藍(lán)布正的藥理作用及急性毒性試驗(yàn)

藍(lán)布正的藥理作用及急性毒性試驗(yàn)

蘭布是薔薇科水生楊梅屬植物的一種溫和毛綠植物（gypnb.var.colu）和路綠植物jacq）。它是貴州苗族人民常用的材料。據(jù)報(bào)道藍(lán)布正主要功能為益氣補(bǔ)血、養(yǎng)陰潤(rùn)肺、壯陽(yáng)補(bǔ)虛等,民間廣泛用以治療頭昏、頭痛、體虛及風(fēng)寒感冒等病癥。藍(lán)布正已收載入《貴州省中藥材、民族藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》(2003年版);在《貴州省藥品標(biāo)準(zhǔn)》(1994年版)中有3個(gè)成方制劑(“圣寧感冒液”、“風(fēng)寒感冒膠囊”、“安腦舒膠囊”)中應(yīng)用藍(lán)布正作原料藥。筆者曾對(duì)藍(lán)布正鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜、抗驚厥藥理作用及急性毒性試驗(yàn)進(jìn)行研究報(bào)告。為進(jìn)一步探討藍(lán)布正藥理作用,本實(shí)驗(yàn)選擇對(duì)免疫功能影響及抗炎等指標(biāo)對(duì)藍(lán)布正進(jìn)行了研究,其結(jié)果提示藍(lán)布正對(duì)免疫功能有增強(qiáng)作用,為臨床用藥提供了藥理學(xué)研究依據(jù)。1實(shí)驗(yàn)材料和設(shè)備1.1藍(lán)布正水提液制備藥材采自貴陽(yáng)孟關(guān),經(jīng)我院藥學(xué)系何順志研究員鑒定為柔毛路邊青GeumjaponicumThunb.Var.chinenseF.Bolle。藍(lán)布正水提液制備:將全草晾干、粉碎,取適量用水提取,收集濾液,濃縮后徐徐加入乙醇攪拌,使之成為70%的乙醇液,靜置過(guò)夜后離心棄去沉淀,取上清液水浴揮干成浸膏,收得率為4.85%,臨用時(shí)配制成一定濃度的水溶液(AE-G)供試。劑量分別采用高、中、低劑量組,對(duì)照組用等容積的生理鹽水(NS)。1.2男性,男性KM小白鼠,體重20±2g;和13±2g,雌雄均用。由貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供,動(dòng)物合格證號(hào):SCXK(黔)2002-0001。1.3儀器721-分光光度計(jì),上海第三分析儀器廠;HH-S-21-6電熱恒溫水浴箱,北京長(zhǎng)安科學(xué)儀器廠。2方法和結(jié)果2.1不同藥物對(duì)小鼠體內(nèi)吸收nd將18～22g小鼠40只,隨機(jī)分成4組,每組10只;給藥組分別按20g/kg、10g/kg、5g/kg不同濃度灌胃給予AE-G,對(duì)照組給予等容積的生理鹽水,每天一次,連續(xù)7天,于最后一天給藥1小時(shí)后,從尾靜脈注射印度墨汁0.1ml/10g,然后分別于2min、10min從小鼠眼球后靜脈叢取血20μl,加入預(yù)置有2ml體積分?jǐn)?shù)為0.1%的碳酸氫鈉溶液的試管中,搖勻,在波長(zhǎng)600nm處測(cè)定光密度值(OD值);最后斷頸處死小鼠,分別稱(chēng)取肝、脾質(zhì)量,并計(jì)算出吞噬指數(shù)K值、校正吞噬指數(shù)α值。見(jiàn)表1。各用藥組數(shù)據(jù)與對(duì)照組采用t檢驗(yàn)比較,其K值、α值增加表示該藥物能提高小鼠巨噬細(xì)胞的吞噬指數(shù)和校正吞噬指數(shù),有免疫增強(qiáng)作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示AE-G各劑量組與對(duì)照組比較均有差異,尤以20g/kg組和10g/kg組有顯著性差異(P<0.05),提示AE-G各劑量組均能明顯增強(qiáng)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬能力。2.2兩組大鼠前、后斷頸參數(shù)比較實(shí)驗(yàn)選擇幼齡小鼠40只,體重13±2g,雌雄兼用,分組、給藥方法及給藥時(shí)間同前。