ch6-4 雜環(huán)類藥物的分析

鹽城衛(wèi)生職業(yè)技術(shù)學(xué)院林QQ:505348076;E-mail:linruirQQ:56334613;E-mail:linruir@雜環(huán)類藥物的分析TheAnalysisofHeterocyclicdrugs藥物分析技術(shù)

Technology

of

PharmaceuticalAnalysis第九章雜環(huán)類藥物的分析

Chapter9

TheAnalysisof

Heterocyclicdrugs

Theringcompoundscontaintheheterocyclicatomsarecalledasheterocycliccompounds。

雜環(huán)化合物：指環(huán)狀有機化合物的碳環(huán)中夾雜有非碳元素原子（如O、S、N等）的化合物。第一節(jié)概述

SECTION1

Generalconsiderations雜環(huán):環(huán)狀有機化合物的碳環(huán)中夾雜有其他非碳原子的環(huán)狀結(jié)構(gòu)叫做雜環(huán)。Thecarb-onringoforganicringcompoundcontainthenon-carbonatomsarecalledasheterocyclic。

非碳原子,又稱雜原子,如N,S,O.Thenon-carbonatomssuchasoxygen,nitrogen,andsulfuretc.inorganicringcompoundsareknownasheterocyclicatoms。

共性Properties:

(1)雜環(huán)類藥物是合成藥物中所占比例最多的一大類藥物.(2)多為五元環(huán)或六元環(huán),單環(huán)或并合環(huán)(monocyclicordicyclicandpolycyclicsystem).(3)雜環(huán)結(jié)構(gòu)較穩(wěn)定,不易開環(huán),其性質(zhì)受雜原子種類、數(shù)目、位置影響.(4)雜環(huán)上取代基性質(zhì)較活潑,常用于分析.(5)含氮雜環(huán),其堿性的強弱往往用于分析.Native(natural)heterocyclicdrugsAlkaloids(naturalbase)VitaminsAntibioticsSyntheticheterocycliccompoundsPyridinesPhenothiazinesBenzodiazepinesProperties:1.pentatomicring&hexatomicringmonocyclicordicyclicandpolycyclicsystem2.stable3.alkalinityofnitrogenatomonheterocyclicnitrogencompound4.absorptionspectra(UV,IR)吡啶類吩噻嗪類苯并二氮雜卓類.喹諾酮類咪唑類本章重點介紹第一節(jié)吡啶類藥物的分析SECTION2ANALYSISOFPYRIDINEDRUGS一、結(jié)構(gòu)分析Structureanalysis1.

結(jié)構(gòu)：本類藥物均有吡啶環(huán)Typicaldrugs吡啶

異煙肼尼可剎米

pyridineIsoniazide(INH)Nikethamide異煙肼（isoniazid）吡啶（pyridine）

異煙腙（ftivazide）丙硫異煙胺（protionamide）NCHNOH碘解磷定CH3I-尼可剎米（nikethamide）尼可剎米，吡啶環(huán)的

位被酰胺基取代。遇堿水解，放出二乙胺。碘解磷定，吡啶環(huán)

位有甲醛肟基取代，該基團在堿性中易降解。吡啶環(huán)氮原子與碘甲烷作用形成季銨鹽，堿性下降。⑴母核:吡啶環(huán)芳叔胺

弱堿性pKb～8.8，

非水堿量法含量測定或沉淀反應(yīng)鑒別吡啶環(huán)可發(fā)生開環(huán)反應(yīng)，可用于吡啶類藥物的鑒別

①異煙肼

位上酰肼基

弱酸性非水酸量法還原性鑒別或氧化還原滴定法含量測定可與某些羰基試劑發(fā)生縮合反應(yīng)鑒別或比色法含量測定酰肼鍵易水解引入特殊雜質(zhì)游離肼

⑵取代基②尼可剎米

位上酰胺基

易水解，遇堿水解后，釋放出具有堿性的二乙胺NH(C2H5)2↑，能使?jié)駶櫟募t色石蕊試紙變藍(lán)色，故可以此進(jìn)行鑒別。用于鑒別或凱氏定N直接蒸餾測定。③丙硫異煙胺

位上硫代甲酰胺基

易水解，加酸水解后，釋放出硫化氫，能使?jié)駶櫟拇姿徙U試紙顯黑色，故可以此進(jìn)行鑒別。3.absorptionspectra(UV,IR)（1）母核能與金屬鹽反應(yīng)生成有色沉淀。

pyridine——withheavymetal（2）堿性:吡啶環(huán)上氮原子具有叔胺性質(zhì)，

pKb=8.8（水中;inwater），非水堿量法滴定；

tertiaryamine——alkaline（3）異煙肼:酰肼基有強還原性,且能與羰基縮合,氧化還原滴定或比色測定；

acylhydrazine(INH)——reducingproperty：condensationreactionwithcarbonylreagents（4）尼可剎米:酰胺基堿性下可水解,放出NH(C2H5)2↑,用于鑒別或凱氏定氮直接蒸餾測定。

acylamine——hydrolysis2.性質(zhì)Properties

①與汞鹽的反應(yīng)異煙肼,尼可剎米+HgCl2→↓白色沉淀

二、鑒別Identification1.母核反應(yīng)

（1）沉淀反應(yīng)與金屬離子反應(yīng)生成有色沉淀INH,Nikethamide+HgCl2→白色↓②與銅鹽的反應(yīng)異煙肼+CuSO4→↓（Cu2O）紅棕色I(xiàn)NH+CuSO4→↓（Cu2O）尼可剎米+CuSO4+硫氰酸鉀→草綠色沉淀。Nikethamide+CuSO4+KSCN→↓

【鑒別】（3）取本品2滴，加水1ml，搖勻，加硫酸銅試液2滴與硫氰酸胺試液3滴，即生成草綠色沉淀。尼可剎米

ChP（2005）P164(3）與碘化鉍鉀反應(yīng)異煙肼、碘解磷定可與碘化鉍鉀（酸性）反應(yīng)，生成有色沉淀；尼可剎米不與碘化鉍鉀反應(yīng)，但可與堿性碘化汞鉀反應(yīng)產(chǎn)生沉淀（2）開環(huán)反應(yīng)：適用于a,a’未取代，

,γ為烷基或羧基取代的。ring-openingreactionofpyridinering

-non-substituted,and,-substitutedwithalkyl,andcarboxylgroupa.

