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甘油含量檢測方法1、原理由于甘油是醇類物質(zhì)，而酸性高碘酸鹽氧化糖醇產(chǎn)生甲醛，在Nash試劑參與下生成黃色的化合物，該化合物在412nm下有最大吸收峰。根據(jù)吸光值即可計算出甘油的濃度。2、試劑①Nash試劑：精確稱取15g乙酸銨，蒸餾水溶解，加入0.2ml冰醋酸，0.2ml乙酰丙酮，定容至100ml?，F(xiàn)用現(xiàn)配。②0.015mol/L高碘酸鈉溶液：精確稱取高碘酸鈉3.2g，用0.12mol/LHCl溶液溶解賓并定容至1000ml。③0.1％L-鼠李糖：精確稱取L-鼠李糖0.5g,溶于蒸餾水中，定容至500ml。④0.5mg/ml甘油標準溶液：稱取甘油0.5g（精確至0.0001g），加水定容至100ml。搖勻，吸取5ml稀釋至50ml，即濃度為0.5mg/ml的甘油標準溶液。⑤0.12mol/LHCl溶液：量取濃鹽酸(12mol/L)20ml，加水定容至2000ml。3、儀器和設備①漩渦混合器②752分光光度計③恒溫水浴鍋4、標準曲線繪制①.吸取0.5mg/ml甘油標準溶液各0.5mL、1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL，分別定容至50mL。即配制好0.005mg/ml、0.01mg/ml、0.02mg/ml、0.03mg/ml、0.04mg/ml的不同濃度的甘油標準液。②吸取上述各濃度甘油標準液1ml分別置于刻度試管中，然后加入1ml0.015mol/L的高碘酸鈉溶液，混勻，室溫放置10min。然后，加入2ml0.1％L-鼠李糖溶液，（以除去過多的髙碘酸鹽），混勻后加入4ml新鮮配制的Nash試劑，在53℃水浴中加熱15min，使其充分顯色。③以空白做參比，在412nm波長下測定其吸光度。④以甘油濃度（mg/L）為橫坐標，OD412為縱坐標繪制標準曲線。注：空白：用水代替甘油標準稀釋液，其余操作同上。每組樣品做2個平行。15、檢測步驟：①稱取一定量的甘油樣品作適當濃度的稀釋。②吸取1ml稀釋液置于刻度試管中，然后加入1ml0.015mol/L的高碘酸鈉溶液，混勻，室溫放置10min。然后，加入2ml0.1％L-鼠李糖溶液，（以除去過多的髙碘酸鹽），混勻后加入4ml新鮮配制的Nash試劑，在53℃水浴中加熱15min，使其充分顯色。③以空白做參比，在412nm波長下測定其吸光度。④以甘油濃度為橫坐標，OD412為縱坐標繪制標準曲線。注：空白：用水代替樣品稀

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