電刺激與骨骼肌收縮反應(yīng)的關(guān)系實(shí)驗(yàn)報告

電刺激與骨骼肌收縮反應(yīng)的關(guān)系實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、 學(xué)習(xí)牛蛙坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本的制備方法。2、 觀察不同刺激強(qiáng)度時骨骼肌收縮時頻率的變化，明確闕下刺激，闕刺激，闕上刺激及最適刺激的概念。3、 觀察電刺激頻率的變化實(shí)驗(yàn)原理活的肌肉組織具有興奮性，能接受刺激發(fā)生反應(yīng)，表現(xiàn)為骨骼肌收縮。剛能引起肌肉產(chǎn)生收縮反應(yīng)的最小刺激強(qiáng)度稱閾強(qiáng)度，所給予刺激稱為閾刺激，此強(qiáng)度以下刺激稱為閾下刺激，此強(qiáng)度以上刺激稱為閾上刺激。能使肌肉發(fā)生最大反應(yīng)的最小刺激稱為最大刺激。就單條骨骼肌纖維而言，它對刺激的反應(yīng)具有"全”或"無"性質(zhì)。但牛蛙的腓腸肌是由許多肌纖維組成的，由于每條肌纖維興奮性的高低不同，其收縮力在一定范圍內(nèi)與刺激強(qiáng)度成正比。即興奮性高的纖維首先發(fā)生興奮，隨刺激強(qiáng)度的增大，興奮性較低的纖維也發(fā)生興奮，肌肉的收縮逐漸增強(qiáng)，當(dāng)整個肌肉的肌纖維均興奮時，便出現(xiàn)最大收縮反應(yīng)。刺激頻率不同，肌肉收縮形式也不同。多個同等強(qiáng)度閾上刺激，相繼作用于神經(jīng)肌肉標(biāo)本，如刺激間隔時間大于肌肉收縮收縮期和舒張期之和，可引起肌肉產(chǎn)生分隔的單收縮;逐漸增加刺激頻率，使刺激間隔時間大于收縮期，而小于收縮期與舒張期之和時，則后一刺激引起肌肉收縮落在前一-收縮過程的舒張期內(nèi)，表現(xiàn)出收縮曲線呈鋸齒狀融合,稱為不完全強(qiáng)直收縮，如刺激間隔時間小于收縮期，則后刺激引起肌肉收縮落在前一收縮過程的收縮期內(nèi)，表現(xiàn)出收縮曲線完全融合，肌肉處于持續(xù)的收縮狀態(tài)，稱為完全強(qiáng)直收縮。實(shí)驗(yàn)對象牛蛙實(shí)驗(yàn)器材任氏液、蛙類手術(shù)器械（剪刀、鑷子、金屬探針、鋅銅弓、玻璃分針、蛙心夾）、張力轉(zhuǎn)換器、刺激電極、BL-420生物信號記錄分析系統(tǒng)、鐵支架、肌槽等。實(shí)驗(yàn)步驟坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本的制備（1）破壞牛蛙腦和脊髓俯式搗毀法:取一只牛蛙，用自來水沖洗干凈。左手握住牛蛙，將其腹面朝向手心，前肢夾在食指和中指之間，后肢夾在無名指和小指之間固定，并用拇指壓住背部使其挺直，食指壓住其頭部前端使頭前俯。右手持探針從枕骨大孔垂直刺人，再將針尖向前方刺入顱腔，左右攪動搗毀腦組織。然后將針退出至進(jìn)針處，但不拔出而是轉(zhuǎn)向后方刺人脊椎椎管搗毀脊髓。用該方法成功破壞牛蛙腦和脊髓后，牛蛙出現(xiàn)四肢（尤其是后肢）完全松軟，呼吸消失，表示腦脊髓已完全破壞，否則應(yīng)按上法再次搗毀。（2） 剪除軀干上部及內(nèi)臟:兩側(cè)腋窩稍下（或在骶骼關(guān)節(jié)水平以上約1.5-2cm處）剪斷脊柱，左手在皮膚外提起脊柱，使蟾蜍頭與內(nèi)臟自然下垂，右手持粗剪刀，分別沿脊柱左右側(cè)剪開皮膚肌肉（剪刀要與脊柱平行剪開），剪除全部內(nèi)臟及頭胸部（注意:勿損傷坐骨神經(jīng)），僅留下后肢、骶骨、脊柱及由它的坐骨神經(jīng)。