生物化學重點大題

-.z.1．簡述Chargaff定律的主要容。答案：(1〕不同物種生物的DNA堿基組成不同，而同一生物不同組織、器官的DNA堿基組成一樣。(2〕在一個生物個體中，DNA的堿基組成并不隨年齡、營養(yǎng)狀況和環(huán)境變化而改變。(3〕幾乎所有生物的DNA中，嘌呤堿基的總分子數(shù)等于嘧啶堿基的總分子數(shù)，腺嘌呤(A)和胸腺嘧啶(T)的分子數(shù)量相等，鳥嘌呤(G)和胞嘧啶(C)的分子數(shù)量相等，即A＋G=T＋C。這些重要的結論統(tǒng)稱為Chargaff定律或堿基當量定律。2．簡述DNA右手雙螺旋構造模型的主要容。答案：DNA右手雙螺旋構造模型的主要特點如下：(1〕DNA雙螺旋由兩條反向平行的多核苷酸鏈構成，一條鏈的走向為5′→3′，另一條鏈的走向為3′→5′;兩條鏈繞同一中心軸一圈一圈上升，呈右手雙螺旋。(2〕由脫氧核糖和磷酸構成的骨架位于螺旋外側，而堿基位于螺旋側。(3〕兩條鏈間A與T或C與G配對形成堿基對平面，堿基對平面與螺旋的虛擬中心軸垂直。(4〕雙螺旋每旋轉(zhuǎn)一圈上升的垂直高度為3.4nm(即34?〕，需要10個堿基對，螺旋直徑是2.0nm。(5〕雙螺旋外表有兩條深淺不同的凹溝，分別稱為大溝和小溝。3．簡述DNA的三級構造。答案：在原核生物中，共價閉合的環(huán)狀雙螺旋DNA分子，可再次旋轉(zhuǎn)形成超螺旋，而且天然DNA中多為負超螺旋。真核生物線粒體、葉綠體DNA也是環(huán)形分子，能形成超螺旋構造。真核細胞核染色體是DNA高級構造的主要表現(xiàn)形式，由組蛋白H2A、H2B、H3、H4各兩分子形成組蛋白八聚體，DNA雙螺旋纏繞其上構成核小體，核小體再經(jīng)多步旋轉(zhuǎn)折疊形成棒狀染色體，存在于細胞核中。4．簡述tRNA的二級構造與功能的關系。答案：的tRNA都呈現(xiàn)三葉草形的二級構造，根本特征如下：(1〕氨基酸臂，由7bp組成，3′末端有-CCA-OH構造，與氨基酸在此縮合成氨基酰-tRNA，起到轉(zhuǎn)運氨基酸的作用;(2〕二氫尿嘧啶環(huán)(DHU、I環(huán)或D環(huán)〕，由8～12個核苷酸組成，以含有5，6-二氫尿嘧啶為特征;(3〕反密碼環(huán)，其環(huán)中部的三個堿基可與mRNA的三聯(lián)體密碼子互補配對，在蛋白質(zhì)合成過程中可把正確的氨基酸引入合成位點;(4)額外環(huán)，也叫可變環(huán)，通常由3～21個核苷酸組成;(5)TψC環(huán)，由7個核苷酸組成環(huán)，和tRNA與核糖體的結合有關。5．簡述真核生物mRNA3′端polyA尾巴的作用。答案：真核生物mRNA的3′端有一段多聚腺苷酸(即polyA)尾巴，長約20～300個腺苷酸。該尾巴與mRNA由細胞核向細胞質(zhì)的移動有關，也與mRNA的半衰期有關;研究發(fā)現(xiàn)，polyA的長短與mRNA壽命呈正相關，剛合成的mRNA壽命較長，“老〞的mRNA壽命較短。6．簡述分子雜交的概念及應用。答案：把不同來源的DNA(RNA〕鏈放在同一溶液中進展熱變性處理，退火時，它們之間*些序列互補的區(qū)域可以通過氫鍵重新形成局部的DNA-DNA或DNA-RNA雙鏈，這一過程稱為分子雜交，生成的雙鏈稱雜合雙鏈。DNA與DNA的雜交叫做Southern雜交，DNA與RNA雜交叫做Northern雜交。核酸雜交已被廣泛應用于遺傳病的產(chǎn)前診斷、致癌病原體的檢測、癌基因的檢測和診斷、親子鑒定和動植物檢疫等方面。7．DNA熱變性有何特點？答案：將DNA溶液加熱到70～100℃幾分鐘后，雙螺旋構造即發(fā)生破壞，氫鍵斷裂，兩條鏈彼此分開，形成無規(guī)則線團狀，此過程為DNA的熱變性。有以下特點：變性溫度圍很窄;260nm處的紫外吸收增加;粘度下降;生物活性喪失;比旋度下降;酸堿滴定曲線改變。

8.試述以下因素如何影響DNA的復性過程：(1〕陽離子的存在;(2〕低于Tm的溫度;(3〕高濃度的DNA鏈。答案：(1〕陽離子可中和DNA分子中磷酸基團的負電荷，減弱DNA鏈間的靜電作用，促進DNA的復性;(2〕低于Tm的溫度可以促進DNA復性;(3〕DNA鏈濃度增高可以加快互補鏈隨機碰撞的速度和時機，從而促進DNA復性。9．對一雙鏈DNA而言，假設一條鏈中(A＋G)/(T＋C)=0.8，則：

