。一級水定容至1000mL亞硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)儲備液（100mg/L）硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)儲備液的配制（1000mg/L，以NO3-計，下同）三一級水1.3710g硝酸鈉準(zhǔn)確稱取1.3710g于110℃~120℃干燥至恒重的硝酸鈉，用水溶解并轉(zhuǎn)移至1000mL容量瓶中，加水稀釋至刻度，混勻。一級水定容至1000mL硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)儲備液（1000mg/L）亞硝酸鹽和硝酸鹽混合標(biāo)準(zhǔn)中間液的配制準(zhǔn)確移取亞硝酸根離子（NO2-）和硝酸根離子（NO3-）的標(biāo)準(zhǔn)儲備液各1.0mL于100mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，此溶液每升含亞硝酸根離子1.0mg和硝酸根離子10.0mg。四硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)儲備液1.0mL亞硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)儲備液1.0mL100mL容量瓶亞硝酸鹽和硝酸鹽混合標(biāo)準(zhǔn)中間液亞硝酸鹽和硝酸鹽混合標(biāo)準(zhǔn)使用液的配制五移取亞硝酸鹽和硝酸鹽混合標(biāo)準(zhǔn)中間液，加水逐級稀釋，制成系列混合標(biāo)準(zhǔn)使用液，亞硝酸根離子濃度分別為0.02mg/L、0.04mg/L、0.06mg/L、0.08mg/L、0.10mg/L、0.15mg/L、0.20mg/L；硝酸根離子濃度分別為0.2mg/L、0.4mg/L、0.6mg/L、0.8mg/L、1.0mg/L、1.5mg/L、2.0mg/L。亞硝根離子0.04mg/L硝根離子0.4mg/L亞硝根離子0.06mg/L硝根離子0.6mg/L亞硝根離子0.08mg/L硝根離子0.8mg/L亞硝根離子0.10mg/L硝根離子1.0mg/L亞硝根離子0.15mg/L硝根離子1.5mg/L亞硝根離子0.20mg/L硝根離子2.0mg/L亞硝酸鹽和硝酸鹽混合標(biāo)準(zhǔn)中間液加水逐級稀釋亞硝酸根離子0.02mg/L硝酸根離子0.2mg/L亞硝酸根離子0.04mg/L硝酸根離子0.4mg/L亞硝酸根離子0.06mg/L硝酸根離子0.6mg/L亞硝酸根離子0.08mg/L硝酸根離子0.8mg/L亞硝酸根離子0.10mg/L硝酸根離子1.0mg/L亞硝酸根離子0.15mg/L硝酸根離子1.5mg/L亞硝酸根離子0.20mg/L硝酸根離子2.0mg/L亞硝酸鹽、硝酸鹽含量的測定（離子色譜法）

技能點(diǎn)：測定原理與試劑配制測定原理一適用范圍二試劑配制三目錄測定原理試樣經(jīng)沉淀蛋白質(zhì)、除去脂肪后，采用相應(yīng)的方法提取和凈化，以氫氧化鉀溶液為淋洗液，陰離子交換柱分離，電導(dǎo)檢測器或紫外檢測其檢測。以保留時間定性，外標(biāo)法定量。一適用范圍1.本法適用于食品中亞硝酸鹽、硝酸鹽的測定。2.測定依據(jù)：GB5009.33-2016。二試劑配制1.試劑2.儀器準(zhǔn)備3.試劑配制4.標(biāo)準(zhǔn)品三1.試劑（除另有說明，所用試劑均為分析純）亞硝酸鹽、硝酸鹽含量的測定（1）乙酸（CH3COOH）。（2）氫氧化鉀（KOH）。（3）水：GB/T6682規(guī)定的一級水。儀器規(guī)格儀器規(guī)格電子天平0.001g洗瓶刻度移液管5mL玻璃棒容量瓶100mL試劑瓶燒杯250mL2.儀器準(zhǔn)備亞硝酸鹽、硝酸鹽含量的測定（1）乙酸溶液（3%）：量取乙酸3mL于100mL容量瓶中，以水稀釋至刻度，混勻。3.1試劑配制：乙酸溶液（3%）亞硝酸鹽、硝酸鹽含量的測定一級水定容至100mL3%乙酸溶液3mL乙酸（2）氫氧化鉀溶液（1mol/L）：稱取6g氫氧化鉀，加入新煮沸過的冷水溶解，用水定容至100mL，混勻。3.2試劑配制：氫氧化鉀溶液（1mol/L）亞硝酸鹽、硝酸鹽含量的測定新煮沸的冷水106g亞鐵氰化鉀6g氫氧化鉀定容至100mL氫氧化鉀溶液（1mol/L）亞硝酸鈉（NaNO2，CAS號：7632-0-0）：基準(zhǔn)試劑，或采用具有標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書的亞硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)溶液。硝酸鈉（NaNO3，CAS號：7631-99-4）：基準(zhǔn)試劑，或采用具有標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書的硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)溶液。4.標(biāo)準(zhǔn)品亞硝酸鹽、硝酸鹽含量的測定亞硝酸鹽、硝酸鹽含量的測定（離子色譜法）

