中國胃癌HER2檢測-指南解讀-鄭杰

中國胃癌HER2檢測指南解讀

〔2022版〕第一頁，共四十頁。概述本指南推薦IHC與FISH和〔或〕DSISH相結(jié)合的檢測策略胃癌有必要進行準確的HER2檢測

HER2狀態(tài)檢測首先選用免疫組織化學(xué)法〔IHC〕

IHC3+的病例視為HER2陽性

IHC2+的病例建議進一步行原位雜交〔ISH：FISH和或DSISH〕檢測，IHC2+/ISH+的病例視為HER2陽性

IHC1+和IHC0病例，IHC2+/ISH-病例視為HER2陰性

胃癌HER2檢測應(yīng)在有能力的實驗室進行

檢測質(zhì)量取決于標本的采集、處理過程、IHC/ISH檢測方法和評判標準的執(zhí)行第二頁，共四十頁。問題一1.請問您所在的醫(yī)院胃癌HER2檢測是否屬于常規(guī)檢測工程？是否不清楚第三頁，共四十頁。問題二請問您所在的醫(yī)院，由誰決定是否做胃癌HER2免疫組化檢測？病理科外科腫瘤內(nèi)科消化內(nèi)鏡室第四頁，共四十頁。問題三請您對多學(xué)科合作對胃癌HER2檢測的重要性打分〔0-5重要性逐漸遞增〕，請按投票器選擇012345第五頁，共四十頁。胃癌HER2檢測第六頁，共四十頁。切片脫水包埋固定HER2檢測的相關(guān)流程切片檢測判讀標本收取第七頁，共四十頁。問題四貴單位胃癌手術(shù)標本送到病理科處理的時間？A30分鐘內(nèi)B1小時內(nèi)C2小時內(nèi)D>2小時E不清楚

第八頁，共四十頁。問題五貴單位手術(shù)標本固定時間？不固定直接取材固定時間在8小時內(nèi)固定時間在12小時左右〔過夜〕固定時間12-24小時不清楚第九頁，共四十頁。標本類型原發(fā)病灶的手術(shù)切除標本原發(fā)病灶的胃鏡活檢標本建議取6-8塊，以獲得足夠的樣本組織，多點活檢對準確的檢測有必要切除標本離體后20–30分鐘內(nèi)進行標記、切開、固定等初步處理后，及時送病理科活檢標本的大小≥2x2x2mm3原發(fā)灶活檢組織、手術(shù)切除組織皆有的病例，建議使用手術(shù)切除組織進行檢測標本采集第十頁，共四十頁。問題六貴單位送檢標本采用何種固定液？不用固定液，直接送病理科10%福爾馬林固定液〔蒸餾水配〕10%福爾馬林固定液〔中性緩沖液配〕10%甲醛固定液不清楚第十一頁，共四十頁。標本固定采用新鮮配制10%中性緩沖福爾馬林作為固定液固定液的量應(yīng)為組織的10倍手術(shù)切除標本的固定時間為8–48h(至少1h/mm組織)活檢標本的固定時間不超過24h(至少1h/mm組織)不宜使用其它固定液，非10%中性緩沖福爾馬林制劑可能會阻礙IHC和ISH檢測的可靠性不宜用微波快速固定組織標準的標本固定是HER2檢測質(zhì)量的保障；保存良好的組織形態(tài)，防止細胞內(nèi)蛋白和核酸的喪失標本準備第十二頁，共四十頁。固定1小時固定52小時固定4小時固定2周固定時間影響HER2染色結(jié)果固定22小時圖片由ofAMorey,StVincent’sHospital,NSW,Australia提供第十三頁，共四十頁。固定較差例如：乳腺癌HER2IHC檢測固定較差會導(dǎo)致染色結(jié)果的異質(zhì)性胞質(zhì)染色可能是由固定較差導(dǎo)致圖片由WHanna提供第十四頁，共四十頁。固定較差例如：胃癌HER2IHC檢測固定不完全會導(dǎo)致假陽性檢查結(jié)果胞質(zhì)染色可能由于使用了不恰當?shù)墓潭ǚ绞綀D片由TargosMolecularPathology.提供第十五頁，共四十頁。固定較差例如：HER2ISH檢測圖片由Abbott/Vysis.提供固定不完全-SISH，“空核〞固定不完全導(dǎo)致探針信號較弱或缺失過度染色會導(dǎo)致持續(xù)性自發(fā)熒光探針信號可能較弱或缺失第十六頁，共四十頁。HER2檢測HER2過表達的檢測HER2擴增的檢測免疫組織化學(xué)染色方法〔IHC〕自動化原位雜交方法〔ISH〕FISHDualSISH第十七頁，共四十頁。實驗室總體要求應(yīng)當在有條件的實驗室進行，擁有試驗所需的儀器和設(shè)備及空間條件

實驗室掌握包括標本的制備、抗體的選擇、抗原修復(fù)方法及其它相關(guān)技術(shù)；探針的選擇、檢測預(yù)處理方法及其它相關(guān)技術(shù)