(1〕互補鏈中(A＋G)/(T＋C)=？

(2〕在整個DNA分子中(A＋G)/(T＋C)=？

(3〕假設一條鏈中(A＋T)/(G＋C)=0.8，則互補鏈中(A＋T)/(G＋C)=？

(4〕在整個DNA分子中(A＋T)/(G＋C)=？答案：(1〕互補鏈中(A＋G)/(T＋C)=1/0.8=1.25

(2〕在整個DNA分子中，因為A=T，G=C，所以，A＋G=T＋C，(A＋G)/(T＋C)=1

(3〕互補鏈中(A＋T)/(G＋C)=0.8

(4〕整個DNA分子中(A＋T)/(G＋C)=0.810.在pH7.0，0.165mol/LNaCl條件下，測得*一組織DNA樣品的Tm為89.3℃，求出四種堿基百分組成。答案：大片段DNA的Tm計算公式為:(G＋C)%=(Tm-69.3〕×2.44%，小于20bp的寡核苷酸的Tm的計算公式為:Tm=4(G＋C)＋2(A＋T)。

(G＋C)%=(Tm–69.3)×2.44%=(89.3-69.3)×2.44%=48.8%，則G%=C%=24.4%(A＋T)%=1-48.8%=51.2%，A%=T%=25.6%]11.為什么說蛋白質(zhì)是生命活動所依賴的重要物質(zhì)根底？答案：1.①論述蛋白質(zhì)的催化、代調(diào)節(jié)、物質(zhì)運輸、信息傳遞、運動、防御與進攻、營養(yǎng)與貯存、保護與支持等生物學功能。②綜上所述，蛋白質(zhì)幾乎參與生命活動的每一個過程，在錯綜復雜的生命活動過程中發(fā)揮著極其重要的作用，是生命活動所依賴的重要物質(zhì)根底。沒有蛋白質(zhì)，就沒有生命。12．谷胱甘肽分子在構造上有何特點？有何生理功能？答案：

谷胱甘肽(GSH〕是由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸組成的三肽。GSH的第一個肽鍵與一般肽鍵不同，是由谷氨酸以γ-羧基而不是α-羧基與半胱氨酸的α-氨基形成肽鍵。GSH分子中半胱氨酸的巰基是該化合物的主要功能基團。GSH的巰基具有復原性，可作為體重要的復原劑保護體蛋白質(zhì)或酶分子中巰基免遭氧化，使蛋白質(zhì)或酶處在活性狀態(tài)。此外，GSH的巰基還有嗜核特性，能與外源的嗜電子毒物如致癌劑或藥物等結合，從而阻斷這些化合物與機體DNA、RNA或蛋白質(zhì)結合，以保護機體免遭毒物損害。13.簡述蛋白質(zhì)變性與沉淀的關系。答案：

蛋白質(zhì)沉淀和變性的概念是不同的。沉淀是指在*些因素的影響下，蛋白質(zhì)從溶液中析出的現(xiàn)象;而變性是指在變性因素的作用下蛋白質(zhì)的空間構造被破壞，生物活性喪失，理化性質(zhì)發(fā)生改變。變性的蛋白質(zhì)溶解度明顯降低，易結絮、凝固而沉淀;但是沉淀的蛋白質(zhì)卻不一定變性，如加熱引起的蛋白質(zhì)沉淀是由于蛋白質(zhì)熱變性所致，而硫酸銨鹽析所得蛋白質(zhì)沉淀一般不會變性。14.概述蛋白質(zhì)一級構造測定的一般程序。答案：