戊烯二醛反應(yīng)pentenedinalreaction(K?nigreaction)

(溴化氰-苯胺法)INH黃色異煙肼：

例:尼可剎米ChP（2005）

【鑒別】（2）取本品1滴，加水50ml，搖勻，分取2ml，加溴化氰試液2ml與2.5%苯胺溶液3ml，搖勻，溶液漸顯黃色。pentenedinalreaction(K?nigreaction)

NikethamideNikethamide

b.2,4-二硝基氯苯反應(yīng)

(Vongerichtenreaction)異煙肼,尼可剎米,異煙腙ChP（2005）

purple-red無水條件下，吡啶或其衍生物與2，4-二硝基氯苯共熱或熔融；冷卻后，加醇制氫氧化鈉溶解，溶液即顯紅色。本法鑒別異煙肼、尼可剎米時，需要氧化酰肼基為羧基，或?qū)Ⅴｋ?、酰胺水解為羧基。?異煙腙

ChP（2005）P218

【鑒別】取異煙腙約50mg，加2,4－二硝基氯苯50mg與乙醇3m1，置水浴中煮沸2～3min，加10％氫氧化鈉溶液2滴，靜置后，即顯鮮明的紅色。異煙肼不經(jīng)處理的反應(yīng)：2.酰肼基團的反應(yīng)

Oxidant:I2、Br2、KBrO3、AgNO3（1）還原反應(yīng)Reductionreaction

：

Reactionofhydrazide——INH

Silvermirrorreaction:INH+AgNO3+H2O(NH3·H2O)→↓→Ag↓Δ

異煙肼ChP（2005）P217【鑒別】（2）取異煙肼約10mg，置試管中，加水2ml溶解后，加氨制硝酸銀試液1m1，即發(fā)生氣泡與黑色渾濁，并在試管壁上生成銀鏡。異煙肼銀鏡反應(yīng)NCONHNH2+AgNO3+H2ONCOOAg+HNO3+NH2NH2NH2NH2+4AgNO34Ag+N2+4HNO3（2）縮合反應(yīng)Condensationreaction

：與芳醛縮合形成腙，hydrazinenon-substitutedcondensewitharomaticaldehydes——toformhydrazone如香草醛、水楊醛、二甲氨基苯甲醛condensatingreagent:vanillin,salicylal(salicylicaldehyde)para-dimethylaminobenzaldehyde黃色λmax=380nm

異煙肼ChP（2005）P217【鑒別】（1）取本品約0.1g，加水5ml溶解后，加10％香草醛的乙醇溶液1m1，搖勻，微熱，放冷，即析出黃色結(jié)晶，濾過，用稀乙醇重結(jié)晶，在105℃干燥后，測定熔點，其熔點為228～231℃，熔融時同時分解。II.hydrazinenon-substitutedcondensewith1,2-naphthoquinone-4-sulfonicacid——toproduceredcolor（三）分解產(chǎn)物的反應(yīng)1.尼可剎米ChP（2005）P164

【鑒別】（1）取本品10滴，加氫氧化鈉試液3ml，加熱，即發(fā)生二乙胺的臭氣，能使?jié)駶櫟募t色石蕊試紙變藍(lán)色。用紅色石蕊試紙檢查

2.丙硫異煙胺ChP（2005）P77

【鑒別】（1）取本品約50mg，加鹽酸溶液（9→100）3ml，緩緩加熱，發(fā)生的氣體可使?jié)駶櫟拇姿徙U試紙顯黑色。（四）紫外吸收光譜特征UV-spectrophotometry

丙硫異煙胺ChP（2005）P77

【鑒別】（2）取本品，加乙醇制成每1ml中含20g的溶液，照分光光度法（附錄ⅣA）測定，在291nm的波長處有最大吸收，吸收度約為0.78。

吡啶類藥物的紫外特征吸收鑒別法

藥物

溶劑

λmax(nm)

E

異煙肼HCl(0.01mol/L)265約420水266378

尼可剎米H2SO4(0.05mol/L)263273NaOH(0.01mol/L)255840260860丙硫異煙胺乙醇(20μg/ml)291(0.78)（五）IR尼可剎米ChP（2005）P

164【鑒別】（4）本品的紅外吸收圖譜應(yīng)與對照的圖譜（光譜集135圖）一致。三、雜質(zhì)檢查LimitTestTLCTurbidimetricmethodDifferencespectrophotometry（一）異煙肼中游離肼的檢查

〔forfreehydrazineinIsoniazide(INH)〕

雜質(zhì)來源原料引入、降解產(chǎn)生

1.薄層色譜法（TLC）

（1）ChP（2005）P217

雜質(zhì)對照品法取本品，加水制成每1ml中含50mg的溶液，作為供試品溶液。另取硫酸肼加水制成每1ml中含0.20mg（相當(dāng)于游離肼50μg的溶液，作為對照溶液。吸取供試品溶液10μl與對照溶液2μl分別點于同一硅膠薄層板（用羧甲基纖維素鈉溶液制備）上，以異丙醇－丙酮（3∶2）為展開劑，展開后，晾干，噴以乙醇制對二甲氨基苯甲醛試液，15min后檢視，在供試品主斑點前方與硫酸肼斑點相應(yīng)的位置上，不得顯黃色斑點。（2）BP（1998）

游離肼

雜質(zhì)對照品法

有關(guān)物質(zhì)高低濃度對比法BP對照溶液制備取硫酸肼50mg，加水50ml使溶解后，加丙酮稀釋至100ml；量取10ml，加供試品溶液0.2ml，加丙酮-水(1:1)稀釋至100ml。

檢查方法

于硅膠GF254薄層板上，分別點加供試品溶液與對照溶液各5μl，以醋酸乙酯-丙酮-甲醇-水(50：20：20：10)為展開劑，色譜分離后，于254nm紫外光下檢測，供試品色譜中出現(xiàn)的雜質(zhì)斑點強度不大于對照溶液色譜斑點(異煙肼)；再噴以二甲氨基苯甲醛溶液，并在日光下檢視，對照溶液色譜中硫酸肼斑點的強度大于供試品溶液色譜中的雜質(zhì)斑點。2.比濁法JP（13）

檢查方法

靈敏度法反應(yīng)原理游離肼+水楊醛→水楊醛腙↓采用樣品中加水楊醛的乙醇溶液觀察渾濁的方法來控制限量。原理：游離肼可與水楊醛反應(yīng)生成水不溶性的水楊醛腙，呈現(xiàn)混濁。方法：取本品0.1克，加水5毫升使溶解，加水楊醛（120）0.1毫升，迅速振搖混合，放置5分鐘內(nèi)不得現(xiàn)混濁。

