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文檔簡介

病料的觸片染色及細(xì)菌的分離培養(yǎng)

一.實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐c要求1.培養(yǎng)無菌操作的意識(shí)2.掌握病料的正確觸片及美蘭染色方法3.掌握病料細(xì)菌分離的操作步驟及其分區(qū)劃線二.實(shí)驗(yàn)儀器及材料1.儀器：恒溫箱、顯微鏡等2.實(shí)驗(yàn)材料：培養(yǎng)基：麥康凱培養(yǎng)基、胰蛋白胨大豆瓊脂（TSA）病料：豬肺、肝臟、脾臟等酒精燈、接種環(huán)、剪刀、接種環(huán)、鑷子等染色液：美蘭染色液三.內(nèi)容與方法1.病料觸片染色：灼燒剪刀、鑷子從病料上剪取小塊組織→→用新鮮切面在干凈載玻片上輕觸3～4個(gè)觸面→→自然干燥→→美蘭染色。2.美蘭染色步驟：觸片經(jīng)過火焰固定→→滴加適量美蘭染色液覆蓋涂面→→染色3分鐘→→晾干→→鏡檢→→菌體呈藍(lán)色。用滅菌的烙刀（趁熱）對病料的表面進(jìn)行滅菌→→用滅菌的剪刀在病料上滅過菌的地方剪一切口→→接種環(huán)滅菌，從切口取細(xì)菌→→無菌操作進(jìn)行平板分區(qū)劃線→→用過的剪刀、鑷子、烙刀、接種環(huán)等燒灼滅菌→→平板放入恒溫箱中18-24小時(shí)→→觀察培養(yǎng)后的細(xì)菌菌落性狀。3.病料中細(xì)菌的分離培養(yǎng)：4.分區(qū)劃線①右持接種環(huán)，燒灼冷卻后，蘸取劃線。②左手抓握瓊脂平板，在酒精燈火焰左上方，使平板面向火焰，右手將已沾的病料接種環(huán)在瓊脂表面分區(qū)劃線③劃線完畢，將接種環(huán)燒灼。④將平板倒扣并做標(biāo)記，培養(yǎng)。劃線及其結(jié)果分區(qū)劃線有單菌落劃線模示圖有單菌落四.結(jié)果及分析討論1病料觸片染色結(jié)果及其分析2細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果及其分析五.注意事項(xiàng)1病料觸片不易過厚2無菌意識(shí)3分區(qū)劃線時(shí)小心劃破培養(yǎng)基4病料正確處理5病料采集的時(shí)間，及運(yùn)輸保存六.作業(yè)1.撰寫試驗(yàn)報(bào)告，下次上實(shí)驗(yàn)課時(shí)交。2.考核：涂片老師看后，當(dāng)場打分（5分）3.衛(wèi)生：包括實(shí)驗(yàn)結(jié)束后實(shí)驗(yàn)及地面衛(wèi)生，顯微鏡等實(shí)驗(yàn)儀器及試劑擺放是否

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