蛋白質(zhì)一級構造測定的一般程序為：①測定蛋白質(zhì)(要求純度必須到達97%以上〕的相對分子質(zhì)量和它的氨基酸組成，推測所含氨基酸的大致數(shù)目。②測定多肽鏈N-末端和C-末端的氨基酸，從而確定蛋白質(zhì)分子中多肽鏈的數(shù)目。然后通過對二硫鍵的測定，查明蛋白質(zhì)分子中二硫鍵的有無及數(shù)目。如果蛋白質(zhì)分子中多肽鏈之間含有二硫鍵，則必須拆開二硫鍵，并對不同的多肽鏈進展別離提純。③用裂解點不同的兩種裂解方法(如胰蛋白酶裂解法和溴化氰裂解法)分別將很長的多肽鏈裂解成兩套較短的肽段。④別離提純所產(chǎn)生的肽段，用蛋白質(zhì)序列儀分別測定它們的氨基酸序列。⑤應用肽段序列重疊法確定各種肽段在多肽鏈中的排列次序，即確定多肽鏈中氨基酸排列順序。⑥如果有二硫鍵，需要確定其在多肽鏈中的位置。15.試論蛋白質(zhì)一級構造與空間構造的關系。答案：①以RNA酶變性與復性實驗、有活性牛胰島素的人工合成為例證實蛋白質(zhì)一級構造決定其空間構造。②Anfinsen發(fā)現(xiàn)蛋白質(zhì)二硫鍵異構酶(PDI〕能加速蛋白質(zhì)正確二硫鍵的形成;如RNA酶復性的過程是十分緩慢的，有時需要幾個小時，而PDI在體外能幫助變性后的RNA酶在2min復性。分子伴侶在細胞能夠幫助新生肽鏈正確組裝成為成熟的蛋白質(zhì)。由此可見，蛋白質(zhì)空間構造的形成既決定于其一級構造，也與分子伴侶、蛋白質(zhì)二硫鍵異構酶等助折疊蛋白的助折疊作用密不可分。16.概述凝膠過濾法測蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量的原理。答案：層析過程中，混合樣品經(jīng)過凝膠層析柱時，各個組分是按分子量從大到小的順序依次被洗脫出來的;并且蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量的對數(shù)和洗脫體積之間呈線性關系。因此，將幾種相對分子質(zhì)量(應小于所用葡聚糖凝膠的排阻極限〕的標準蛋白質(zhì)混合溶液上柱洗脫，記錄各種標準蛋白質(zhì)的洗脫體積;然后，以每種蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量的對數(shù)為縱坐標，以相對應的洗脫體積為橫坐標，繪制標準曲線;再將待測蛋白質(zhì)溶液在上述一樣的層析條件下上柱洗脫，記錄其洗脫體積，通過查標準曲線就可求得待測蛋白質(zhì)的相對分子質(zhì)量。17.概述SDS法測蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量的原理。答案：(1〕聚丙烯酰胺凝膠是一種凝膠介質(zhì)，蛋白質(zhì)在其中的電泳速度決定于蛋白質(zhì)分子的大小、形狀和所帶電荷數(shù)量。(2〕十二烷基硫酸鈉(SDS〕可與蛋白質(zhì)大量結合，結合帶來兩個后果：①由于SDS是陰離子，故使不同的亞基或單體蛋白質(zhì)都帶上大量的負電荷，掩蓋了它們自身所帶電荷的差異;②使它們的形狀都變成桿狀。這樣，它們的電泳速度只決定于其相對分子質(zhì)量的大小。(3〕蛋白質(zhì)分子在SDS凝膠中的移動距離與指示劑移動距離的比值稱相對遷移率，相對遷移率與蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量的對數(shù)呈線性關系。因此，將含有幾種相對分子質(zhì)量的標準蛋白質(zhì)混合溶液以及待測蛋白溶液分別點在不同的點樣孔中，進展SDS;然后以標準蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量的對數(shù)為縱坐標，以相對應的相對遷移率為橫坐標，繪制標準曲線;再根據(jù)待測蛋白的相對遷移率，即可計算出待測蛋白的相對分子質(zhì)量。18．簡述蛋白質(zhì)的抽提原理和方法。答案：抽提是指利用*種溶劑使目的蛋白和其他雜質(zhì)盡可能分開的一種別離方法。其原理：不同蛋白質(zhì)在*種溶劑中的溶解度不同，所以可以通過選擇溶劑，使得目的蛋白溶解度大，而其他雜蛋白溶解度小，然后經(jīng)過離心，可以去除大多數(shù)雜蛋白。方法：溶劑的選擇是抽提的關鍵，由于大多數(shù)蛋白質(zhì)可溶于水、稀鹽、稀堿或稀酸，所以可以選擇水、稀鹽、稀堿或稀酸為抽提溶劑;對于和脂類結合比擬結實或分子中非極性側鏈較多的蛋白質(zhì)分子可以選用有機溶劑進展抽提。19.根據(jù)蛋白質(zhì)一級氨基酸序列可以預測蛋白質(zhì)的空間構造。假設有以下氨基酸序列：Ile-Ala-His-Thr-Tyr-Gly-Pro-Glu-Ala-Ala-Met-Cys-Lys-Try-Glu-Ala-Gln-Pro-Asp-Gly-Met-Glu-Cys-Ala-Phe-His-Arg

(1〕預測在該序列的哪一部位可能會出卷曲或β-轉(zhuǎn)角。

(2〕何處可能形成鏈二硫鍵？

(3〕假設該序列只是大的球蛋白的一局部，試分析在Asp、Try、Gln、Val、Lys、Thr、Leu中，哪些可能分布在該蛋白的外外表，哪些分布在部？

答案：(1〕可能在7位和18位氨基酸打彎，因為脯氨酸常出現(xiàn)在打彎處。

(2〕12位和23位的半胱氨酸可形成二硫鍵。

(3〕分布在外外表的為極性帶電荷的殘基：Asp、Gln和Lys;分布在部的是非極性的氨基酸殘基：Try、Leu和Val;Thr盡管有極性，但疏水性也很強，因此，它出現(xiàn)在外外表和部的可能性都有。20.簡述抑制劑對酶活性的抑制作用與酶變性的不同點。答案：(1〕抑制劑對酶有一定的選擇性，一種抑制劑只能引起*一類或*幾類酶的抑制;而使酶變性失活的因素，如強酸、強堿等，對酶沒有選擇性;(2〕抑制劑雖然可使酶失活，但它并不明顯改變酶的構造，不引起酶蛋白變性，去除抑制劑后，酶又可恢復活性。而變性因素常破壞酶分子的非共價鍵，局部或全部地改變酶的空間構造，從而導致酶活性的降低或喪失。21.在很多酶的活性中心均有His殘基參與，請解釋？答案：酶蛋白分子中組氨酸的側鏈咪唑基pK值為6.0～7.0，在生理條件下，一半解離，一半不解離，因此既可以作為質(zhì)子供體(不解離局部〕，又可以作為質(zhì)子受體(解離局部〕，既是酸，又是堿，可以作為廣義酸堿共同催化反響，因此常參與構成酶的活性中心。22.以糖原磷酸化酶激活為例，說明級聯(lián)系統(tǒng)是怎樣實現(xiàn)反響信號放大的？