優(yōu)點：不用對照品，價廉、簡單易行缺點：準(zhǔn)確度差3.差示分光光度法

游離肼+對二甲氨基苯甲醛→黃色縮合物于456nm波長處有最大吸收異煙肼+對二甲氨基苯甲醛→縮合物于456nm波長處無吸收游離肼+3%丙酮→無色的二甲基甲酮連氮

參比：異煙肼+游離肼+對二甲氨基苯甲醛+3%丙酮樣品：異煙肼+游離肼+對二甲氨基苯甲醛

測定，對照法定量

對照品溶液的制備與測定取50ml量瓶2個，各加1μg/ml肼標(biāo)準(zhǔn)液5ml。其中一個加對二甲氨基苯甲醛試液……于456nm波長處，以對二甲氨基苯甲醛試液的水稀釋溶液(20→50)為對照，測定吸收度；于另一個量瓶中加入丙酮1.5ml，并按同法操作，以含3%丙酮的對二甲氨基苯甲醛試液的水稀釋溶液為對照，測定吸收度。然后計算二溶液的吸收度差值△A456nm。

供試品溶液的制備與測定

2mg/ml供試品水溶液,分取二等份分置50ml量瓶中，照上述對照品溶液的制備與測定項下，自“其中一個……”起，依法操作并計算△A456nm。Cg=(C/△A456nm)d(△A456nm)g（二）尼可剎米中有關(guān)物質(zhì)的檢查

ChP（2005）TLC高低濃度對比法配制兩種不同濃度的對照溶液四、含量測定Assay

（一）異煙肼的含量測定217

氧化還原滴定法常用氧化劑：碘、溴、溴酸鉀、高錳酸鉀、重鉻酸鉀、NaNO2、硫酸鈰等。其中碘量法，溴量法，溴酸鉀法最常用。oxidant:iodine；bromine；potassiumrominate

（1）溴酸鉀法

potassiumbromatemethod

ChP（2005）原料及制劑操作：

原理：

等當(dāng)點:稍過量的Br2測定方法

取本品約0.2g，精密稱定，置100ml量瓶中，加水使溶解并稀釋至刻度，搖勻；精密量取25m1，加水50m1、鹽酸20ml與甲基橙指示劑1滴，用溴酸鉀滴定液（0.01667mo1/L）緩緩滴定（溫度保持在18～25℃）至粉紅色消失。每1ml的溴酸鉀滴定液（0.01667mol/L）相當(dāng)于3.429mg的C6H7N3O。反應(yīng)摩爾比3∶2

a.緩緩滴定并充分振搖,防止局部濃度過高終點提前；b.到終點后,補加一滴指示劑,如顏色褪去即可,否則未到終點；討論c.ChP77、85、90、95、2000、2005均采用本法測定異煙肼（片）；d.化學(xué)計量關(guān)系：3/2T=0.01667×3/2×137.14=3.429Theindicatorwasoxidizedintocolorlessbybromine.T=3/2×MW×0.01667=3/2×137.14×5/300=137.14×5/200=3.429(mg/ml)（2）溴量法反應(yīng)摩爾比1∶4剩余溴量法bromometricmethod：

原理：操作：

Br2（過）+KI→I2+2KBrI2+Na2S2O3→2NaI+Na2S4O60.1mol/LBr2:（溴酸鉀3g+溴化鉀15g→水1000ml）在稀HCl反應(yīng)條件下：KBrO3+5KBr+6HCl→Br2+6KCl+3H2O討論：ChP63版曾用本法測定異煙肼a.酸度0.70～0.86mol/L，所測結(jié)果一致，高、低都會使結(jié)果偏低；b.放置時間15～30min；c.滴定溫度﹤30℃；d.測定應(yīng)在25min內(nèi)完成（3）剩余碘量法iodometricmethod

反應(yīng)摩爾比1∶4操作：

原理：I2(theexcess)+2Na2S2O3(VS)→2NaI+Na2S4O6討論：a.本法簡便,但因碘氧化力較弱,反應(yīng)不易完全。常因反應(yīng)時間、溫度不同有所差異；b.用于制劑分析時,含有還原性賦形劑時有干擾；c.化學(xué)計量關(guān)系：(1:4)

INH:I=1:40.1mol/LI2≈3.429mgC6H7N3Titer(T)=a/b×MWmg/mmol×0.1mmol/ml×1ml=1/4×137.14×0.1×1=3.429mg/ml2.非水溶液滴定法

non-aqueoustitrationmethod（1）非水酸量法

non-aqueousacidimetry（2）非水堿量法

non-aqueousalkalimetry

（二）尼可剎米的含量測定

1.非水溶液滴定法ChP（2005）原料P1642.紫外分光光度法ChP（2000）注射液P165內(nèi)容量移液管用內(nèi)容量移液管精密量取本品1m1，置100ml量瓶中，用0.5％硫酸溶液分次洗滌移液管內(nèi)壁，洗液并入量瓶中，加0.5％硫酸溶液稀釋至刻度，搖勻，精密量取適量，加0.5％硫酸溶液稀釋成每1ml中約含尼可剎米20μg的溶液，在263nm的波長處測定吸收度，按C10H14N2O的吸收系數(shù)（）為292計算，即得。（三）異煙腙的含量測定

非水溶液滴定法電位法指示終點ChP（2005）原料及片劑P218（四）丙硫異煙胺的含量測定

P78

1.非水溶液滴定法ChP（2005）原料2.銀量法ChP（2005）片劑取本品20片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量（約相當(dāng)于丙硫異煙胺0.3g）置具塞錐形瓶中，加丙酮20ml使丙硫異煙胺溶解，精密加入硝酸銀滴定液（0.1mo1/L）50m1，搖勻，放置15min，加水50m1、硝酸3m1、硝基苯5ml與硫酸鐵銨指示液2m1，用硫氰酸銨滴定液（0.1mo1/L）滴定，并將滴定的結(jié)果用空白試驗校正。每lml的硝酸銀滴定液（0.1mo1/L）相當(dāng)于9.014mg的C9H12N2S。

利用開環(huán)反應(yīng)或酰肼基團與試劑呈色測定。

ring-openingreactionofpyridinereductionandcondensationreactionofhydrazide

2.比色測定Colorimetricmethod3.非水滴定法

non-aqueoustitrationmethod利用吡啶環(huán)的堿性，進(jìn)行非水滴定。non-aqueousalkalimetrynon-aqueousacidimetry99：79.下列藥物中，哪一個藥物加氨制硝酸銀能產(chǎn)生銀鏡反應(yīng)A.地西泮B.阿司匹林C.異煙肼D.苯佐卡因E.苯巴比妥

97：132．用于吡啶類藥物鑒別的開環(huán)反應(yīng)有(BE)A.茚三酮反應(yīng)B.戊烯二醛反應(yīng)C.坂口反應(yīng)D.硫色素反應(yīng)E.二硝基氯苯反應(yīng)

