豬瘟抗體效價(jià)與豬瘟母源抗體相關(guān)性研究

豬瘟抗體效價(jià)與豬瘟母源抗體相關(guān)性研究

豬疫情是一種高度接觸性的傳染病，對(duì)養(yǎng)豬業(yè)危害嚴(yán)重。它主要以廣泛的流行趨勢(shì)、發(fā)病率和死亡率為主要特征。在2011年的《陸生動(dòng)物衛(wèi)生法典》中,OIE規(guī)定豬瘟是必須呈報(bào)的豬傳染病,我國(guó)將其列為一類動(dòng)物傳染病。目前,我國(guó)對(duì)豬瘟的防控以疫苗免疫為主,取得了一定效果,但仍然不能阻斷豬瘟在我國(guó)的發(fā)生。近些年,豬瘟的發(fā)病特征和臨床表現(xiàn)越來越復(fù)雜,出現(xiàn)了潛伏期長(zhǎng),臨床癥狀不典型的非典型豬瘟,以及發(fā)病年齡提前、長(zhǎng)期持續(xù)感染等復(fù)雜現(xiàn)象,造成嚴(yán)重經(jīng)濟(jì)損失。這些現(xiàn)象與免疫密切相關(guān),特別是豬瘟的首免時(shí)間和免疫程序。為此,本研究對(duì)浙江某規(guī)模豬場(chǎng)不同類別豬的豬瘟抗體水平進(jìn)行調(diào)查,通過整理、分析得到一些結(jié)論和啟示,為規(guī)?；B(yǎng)豬場(chǎng)制定科學(xué)合理的免疫程序提供數(shù)據(jù)支持。1材料和方法1.1豬疫情疫苗與實(shí)驗(yàn)動(dòng)物豬瘟兔化弱毒凍干細(xì)胞苗購自齊魯動(dòng)物保健品有限公司;不同胎齡的母豬及所產(chǎn)仔豬來源于浙江某規(guī)模豬場(chǎng)。1.2醫(yī)用血凝板、豬模型血凝產(chǎn)品及血清豬瘟正向間接血凝反應(yīng)(IHA)診斷試劑盒、96孔110°V型醫(yī)用血凝板、豬瘟血凝抗原、陽性對(duì)照血清、陰性對(duì)照血清及稀釋液等均購自中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所。1.3不同日齡的豬豬抗炎抗體的檢測(cè)1.4豬檢驗(yàn)和血清制備生產(chǎn)母豬斷奶時(shí)用4頭份豬瘟弱毒疫苗免疫。其仔豬隨機(jī)分為兩組,A組在21d~23d首免、60d~65d二免,B組在35d~40d首免、65d~70d二免,用3頭份豬瘟疫苗免疫后,10d~15d采取全血并分離血清備檢。1.5豬相同部位的不同豬抗炎作用的測(cè)定隨機(jī)抽取63窩未經(jīng)豬瘟疫苗免疫的同窩仔豬全血,分離血清備檢。1.6不同胎齡的母豬和豬疫情免疫抗體檢測(cè)1.7抗抗體檢測(cè)方法按照試劑盒說明書進(jìn)行IHA檢測(cè)。IHA血凝效價(jià)4log2(1∶16)為保護(hù)臨界線,抗體效價(jià)≥25判為合格。2結(jié)果2.1豬檔案母源抗體檢測(cè)結(jié)果仔豬豬瘟的母源抗體合格率、抗體效價(jià)平均值隨仔豬日齡增長(zhǎng)而逐漸降低。在母豬一年兩次豬瘟免疫注射情況下,仔豬36d~40d時(shí)豬瘟母源抗體的合格率為78.79%、其抗體平均效價(jià)達(dá)到5.97;41d~45d時(shí),豬瘟母源抗體合格率降到50%,抗體平均效價(jià)降到4.79(表1)。2.2抗體成功率A組仔豬21d~23d進(jìn)行豬瘟疫苗首免、60d~65d二免,B組35d~40d首免、65d~70d二免。在免疫劑量相同情況下,A組一免抗體合格率為26.67%(4/15),抗體平均效價(jià)為2.87。B組的一免抗體合格率為44.32%(117/264),抗體平均效價(jià)為4.61;B組明顯高于A組。二免后A組抗體合格率為42.37%(25/59),抗體平均效價(jià)為3.76;B組抗體合格率為46.15%(66/143),抗體平均效價(jià)為4.81,B組抗體合格率略高于A組,并且B組抗體平均效價(jià)明顯高于A組(圖1、圖2)。