設(shè)備的清潔驗(yàn)證

-.z.第四節(jié)設(shè)備的清潔驗(yàn)證關(guān)于清潔驗(yàn)證的原理及方法將在第三篇第二章詳細(xì)介紹，制劑生產(chǎn)驗(yàn)證各章亦對(duì)相應(yīng)設(shè)備的清洗驗(yàn)證要點(diǎn)進(jìn)展介紹，可以參閱這些章節(jié)的容?？紤]到制藥設(shè)備驗(yàn)證的完整性，應(yīng)包括設(shè)備確實(shí)認(rèn)，變動(dòng)控制程序、儀器儀表的校準(zhǔn)和清洗驗(yàn)證。在此對(duì)設(shè)備的清潔驗(yàn)證從方法上作簡(jiǎn)單介紹。設(shè)備清洗有自動(dòng)清洗和人工清洗兩種方法，或者兩種方法的結(jié)合。所謂清洗是從工藝設(shè)備或貯存設(shè)備中去除污染物的工藝過(guò)程，以保證設(shè)備能夠平安地進(jìn)展下一步的產(chǎn)品生產(chǎn)，它包括清洗、消毒和貯存。設(shè)備清潔驗(yàn)證的目的是通過(guò)測(cè)試證明該設(shè)備的自動(dòng)清洗程序(CIP)或人工清洗程序能夠去除設(shè)備部件上的活性藥物殘留物，并到達(dá)可承受的合格標(biāo)準(zhǔn)，并證明此清潔程序具有穩(wěn)定性和重演性。一、設(shè)備清潔驗(yàn)證中常用的術(shù)語(yǔ)1)人體接觸劑量限度(SEL，SubjectE×posureLimit)。指一個(gè)沒(méi)有藥理學(xué)和毒理學(xué)經(jīng)歷的人可以接觸的*一藥物的暴露劑量。2)允許殘留濃度(ARL，AllowableResidualLimit)．指*一設(shè)備經(jīng)清洗后，其外表殘留的藥物(或清潔劑)的最大允許量。3)活性成分(API，ActivePharmaceuticallngredient；或ADS，ActiveDrugSubstance)：指在*一藥物中代表效用的物質(zhì)。這種物質(zhì)在制造、工藝或包裝過(guò)程中就變成了一種活性成分或者藥物的最終成型形式?；钚猿煞衷诩膊≡\斷、治療、緩解、處理或預(yù)防方面提供藥理上的活力或其他直接的作用，以致影響人體或動(dòng)物的組織和功能。API在工藝制造過(guò)程中產(chǎn)生，如：①化學(xué)合成；②發(fā)酵；③重組DNA或其他生物工藝；④從自然資源上別離或取得；⑤其他工藝的任何組合等。對(duì)設(shè)備清潔驗(yàn)證來(lái)說(shuō)，API包括中間體及成品。一般來(lái)說(shuō)，SEL、ARL的允許值應(yīng)從藥物平安評(píng)價(jià)部門(mén)獲取。二、驗(yàn)證設(shè)計(jì)在驗(yàn)證取樣測(cè)試時(shí)，假設(shè)發(fā)現(xiàn)洗過(guò)的設(shè)備明顯不干凈，應(yīng)立即停頓驗(yàn)證，有明顯的殘留物存在說(shuō)明現(xiàn)有的清潔程序是不適宜的，因此必須在驗(yàn)證開(kāi)場(chǎng)前重新評(píng)價(jià)清潔程序。從*種意義上來(lái)說(shuō)，清潔驗(yàn)證就是對(duì)清洗標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程的驗(yàn)證。清潔驗(yàn)證主要是通過(guò)擦拭取樣法和沖洗取樣法對(duì)活性成分APl進(jìn)展測(cè)試。另外可根據(jù)日常使用的需要，增加一些其他工程的測(cè)試，如清潔劑、酸液、溶劑、消毒劑等殘留量的測(cè)試。