例1.ChP（2005）異煙肼的測定方法為(A)A.溴酸鉀滴定法B.溴量法C.TCLD.NaNO2E.比色法

例2.能和2,4一二硝基氯苯發(fā)生呈色反應(yīng)的藥物是(A)A.異煙腙B.硫酸奎寧C.阿莫西林D.四環(huán)素E.炔孕酮

例3.能和硫酸銅及硫氰酸銨反應(yīng)，生成草綠色沉淀的藥物為(C)A.對乙酰氨基酚B.異煙肼C.尼可剎米D.地西泮E.維生素E

例4.經(jīng)高錳酸鉀或溴水氧化后，可發(fā)生開環(huán)形成戊烯二醛反應(yīng)的藥物為(E)A.葡萄糖B.皮質(zhì)酮C.維生素CD.土霉素E.異煙肼

例5.溴酸鉀法測定異煙肼含量的方法是A.屬于氧化還原滴定法B.lmol溴酸鉀相當(dāng)于3/2mol的異煙肼C.采用永停滴定法指示終點D.在HCl酸性條件下進(jìn)行滴定E.還可以用于異煙肼制劑的含量測定

例6.異煙肼可由原料反應(yīng)不完全或貯藏中的降解反應(yīng)而引入哪種雜質(zhì)A.間氨基酚B.水楊酸C.對氨基苯甲酸D.游離肼E.其他甾體

例7.可用于異煙肼鑒別的反應(yīng)有A.與氨制硝酸銀的反應(yīng)B.戊烯二醛反應(yīng)C.坂口反應(yīng)D.硫色素反應(yīng)E.二硝基氯苯反應(yīng)

SECTION2AnalysisofPhenothiazineDrugs一、StructureanalysisGeneralconsiderations

basicstructure:

硫氮雜蒽母核

sulfurnitrogenheterocyclicanthracene

（1）含S、N的三環(huán)共軛的大

體系，S、N與苯環(huán)形成p-

共軛——具有紫外吸收光譜特征（2）硫氮雜蒽環(huán)上硫原子為-2價，具有還原性，易氧化呈色，生成砜或亞砜（3）硫氮雜蒽環(huán)上硫原子有兩對孤對電子，易與金屬離子配合呈色R’:-H,-Cl,-COCH3,-CF3,-SCH2CH3

2.取代基R：脂烴胺基、哌嗪基，具堿性R:dimethylamino,diethylaminogroupnitrogenheterocyclicring

R

：鹵素奮乃靜癸氟奮乃靜鹽酸氟奮乃靜鹽酸三氟拉嗪鹽酸二氧丙嗪共同點（1）硫氮雜蒽母核為共軛三環(huán)π系統(tǒng)；（2）含兩個雜原子多環(huán)共軛體系，有UV吸收；（3）硫氮雜蒽母核的硫為二價，易被氧化生成砜或亞砜遇不同氧化劑如硫酸、硝酸、三氯化鐵試液及過氧化氫等，隨著取代基的不同，而呈不同的顏色。其紫外吸收光譜有明顯不同，它們具有四個峰值。（4）與金屬離子配合，生成有色物，可比色測定不同點：R，R’取代基不同RR’鹽類藥名-(CH2)3N(CH3)2-HHCl鹽酸丙嗪-(CH2)3N(CH3)2-ClHCl鹽酸氯丙嗪-CH2CH(CH3)N(CH3)2-HHCl鹽酸異丙嗪（二）性質(zhì)

1.紫外與紅外吸收光譜本類藥物的紫外特征吸收，主要由母核三環(huán)的π系統(tǒng)所產(chǎn)生，一般具有三個峰值。即在204～209nm（205nm附近）、250～265nm（254nm附近）和300～325nm（300nm附近）。最強峰多在250～265nm。

2位上的取代基（R′）不同，會引起吸收峰發(fā)生位移。其結(jié)構(gòu)中-2價的硫，具還原性，可被氧化,氧化產(chǎn)物砜及亞砜有四個吸收峰。吩噻嗪類藥物隨取代基R和R′的不同，產(chǎn)生不同的紅外吸收光譜。10位上烴胺側(cè)鏈R對最大吸收波長有一定影響.碳鏈越短影響越大。即使氨基在四個碳鏈的末端,對吸收峰的位置仍會有影響。2.具還原性,易被氧化呈色3.易與金屬離子配合呈色本類藥物中未被氧化的硫，可與鈀離子形成配位化合物，其氧化產(chǎn)物則無此反應(yīng)。此性質(zhì)可用于鑒別和含量測定，并具有專屬性，可消除氧化產(chǎn)物的干擾。

4.堿性二、鑒別Identification（一）UV和IR

特征的紫外吸收：

具有三個峰值205nm、254nm和300nm附近，兩個谷220nm和280nm附近；若被氧化則有四個吸收峰，可用于判斷樣品中有無氧化物。

藥物名稱溶劑濃度（μg/ml）λmax（nm）AE1%1cm鹽酸氯丙嗪鹽酸（9→1000）52540.46915306——鹽酸異丙嗪鹽酸（0.01mol/L）6249—883~937奮乃靜無水乙醇72580.65—癸氟奮乃靜乙醇10260——鹽酸氟奮乃靜鹽酸（9→1000）10255—553~593鹽酸三氟拉嗪鹽酸（1→20）10256—630鹽酸硫利達(dá)嗪乙醇8264與315——鹽酸氯丙嗪

ChP（2005）P274

[鑒別]

（2）取本品，加鹽酸溶液（9→1000）制成每1ml中含5g的溶液，照分光光度法（附錄ⅣA）測定，在254nm與306nm的波長處有最大吸收，在254nm的波長處吸收度約為0.46。奮乃靜

ChP（2005）P328

[鑒別]

（2）取本品，加無水乙醇制成每1ml中含7g的溶液，照分光光度法（附錄ⅣA）測定，在258nm的波長處有最大吸收，吸收度約為0.65。（3）奮乃靜的紅外吸收圖譜應(yīng)與對照的圖譜（光譜集243圖）一致鹽酸異丙嗪、鹽酸異丙嗪的紅外吸收圖譜應(yīng)分別與對照的圖譜（光譜集350、351圖）一致（二）顯色反應(yīng)1.氧化劑氧化顯色氧化劑

硫酸、硝酸、過氧化氫(1)氧化劑：H2SO4、溴水、FeCl3、H2O2

(2)（可用于比色測定）

藥物名稱硫酸硝酸過氧化氫

鹽酸氯丙嗪顯紅色,漸變淡黃色—鹽酸異丙嗪顯櫻桃紅色,放置生成紅色沉淀,加熱即溶解,后顏色漸變深溶液由紅色轉(zhuǎn)變?yōu)槌赛S色奮乃靜——顯深紅色;放置后紅色漸褪去鹽酸氟奮乃靜顯淡紅色,溫?zé)帷笞兂杉t褐色鹽酸三氟拉嗪—生成微帶紅色的白色沉淀;放—置后,紅色變深,加熱后變黃色

