第25次課 體內藥物分析

體內藥物分析第十三章一概述（一）體內藥物分析的概念體內藥物分析：是一門研究進入人或動物體內，存在于生物樣品（如體液、組織、器官和排泄物等）中的藥物及其代謝物和內源性物質的質與量變化規(guī)律的分析方法學。（二）體內藥物分析的意義

通過體內藥物分析結果可求得藥物動力學參數(shù)，可了解藥物在體內的吸收、分布、代謝、排泄情況。因此，體內藥物分析為藥物研究、制劑質量管理、臨床用藥等提供了數(shù)據(jù)和信息。另外，在用藥過量、誤服或服毒等中毒事件中，為解毒急救或判斷案情，也需要進行體內藥物分析；還有對一些興奮劑、致幻劑、鎮(zhèn)靜劑等藥物濫用現(xiàn)象也需要進行體內藥物進行檢測。返回首頁（三）體內藥物分析的特點1．干擾物質多：生物樣品中含有大量的內源性物，質如蛋白質、脂肪等，以及代謝物、結合物等，樣品一般均需經過分離、凈化后才能進行分析。2．樣品量少、不能重復取樣：生物樣品多數(shù)在特定條件下采集，無法再次取樣，且濃度低、變化幅度大，在測定前需濃縮、富集以適應分析方法要求。 3．被測成分濃度低：對分析方法的靈敏度及專屬性要求較高。4．藥物濃度監(jiān)測和藥物濫用：要求分析方法簡便、快速二常用樣品的種類、采集和貯存（一）樣品及采集1、血樣：

血漿：是在加肝素、枸櫞酸、草酸鹽等抗凝劑的全血經離心后分取，量約為全血的一半。血清：是血液室溫放置后，自然凝固析出的清液。采取：一般是靜脈取血、針刺手指、耳垂取血2、唾液：

優(yōu)點：樣品易得，取樣無痛苦，尤易為兒童接收。缺點：藥物濃度變化大采取：漱口15分鐘，收集自然流出或經舌在口內攪動流出的唾液。也可采取物理、化學方法刺激使唾液流出。

3、尿液：

尿樣測定主要用于藥物劑量回收研究、藥物腎清除率和生物利用度等研究，以及測定代謝物類型等。

優(yōu)點：采取簡便，取樣量大，受試者無痛苦。缺點：藥物濃度變化也大，需采集一定時間內的尿樣。采?。簞游飸诖x籠中進行，通過籠下漏斗接收。（二）樣品貯存取樣后最好立即進行分析，不能立即分析的，則短期內冷藏(4℃)，長期冰凍(-20℃)。尿液是很好的細菌生長液，若需收集24小時或更長時間的樣品或不能立即測定的，應置冰箱冷藏或加防腐劑（1%甲苯、過飽和氯仿）保存。

三生物樣品前處理（一）藥物在體內的存在形式游離型：原形藥物或代謝物綴合物：藥物或其代謝物與葡萄糖醛酸等結合結合物：藥物與蛋白質結合因此，在樣品測定之前要進行適當?shù)臉悠分苽?。包括分離、純化、濃集、必要時還需對待測組分進行化學衍生化。（二）樣品前處理的目的1、提高測定方法靈敏度、準確度和專屬性2、保護測定儀器不受生物樣品中類脂和蛋白質等的污染。（三）樣品的分離與純化包括樣品去除蛋白質、綴合物水解和待測組分的提取。1、去除蛋白質（1）加入與水相混溶的有機溶劑：乙腈、甲醇、乙醇、丙酮等。（2）加入中性鹽：飽和硫酸銨、硫酸鈉、枸櫞酸鹽等。（3）加入強酸：三氯醋酸、高氯酸、硫酸-鎢酸等。（4）加入金屬離子：CuSO4-Na2WO4等。（5）酶解法：常用枯草菌蛋白酶2、綴合物水解尿液中藥物多數(shù)呈綴合物狀態(tài)。（1）酸水解：適量鹽酸（2）酶水解：常用葡萄糖醛酸苷酶或硫酸酯酶或兩者混合。3、待測組分的提取提取目的：從大量共存物中分離出所需要的微量組分提取方法：多數(shù)藥物是親脂性的，可用有機溶劑提取出來，而大多數(shù)內源性雜質是強極性的，不被提取出。（1）液-液提取（LLE）：液-液提取中需注意的問題：①適當?shù)挠袡C溶劑：常用乙醚、氯仿等。②適當?shù)乃鄍H值：由藥物的pKa值確定，一般堿性藥物在堿性條件、酸