（3） 剝皮:左手握住脊柱斷端（注意:不要握住或接觸神經(jīng)），右手捏住其上的皮膚邊緣,向下剝掉全部后肢皮膚,將標(biāo)本放在盛有任氏液的培養(yǎng)皿中，洗凈手及用過的器械后，進(jìn)行下述操作。（4） 剝離坐骨神經(jīng):將標(biāo)本腹側(cè)向上用蛙釘固定于蛙板上。沿脊柱側(cè)用玻璃分針游離坐骨神經(jīng)并于近脊柱處用線結(jié)扎并在靠脊柱側(cè)剪斷坐骨神經(jīng)然后將標(biāo)本背部向上放置固定.循坐骨神經(jīng)溝（股二頭肌及半膜肌之間的肌縫處）找出坐骨神經(jīng)的大腿部分，用玻分針順神經(jīng)走行方向小心分離至梨狀肌下孔，用鑷子夾住結(jié)扎線，將坐骨神經(jīng)干從梨狀肌下孔穿出至背側(cè)，用鑷子輕提起坐骨神經(jīng)，游離并剪斷坐骨神經(jīng)的所有分亥將神經(jīng)-直游離至胭窩處。（5） 制成坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本:分離腓腸肌的跟腱，在跟腱處穿線結(jié)扎并在結(jié)扎線遠(yuǎn)端剪斷跟腱，提起跟腱將腓腸肌游離至膝關(guān)節(jié)處;然后將坐骨神經(jīng)搭在腓腸肌上，用粗剪刀剪去股骨上的肌肉，玻璃分針刮凈骨膜，于膝關(guān)節(jié)上約1cm處斜行剪斷股骨然后沿膝關(guān)節(jié)下將脛骨全部剪掉。至此，坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本制備完畢。（6） 檢查標(biāo)本的興奮性:用經(jīng)任氏液濕潤的鋅銅弓迅速接觸坐骨神經(jīng)，如腓腸肌有明顯而靈敏的收縮，表示標(biāo)本興奮性良好，將標(biāo)本放人盛有任氏液小搪瓷杯內(nèi)約10-20min,待其興奮性穩(wěn)定后即可進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。2、固定標(biāo)本將標(biāo)本的股骨頭固定在肌槽的股骨固定孔內(nèi)。肌腱上的結(jié)扎線與張力換能器相連。將神經(jīng)置于肌槽的電極上。3、儀器連接張力換能器的插頭插入生物信號記錄分析系統(tǒng)的信號輸入插孔，刺激電極的接頭與其刺激信號輸出孔相連。4、BL-420的操作打開BL-420-實(shí)驗(yàn)項目3肌肉神經(jīng)實(shí)驗(yàn)3刺激強(qiáng)度與反應(yīng)的關(guān)系3引導(dǎo)出肌肉收縮。實(shí)驗(yàn)結(jié)果（1）改變刺激強(qiáng)度，記錄肌肉的收縮張力曲線（2）改變刺激頻率，記錄肌肉的單收縮和興奮性復(fù)合張力曲線（來源：人體機(jī)能實(shí)驗(yàn)第二版徐晨）實(shí)驗(yàn)討論1、 沒有出現(xiàn)張力曲線，可能是因?yàn)榧∪饣蛏窠?jīng)已經(jīng)死亡，電刺激時不會發(fā)生反應(yīng)。2、 出現(xiàn)了曲線，但曲線與上圖有點(diǎn)出入，可能是因?yàn)槔K子太緊或太松，電刺激所產(chǎn)生的反應(yīng)受到影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)論1，該牛