鹽酸硫利達(dá)嗪顯藍(lán)色—

—

奮乃靜

ChP（2005）P328[鑒別]（1）取本品5mg，加鹽酸與水各1ml，加熱至80℃，加入過氧化氫溶液數(shù)滴，即顯深紅色；放置后，紅色漸褪去。

鹽酸異丙嗪

ChP（2005）P511[鑒別]

（1）取本品約10mg，加水1ml溶解后，加硝酸5滴即顯紅色，漸變淡黃色。[鑒別]（1）取本品約5mg，加硫酸5ml溶解后，溶液顯櫻桃紅色；放置后，色漸變深。（2）取本品約0.1g，加水3ml溶解后，加硝酸1ml，即生成紅色沉淀；加熱，沉淀即溶解，溶液由紅色轉(zhuǎn)變?yōu)槌赛S色。癸氟奮乃靜ChP（2005）P454[鑒別]（2）取本品約5mg，加甲醇2ml溶解后，加0.1%氯化鈀溶液3ml，即有沉淀生成，并顯紅色，再加過量的氯化鈀溶液，顏色變深。2.與鈀離子配合顯色

利用分子結(jié)構(gòu)中未被氧化的硫與金屬鈀離子絡(luò)合形成有色配合物，如與癸氟奮乃靜形成紅色配合物。3.氟元素顯色反應(yīng)(鹽酸氟奮乃靜)（三）分解產(chǎn)物的反應(yīng)癸氟奮乃靜ChP（2005）P454[鑒別]（1）取本品15～20mg，加碳酸鈉與碳酸鉀各約0.1g，混勻，在600℃熾灼15～20分鐘，放冷，加水2ml使溶解，加鹽酸溶液（1→2）酸化，濾過，濾液加茜素鋯試液0.5ml，應(yīng)顯黃色。（四）氯化物的反應(yīng)鹽酸氯丙嗪ChP（2005）[鑒別]（3）本品的水溶液顯氯化物的鑒別反應(yīng)（附錄Ⅲ）。三、有關(guān)物質(zhì)檢查1.癸氟奮乃靜及其注射液TLC參比雜質(zhì)對照品法以鹽酸氟奮乃靜為對照品2.其他藥物TLC高低濃度對比法

(一)鹽酸異丙嗪中特殊雜質(zhì)檢查主要有：2-二甲氨基-1-丙醇；N,N,β-三甲基-10H-吩噻嗪-10-乙胺異構(gòu)體和結(jié)構(gòu)不清的分解產(chǎn)物

。因此采用TLC法中的高低濃度對比法控制上述這些雜質(zhì)的限量。(二)鹽酸硫利達(dá)嗪中有關(guān)物質(zhì)檢查本品遇光不穩(wěn)定，在生產(chǎn)和貯藏過程中易引入有關(guān)物質(zhì)，因其結(jié)構(gòu)不清，因此也采用TLC法中的高低濃度對比法控制雜質(zhì)的限量。

特殊雜質(zhì)檢查四、含量測定Assay（一）非水溶液滴定法原料藥

吩噻嗪類藥物母核上氮原子堿性極弱,不能進(jìn)行滴定,10位取代基上N原子為堿性,可在非水介質(zhì)中以高氯酸標(biāo)準(zhǔn)液，以結(jié)晶紫為指示劑。

HClO4在冰醋酸溶液中，具強氧化性，可氧化吩噻嗪類藥物產(chǎn)生紅色的氧化物，干擾指示劑終點的觀察。排除方法：

（1）改用中性溶劑（2）加抗壞血酸（3）電位法指示終點

非水堿量法測定吩噻嗪類藥物

藥物名稱

冰HAc

Hg(Ac)2終點顏色(結(jié)晶紫)奮氖靜20-藍(lán)綠色癸氟奮氖靜20-藍(lán)綠色鹽酸三氟拉嗪205藍(lán)綠色鹽酸異丙嗪104藍(lán)色鹽酸氟奮氖靜205藍(lán)綠色鹽酸二氧丙嗪2510藍(lán)色鹽酸氯丙嗪醋酐105玫瑰紅色(橙黃IV)（二）紫外分光光度法UV

制劑分析直接分光光度法2.萃取后分光光度法3.二階導(dǎo)數(shù)分光光度法4.萃取—雙波長分光光度法1.直接分光光度法供試品不需提取分離，溶于適當(dāng)?shù)娜軇┲屑纯蛇M(jìn)行含量測定。1.奧沙西泮原料的測定在229nm，采用標(biāo)準(zhǔn)對照法測定。2.鹽酸異丙嗪片的測定在249nm，采用＝910測定。3.鹽酸異丙嗪注射液的測定299nm＝108

測定波長的選擇：注射液處方加VC作抗氧劑，可還原異丙嗪紅色氧化產(chǎn)物，從而防止異丙嗪氧化變色。VC（max243nm）在鹽酸異丙嗪最大吸收波長249nm處有吸收，干擾注射液測定。因此選用299nm波長測定鹽酸異丙嗪注射液的含量時，維生素C在此波長處則不產(chǎn)生干擾,但＝108。同理，鹽酸氯丙嗪片劑測定波長為254nm（為915）；注射液測定波長改為306nm（為115）。操作：取10片，除去糖衣后，精稱，研細(xì)→稱取粉末適量→加水、鹽酸溶解→過濾，取濾液于249nm處測定。已知：鹽酸異丙嗪=910，即可計算優(yōu)點：不需標(biāo)準(zhǔn)品缺點：儀器精密度要求高測定中注意問題：避光、防止氧化。2.萃取后分光光度法

鹽酸氯丙嗪注射液3.萃取-雙波長分光光度法

本法是USP（24）收載的方法，用于鹽酸氯丙嗪注射液的含量測定，主要用來校正樣品中氧化物對測定的干擾。測定原理利用氯丙嗪的最λmax為254nm，其氧化物在此波長也有吸收，同時在277nm氧化物也有吸收，且其A=A254-A277.而氯丙嗪在此波長無吸收。因此，可由兩波長處測得△A計算氯丙嗪含量。（1）原理

在待測組分（a）的最大吸收波長（測定波長，

1）處測定待測組分和干擾組分（b）吸收度的總和；另選一適當(dāng)波長（參比波長，

2）測定吸收度，并使干擾組分在測定波長和參比波長處的吸收度相等，即，而待測組分在這兩個波長處吸收度的差值足夠大。（2）定量依據(jù)樣品在二波長下吸收度差值（

A）：

即，吸收度差值（

A）僅與待測組分的濃度有關(guān)，而與干擾組分無關(guān)，干擾組分的干擾被消除。（3）必要條件①干擾組分在兩個波長處吸收度相等②待測組分在兩個波長處吸收度相差足夠大