大局部企業(yè)在設(shè)備清洗中使用的清潔劑是水(包括飲用水、純化水和注射用水)，原因之一就是使用化學(xué)清潔劑要作清潔劑殘留量的測(cè)試，從而增加清洗的難度。制造部門(mén)在設(shè)備清潔程序中任何關(guān)于清潔劑、溶劑、添加劑的改變必須填寫(xiě)變動(dòng)控制表，得到批準(zhǔn)后執(zhí)行。并非所有的設(shè)備清潔驗(yàn)證需做活性成分APl的測(cè)試。根據(jù)APl是否在特殊的清潔劑或溶劑中溶解而使設(shè)備難以清洗的程度來(lái)對(duì)APl的濃度作出評(píng)價(jià)oAPl允許濃度可根據(jù)公式來(lái)計(jì)算，如果人體接觸劑量限度SEL太低無(wú)法到達(dá)時(shí)，可用替代基質(zhì)來(lái)覆蓋所有的產(chǎn)品。(一)驗(yàn)證次數(shù)①必須經(jīng)過(guò)連續(xù)3次成功的試驗(yàn)。假設(shè)能證明活性藥物和清，潔劑的殘留物均在可承受限度，清潔驗(yàn)證方可認(rèn)為是成功的。清潔驗(yàn)證過(guò)程中清潔設(shè)備的用水必須符合相應(yīng)法規(guī)的測(cè)試要求(如注射用水、純化水標(biāo)準(zhǔn)等)。清潔后設(shè)備的外表應(yīng)均無(wú)肉眼可見(jiàn)的產(chǎn)品、溶液或清潔殘留物的痕跡。假設(shè)水在設(shè)備外表形成一層均勻的膜時(shí)，則可認(rèn)為說(shuō)明該設(shè)備已清潔干凈。②對(duì)新產(chǎn)品進(jìn)展評(píng)估，決定是否需要額外的清潔驗(yàn)證研究工程。假設(shè)該新產(chǎn)品證明是最難以清潔的和在使用同一設(shè)備的所有產(chǎn)品基質(zhì)中允許殘留濃度ARL是最低的物質(zhì)，則在前3批產(chǎn)品試驗(yàn)中必須要對(duì)設(shè)備清潔程序的驗(yàn)證進(jìn)展評(píng)價(jià)。(二)清潔驗(yàn)證可承受標(biāo)準(zhǔn)3次連續(xù)的驗(yàn)證中所收集的樣品測(cè)試結(jié)果，必須都符合允許值。1．棉球擦拭取樣法(1)對(duì)非專用設(shè)備與產(chǎn)品接觸的設(shè)備外表上取得樣品必須符合活性成分APl和清潔劑的允許殘留濃度ARL。(2)對(duì)專用設(shè)備只需對(duì)清潔劑的允許殘留濃度ARL進(jìn)展測(cè)定?，F(xiàn)在許多企業(yè)都使用專用設(shè)備(如箱型BIN混合機(jī)，可以配備許多BIN)來(lái)生產(chǎn)，以減少設(shè)備清潔驗(yàn)證的次數(shù)和難度。(3)允許殘留濃度ARL的計(jì)算ARL＝SEL·VSF(驗(yàn)證平安系數(shù))式中，SEL是指1d1個(gè)病人在服用1種藥物時(shí)，另1種藥物的殘留物在該藥物中的最大允許量。2．沖洗水取樣法1)對(duì)非專用設(shè)備①最后一次沖洗水中的活性成分APl濃度必須小于等于根據(jù)SEL計(jì)算出來(lái)的允許殘留濃度ARL值。②最后一次沖洗水中清潔劑(溶劑)的濃度必須小于等于藥物評(píng)價(jià)部門(mén)規(guī)定的允許殘留濃度ARL值。2)對(duì)專用設(shè)備最后一次沖洗水中清潔劑(溶劑)的濃度必須小于等于藥物評(píng)價(jià)部門(mén)規(guī)定的允許殘留濃度ARL值。3)允許殘留濃度ARL的計(jì)算(一般用于容器、貯罐設(shè)備的清洗)ARL＝SEL·VSF(驗(yàn)證平安系數(shù))3.微生物測(cè)試當(dāng)產(chǎn)品放行時(shí)需做微生物分析，其使用的設(shè)備在清潔驗(yàn)證時(shí)需在與產(chǎn)品接觸設(shè)備的外表進(jìn)展微生物取樣及測(cè)試。