答案：(1〕級聯(lián)系統(tǒng)：在連鎖代反響中一個酶被激活后，連續(xù)地發(fā)生其它酶被激活，導致原始調(diào)節(jié)信號的逐級放大，這樣的連鎖代反響系統(tǒng)稱為級聯(lián)系統(tǒng)。糖原磷酸化酶的激活過程就是一個例子。

(2〕放大過程：激素(如腎上腺素〕使腺苷酸環(huán)化酶活化，催化ATP和生成cAMP;

cAMP使蛋白激酶活化，使無活力的磷酸化酶b激酶轉(zhuǎn)變成有活力的磷酸化酶b激酶;磷酸化酶b激酶使磷酸化酶b轉(zhuǎn)變成激活態(tài)磷酸化酶a;磷酸化酶a使糖原分解為磷酸葡萄糖。23．對活細胞的實驗測定說明，酶的底物濃度通常就在這種底物的Km值附近，請解釋其生理意義？為什么底物濃度不是大大高于Km或大大低于Km呢？答案：據(jù)V-[S]的米氏曲線可知，當?shù)孜餄舛却蟠蟮陀贙m值時，酶不能被底物飽和，從酶的利用角度而言，很不經(jīng)濟;當?shù)孜餄舛却蟠蟾哂贙m值時，酶趨于被飽和，隨底物濃度改變，反響速度變化不大，不利于反響速度的調(diào)節(jié);當?shù)孜餄舛仍贙m值附近時，反響速度對底物濃度的變化較為敏感，有利于反響速度的調(diào)節(jié)。

24．舉例說明競爭性抑制的特點及實際意義。有時別構酶的活性可以被低濃度的競爭性抑制劑激活，請解釋？答案：競爭性抑制劑的特點：(1〕抑制劑以非共價鍵與酶結合，用超濾、透析等物理方法能夠解除抑制;(2〕抑制劑的構造與底物構造相似，可與底物競爭酶的活性中心;(3〕抑制劑使反響速度降低，Km值增大，但對Vma*并無影響，(4〕增加底物濃度可降低或解除對酶的抑制作用。競爭性抑制作用的原理可用來說明*些藥物的作用原理和指導新藥合成。例如*些細菌以對氨基苯甲酸、二氫喋呤啶及谷氨酸為原料合成二氫葉酸，并進一步生成四氫葉酸，四氫葉酸是細菌核酸合成的輔酶?；前匪幬锱c對氨基苯甲酸構造相似，是細菌二氫葉酸合成酶的競爭性抑制劑。它通過降低菌體四氫葉酸的合成能力，阻礙核酸的生物合成，抑制細菌的繁殖，到達抑菌的作用。25.在一個符合米氏方程的酶促反響體系中，：無抑制劑時，雙倒數(shù)圖中橫軸的截距是-2L/mmol，縱軸的截距是2min.L/mmol，當參加可逆抑制劑后，橫軸的截距沒有變，而縱軸的截距是3min.L/mmol。問：(1〕上述雙倒數(shù)示意圖怎么表示？(2〕無抑制劑時，反響最大速度和米氏常數(shù)各是多少？(3〕有抑制劑時，反響最大速度和米氏常數(shù)又分別是多少？(4)該抑制劑是何種類型的？

答案：(略〕26．簡述G蛋白耦聯(lián)受體介導的跨膜信號轉(zhuǎn)導的根本過程。激素是第一信使，與靶細胞膜上的受體結合，使G蛋白活化，進而激活膜上的腺苷酸環(huán)化酶(AC〕系統(tǒng)。AC催化ATP轉(zhuǎn)變?yōu)閏AMP。cAMP作為第二信使可激活蛋白激酶A(PKA〕，繼而激活磷酸化酶并催化細胞磷酸化反響，引起靶細胞特定的生理效應：腺細胞分泌、肌細胞收縮與舒、神經(jīng)細胞膜電位變化、細胞通透性改變、細胞分裂與分化以及各種酶促反響等。(該題也可問：簡述依賴于cAMP的蛋白激酶A的激活機制〕

答案：(略〕27．簡述酶耦聯(lián)受體介導的跨膜信號轉(zhuǎn)導的根本過程。答案：(1〕具有酪氨酸激酶的受體：該受體簡單，只有一個橫跨細胞膜的α螺旋，有兩種類型，①受體具有酪氨酸激酶的構造域，即受體與酪氨酸激酶是同一個蛋白質(zhì)分子;當與相應的化學信號結合時，直接激活自身的酪氨酸激酶構造域，導致受體自身或細胞靶蛋白的磷酸化。②受體本身沒有酶的活性，但當它被配體激活時立即與酪氨酸激酶結合，并使之激活，通過對自身和底物蛋白的磷酸化作用，把信號傳入細胞。(2〕具有鳥苷酸環(huán)化酶的受體:該受體也只有一個跨細胞膜的α螺旋，其膜側有鳥苷酸環(huán)化酶，當配體與它結合后，即將鳥苷酸環(huán)化酶激活，催化細胞GTP生成cGMP，cGMP又可激活蛋白激酶G(PKG〕，PKG促使底物蛋白質(zhì)磷酸化，產(chǎn)生效應。