（4）應(yīng)用①萃取除去抗氧劑的干擾

②雙波長分光光度法測定

排除氧化產(chǎn)物的干擾

測定波長254nm參比波長277nm對照法定量4.二階導(dǎo)數(shù)分光光度法

鹽酸氯丙嗪注射液抗氧劑維生素C的二階導(dǎo)數(shù)光譜近似為接近基線的一條直線，不干擾鹽酸氯丙嗪的測定。因此鹽酸氯丙嗪可從其二階導(dǎo)數(shù)光譜量取峰266nm～谷254nm距離，標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量

其測定方法如下：

①光譜繪制

測繪條件：波長范圍為200nm～320nm；狹縫為12nm；紙速為120mm/min。②線性關(guān)系

精取鹽酸氯丙嗪對照液(50μg/ml)制得標(biāo)準(zhǔn)系列，以HCI(0.1mol/L)為空白，按光譜繪制項下分別測定。用尺量取不同濃度系列溶液光譜266nm-谷254nm距離（DL），并以峰谷距離為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。③供試品測定

精密量取鹽酸氯丙嗪注射液2.0ml，按光譜繪制項下的方法，測得二階導(dǎo)數(shù)光譜，量取光譜峰-谷(266nm～254nm)距離，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上求出濃度，計算百分含量。（三）鈰量法：

原理:適當(dāng)pH下,用硫酸鈰氧化吩噻嗪進(jìn)行測定開始時,吩噻嗪失去一個電子→游離基（紅色）

等電點吩噻嗪失去2個電子→無色，終點：紅色→無色條件：在硫酸酸性下

自身指示終點或電位法、永停法指示終點優(yōu)點：

硫酸鈰作滴定劑具有高的氧化電位，且為一價還原；不存在對環(huán)取代基的副反應(yīng)，專屬性高。本法既可用于原料，亦可用于片劑的測定（1）賦形劑不干擾,復(fù)方制劑中咖啡因、苯丙胺、可待因、巴比妥類藥物等不干擾；（2）反應(yīng)為一價還原（Ce4+→Ce3+）,對環(huán)上取代基無作用；（3）用于原料藥，也可用于制劑分析。硝苯地平的測定

基本原理硝苯地平的測定原理，可用下列反應(yīng)式表示：終點時:微過量的Ce4+將指示劑中的Fe2+氧化成Fe3+，使橙紅色配合物離子呈淡藍(lán)色或無色，以指示終點的到達(dá)。原理：吩噻嗪類藥物可與一些金屬離子（如Pd2+）在適當(dāng)pH值的溶液中形成有色的絡(luò)合物，借以進(jìn)行比色測定。（四）比色法2.鐵鹽比色法1.鈀離子比色法反應(yīng)在pH2±0.1的緩沖液中進(jìn)行鈀離子比色法優(yōu)點：鈀離子比色法可選擇性地用于未被氧化的吩噻嗪類藥物的測定。

max~500nm吩噻嗪類藥物

+Pd2+pH2±0.1紅色配位化合物在

max處測定A，以對照法定量鈀離子比色法可選擇性地用于未被氧化的吩噻嗪類藥物的測定

（1）鈀離子試劑：PdCl2和十二烷基硫酸酯鈀鹽.＊用PdCl2時，形成的有色配位物水中溶解度小,樣品量大時,產(chǎn)生沉淀.＊十二烷基硫酸酯鈀鹽,其配位物溶解度大,吸收強度增大（約2倍）.（2）本法優(yōu)點：氧化產(chǎn)物不干擾。討論：95：131．鹽酸氯丙嗪的含量測定方法有A.中和法B.非水滴定法C.紫外法D.旋光法E.鈰量法

99x：87.中國藥典（1995年版）對鹽酸異丙嗪注射液的含量測定，選用299nm波長處測定，其原因是A.299nm處是它的最大吸收波長B.為了排除其氧化產(chǎn)物的干擾C.為了排除抗氧劑的干擾D．在299nm處，它的吸收系數(shù)最大E.在其他波長處，因其無明顯吸收

99x：78.有氧化產(chǎn)物存在時，吩噻嗪類藥物的鑒別或含量測定方法為A.非水溶液滴定法B.紫外分光光度法C.熒光分光光度法D.鈀離子比色法E.pH指示劑吸收度比值法

例1.中國藥典(2000年版)中地西泮原料藥中2-甲氨基-5-氯二苯酮的檢查法為A.TLCB.HPLCC.GCD.沉淀法E.顯色法

例2.檢查鹽酸氯丙嗪中“有關(guān)物質(zhì)”時，采用的對照溶液為A.雜質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)溶液B.標(biāo)準(zhǔn)“有關(guān)物質(zhì)”溶液C.供試品溶液D.供試液的稀釋溶液E.對照溶液

例3.某藥物于酸性溶液中，加硫酸鈰試液則產(chǎn)生紅色，繼續(xù)滴加硫酸鈰試液，紅色由淺變深，繼由深又變淺直至紅色消失，該藥物應(yīng)為A.雌二醇B.氯丙嗪C.諾氟沙星D.硫酸鎂E.苯巴比妥鈉

例4.吩噻嗪類藥物與鈀離子反應(yīng)，需在以下哪種酸性條件下進(jìn)行A.pH4B.pH3～3.5C.pH2±0.1D.pH1E.pH5

第三節(jié)苯并二氮雜卓

類藥物的分析

環(huán)庚三烯草卓一.結(jié)構(gòu)分析

氯氮卓（1955年合成）

地西泮（1959年合成）

硝西泮氯硝西泮奧沙西泮鹽酸氟西泮艾司唑侖阿普唑侖共同點：

1.二氮雜卓環(huán)為七元環(huán)，環(huán)上氮原子具有強堿性，苯基的取代使堿性降低，可進(jìn)行非水滴定法測定；苯并二氮雜卓母核弱堿性，UV吸收，用于含量測定；

2.結(jié)構(gòu)中的環(huán)一般比較穩(wěn)定，但在酸性溶液中可水解，形成相應(yīng)的二苯甲酮衍生物?？捎糜阼b別和比色測定。（氯氮卓水解生成芳伯胺基；地西泮水解生成芳仲胺基和甘氨酸）;