棉簽擦拭法的適宜標(biāo)準(zhǔn)一般為＜100CFU／10in2(2in×5in，lin=0.0254m)或＜100CFU／65cm2(5cm×13cm)。三、設(shè)備清潔驗(yàn)證步驟根據(jù)清潔程序的規(guī)定和要求或事先設(shè)定一個(gè)程序?qū)υO(shè)備進(jìn)展清潔，應(yīng)對(duì)整個(gè)清潔過(guò)程作詳細(xì)的記錄，記錄的容應(yīng)包括：進(jìn)展清潔驗(yàn)證設(shè)備的圖紙(應(yīng)在圖紙上標(biāo)出取樣點(diǎn))，設(shè)備一覽表(包括設(shè)備名稱、廠商、能力、型號(hào)和序號(hào)等)，清潔過(guò)程中的各項(xiàng)參數(shù)，清潔后的檢查情況。設(shè)備清潔完成后則應(yīng)根據(jù)要求進(jìn)展取樣。1．決定各藥品中最難清潔物質(zhì)對(duì)于有多個(gè)活性成分的藥品(如多組分藥品、復(fù)方制劑)，以最難溶解的活性成分作為最難清潔物質(zhì)。2．確定ARL值根據(jù)資料或比照各藥品活性成分(也是最難清潔的物質(zhì))，計(jì)算ARL值。3．非專用設(shè)備的清潔如*一設(shè)備是非專用設(shè)備，各種產(chǎn)品在生產(chǎn)過(guò)程中均使用，測(cè)試要求包括：①設(shè)備清潔后的目檢；②對(duì)選定藥品*個(gè)活性成分殘留物的測(cè)試；③微生物測(cè)試。4．決定設(shè)備使用后至清潔的周期假設(shè)驗(yàn)證中確定最大周期是72h，則驗(yàn)證試驗(yàn)所選擇的周期必須應(yīng)用到日常正常的設(shè)備清潔程序中，除非有新的驗(yàn)證加以更正。5．設(shè)備的枯燥、貯存和微生物測(cè)試①最后清洗后，應(yīng)根據(jù)貯藏條件對(duì)設(shè)備進(jìn)展枯燥，以防止微生物生長(zhǎng)。枯燥和貯存的程序必須與驗(yàn)證測(cè)試條件一致。②選擇最難清潔部位并以此作為取樣點(diǎn)。③清潔后的設(shè)備貯存方法須能防治污染(例如置于密閉處)。6．分析測(cè)試方法①測(cè)試儀器對(duì)API殘留物必須有足夠的靈敏度，能夠測(cè)量所研究化學(xué)實(shí)體的ARL的濃度。②測(cè)試(檢驗(yàn))方法必須經(jīng)過(guò)驗(yàn)證。7．決定取樣方法在驗(yàn)證前預(yù)先制訂取樣方案，根據(jù)提供的設(shè)備圖紙來(lái)確定取樣的位置，設(shè)備取樣一般在設(shè)備外表目檢后，采用棉簽法或水沖法來(lái)進(jìn)展。如果目檢過(guò)程中發(fā)現(xiàn)設(shè)備外表不清潔，則隨后的取樣就不必進(jìn)展了。明顯的污染說(shuō)明此清潔程序不能對(duì)設(shè)備進(jìn)展充分的清潔，故在繼續(xù)進(jìn)展驗(yàn)證前必須重新對(duì)清潔程序進(jìn)展評(píng)估和修正。用棉簽法采集樣品時(shí)，設(shè)備的外表系指設(shè)備與藥物接觸的外表，取樣點(diǎn)應(yīng)是設(shè)備的主要部位，且應(yīng)從設(shè)備與藥品接觸的外表中最難清潔的部位取樣。設(shè)備的取樣點(diǎn)一般不得少于3個(gè)。假設(shè)此設(shè)備是小型設(shè)備且取樣點(diǎn)具有代表性的話，則可以減少取樣數(shù)量。假設(shè)設(shè)備的*些外表并不接觸藥品，但可能會(huì)對(duì)產(chǎn)品造成潛在的污染，則也可以加以取樣。