實驗室經(jīng)過嚴格的內(nèi)部和外部質(zhì)量控制程序驗證，建立完善的實驗室標準操作流程〔SOP〕

實驗室技術(shù)員具備相關(guān)資質(zhì)及經(jīng)過合格培訓(xùn)第十八頁，共四十頁。HER2檢測-IHC

IHC方法

試驗方法根據(jù)實驗室條件可以選擇手工染色、半自動染色和全自動免疫組化染色建議使用全自動染色方法建議使用我國相關(guān)部門〔SFDA〕批準的試劑盒自行組配和分裝的抗體必須經(jīng)過嚴格的內(nèi)部和外部質(zhì)量控制程序驗證，并與權(quán)威機構(gòu)批準的檢測試劑盒進行比對，以保證檢測結(jié)果的可靠性IHC抗體第十九頁，共四十頁。結(jié)果判讀和分析普通光學(xué)顯微鏡熒光顯微鏡病理醫(yī)生需要經(jīng)過培訓(xùn)

IHC評分標準和乳腺癌有所不同樣本：活檢組織和切除組織有所不同觀察：高異質(zhì)性需要全面觀察所有腫瘤組織溝通：結(jié)果不確定時需要與腫瘤科醫(yī)生溝通第二十頁，共四十頁。IHC判讀標準

〔參照ToGA經(jīng)驗，所有圖片來自SCC〕0無反響或腫瘤細胞膜染色<10% 1+≥10%腫瘤細胞微弱或隱約膜染色，細胞膜僅局部區(qū)域著色2+

≥10%腫瘤細胞弱到中度的完全或細胞基底部和兩側(cè)邊膜染色3+≥10%腫瘤細胞完全性或基底部和兩側(cè)邊膜強染色〔對3+的病例同時說明百分率，注明是否有異質(zhì)性〕IHC結(jié)果判讀時應(yīng)注意：細胞質(zhì)著色應(yīng)忽略不計，正常胃黏膜上皮細胞不應(yīng)著色

HER2檢測-IHC第二十一頁，共四十頁。原位雜交檢測方法〔ISH〕熒光原位雜交〔FISH〕雙色銀染原位雜交〔DualSISH，DSISH〕探針建議使用我國相關(guān)部門〔SFDA〕批準的試劑盒第二十二頁，共四十頁。FISH，HER2紅色信號增多，局部呈簇狀，CEP17信號1-2個，比值7.2，有擴增〔100×〕FISH，HER2和CEP17信號各1-2個，比值1.65，無擴增〔100×〕FISH：嚴格按照試劑盒標準程序執(zhí)行HER2檢測-FISH圖片來自SCC第二十三頁，共四十頁。DSISHHER2黑色信號擴增，呈簇狀；CEP17紅色信號1-2個；比值15，有擴增(100×)

DSISHHER2和CEP17信號各1-2個，比值<0.8，無擴增(100×)

DSISH：實驗室應(yīng)先進行嚴格的比照試驗和程序優(yōu)化

嚴格按照所用全自動染色儀器的優(yōu)化程序和SOP執(zhí)行HER2檢測-DSISH圖片來自SCC第二十四頁，共四十頁。請問貴院是否有統(tǒng)一的HER2檢測病理報告格式？是否問題七第二十五頁，共四十頁。檢測報告內(nèi)容胃癌HER2IHC/ISH檢測報告臨床信息：姓名 性別年齡門診／住院號 送檢醫(yī)師 聯(lián)系方式

檢測日期年月日標本信息：病理號/蠟塊號標本類型：手術(shù)切除□活檢□腫瘤部位：胃食道交界處□胃底□胃體□胃竇□幽門管□轉(zhuǎn)移灶□標本固定液種類〔10％中性緩沖福爾馬林〕是□ 否□標本離體至固定時間(如有記錄) 分鐘標本固定的時間(如有記錄)分鐘組織學(xué)類型/分級Laurén分型臨床分期TNM第二十六頁，共四十頁。HER2IHC檢測報告檢測信息：抗體信息(克隆號／生產(chǎn)商)檢測方法 手工/半自動□ 全自動□對照設(shè)置情況3+□0□樣本量是否足夠用于評估 是□ 否□具有膜著色的腫瘤細胞的百分比%著色的異質(zhì)性 有□ 無□腫瘤細胞膜染色模式完整□基底和側(cè)膜〔U-shaped)□兩者皆有□判讀結(jié)果： 0□ l+□ 2+□3+□ 無法判讀□結(jié)論：陽性□；不確定□；陰性□；無法判讀□檢測人員：技術(shù)員病理醫(yī)師第二十七頁，共四十頁。

HER2ISH檢測報告

檢測信息：探針信息(生產(chǎn)商/商品號)