3.本品多為游離堿，不溶于水，而溶于甲醇、乙醇和氯仿中。

3.含鹵素（一）化學(xué)鑒別法1.芳伯胺基反應(yīng)：氯氮卓、艾司唑侖、奧沙西泮

氯氮卓水解生成芳伯胺基(重氮化偶合反應(yīng))2.茚三酮反應(yīng)：地西泮地西泮水解生成甘氨酸（茚三酮反應(yīng)）3.硫酸熒光反應(yīng)：地西泮

本類藥物→加硫酸，在紫外燈下，呈熒光。4.沉淀反應(yīng)

5.分解產(chǎn)物的反應(yīng)二、鑒別試驗

（二）UV和IR（三）TLC

(一)化學(xué)鑒別試驗

1。沉淀反應(yīng)

氯氮卓橙紅色沉淀阿普唑侖鹽酸氟西泮＋KBiI4也生成橙紅色沉淀氯硝西泮放置后，沉淀顏色變深，因此可以相互區(qū)別。阿普唑侖+遇硅鎢酸白色沉淀，藥典中也用于鑒別。氯氮卓ChP（2005）P773【鑒別】（1）取本品約10mg，加鹽酸溶液（9→1000）10ml溶解后，加碘化鉍鉀試液1滴，即生成橙紅色沉淀。沉淀反應(yīng)阿普唑侖ChP（2005）P300[鑒別]（1）取本品約5mg，加鹽酸溶液（9→1000）2ml溶解后，分為兩份：一份加硅鎢酸試液1滴，即生成白色沉淀；另一份加碘化鉍鉀試液1滴，即生成橙紅色沉淀。2.水解后重氮化—偶合反應(yīng)氯氮卓、艾司唑侖、奧沙西泮

氯氮卓ChP（2005）[鑒別]（1）取本品約10mg，加鹽酸溶液（1→2）15ml，緩緩煮沸15分鐘，放冷，溶液顯芳香第一胺類的鑒別反應(yīng)（附錄Ⅲ）。氯氮卓和奧沙西泮，其反應(yīng)如下：3.水解后呈茚三酮反應(yīng)地西泮4.硫酸-熒光反應(yīng)

本類藥物溶于硫酸后，在紫外光（365nm）下，顯不同顏色的熒光。例如：

地西泮黃綠色

黃色氯氮卓黃色

紫色艾司唑侖+H2SO4亮綠色+稀硫酸天藍(lán)色硝西泮淡藍(lán)色

藍(lán)綠色奧沙西泮淡黃綠色地西泮ChP（2005）P179[鑒別]（1）取本品約10mg，加硫酸3ml，振搖使溶解，在紫外燈（365nm）下檢視，顯黃綠色熒光。5.分解產(chǎn)物的反應(yīng)

地西泮ChP（2005）[鑒別]（4）取本品20mg，用氧瓶燃燒法（附錄ⅦC）進(jìn)行有機破壞，以5%氫氧化鈉溶液5ml為吸收液，燃燒完全后，用稀硝酸酸化，并緩緩煮沸2分鐘，溶液顯氯化物的鑒別反應(yīng)（附錄Ⅲ）。本類藥物多為有機氯化合物，用氧瓶燃燒法破壞，顯氯化物反應(yīng)。Ch.P用于地西泮和三唑侖藥物的鑒別。5.氯化銅焰色反應(yīng)

分子結(jié)構(gòu)中含有氯元素的藥物，在銅網(wǎng)上燃燒發(fā)出CuCl2綠色火焰。此反應(yīng)藥典未用于本類藥物鑒別。

（二）紫外特征吸收和紅外吸收光譜

藥物名稱溶劑濃度（μg/ml）λmax（nm）A

地西泮0.5%硫酸甲醇溶液5242約0.51282

約0.23366氯氮卓鹽酸溶液(9→1000)7245,308阿普唑侖鹽酸溶液(9→1000)12264鹽酸氟西泮硫酸甲醇(1→36)10239±2,284±2比值1.95～2.50362±2氯硝西泮0.5%硫酸甲醇溶液10239±2,307±2奧沙西泮乙醇10229,315±2(較弱)

紅外吸收光譜:已用于地西泮、阿普唑侖、艾司唑侖、鹽酸氟西泮、氯硝西泮和奧沙西泮的鑒別。TLC法

1.常用的五種苯并二氮雜卓類藥物的TLC法

按常規(guī)法點樣10μl于硅膠G薄層板上，以苯-丙酮（3：2）為展開劑,飽和15min，用上行法展開15cm，揮發(fā)溶劑，用稀硫酸噴霧，于105℃干燥30min，置紫外燈下檢視熒光斑點，結(jié)果見表8-6。

2.酸水解產(chǎn)物的TLC法

利用苯并二氮雜卓類藥物經(jīng)酸水解產(chǎn)生的二苯甲酮衍生物進(jìn)行鑒別。由于不同的苯并二氮雜卓類藥物水解后可能會獲得相同的二苯甲酮衍生物，因此本法的專屬性較差。

三、特殊雜質(zhì)的檢查

（一）有關(guān)物質(zhì)的檢查

Ch.P收載的八種本類藥物，除氯氮卓外，其余均作此項檢查。其檢查方法除了三唑侖采用GC法外，其余均用TLC法進(jìn)行檢查。USP(24)和BP(2000)中對氯氮卓都規(guī)定了此項檢查，而且均用TLC法進(jìn)行檢查。1.地西泮中有關(guān)物質(zhì)的檢查地西泮在合成過程中因其副反應(yīng)，可能引入N-去甲基苯甲二氮卓及化學(xué)結(jié)構(gòu)不清的有關(guān)物質(zhì)，地西泮的原料及片劑可采用TLC高低濃度對比法

地西泮中有關(guān)物質(zhì)的檢查，檢查方法為：取本品，加丙酮制成1ml含100mg的溶液作為供試液；精密量取供試液適量，加丙酮制成1ml中含0.3mg的溶液，作為對照液。吸取上述兩溶液各5μl，分別點于同一硅膠板上，進(jìn)行檢查，其雜質(zhì)限量為

A.0.03%B.0.02%C.3%D.0.3%E.0.1%

2.氯氮卓中有關(guān)物質(zhì)的檢查

USP（24）TLC規(guī)定其分解產(chǎn)物2-氨基-5-氯-2-苯甲酮含量不得過0.01%；中間體7-氯-1，3-二氫-5-苯基-2H-1，4-苯并二氮雜卓-2-酮-4-氧化物含量不得過0.1%。氧化物、氨基物雜質(zhì)對照品法有關(guān)物質(zhì)參比雜質(zhì)對照品法BP（1998）TLC高低濃度對比法

3.氯氮卓中有關(guān)物質(zhì)的反相高效液相色譜法

色譜條件：色譜柱為250mm×2.6mm（i.d.）Nucleosil10C18柱；n=3000；流動相為甲醇-磷酸液(0.05mol/L)(60:40),40%氫氧化鈉溶液調(diào)pH為6.0；流速為1ml/min;紫外檢測器波長為254nm。