當(dāng)有些設(shè)備外表不可能或不適合用棉簽取樣時(shí)，可采用水沖洗法進(jìn)展取樣。水沖洗法的水樣不是取自為清潔而沖洗設(shè)備的最后用水，而是在設(shè)備清潔完畢后，用于沖洗設(shè)備外表并收集起來(lái)的用于樣品分析的水。沖洗水的用量應(yīng)能足以使設(shè)備所有外表得到潤(rùn)濕并提供足夠的量以便進(jìn)展分析測(cè)試。用作沖洗水的注射用水或純化水應(yīng)事先取樣，以便進(jìn)展對(duì)照分析。棉簽法的要點(diǎn)如下。①據(jù)設(shè)備情況決定試驗(yàn)中的取樣方法，一般設(shè)備外表用棉簽取樣。②假設(shè)產(chǎn)品殘留物在設(shè)備外表分布均勻，所有取樣點(diǎn)的測(cè)試結(jié)果不大于ARL。③棉簽取樣點(diǎn)應(yīng)代表整個(gè)清潔的設(shè)備外表，并以最難清潔部位為取樣點(diǎn)。在驗(yàn)證方案中應(yīng)圖示設(shè)備取樣點(diǎn)位置。④棉簽樣只能從接觸產(chǎn)品的設(shè)備外表取得。⑤棉簽樣的面積是65cm2左右。⑥取完樣的棉簽應(yīng)放入10ml的溶劑中并蓋緊蓋子。8．清潔驗(yàn)證監(jiān)控(1)準(zhǔn)備設(shè)備簡(jiǎn)圖為需要進(jìn)展清潔驗(yàn)證的每個(gè)設(shè)備準(zhǔn)備圖紙，并標(biāo)出棉簽取樣的位置。(2)準(zhǔn)備設(shè)備一覽表列出設(shè)備(包括自動(dòng)清洗設(shè)備和周轉(zhuǎn)容器)名稱、廠商、能力、型號(hào)和序列號(hào)。(3)記錄清洗循環(huán)參數(shù)應(yīng)盡量使有關(guān)自動(dòng)清潔的各項(xiàng)變量標(biāo)準(zhǔn)化，盡可能加以控制并測(cè)量，并記錄以下參數(shù)(包括設(shè)定值和實(shí)際值)：①設(shè)備使用后的“清洗〞周期；②為進(jìn)展清潔而引起的設(shè)備撤除程度；③預(yù)洗參數(shù)(例如弄濕、刮除、浸泡時(shí)間，溫度，溶液，用量等)；④每一清潔階段的水質(zhì)(飲用水、熱水、純化水等)；⑤洗滌時(shí)水的壓力和流量、水溫、水量、洗滌時(shí)間；⑥每一沖洗階段重復(fù)的次數(shù)；⑦水沖洗的方法(例如電動(dòng)噴射、浸沒(méi)、手工擦洗、其他)；⑧噴淋頭的數(shù)量和類型；⑨沖洗水的質(zhì)量；⑩沖洗水的壓力或流量、水溫、水量、沖洗時(shí)間；?沖洗水的排水方法；?沖洗的次數(shù)；?枯燥方法(例如壓縮空氣、自然枯燥、加熱)和條件(例如在環(huán)境控制區(qū)、層流下)；?貯存時(shí)間；?貯存條件(例如干凈度100

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級(jí))。注：設(shè)備手工清洗的程序和操作參數(shù)可根據(jù)實(shí)際情況盡可能詳細(xì)地記錄下來(lái)，表2－35是*一設(shè)備手工清潔驗(yàn)證記錄表。設(shè)備手工清潔程序完成后，今后日常的清洗操作必須遵循已驗(yàn)證的規(guī)則。所有的操作參數(shù)如介質(zhì)、壓力、溫度、用力大小、閥門(mén)開(kāi)啟度等必須大于驗(yàn)證時(shí)的參數(shù)?；蛘咴跀M定驗(yàn)證方案時(shí)，將驗(yàn)證時(shí)的操作參數(shù)設(shè)定得比日常操作時(shí)小，如最終沖洗水的水溫平時(shí)為65℃，則驗(yàn)證時(shí)可設(shè)定為55℃。