技能點(diǎn)：試樣溶液的測定試樣預(yù)處理二試樣提取三儀器參考條件四標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作五試樣溶液的測定六目錄儀器準(zhǔn)備一儀器準(zhǔn)備一儀器規(guī)格儀器規(guī)格離子色譜儀配電導(dǎo)檢測器計抑制器或紫外檢測器，高容量陰離子交換柱，50μL定量環(huán)離心機(jī)≥10000r/min，配50mL離心管分析天平0.1mg、1mg凈化柱C18柱、Ag柱和Na柱或等效柱恒溫水浴鍋100℃±1℃具塞錐形瓶50mL、100mL、150mL水性濾膜針頭濾器0.22μm刻度移液管1mL、2mL容量瓶100mL濾紙食物粉碎機(jī)注射器1.0mL、2.5mL超聲波清洗儀35kHz試樣預(yù)處理二試樣提取1.蔬菜、水果等植物性試樣2.肉類、蛋類、魚及其制品等3.腌魚類、腌肉類及其他腌制品4.乳5.乳粉及干酪6.洗脫三1.蔬菜、水果等植物性試樣亞硝酸鹽、硝酸鹽含量的測定2.肉類、蛋類、魚類及其制品等亞硝酸鹽、硝酸鹽含量的測定定容至100mL準(zhǔn)確稱取5g（0.001g）150mL具塞錐形瓶加水80mL超聲提取30min，每隔5min振搖1次放置至室溫，轉(zhuǎn)移至100mL容量瓶75℃水浴5min10000r/min離心15min，上清液備用濾紙過濾3.腌魚類、腌肉類及其他腌制品亞硝酸鹽、硝酸鹽含量的測定定容至100mL稱取試樣勻漿2g（0.001g）150mL具塞錐形瓶加水80mL超聲提取30min，每隔5min振搖1次放置至室溫，轉(zhuǎn)移至100mL容量瓶75℃水浴5min10000r/min離心15min，上清液備用濾紙過濾4.乳亞硝酸鹽、硝酸鹽含量的測定定容至100mL稱取試樣10g（0.01g）100mL具塞錐形瓶加水80mL超聲提取30min轉(zhuǎn)移至100mL容量瓶濾液備用3%乙酸溶液2mL濾紙過濾4℃放置20min5.乳粉及干酪亞硝酸鹽、硝酸鹽含量的測定稱取試樣2.5g（0.01g）100mL具塞錐形瓶加水80mL超聲提取30min轉(zhuǎn)移至100mL容量瓶濾液備用3%乙酸溶液2mL濾紙過濾加水稀釋至100mL，混勻于4℃放置20min，取出放置至室溫取上述備用溶液約15mL，通過0.22μm水性濾膜針頭濾器、C18柱，棄去前面3mL（如果氯離子大于100mg/L，需要一次通過針頭濾器、C18柱、Ag柱和Na柱，棄去前面7mL），收集后面洗脫液待測。6.洗脫亞硝酸鹽、硝酸鹽含量的測定儀器參考條件色譜柱：氫氧化物選擇性，可兼容梯度洗脫的二乙烯基苯-乙基苯乙烯共聚物基質(zhì)，烷醇基季銨鹽功能團(tuán)的高容量陰離子交換柱，4mm×250mm（帶保護(hù)柱4mm×50mm），或性能相當(dāng)?shù)碾x子色譜柱。淋洗液。氫氧化鉀溶液：濃度為6mmol/L～70mmol/L，洗脫梯度為6mmol/L30min，70mmol/L5min，6mmol/L5min；流速1.0mL/min。粉狀嬰兒配方食品：氫氧化鉀溶液，濃度為5mmol/L～50mmol/L，洗脫梯度為5mmol/L33min，50mmol/L5min，5mmol/L5min；流速1.3mL/min。抑制器。檢測器：電導(dǎo)檢測器，檢測池溫度為35℃；或紫外檢測器，檢測波長為226nm。進(jìn)樣體積：50

μL。（可根據(jù)試樣中被測離子含量進(jìn)行調(diào)整）。四標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作將標(biāo)準(zhǔn)系列工作溶液分別注入離子色譜儀中，得到各濃度標(biāo)準(zhǔn)工作液色譜圖，測定相應(yīng)的峰高或峰面積，以標(biāo)準(zhǔn)工作液的濃度為橫坐標(biāo)，以峰高或峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。五試樣溶液的測定將空白和試樣溶液注入離子色譜儀中，得到空白和試樣溶液的峰高或峰面積，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線得到待測液中亞硝酸根離子或