檢測結(jié)果：氨基物（Ⅱ）的tR為12.0min、氧化物（Ⅲ）的tR為4.3min，痕量雜質(zhì)（Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ）的tR為13.8、3.6、4.7min。

（二）降解產(chǎn)物的檢查地西泮注射液分解產(chǎn)生2-甲氨基-5-氯二苯甲酮HPLC主成分自身對照法1.峰面積歸一化法

取一定量供試品溶液進(jìn)樣，測定各雜質(zhì)及藥物的峰面積，計算各雜質(zhì)峰面積及其總和占總峰面積的百分率，不能超過限量。注意溶劑峰不應(yīng)計算在總峰面積內(nèi)。

優(yōu)點：不需雜質(zhì)對照品，簡便易行。

缺點：檢測波長處，各雜質(zhì)和藥物的吸收強度可能有差異，控制雜質(zhì)峰面積百分率不一定就是雜質(zhì)限量，準(zhǔn)確度差。

2.主成分自身對照法

雜質(zhì)峰面積與主成分峰面積相差懸殊時應(yīng)用。

方法

分別進(jìn)樣，測定供試品溶液中各雜質(zhì)峰面積及其總和，與對照溶液主成分峰面積比較，控制供試品中雜質(zhì)的量。

優(yōu)點：不需雜質(zhì)對照品，可同時控制各個雜質(zhì)及其總量限度

缺點：檢測波長處，各雜質(zhì)和藥物的吸收強度可能有差異，準(zhǔn)確度差

3.內(nèi)標(biāo)法測定供試品中雜質(zhì)的總量限度方法供試品→供試品溶液1圖1供試品+內(nèi)標(biāo)→供試品溶液2圖2

判斷若圖1無與內(nèi)標(biāo)峰保留時間相同的雜質(zhì)峰，則圖2中各雜質(zhì)峰面積之和應(yīng)小于內(nèi)標(biāo)物質(zhì)峰面積（溶劑峰不計在內(nèi)）若圖1有與內(nèi)標(biāo)峰保留時間相同的雜質(zhì)峰，則將圖2上的內(nèi)標(biāo)峰面積減去圖1中此雜質(zhì)峰面積，得內(nèi)標(biāo)物質(zhì)峰的校正面積；圖2中各雜質(zhì)峰面積加上圖1此雜質(zhì)峰面積，得各雜質(zhì)峰的校正總面積；各雜質(zhì)峰校正總面積應(yīng)小于內(nèi)標(biāo)物質(zhì)峰的校正面積。

4.內(nèi)標(biāo)法加校正因子測定供試品中某個雜質(zhì)的含量

準(zhǔn)確測定雜質(zhì)含量

方法內(nèi)標(biāo)+雜質(zhì)對照品→溶液，進(jìn)樣，測定，計算校正因子

供試品+內(nèi)標(biāo)→供試品溶液，進(jìn)樣，測定雜質(zhì)和內(nèi)標(biāo)峰面積或峰高，計算雜質(zhì)量

5.外標(biāo)法測定供試品中某個雜質(zhì)的量供試品→供試品溶液

雜質(zhì)對照品→對照品溶液進(jìn)樣，測定，計算雜質(zhì)的含量

缺點：不易準(zhǔn)確控制進(jìn)樣量，宜用定量環(huán)進(jìn)樣

一、非水溶液滴定法原料(一)基本原理當(dāng)HA酸性較強時，反應(yīng)不能定量完成，必須除去或降低HA的酸性，使反應(yīng)順利地完成。BH+A-+HClO4BH+ClO4+HA游離堿類鹽被置換出的弱酸因此，要根據(jù)不同情況采用相應(yīng)測定條件。四、含量測定

(二)一般方法供試品+冰醋酸10ml~30ml若供試品為氫鹵酸鹽再加5%醋酸汞的冰醋酸液3ml~5ml結(jié)果高氯酸滴定液滴定以空白試驗校正

(三)問題討論1.適用范圍主要用于Kb＜10-8的有機堿鹽的含量測定。對堿性較弱的雜環(huán)類藥物，只要選擇合適的溶劑、滴定劑和終點指示的方法，可使pKb為8～13的弱堿性藥物采用本法滴定。一般來說：Kb為10-8～10-10時，宜選冰醋酸作為溶劑；藥物的Kb為10-10～10-12時，宜選冰醋酸與醋酐的混合溶液；Kb＜10-12時，應(yīng)用醋酐作為溶劑。另外，在冰醋酸中加入不同量的甲酸，也能使滴定突躍顯著增大，使一些堿性極弱的雜環(huán)類藥物獲得滿意測定結(jié)果。

2.酸根的影響：無機酸類，在醋酸介質(zhì)中的酸性以下列排序遞減：高氯酸＞氫溴酸＞硫酸＞鹽酸＞硝酸消除HX干擾的方法：加Hg(Ac)2量不足終點不明顯，結(jié)果偏低。2B·HX+Hg(Ac)2→2B·HAc+HgX2

過量(1～3倍)不影響測定結(jié)果3.滴定劑的穩(wěn)定性非水溶液滴定法所用的溶劑為醋酸，具有揮發(fā)性，膨脹系數(shù)較大，溫度和貯存條件都影響滴定劑的濃度。若滴定樣品與標(biāo)定HClO4溶液時的溫度不一致，溫差未超過10℃時，應(yīng)將高氯酸滴定液的濃度用下列公式加以校正：

4.終點指示方法常用電位法和指示劑法。Ch.P收載的本類藥物大多采用結(jié)晶紫指示劑指示終點，少數(shù)采用電位法指示終點。(四)應(yīng)用實例

1.游離弱堿性藥物測定

異煙肼、尼可剎米、地西泮及氯氮卓等。基于這些藥物分子結(jié)構(gòu)中氮原子的弱堿性，可用非水溶液滴定法直接測定其含量。由于這些藥物的堿性強弱不同，測定時所采用溶劑、指示劑及其指示終點的方法也不盡相同。

藥物名稱取樣量(g)溶劑指示劑終點顏色

尼可剎米0.15冰醋酸10ml結(jié)晶紫藍(lán)綠色地西泮0.2冰醋酸、酸酐10ml結(jié)晶紫綠色氯氮卓0.3冰醋酸10ml結(jié)晶紫藍(lán)色

2.氫鹵酸鹽類藥物測定

當(dāng)這些藥物溶于冰醋酸時，由于氫鹵酸在冰醋酸中酸性較強，對測定有干擾，必須先加入過量的醋酸汞冰醋酸溶液，使其形成難以電離的鹵化汞，而