9．分析測(cè)試的要求對(duì)于制造一個(gè)單一產(chǎn)品的專用設(shè)備，假設(shè)在清潔過(guò)程中使用清潔劑的話，則驗(yàn)證分析時(shí)必須進(jìn)展清潔劑殘留物的測(cè)試；假設(shè)產(chǎn)品放行前要進(jìn)展微生物分析的話，則設(shè)備清潔后應(yīng)立即取樣，并進(jìn)展微生物測(cè)試；對(duì)于制造多類產(chǎn)品的非專用設(shè)備，還必須增加活性藥物殘留量的測(cè)試。最具活性的產(chǎn)品或最難清潔的產(chǎn)品應(yīng)被視為“最惡劣條件〞，用其代表所有產(chǎn)品進(jìn)展清潔驗(yàn)證。假設(shè)*設(shè)備生產(chǎn)的產(chǎn)品中既有最具活性，又有最難清潔的原料或成分，則取其中ARL值比擬低的產(chǎn)品作為清潔驗(yàn)證的代表產(chǎn)品。當(dāng)*一設(shè)備要用于新產(chǎn)品生產(chǎn)時(shí)，一般需對(duì)新產(chǎn)品進(jìn)展清潔驗(yàn)證，而對(duì)于那些具有高毒性的產(chǎn)品則應(yīng)單獨(dú)進(jìn)展清潔驗(yàn)證。四、清潔驗(yàn)證失敗的調(diào)查假設(shè)清潔驗(yàn)證的最后測(cè)試結(jié)果證明驗(yàn)證未到達(dá)合格標(biāo)準(zhǔn)而失敗的話，則應(yīng)對(duì)驗(yàn)證過(guò)程進(jìn)展全面的調(diào)查，以查清造成失敗的真正原因，然后根據(jù)失敗的性質(zhì)采取相應(yīng)的措施。對(duì)于與驗(yàn)證過(guò)程無(wú)關(guān)的、有明顯原因的失敗(諸如機(jī)器故障、動(dòng)力故障、分析錯(cuò)誤等)，這次試驗(yàn)可不作為整個(gè)驗(yàn)證的一局部，但這個(gè)失敗的記錄應(yīng)收集在驗(yàn)證報(bào)告中，并且這個(gè)失敗并不證明早先試驗(yàn)的無(wú)效。對(duì)于與驗(yàn)證有關(guān)的失敗(諸如清潔過(guò)程未按規(guī)定的清潔程序進(jìn)展)或無(wú)明確原因的失敗(如沒(méi)有明顯理由)，則必須重新進(jìn)展連續(xù)3次的試驗(yàn)。這次失敗應(yīng)有記錄，但不必歸人驗(yàn)證檔案中。五、清潔程序的制訂要進(jìn)展清潔驗(yàn)證，首先必須對(duì)有關(guān)設(shè)備制訂相應(yīng)的清潔程序，然后根據(jù)此程序進(jìn)展設(shè)備的清潔，再通過(guò)取樣和測(cè)試分析對(duì)此程序加以驗(yàn)證，或根據(jù)已有的清潔SOP作驗(yàn)證。清潔程序應(yīng)包括以下容。1．清潔周期確實(shí)定生產(chǎn)部門(mén)根據(jù)生產(chǎn)的需要，制訂設(shè)備使用完畢和清潔的周期。根據(jù)實(shí)際作業(yè)情況，清潔周期確實(shí)定一般需考慮以下幾個(gè)因素：①連續(xù)進(jìn)展數(shù)批同品種產(chǎn)品或中間體的生產(chǎn)后；②更換不同品種產(chǎn)品或中間體生產(chǎn)時(shí)；③設(shè)備經(jīng)過(guò)重大檢修后；④突發(fā)事件的發(fā)生使設(shè)備受污時(shí)；⑤設(shè)備閑置超過(guò)一定時(shí)間且又需重新啟用時(shí)。在進(jìn)展設(shè)備清潔驗(yàn)證的過(guò)程中也應(yīng)按此周期實(shí)施清潔工作，且在清潔驗(yàn)證通過(guò)后，正常生產(chǎn)過(guò)程中的設(shè)備清潔周期應(yīng)不大于此時(shí)間。