于最后一天給藥1小時(shí)后斷頸處死,取其胸腺、脾臟稱(chēng)重,并計(jì)算出指數(shù)。見(jiàn)表2。各劑量組與對(duì)照組比較,經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理均有顯著性差異(P<0.05)。提示AE-G灌胃能明顯提高小鼠胸腺指數(shù)和脾指數(shù)。2.3小鼠體內(nèi)溶血素含量的檢測(cè)取體重20±2g小鼠40只,分組、給藥方法同前。按文獻(xiàn)方法操作,于給藥的第一天,給動(dòng)物腹腔注射5%的雞紅細(xì)胞,0.2ml/只,刺激溶血素(IgM)的產(chǎn)生,在最后一天給藥1小時(shí)后,將小鼠斷頸取血,以3000r/min離心,10min,取血清再加入5%的雞紅細(xì)胞,10%補(bǔ)體各0.5ml,37℃水浴孵育30min后,離心取上清液,用721型分光光度計(jì)于540nm處測(cè)OD值,計(jì)算出溶血素(HC)含量。見(jiàn)表3。其溶血素的含量可綜合反應(yīng)抗體IgM的數(shù)量及作用,即反應(yīng)藥物對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體液免疫功能的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,給藥組與對(duì)照組比較,無(wú)論是高、中、低劑量組均有顯著性差異(P<0.05),但不同劑量的組間差異不明顯,說(shuō)明藍(lán)布正對(duì)小鼠體液免疫有其促進(jìn)作用。2.4水腫抑制率測(cè)定取小鼠40只,體重20±2g,分組及給藥方法同前,于末次灌胃給藥后30min,每只小鼠右耳內(nèi)外兩面均勻涂抹0.05ml二甲苯進(jìn)行攻擊,致炎2h后拉脫頸椎處死,以8mm打孔器取左右耳片,稱(chēng)重,兩耳片重量差為腫脹度。計(jì)算腫脹抑制率,結(jié)果見(jiàn)表4。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,各給藥組與對(duì)照組比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。提示AE-G對(duì)二甲苯致小鼠耳廓腫炎癥無(wú)明顯對(duì)抗作用。2.5皮下注射和地塞米松對(duì)大鼠炎癥增殖期的影響取小鼠40只,仍隨機(jī)分為四組,取消中劑量組,增加了陽(yáng)性對(duì)照組(地塞米松組),陰性對(duì)照組仍為生理鹽水,給藥方法同前,給藥時(shí)間為14天。實(shí)驗(yàn)采用動(dòng)物局部皮下植入棉球的方法,產(chǎn)生與炎癥后期病理變化相似的肉芽增生,實(shí)驗(yàn)可反應(yīng)藥物對(duì)炎癥增殖期有無(wú)抑制效應(yīng)。陽(yáng)性對(duì)照組用藥為地塞米松,以35mg/kg劑量皮下注射,隔日一次給藥。結(jié)果見(jiàn)表5。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:無(wú)論是高、低劑量組與陰性對(duì)照組比較均無(wú)顯著性差異(P>0.05),而與陽(yáng)性對(duì)照組相比則有明顯差異(P<0.05)。說(shuō)明AE-G對(duì)增殖期炎癥效果不明顯。3血清溶血素igm抗體水平3.1試驗(yàn)研究結(jié)果表明,藍(lán)布正既能顯著提高小鼠巨噬細(xì)胞的吞噬能力,增強(qiáng)小鼠非特異免疫功能;又能明顯提高小鼠胸腺指數(shù)和脾指數(shù);明顯增加小鼠脾細(xì)胞分泌溶血素的能力,提高正常小鼠血清溶血素IgM抗體水平,增強(qiáng)小鼠特異免疫功能。提示藍(lán)布正水提液對(duì)非特異免疫功能和體液免疫功能有促進(jìn)作用。這為苗族及民間傳統(tǒng)用以治療頭昏頭暈、感冒頭痛等癥提供了一定藥理實(shí)驗(yàn)依據(jù)。3.2藍(lán)布正在《貴州省藥品標(biāo)準(zhǔn)》(1994年版)中已有3個(gè)成方制劑(“圣寧感冒液