上述幾種跨膜信號轉(zhuǎn)導過程并不是截然分開的，相互之間存在著錯綜復雜的聯(lián)系，形成所謂的信號網(wǎng)絡。28.1分子乙酰CoA徹底氧化生成CO2和H2O，可提供幾分子ATP？為什么？答案：可提供10分子ATP。具體情況如下：(1)在異檸檬酸脫氫酶作用下，異檸檬酸脫下兩個氫生成α-酮戊二酸和NADH＋H＋;(2〕在α-酮戊二酸脫氫酶系作用下，α-酮戊二酸脫氫生成琥珀酰CoA和NADH＋H＋;(3〕在琥珀酰CoA合成酶作用下，琥珀酰CoA水解生成琥珀酸，產(chǎn)生1分子GTP;(4〕在琥珀酸脫氫酶作用下，琥珀酸脫氫生成延胡索酸和FADH2;(5〕在蘋果酸脫氫酶催化下，蘋果酸脫氫生成草酰乙酸和NADH＋H＋。1分子NADH進入NADH呼吸鏈氧化可提供2.5分子ATP，而1分子FADH2進入FADH2呼吸鏈氧化可提供1.5分子ATP，所以1分子乙酰CoA徹底氧化生成CO2和H2O，可提供10分子ATP(3×2.5＋1.5＋1〕。29.何謂三羧酸循環(huán)"它有何生理意義"答案：在線粒體中，乙酰CoA和草酰乙酸縮合生成檸檬酸，經(jīng)過一系列酶促反響重新生成草酰乙酸，而將乙酰CoA徹底氧化生成H2O和CO2，并釋放能量。這個循環(huán)反響稱為三羧酸循環(huán)，又稱檸檬酸循環(huán)或Krebs循環(huán)。生理學意義：(1〕糖的有氧分解是產(chǎn)生動物生理活動所需能量的主要來源;(2〕三羧酸循環(huán)是糖、脂肪、蛋白質(zhì)在體徹底氧化的共同代途徑;(3〕三羧酸循環(huán)是糖、脂肪、蛋白質(zhì)及其他有機物質(zhì)代的聯(lián)系樞紐。30.為什么說三羧酸循環(huán)是糖類、脂類和蛋白質(zhì)分解的共同通路？答案：(1〕葡萄糖經(jīng)甘油醛-3-磷酸、丙酮酸等物質(zhì)生成乙酰CoA，而乙酰CoA必須進入三羧酸循環(huán)才能被徹底氧化分解。(2〕脂肪分解產(chǎn)生的甘油和脂肪酸，甘油可以經(jīng)磷酸二羥丙酮進入糖有氧氧化途徑，最終的氧化分解也需要進入三羧酶循環(huán)途徑;而脂肪酸經(jīng)β-氧化途徑產(chǎn)生乙酰CoA，乙酰CoA可進入三羧酸循環(huán)氧化。(3〕蛋白質(zhì)分解產(chǎn)生氨基酸，氨基酸脫去氨基后產(chǎn)生的碳骨架可進入三羧酸循環(huán)，同時，三羧酸循環(huán)的中間產(chǎn)物可作為氨基酸的碳骨架，承受NH3重新生成氨基酸。所以，三羧酸循環(huán)是三大物質(zhì)共同通路。31.磷酸戊糖途徑的主要生理意義是什么？答案：(1〕中間產(chǎn)物核糖-5-磷酸是動物體合成多種物質(zhì)的重要原料;(2〕產(chǎn)生的NADPH(復原力〕參與多種代反響;(3〕磷酸戊糖途徑與糖的有氧分解及糖的無氧分解相互聯(lián)系;(4〕通過轉(zhuǎn)酮基和轉(zhuǎn)醛基反響，使丙糖、丁糖、戊糖、己糖、庚糖互相轉(zhuǎn)化。32.簡述葡萄糖激酶和己糖激酶的差異。答案：己糖激酶和葡萄糖激酶的主要差異在于：①葡萄糖激酶只存在于肝臟中，而己糖激酶在肝臟和肌肉中都存在;②己糖激酶的Km值為0.1mmol/L，葡萄糖激酶的Km值為10mmol/L;③己糖激酶受產(chǎn)物葡萄糖-6-磷酸的反響抑制，葡萄糖激酶不受產(chǎn)物葡萄糖-6-磷酸的反響抑制。所以，當血液中葡萄糖濃度低時，己糖激酶起主要作用;當血液中葡萄糖濃度高時，葡萄糖激酶起主要作用，結果肝臟糖原濃度高于肌肉糖原濃度。33．試述丙酮酸氧化脫羧反響受哪些因素調(diào)控"答案：(1〕變構調(diào)控：丙酮酸氧化脫羧作用的兩個產(chǎn)物乙酰CoA和NADH都抑制丙酮酸脫氫酶復合體，乙酰CoA抑制二氫硫辛酰胺乙酰轉(zhuǎn)移酶(E2〕，NADH抑制二氫硫辛酰胺脫氫酶(E3〕組分。(2〕化學修飾調(diào)控：丙酮酸脫氫酶磷酸化后，酶活性受到抑制，去磷酸化后活性恢復。(3〕丙酮酸脫氫酶(E1〕組分受GTP抑制，為AMP所活化。34.呼吸鏈是由哪些成分組成的？各有何作用？答案：主要有五大類：①NAD＋，在呼吸鏈中傳遞氫，傳遞氫和電子;②FMN和FAD，傳遞氫;③鐵硫蛋白，傳遞電子;④CoQ，傳遞氫;⑤細胞色素體系，是一類以鐵卟啉為輔基的結合蛋白，傳遞電子，電子在細胞色素中的傳遞順序為b→c1→c→aa3。35.為什么說在呼吸鏈中，輔酶Q是一種特殊靈活的載體"答案：輔酶Q是呼吸鏈中唯一的非蛋白質(zhì)組分，其構造中含有由數(shù)目不同的類異戊二烯組成的側鏈，所以它是非極性分子，可以在線粒體膜的疏水相中快速擴散，也有的CoQ結合于膜上。另外，它也是呼吸鏈中惟一不與蛋白質(zhì)嚴密結合的傳遞體，因此，可以在黃素蛋白和細胞色素類之間作為一種特殊靈活的載體而起作用。36.鐵硫蛋白和細胞色素是如何傳遞電子的"答案：鐵硫蛋白和細胞色素傳遞電子的方式是一樣的，都是通過鐵的價變，即Fe2＋和Fe3＋的互變來進展電子的傳遞。這兩類蛋白質(zhì)的差異在于細胞色素中的鐵是血紅素鐵，鐵與血紅素分子嚴密結合;而鐵硫蛋白中的鐵是非血紅素鐵，與蛋白質(zhì)中半胱氨酸的硫和無機硫原子結合在一起，形成一個鐵硫中心。37.試述體能量的生成方式以及水的生成。答案：ATP的生成有兩種方式，分別為底物水平磷酸化作用和氧化磷酸化作用(二者概念略〕，后者是主要的。