2．清潔部位確實(shí)定用于藥品生產(chǎn)的設(shè)備根據(jù)其生產(chǎn)產(chǎn)品一樣與否，可分為專用設(shè)備和非專用設(shè)備。所謂專用設(shè)備即指那些用于生產(chǎn)同一類產(chǎn)品的設(shè)備；而非專用設(shè)備則指那些用于制造假設(shè)干不同產(chǎn)品的設(shè)備。一般而言，根據(jù)設(shè)備的用途、設(shè)備外表的類型和特征以及設(shè)備的構(gòu)造來(lái)確定設(shè)備的待清潔部位，以到達(dá)去除污染的目的。3．清潔劑的選擇設(shè)備清潔程序中選擇適宜的清潔劑是尤為重要的，一般而言主要根據(jù)清潔劑本身不同的化學(xué)性質(zhì)、去污能力、實(shí)驗(yàn)室的評(píng)估以及以往設(shè)備清潔的經(jīng)歷來(lái)確定清潔劑的類型。4．清潔工具和場(chǎng)地的規(guī)定清潔程序中應(yīng)注明清潔過(guò)程中所使用的工具，諸如抹布、刷子等的類型；清潔的場(chǎng)地也要明確，一般采用就地清潔和專用場(chǎng)所(清潔間)清潔兩種方法。5．清潔參數(shù)確實(shí)定清潔程序中必須對(duì)整個(gè)清潔過(guò)程中設(shè)備的拆裝操作有詳細(xì)的描述；清潔過(guò)程中的技術(shù)參數(shù)應(yīng)盡可能使有關(guān)手工清潔的各項(xiàng)變量標(biāo)準(zhǔn)化，而這些技術(shù)參數(shù)確實(shí)定應(yīng)盡可能便于測(cè)量控制和記錄。這些技術(shù)參數(shù)一般應(yīng)包括以下容：清潔前預(yù)處理(刮除或浸泡)，參數(shù)(例如時(shí)間、溫度、溶劑、用量等)，清潔用水的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，持續(xù)洗滌時(shí)間，洗滌水的壓力、流量、溫度和用量，洗滌的次數(shù)，所使用溶劑的名稱、濃度和用量，所使用清潔劑的名稱、濃度和用量，水洗的方法(例如電動(dòng)噴射、浸沒(méi)、手工洗滌等)，沖淋水的質(zhì)量，沖淋持續(xù)時(shí)間，沖淋水的壓力、流量、溫度和用量，沖淋的次數(shù)，沖淋的方法，手工清洗用力大小等。根據(jù)設(shè)備的不同，清潔操作的順序、方法和要求也不盡一樣。這些都應(yīng)在各自清潔程序中作明確而詳細(xì)的描述。6．設(shè)備的枯燥和貯存清潔完畢后應(yīng)對(duì)設(shè)備進(jìn)展枯燥以防止微生物的生長(zhǎng)。設(shè)備的枯燥一般可采用干凈的壓縮空氣吹淋、自然枯燥或加熱枯燥等方法。清潔枯燥后設(shè)備的貯存方法須能防止污染，須明確貯存時(shí)間和貯存條件(例如貯存室的干凈度和溫度、濕度要求等)。7．清潔后的檢查設(shè)備的整個(gè)清潔工作完成后應(yīng)對(duì)清潔工作進(jìn)展檢查，可采用目檢的方法。檢查的容包括：①設(shè)備、外外表清潔情況的判定，尤其應(yīng)仔細(xì)檢查那些關(guān)鍵部位和難以清潔的部位；②清潔記錄是否及時(shí)、完整、清晰和規(guī)；③清潔后的設(shè)備是否有“已清潔〞的狀態(tài)牌。清潔檢查完畢后，檢查者應(yīng)在檢查記錄表上簽名認(rèn)可。假設(shè)在檢查中發(fā)現(xiàn)清潔沒(méi)有到達(dá)要求，則應(yīng)重新對(duì)設(shè)備進(jìn)展清潔。