不同方法提取藍(lán)布正揮發(fā)油的gc-ms分析

不同方法提取藍(lán)布正揮發(fā)油的gc-ms分析

藍(lán)布正是薔薇科水生楊梅植物的南水楊梅。它是f.f。柳葉草。為多年生草本,生長于山谷草地或溝邊等濕潤的地方。主要分布于我國東北、華北至西南各省(自治區(qū))。性辛、苦、平。具有鎮(zhèn)痛、降壓、調(diào)經(jīng)、祛風(fēng)除濕的功效。藍(lán)布正作為貴州苗藥,僅周欣等用水蒸氣蒸餾(SD)法對其揮發(fā)油化學(xué)成分進(jìn)行過研究,用同時蒸餾萃取(SDE)和微波萃取(MAE)的揮發(fā)油成分研究尚未見報道。本文采用SD法、SDE法和MAE法對藍(lán)布正揮發(fā)油進(jìn)行提取,所得揮發(fā)油進(jìn)行GC-MS圖譜分析,并對3種方法提取的揮發(fā)油成分進(jìn)行比較。1u3000熱電套裝HP6890/HP5973GC-MS聯(lián)用儀(美國惠普公司);家用微波爐;同時蒸餾萃取設(shè)備(試樣瓶;萃取瓶;98-1-B型電熱套;DK-9-I型恒溫水浴鍋),瑞士BUCHI公司R-210型旋轉(zhuǎn)薄膜蒸發(fā)儀,蒸餾水,正己烷、無水硫酸鈉為分析純。藍(lán)布正鮮草10月份購于貴陽市藥材市場,經(jīng)貴陽中醫(yī)學(xué)院何順治老師鑒定為薔薇科水楊梅屬植物南水楊梅GeumjaponicumThunb.var.chinenseF.Bolle的全草。2gc/ms條件氣相色譜條件:色譜柱為HP-5MS(5%PhenylMethylSiloxane,30m×0.25mm×0.25μm)彈性石英毛細(xì)管柱;采用程序升溫:50℃保持2min,以4℃·min-1升至180℃,然后以9℃·min-1升至290℃,恒溫5min;氣化室溫度250℃載氣為高純氦氣(99.999%);柱前壓51.98kPa;載氣流量1.0mL·min-1;進(jìn)樣量1μL;分流比40:1。質(zhì)譜條件:離子源為EI源;離子源溫度230℃;四極桿溫度150℃;電子能量70eV;發(fā)射電流34.6μA;倍增器電壓1.294kV;接口溫度280℃;溶劑延遲5min;質(zhì)量范圍10～550u。3提取方法3.1特殊氣味油物的制備稱取藍(lán)布正鮮草500g切碎于1000mL圓底燒瓶中,水蒸氣蒸餾6h后,得到特殊氣味的淺黃色油狀物,用無水硫酸鈉干燥除水,過濾。得油率為0.08%。3.2萃取物的制備稱取藍(lán)布正鮮草500g切碎于1000mL圓底燒瓶中,在自制的同時蒸餾萃取設(shè)備中加入5mL正己烷作為萃取劑,同時蒸餾萃取6h,所得萃取物用無水硫酸鈉干燥除水,過濾。得油率為0.13%。3.3微波萃取處理稱取藍(lán)布正鮮草190g切碎于500mL圓底燒瓶中,加入正己烷,在輻射時間200s、微波功率為700W的條件下進(jìn)行微波萃取2次,正己烷每次用量為400mL,過濾。殘渣用正己烷洗滌3次,每次150mL,與濾液合并,減壓濃縮回收正己烷,用無水硫酸鈉干燥除水,過濾。得油率為0.15%。4gc-ms鑒定取以不同方法提取的藍(lán)布正揮發(fā)油適量,加40倍的乙醚,混勻,各取1μL用氣相色譜-質(zhì)譜儀進(jìn)行分析鑒定。