體水的生成方式主要是代物脫氫經(jīng)呼吸鏈傳遞與激活的氧化合;除此以外，非線粒體氧化體系中的氧化酶、過氧化氫酶等催化的反響也能生成水。38.闡述一對電子從NADH傳遞至氧是如何生成2.5個ATP的？答案：每對電子通過呼吸鏈傳遞復合體I、復合體Ⅲ和復合體Ⅳ時，分別有4個H＋、4個H＋和2個H＋從基質(zhì)泵出，導致線粒體膜兩側形成跨膜的質(zhì)子梯度。當這些質(zhì)子通過ATP合酶返回基質(zhì)時，能夠促使ATP合成。每3個H＋通過ATP合酶可促使1分子ATP合成，同時，產(chǎn)生的ATP從線粒體基質(zhì)進入胞質(zhì)需消耗1個H＋，所以每形成1個ATP需4個H＋，這樣一對電子從NADH傳遞至氧共生成2.5個ATP[(4＋4＋2)/439.一對電子從FADH2傳遞至氧可產(chǎn)生多少分子ATP"為什么"答案：一對電子從FADH2傳遞至氧產(chǎn)生1.5個ATP。由于FADH2直接將電子傳送給呼吸鏈傳遞復合體II，不經(jīng)過呼吸鏈傳遞復合體I，所以當一對電于從FADH2傳遞至氧時只有6個H＋由基質(zhì)泵出，合成1分子ATP需4個H＋，共形成1.5個ATP[(4＋2)／4]。40.化學滲透學說的要點是什么"答案：化學滲透學說的要點是：(1〕呼吸鏈中各遞氫體和遞電子體按特定的順序排列在線粒體膜上;(2〕呼吸鏈中復合體Ⅰ、復合體Ⅲ和復合體Ⅳ都具有質(zhì)子泵的作用，在傳遞電子的過程中將H＋泵出膜，所以呼吸鏈的電子傳遞系統(tǒng)是一個主動運輸質(zhì)子的體系;(3〕質(zhì)子不能自由通過線粒體膜，泵出膜外的H＋不能自由返回膜側，使膜外形成H＋濃度的跨膜梯度;(4〕線粒體膜上有ATP合酶，當質(zhì)子通過ATP合酶返回線粒體基質(zhì)時，釋放出自由能，驅(qū)動ADP和Pi合成ATP。41.簡述ATP合成酶的構造特點及功能。答案：ATP合酶主要有兩個功能單位：F1和F0。(1〕F1由5種亞基組成(α3β3γδε〕，是一種可溶性的膜周邊蛋白，具有催化ATP合成的功能;其中，α和β亞基上有ADP和ATP結合位點;β亞基為催化亞基，單獨存在時，不具有ATP合酶的作用，但能使ATP水解。(2〕F0是由多亞基組成的不溶于水的跨膜蛋白，含有大量的疏水性氨基酸，在膜中形成了跨膜的質(zhì)子通道，便于質(zhì)子回流。42.試述影響氧化磷酸化的因素及其作用機制。答案：(1〕呼吸鏈抑制劑：魚藤酮、殺粉蝶菌素、安密妥與復合體I中的鐵硫蛋白結合，抑制電子傳遞;抗霉素A、二巰基丙醇抑制復合體Ⅲ;一氧化碳、氰化物、疊氮化物、硫化氫抑制復合體Ⅳ。(2〕解偶聯(lián)劑：該類典型代表是2，4-二硝基苯酚。在線粒體膜外側pH較低，2，4-二硝基苯酚的羥基不能解離，可自由進入線粒體;進入線粒體后，2，4-二硝基苯酚的羥基解離帶負電荷。1分子2，4-二硝基苯酚進入線粒體就相當于從膜外側帶入線粒體1個H＋，破杯了膜兩側的H＋梯度，使ATP不能合成，而電子傳遞繼續(xù)進展，結果使電子傳遞的氧化和磷酸化兩個過程別離。(3〕氧化磷酸化抑制劑：寡霉素可阻止質(zhì)子從F0質(zhì)子通道回流，抑制磷酸化并間接抑制電子在呼吸鏈上傳遞。(4〕ADP的調(diào)節(jié)作用：ADP濃度升高，氧化磷酸化速度加快，反之，氧化磷酸化速度減慢。43.試比擬電子傳遞抑制劑、氧化磷酸化抑制劑和解偶聯(lián)劑對生物氧化作用的影響。答案：(1〕電子傳遞抑制劑使電子傳遞鏈的*一部位阻斷，電子不能傳遞，氧的消耗停頓，同時ATP的合成停頓。(2〕氧化磷酸化抑制劑的作用位點在ATP合酶，使ATP合酶被抑制，而不能合成ATP，結果電子傳遞也被抑制，氧消耗停頓。