六、驗(yàn)證報(bào)告的完成清潔驗(yàn)證完畢后，各驗(yàn)證部門(mén)應(yīng)將自己負(fù)責(zé)局部的驗(yàn)證數(shù)據(jù)和資料匯總，并起草相關(guān)局部的報(bào)告，然后交驗(yàn)證部統(tǒng)一匯總，對(duì)每一局部加以復(fù)核，在此根底上起草一份完整的驗(yàn)證報(bào)告，送交驗(yàn)證委員會(huì)審批。一份完整的清潔驗(yàn)證報(bào)告應(yīng)包括驗(yàn)證方案、清潔程序、設(shè)備一覽表、清潔參數(shù)、分析測(cè)試數(shù)據(jù)、驗(yàn)證總結(jié)等容。七、驗(yàn)證報(bào)告的審查和批準(zhǔn)驗(yàn)證委員會(huì)應(yīng)按照相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)對(duì)驗(yàn)證報(bào)告中所列的各項(xiàng)技術(shù)參數(shù)、驗(yàn)證過(guò)程和測(cè)試分析結(jié)果逐一加以審查，以確保所實(shí)施的清潔驗(yàn)證對(duì)正常生產(chǎn)過(guò)程中的設(shè)備清潔和質(zhì)量控制具有可重復(fù)性。假設(shè)提交的驗(yàn)證報(bào)告符合規(guī)定的要求，則應(yīng)簽署驗(yàn)證合格報(bào)告以正式批準(zhǔn)該清潔驗(yàn)證工程的通過(guò)。生產(chǎn)部門(mén)在收到清潔驗(yàn)證合格證后，可根據(jù)驗(yàn)證的技術(shù)參數(shù)和清潔程序制訂詳細(xì)的清潔操作規(guī)程SOP，并進(jìn)展全面的培訓(xùn)，以確保驗(yàn)證過(guò)程中所使用的程序能切實(shí)得以執(zhí)行。第二章清潔驗(yàn)證第一節(jié)概要在藥品生產(chǎn)的每道工序完成后，對(duì)制藥設(shè)備進(jìn)展清洗是防止藥品污染和穿插污染的必要手段。產(chǎn)品生產(chǎn)后，總會(huì)殘留假設(shè)干原輔料和微生物。微生物在適當(dāng)?shù)臏貪穸认乱詺埩粑镏械挠袡C(jī)物為營(yíng)養(yǎng)可大量繁殖，產(chǎn)生各種代物，從而大大增加殘留物的復(fù)雜性和危害程度。顯然，如果這些殘留的原輔料、微生物和其代產(chǎn)物進(jìn)入下批生產(chǎn)過(guò)程，必然對(duì)下批產(chǎn)品產(chǎn)生不良影響。因此，必須通過(guò)清洗將這些污染源從藥品生產(chǎn)的循環(huán)中除去。嚴(yán)格地講，絕對(duì)意義上的、不含任何殘留物的清潔狀態(tài)是不存在的。在制藥工業(yè)中，清潔的概念就是指設(shè)備中各種殘留物〔包括微生物及其代產(chǎn)物〕的總量低至不影響下批產(chǎn)品的規(guī)定的療效、質(zhì)量和平安性的狀態(tài)。通過(guò)有效的清洗，可將上批生產(chǎn)殘留在生產(chǎn)設(shè)備中的物質(zhì)減少到不會(huì)影響下批產(chǎn)品療效、質(zhì)量和平安性的程度。由于有效的清洗除去了微生物繁殖需要的有機(jī)物，創(chuàng)造了不利于微生物繁殖的客觀條件，便于將設(shè)備中的微生物污染控制在一定水平。設(shè)備的清潔程度，取決于殘留物的性質(zhì)、設(shè)備的構(gòu)造、材質(zhì)和清洗的方法。對(duì)于確定的設(shè)備和產(chǎn)品，清潔效果取決于清洗的方法。