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文檔簡介

實(shí)驗(yàn)四病原性球菌的檢驗(yàn)(一）

目的要求：4學(xué)時熟悉病原性球菌的分離鑒定程序及臨床意義；掌握血瓊脂平板的制備方法；掌握常見球菌的形態(tài)特點(diǎn)和鑒定方法；熟悉鑒定細(xì)菌的動物試驗(yàn)；實(shí)驗(yàn)內(nèi)容：1.病原性球菌（錄像）；2.制備血瓊脂平板；3.血瓊脂平板細(xì)菌接種；4.肺炎鏈球菌的Optochin敏感試驗(yàn)；1.病原性球菌（錄像）注意點(diǎn)：（1）每種病原性球菌的形態(tài)染色特征；（2）每種病原性球菌的診斷要點(diǎn)；病原性球菌的診斷程序膿汁標(biāo)本

革蘭染色血瓊脂平板培養(yǎng)生化特征、致病性鑒定藥敏，出報告膽汁溶菌試驗(yàn)觸酶試驗(yàn)?zāi)堂冈囼?yàn)Optochin試驗(yàn)染色性、形態(tài)、排列色素溶血其它菌落特征初步鑒定葡萄球菌、鏈球菌、肺炎球菌、奈瑟菌葡萄球菌鏈球菌、肺炎C葡萄球菌金黃色葡萄球菌肺炎球菌肺炎球菌2.制備血瓊脂平板制備過程：1.熔化已高壓滅菌的固體培養(yǎng)基；2.冷卻50℃左右加入預(yù)熱的10%脫纖維羊血，混勻；3.無菌傾注平皿,充分冷卻凝固備用。

每人1個血平皿3.血瓊脂平板細(xì)菌接種菌種：金黃色葡萄球菌；表皮葡萄球菌；腐生葡萄球菌；草綠色鏈球菌；化膿性鏈球菌；肺炎鏈球菌方法與步驟：

1.每人1個平皿，每平皿接種一種菌，每桌6種菌；

2.分區(qū)劃線接種：肺炎鏈球菌盡量搖勻多取菌

3.35℃,18-24h

。注意：無菌操作！原理：

Optochin（奧普托欣）是鹽酸乙基氫化羥基奎寧的商品名。對肺炎鏈球菌有特異性抑制作用，在平板上可形成抑菌圈。抑菌圈直徑大于14mm為敏感。主要用于肺炎鏈球菌和其它鏈球菌的鑒別。4.Optochin敏感試驗(yàn)方法：

（1）平皿標(biāo)記分區(qū)（可設(shè)草綠色鏈球菌對照）；（2）無菌棉簽均勻涂抹血平皿；

(3)貼5ug奧普托欣照片，輕壓貼牢；（4）35℃,18-24h測量抑菌圈大?。唬?）判斷敏感性標(biāo)記涂菌貼藥片孵育實(shí)驗(yàn)

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