(3〕解偶聯(lián)劑的作用是使電子傳遞和氧化磷酸化兩個過程別離，結果是電子傳遞失去控制，氧消耗增加，ATP卻不能合成，產(chǎn)生的能量以熱的形式散失，使體溫升高。44.在脂肪酸合成中，乙酰CoA.羧化酶起什么作用？乙酰CoA羧化酶受哪些因素調(diào)控？答案：乙酰CoA羧化酶的作用是催化乙酰CoA和CO2合成丙二酸單酰CoA，為脂肪酸合成提供二碳化合物。乙酰CoA羧化酶是脂肪酸合成反響中的一種限速調(diào)節(jié)酶，檸檬酸和異檸檬酸可增強該酶的活性，而長鏈脂肪酸則抑制該酶的活性。此酶經(jīng)磷酸化后活性喪失，胰高血糖素及腎上腺素等能促進這種磷酸化作用，從而抑制脂肪酸的合成;而胰島素則能促進酶的去磷酸化作用、增強乙酰CoA羧化酶的活性。45．試比擬脂肪酸β-氧化與其生物合成的差異。答案：(1〕進展的部位不同，脂肪酸β-氧化在線粒體進展，脂肪酸的合成在胞液中進展。(2〕主要中間代物不同，脂肪酸β-氧化的主要中間產(chǎn)物是乙酰CoA，脂肪酸合成的主要中間產(chǎn)物是丙二酸單酚CoA。(3〕脂肪酰基的轉(zhuǎn)運載體不同，脂肪酸β-氧化的脂肪酰基轉(zhuǎn)運載體是CoA，脂肪酸合成的脂肪?；D(zhuǎn)運載體是ACP。(4〕參與的輔酶不同，參與脂肪酸β-氧化的輔酶是FAD和NAD＋，參與脂肪酸合成的輔酶是NADPH。(5〕脂肪酸β-氧化不需要CO2，而脂肪酸的合成需要CO2。(6〕反響發(fā)生時ADP/ATP比值不同，脂肪酸β-氧化在ADP/ATP比值高時發(fā)生，而脂肪酸合成在ADP/ATP比值低時進展。(7〕檸檬酸發(fā)揮的作用不同，檸檬酸對脂肪酸β-氧化沒有激活作用，但能激活脂肪酸的生物合成。(8〕脂酰CoA的作用不同，脂酰輔酶A對脂肪酸β-氧化沒有抑制作用，但能抑制脂肪酸的生物合成。46.圖示鳥氨酸循環(huán)的過程，并簡述該途徑的生理意義。答案：圖略意義：(1〕機體，氨是有毒化合物，通過該途徑合成尿素，尿素是中性無毒物質(zhì)，從而起到解氨毒的作用，這是哺乳動物最終排出氨的方式;(2〕通過該途徑也可以去除氨基氮及二氧化碳，能夠減少體CO2溶于血液所造成的酸性。47．簡述天冬氨酸在體轉(zhuǎn)變成葡萄糖的主要代途徑。答案：(1〕天冬氨酸經(jīng)轉(zhuǎn)氨基作用或聯(lián)合脫氨基作用形成草酰乙酸;(2〕草酰乙酸由磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶催化形成磷酸烯醇式丙酮酸;(3〕然后沿著糖酵解途徑的逆反響，依次生成甘油酸-2-磷酸、甘油酸-3-磷酸、甘油酸-1，3-二磷酸、甘油醛-3-磷酸、磷酸二羥丙酮和果糖-1，6-二磷酸;果糖-1，6-二磷酸在果糖二磷酸酶的催化下形成果糖-6-磷酸、葡萄糖-6-磷酸;(4〕葡萄糖-6-磷酸水解生成葡萄糖，反響由葡萄糖-6-磷酸酶催化。48．鳥氨酸循環(huán)、三羧酸循環(huán)和轉(zhuǎn)氨基作用是如何聯(lián)系的？答案：圖略，鳥氨酸循環(huán)過程中，天冬氨酸不斷被消耗轉(zhuǎn)變?yōu)檠雍魉?。延胡索酸可以?jīng)過三羧酸循環(huán)轉(zhuǎn)化為蘋果酸，蘋果酸再氧化成草酰乙酸，后者可再與谷氨酸進展轉(zhuǎn)氨基反響，重新生成天冬氨酸。而谷氨酸又可通過其他的各種氨基酸把氨基轉(zhuǎn)移給α-酮戊二酸生成。因此，其他的各種氨基酸的氨基可以通過天冬氨酸的形式用于合成尿素。天冬氨酸和延胡索酸可使尿素循環(huán)、三羧酸循環(huán)和轉(zhuǎn)氨基作用聯(lián)系起來。50．簡述保證DNA復制忠實性的因素及其功能？(1〕半保存復制的原則，(2〕堿基互補配對的規(guī)律，A-T