通過HPMSD化學(xué)工作站數(shù)據(jù)處理系統(tǒng),對總離子流圖中的各峰經(jīng)質(zhì)譜掃描后得質(zhì)譜圖,采用Nist98和Wiley275.L譜庫進(jìn)行檢索,按峰面積歸一化法進(jìn)行計算求得各化學(xué)成分在揮發(fā)油中的相對含量。結(jié)果見表1,各離子流圖見圖1-A,B,C。5討論5.1揮發(fā)油的組成通過GC-MS分析,SD法所得的藍(lán)布正揮發(fā)油共分離出140個峰,經(jīng)過計算機檢索和核對質(zhì)譜庫,鑒定出53個成分,占其揮發(fā)油總含量的88.11%;SDE法所得的揮發(fā)油共分離出90個峰,鑒定出31個成分,占其揮發(fā)油總含量的88.40%;MAE法所得的揮發(fā)油共分離出180個峰,鑒定出36個成分,占其揮發(fā)油總含量的58.25%。由表1可知,3種方法提取的揮發(fā)油共鑒定出58種成分,其中有18種成分3種方法都能提取到。5.2提取揮發(fā)油的成分有由表1可知,3種提取方法對藍(lán)布正揮發(fā)油提取幾個含量較高的主要成分基本相同,但有差異。SD法提取的揮發(fā)油主要成分是丁香酚(37.28%)、桃金娘醛(21.58%)、桃金娘烯醇(6.37%)、桃金娘烷醇(5.70%)、1,8-桉葉素(4.30%)、桃金娘烯醛(1.42%)、水芹醛(1.28%),SDE法提取的揮發(fā)油主要成分是丁香酚(32.40%)、桃金娘醛(25.77%)、桃金娘烯醇(8.24%)、桃金娘烷醇(5.89%)、1-辛烯-3-醇(1.76%)、桃金娘烯醛(1.43%)、水芹醛(1.33%),SD法和SDE法所提取的揮發(fā)油主要成分比較相似。MAE法提取的揮發(fā)油主要成分是丁香酚(23.03%)、桃金娘醛(1.64%)、桃金娘烯醇(1.36%)、棕櫚酸(1.59%)及各種烷烴(24.22%)。前2種方法提取的丁香酚的含量能達(dá)到30%以上,桃金娘醛含量能達(dá)到20%以上,桃金娘烯醇的含量也達(dá)到了6%以上,MAE法提取的丁香酚含量能達(dá)到20%以上,桃金娘醛和桃金娘烯醇的量只有1%,但MAE法提取的各類烷烴含量很高。5.3化合物檢測結(jié)果參照文獻(xiàn),L-芳樟醇、桃金娘烯醇、桃金娘烷醇、丁香酚、α-金合歡烯、棕櫚酸、植醇等化合物都能提取到,同時還鑒定出蒎烯、水芹烯、松油酮、松油醇、香草醇、橙花叔醇、α-甜沒藥萜醇等10多種化合物。而文獻(xiàn)上報道的含量較高的11,14,17-二十碳三烯酸甲酯、亞油酸、石竹烯氧化物等都沒有檢測到。這可能與藍(lán)布正的生長環(huán)境,采收季節(jié)及提取方式等不同有關(guān)。5.4揮發(fā)性成分的提取方法首次將藍(lán)布正用SDE法和MAE法提取其揮發(fā)油成分,并對3種方法提取的揮發(fā)油成分進(jìn)行比較,SD法和SDE法提取的化學(xué)成分相似,但有差異。MAE法雖然提取時間短,與SD法和SDE法提取的化學(xué)成分有較大差別,并提取出了SD法和SDE法無法提取出來的高沸點的揮發(fā)性成分。3種方法結(jié)合可以使揮發(fā)性成分的種類和量提取完全。SD法作為揮發(fā)油提取的傳統(tǒng)方法,提取時間較長,揮發(fā)油吸附于管壁上損失較大;SDE法是揮發(fā)油溶于有機溶劑的溶液,體積較大,便于操作,避免了通常蒸餾法提取精油時在器壁上吸附損失,但提取時間也較長;MAE法是利