檢測方法

對照設(shè)置情況陽性對照□陰性對照□樣本量是否足夠用于評估 是□ 否□IHC檢測結(jié)果 0□ l+□2+□ 3+□ 無法判讀□判讀結(jié)果：

用于評估的腫瘤細胞數(shù)量

HER2信號總數(shù)／CEPl7信號總數(shù)

HER2信號數(shù)平均值／細胞核

CEPl7信號數(shù)平均值／細胞核

17號染色體是否為多體 是□ 否□結(jié)論： 陽性(擴增)□ 陰性(無擴增)□ 無法判讀□檢測人員： 技術(shù)員病理醫(yī)生

第二十八頁，共四十頁。實驗室質(zhì)量控制〔1〕HER2蛋白和基因擴增的檢測均應(yīng)在內(nèi)、外部質(zhì)量控制良好的病理實驗室進行檢測必須嚴格按照指南要求執(zhí)行，以保證結(jié)果可靠不具備HER2檢測條件的單位應(yīng)按照指南要求，妥善處理和準備好標本，提供給有質(zhì)量保證的病理實驗室進行檢測第二十九頁，共四十頁。實驗室質(zhì)量控制〔2〕實驗室內(nèi)、外部質(zhì)量控制和SOP的主要要求如下準備開展GCHER2檢測的實驗室應(yīng)選擇1～2家已較好開展該項檢測的實驗進行25～100例標本的比照驗證或通過參加有關(guān)外部質(zhì)量控制活動來實現(xiàn)，外部質(zhì)控陽性和陰性結(jié)果的一致性應(yīng)到達90％以上，每年應(yīng)進行1～2次從事GCHER2檢測的實驗室技術(shù)人員和病理醫(yī)師應(yīng)進行必要的培訓(xùn)和資格考核第三十頁，共四十頁。實驗室質(zhì)量控制〔3〕實驗室應(yīng)建立完善的SOP，并做好每次檢測情況的記錄和存檔工作任何改變操作程序和試劑的行為均應(yīng)重新進行嚴格的驗證內(nèi)部質(zhì)控應(yīng)包括同一組織不同批次染色結(jié)果的重復(fù)性分析，每次染色陽性、陰性對照的設(shè)置，如有可能還應(yīng)沒置包括低表達／低擴增對照檢測相關(guān)的儀器和設(shè)備需定期維護、校驗第三十一頁，共四十頁。類似乳腺癌亮視野檢測方法有優(yōu)勢Her2檢測流程樣本收集鏡下觀察異質(zhì)性高需要觀察整張切片檢測所需時間胃癌進展快，宜及時獲得結(jié)果多學(xué)科參與結(jié)果判讀與乳腺癌有所不同胃癌HER2檢測：根本過程和特殊性數(shù)量、質(zhì)量適宜的含有腫瘤組織的活檢標本具有代表性的手術(shù)切除標本第三十二頁，共四十頁。多學(xué)科協(xié)作共同努力醫(yī)生和技術(shù)員

知識更新和觀念改變患者和醫(yī)生第三十三頁，共四十頁。多學(xué)科協(xié)作檢測HER2：臨床醫(yī)生之角色采樣手術(shù)和胃鏡活檢〔6-8塊組織〕固定10%中性緩沖福爾馬林樣本送檢〔離體時間〕30分鐘結(jié)果解讀HER2+IHC01+2+3+HER2陽性第三十四頁，共四十頁。多學(xué)科協(xié)作檢測HER2：病理醫(yī)生之角色WolffAC,etal.JClinOncol2007;25:118–145.檢測結(jié)果分析檢查備檢標本是否可用正確設(shè)立內(nèi)部對照組依照國際評分系統(tǒng)進行評分檢測結(jié)果報告使用標準化HER2檢測結(jié)果報告表報告內(nèi)容應(yīng)包括標本取樣，固定，檢測方法及評分系統(tǒng)多學(xué)科檢測治療小組(MDT)會議第三十五頁，共四十頁。學(xué)科協(xié)作檢測HER2：技術(shù)員之角色處理:防止影響檢測結(jié)果之因素--最正確答案固定時間及固定方法--石蠟包埋--組織切片的合理時間(最好于HER2檢測前切片)--標本脫蠟方法:使用標準化/經(jīng)驗證之檢測步驟--IHC--ISHFISHDualSISHWolffAC,etal.JClinOncol2007;25:118–145.第三十六頁，共四十頁?；颊卟±磲t(yī)生技術(shù)人員腫瘤科/內(nèi)科醫(yī)生病理醫(yī)生外科/內(nèi)窺鏡醫(yī)生獲取腫瘤組織并按照標準進行固定后轉(zhuǎn)送病理科標本處理和制片病理診斷選取有代表性的組織按照標準檢測結(jié)果判讀和評分簽發(fā)報告與臨床醫(yī)生溝通并作必要的解釋評估檢測需求、提出手術(shù)或活檢以獲得標本成功且及時的HER2檢測需要多學(xué)科合作第三十七頁，共四十頁。

建議

提高檢測率離體時間和固