G-C。(3〕DNA聚合酶I的校對作用，(4〕引物的切除，51.簡述DNA復制時所需的主要酶類及其功能。答案：(1〕DNA聚合酶：催化核苷酸之間生成磷酸二酯鍵，也具有一定的校正功能;(2)拓撲異構酶：催化DNA超螺旋解開，使之變?yōu)殡p螺旋;(3〕解旋酶：解開DNA雙鏈，使之變?yōu)閱捂?(4〕單鏈結合蛋白：和單鏈DNA結合，使之變?yōu)槟軌蜃鳛閺椭颇０宓姆€(wěn)定單鏈;(5〕引物酶：以解旋后的單鏈DNA為模板，催化合成一小段帶有3′-OH的RNA;(6〕DNA連接酶：催化DNA雙鏈中的一條單鏈缺口處游離的3′末端-OH與5′末端磷酸形成磷酸二酯鍵，從而把兩段相鄰的DNA鏈連成完整的鏈。52．真核生物染色體的端粒是怎樣復制的？答案：(1〕端粒DNA的3′端和端粒酶所含的RNA分子的3′端形成堿基配對;(2〕端粒酶利用RNA為模板，將dNTP加到端粒DNA的3′端，這個逆轉(zhuǎn)錄過程一直進展到RNA模板的第35位;(3〕DNA-RNA雜交鏈之間發(fā)生相對滑動，新生長的端粒DNA鏈3′端再和RNA3′端形成新的堿基配對，重新暴露出局部RNA模板序列;(4〕繼續(xù)逆轉(zhuǎn)錄過程。該結合→聚合→轉(zhuǎn)位的過程周而復始，直至在端粒DNA的3′端形成了足夠長度(提供后隨鏈盤旋時所需的長度〕的單鏈突出;(5〕該3′突出端能夠彎轉(zhuǎn)過來成為后隨鏈合成的起始端，然后由DNA聚合酶復制DNA5′端空缺的DNA，最后由連接酶連接。53．簡述轉(zhuǎn)錄過程和復制過程的不同點。答案：(1〕復制時兩條DNA鏈均為模板，轉(zhuǎn)錄時一條DNA鏈均為模板;(2〕復制時dNTP為底物，轉(zhuǎn)錄時NTP為底物;(3〕復制時需要DNA聚合酶、連接酶等，轉(zhuǎn)錄時僅需要RNA聚合酶;(4〕復制產(chǎn)物為子產(chǎn)物代雙鏈DNA，轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為mRNA、tRNA、rRNA;(5〕復制時A=T、G≡C配對，轉(zhuǎn)錄時A=U、G≡C、T=A配對;(6〕復制時需要一小段RNA為引物，轉(zhuǎn)錄時不需引物。54．簡述轉(zhuǎn)錄起始階段的幾個反響。答案：起始階段包括下面幾個反響：①RNA聚合酶全酶的σ亞基識別模板DNA的啟動子，并與之嚴密結合;②局部解開雙螺旋，以使模板鏈可與核糖核苷酸進展堿基配對;③RNA聚合酶催化底物核苷酸脫去焦磷酸形成磷酸二酯鍵，合成RNA鏈最初的2～9個核苷酸后，σ亞基脫離，起始階段完畢。55.簡述真核生物與原核生物轉(zhuǎn)錄的不同點。答案：真核生物的轉(zhuǎn)錄在很多方面與原核生物不同，具有*些特殊規(guī)律，主要包括：(1〕轉(zhuǎn)錄單位一般為單基因(單順反子〕，而原核生物的轉(zhuǎn)錄單位多為多基因(多順反子〕;(2〕真核生物的三種成熟的RNA分別由三種不同的RNA聚合酶催化合成;(3〕在轉(zhuǎn)錄的起始階段，RNA聚合酶必須在特定的轉(zhuǎn)錄因子的參與下才能起始轉(zhuǎn)錄;(4〕組織或時間特異表達的基因轉(zhuǎn)錄常與增強子有關，增強子是位于轉(zhuǎn)錄起始點上游的遠程調(diào)控元件，具有增強轉(zhuǎn)錄效率的作用;(5〕轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)方式以正調(diào)節(jié)為主，調(diào)節(jié)蛋白的種類是轉(zhuǎn)錄因子或調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄因子活性的蛋白因子。56.簡述操縱子模型，并說明各組分的功能。答案：操縱子是原核生物基因表達調(diào)控的功能單位，由調(diào)節(jié)基