改組織學緒論(7版)

組織學與胚胎學

第一章組織學緒論目的要求

1．掌握組織的基本概念和類型，細胞、組織、器官、系統(tǒng)的關系。2．熟悉組織學常用研究技術的基本原理及其應用。3．了解組織學研究內(nèi)容和學習這門課程的目的。一、組織學的研究內(nèi)容組織學（histology）：研究機體微細結構及其相關功能的科學組織學常用量度單位微米(1μm=0.001mm)納米(1nm=0.001μm)

消化系統(tǒng)

食管上皮組織肌組織結締組織復層扁平上皮涂片組織學研究內(nèi)容細胞細胞外基質組織上皮組織結締組織肌肉組織神經(jīng)組織器官和系統(tǒng)人體意義：

只有深入了解機體的結構才可能透徹闡明其功能。掌握組織學的基本知識和技能,是將來學好生理學和病理學的前提。二、組織胚胎學研究技術問題

解決方法

觀察對象太小

放大

顯微鏡

觀察對象無色，無反差

染色（HE染色）

觀察對象生化成分不同

細胞化學、免疫組織化學

觀察對象是活體

培養(yǎng)(一)光鏡技術分辨率(Resolution)是指能夠分辨相鄰兩點之間的最小距離。LM的分辨率約為0.2μm。1.切片(Section):將組織切薄使光線可以透過。a.固定(Fixation):為保存新鮮組織的微觀結構，盡快將組織浸入到酒精，甲醛等固定劑中。b.石蠟包埋(Paraffinembedding):*脫水(Dehydration):用濃度逐漸升高的酒精(70~100%)將組織中的水完全置換出來。*透明(Clearing):用二甲苯完全置換出酒精。*浸蠟(Infiltration):在60~62?C時，用液態(tài)石蠟完全置換出二甲苯。室溫時石蠟凝固成固態(tài)，內(nèi)含待切組織。c.切片:用切片機將組織切成1~20μm厚的蠟片，然后將其放到溫水上，待其完全展開后，裱到有粘附劑的載玻片上。2.染色(Staining):染料可以將微觀結構顯示不同的顏色以便觀察鑒別。在染色前，需要脫蠟入水，因為染料是水溶性的。HE染色：蘇木精（Hematoxylin）伊紅（Eosin）染色堿性染料將嗜堿性物質（本身酸性）染成藍色細胞核中的DNA、RNA細胞質中的RNA酸性染料將嗜酸性物質（本身堿性）染成紅色細胞質、膜性結構（線粒體、溶酶體、滑面內(nèi)質網(wǎng)）H.E.染色切片在染色后，重新進入酒精和二甲苯，最后用中性樹膠封片，以便長期保存。*切片:固定→梯度酒精→二甲苯→石蠟。*染色:石蠟→二甲苯→梯度酒精→水。*保存:水→梯度酒精→二甲苯→中性樹膠。其他染色法:硝酸銀→神經(jīng)細胞、活體染色、特殊染色其他切片技術:火棉膠包埋,冰凍切片,涂片,鋪片,磨片。銀染色方法親銀性(直接染色)嗜銀性(+還原劑)硝酸銀溶液直接染色(或+還原劑)銀染色法活體染色特殊染色

H&E染色的中等動靜脈不同的染色方法，其結果不同。醛復紅染色的中等動靜脈鋪片涂片

smear磨片(二)電鏡技術（ElectronMicroscopy）透射電鏡（Transmissionelectronmicroscopy

TEM）用途:觀察細胞內(nèi)部結構掃描電鏡（ScanningelectronmicroscopySEM）用途:觀察組織或細胞表面的立體結構

透射電子顯微鏡

Transmissionelectronmicroscope觀察細胞內(nèi)部結構以電子束穿透樣品,經(jīng)聚合放大后,顯像于熒光屏上進行觀察與攝片

掃描電鏡（Scanningelectronmicroscope,SEM）

觀察細胞或組織的表面結構組織塊經(jīng)取材固定后,干燥,在標本表面先后噴一層碳膜和合金膜,鏡下掃描成像透射電鏡電子密度高:當電子束投射到密度大吸附重金屬多的結構時,電子被散射的多,因此,射落到熒光屏上的電子少而呈暗像,電鏡照片呈黑或深灰色,稱為電子密

度高。反之稱為電子密度低。影像較黑稱電子密度高反之稱電子密度低(三)組織化學術組織化學術:為應用化學、物理、生物化學、免疫學或分子生物學原理和技術,與組織學技術相結合而產(chǎn)生的技術,能在組織切片定性、定位、定量地顯示某種物質的存在與否以及分布狀態(tài)。細胞