結(jié)果表明35d~40d首免比21d~23d首免更為合理。2.3差雙滴度和各比方差分析對(duì)63窩仔豬的豬瘟母源抗體進(jìn)行檢測(cè),母源抗體水平一致的占36.51%(23/63),相差一個(gè)滴度的占36.51%(23/63),差兩個(gè)滴度占15.87%(10/63),差3個(gè)~4個(gè)滴度均占3.17%(2/63),個(gè)別豬差距達(dá)6個(gè)~8個(gè)滴度,分別占1.59%(1/63)和3.17%(2/63),差距在3個(gè)~8個(gè)滴度之間的占11%。結(jié)果表明同一窩仔豬的豬瘟母源抗體效價(jià)并不完全相同或接近,甚至可能有很大差異。2.4其他各胎齡經(jīng)產(chǎn)豬抗體分析不同胎齡母豬豬瘟抗體的合格率,初產(chǎn)母豬稍低(83.33%),其它各胎齡經(jīng)產(chǎn)母豬基本接近,其中也有個(gè)別母豬抗體低于臨界值;豬瘟抗體效價(jià)的平均值隨母豬胎齡增加而升高,并且抗體的離散度則隨胎齡增加而縮小(表2)。3疫程序免疫下見血牛專四體仔豬豬瘟母源抗體水平的高低,直接關(guān)系到豬瘟首免時(shí)間的確定。許多養(yǎng)殖場(chǎng)普遍使用的仔豬豬瘟免疫程序?yàn)?0d~23d首免、60d~65d二免,但免疫效果不佳,免疫后的豬群發(fā)生了豬瘟,造成仔豬和育肥豬大量死亡。其原因可能是此時(shí)仔豬豬瘟母源抗體還處于較高水平,過早免疫既中和了母源抗體,又中和了一部分免疫抗體而導(dǎo)致免疫失敗。調(diào)查結(jié)果也表明35d~40d是仔豬母源抗體進(jìn)入明顯下降的臨界區(qū)間,在此時(shí)間點(diǎn)之前母源抗體水平較高,此后抗體水平明顯下降。對(duì)采取不同免疫程序免疫的仔豬抗體進(jìn)行檢測(cè)也表明35d~40d首免抗體合格率和平均抗體效價(jià)均高于21d~23d首免,結(jié)果提示仔豬的豬瘟首免時(shí)間應(yīng)該在40d左右為宜。仔豬的母源抗體依賴于母豬的初乳,本次調(diào)查表明同窩仔豬母源抗體存在很大差異,主要原因可能是仔豬出生后初乳的攝入量不同所致;個(gè)別也可能因寄養(yǎng)不當(dāng),導(dǎo)致新生仔豬初乳攝入不足,甚至沒有吃到初乳。因此,在母豬豬瘟免疫到位的情況下,仔豬出生后應(yīng)及時(shí)吃好初乳,特別是對(duì)弱小個(gè)體,必須人工幫助其吃足初乳,寄養(yǎng)仔豬也應(yīng)保證其吃足初乳后再寄出,否則在一個(gè)豬瘟陽性場(chǎng),這部分低抗體仔豬極有可能發(fā)生感染。規(guī)模豬場(chǎng)生產(chǎn)母豬豬瘟免疫一般采用隨胎免疫的方式,即一年免疫兩次以上,初產(chǎn)母豬一般在配種前也經(jīng)過二次豬瘟疫苗免疫。本調(diào)查表明隨母豬胎齡增加,免疫注射的多次實(shí)施,豬瘟抗體漸趨平衡,離散度縮小,抗體平均效價(jià)不會(huì)因免疫注射的反復(fù)進(jìn)行而不斷上升,只保持在一個(gè)相對(duì)穩(wěn)定的狀態(tài),本結(jié)果與徐新紅、覃紹敏、楊銘芬等報(bào)導(dǎo)一致。針對(duì)我國(guó)目前豬瘟的流行現(xiàn)狀與養(yǎng)豬業(yè)規(guī)?；奶攸c(diǎn),做好免疫監(jiān)測(cè)是降低我國(guó)現(xiàn)階段豬瘟流行的重要手段。應(yīng)用免疫檢測(cè)手段,可以隨時(shí)掌握豬群的免疫狀態(tài),制定適合于該豬場(chǎng)合理的免疫程序,并隨時(shí)淘汰免疫耐受豬(對(duì)疫苗注射不產(chǎn)生或產(chǎn)生低抗體水平的豬)。此外,結(jié)合CSFV抗原檢測(cè),堅(jiān)決淘汰CSFV