書(shū)面的、確定的清洗方法即所謂的清潔規(guī)程，應(yīng)包括清洗方法及影響清潔效果的各項(xiàng)具體規(guī)定，如清洗前設(shè)備的拆卸、清潔劑的種類、濃度、溫度、清洗的次序和各種參數(shù)，清洗后的檢查或清潔效果確實(shí)認(rèn)等以及生產(chǎn)完畢后等待清洗的最長(zhǎng)時(shí)間及清洗后至下次生產(chǎn)的最長(zhǎng)存放時(shí)間等。設(shè)備的清洗必須按照清潔規(guī)程進(jìn)展。各種版本的GMP都規(guī)定必須對(duì)清潔規(guī)程進(jìn)展驗(yàn)證。清潔驗(yàn)證就是通過(guò)科學(xué)的方法采集足夠的數(shù)據(jù)，以證明按規(guī)定方法清潔后的設(shè)備，能始終如一地到達(dá)預(yù)定的清潔標(biāo)準(zhǔn)。驗(yàn)證結(jié)論的準(zhǔn)確性與完整性，是驗(yàn)證的核心。驗(yàn)證的方法學(xué)是保證驗(yàn)證結(jié)論完整可靠的關(guān)鍵。從方法學(xué)上考慮，科學(xué)、完整的清潔驗(yàn)證一般可按以下幾個(gè)工作階段依次進(jìn)展(圖3－1)。1．開(kāi)發(fā)階段根據(jù)產(chǎn)品性質(zhì)、設(shè)備特點(diǎn)、生產(chǎn)工藝等因素?cái)M定清潔方法并制定清潔規(guī)程，對(duì)清潔人員進(jìn)展操作培訓(xùn)。2．方案準(zhǔn)備階段對(duì)生產(chǎn)設(shè)備進(jìn)展詳細(xì)考察，確定有代表性的，難清潔的部位作為取樣點(diǎn)；計(jì)算設(shè)備的外表積；根據(jù)產(chǎn)品的相關(guān)性質(zhì)選定*種物質(zhì)作為參照物質(zhì)，確定清潔后允許的最大殘留量為合格標(biāo)準(zhǔn)，驗(yàn)證過(guò)檢驗(yàn)其含量確定設(shè)備清潔的程度，必要時(shí)還要考察清潔的殘留量；根據(jù)驗(yàn)證共同要求制訂并批準(zhǔn)驗(yàn)證方案；開(kāi)發(fā)驗(yàn)證有關(guān)取樣方法和檢驗(yàn)方法，以保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。在驗(yàn)證開(kāi)場(chǎng)前需對(duì)有關(guān)人員進(jìn)展培訓(xùn)。3．方案實(shí)施階段按照批準(zhǔn)的驗(yàn)證方案開(kāi)展試驗(yàn)獲取數(shù)據(jù)，評(píng)價(jià)結(jié)果，得出結(jié)論。如驗(yàn)證的結(jié)果說(shuō)明清潔程序無(wú)法確保設(shè)備清潔到達(dá)預(yù)定標(biāo)準(zhǔn)，則需查找原因、修改程序并重新驗(yàn)證，直至結(jié)果合格。4．監(jiān)控及再驗(yàn)證階段對(duì)已驗(yàn)證并投入運(yùn)行的清潔方法進(jìn)展監(jiān)控，對(duì)清潔方法的變更實(shí)行變更管理，根據(jù)監(jiān)測(cè)的結(jié)果來(lái)看各種生產(chǎn)活動(dòng)中，所采用的清潔方法能到達(dá)的實(shí)際效果，以確定再驗(yàn)證的周期進(jìn)展再驗(yàn)證。第二節(jié)清潔方法的制訂一、清潔方式工藝設(shè)備的清潔，通?？煞譃槭止で鍧嵎绞胶妥詣?dòng)清潔方式，或兩者的結(jié)合。手工清潔方式的特征是主要由人工持清潔工具，按預(yù)定的要求清洗設(shè)備，根據(jù)目測(cè)確定清潔的程度，直至清潔完成。常用的清潔工具一般有能噴灑清潔劑和淋洗水的噴槍，刷子、尼龍清潔塊等。清洗前通常需要將設(shè)備拆卸到一定程度并轉(zhuǎn)移到專門(mén)的清洗場(chǎng)所。自動(dòng)清潔方式的特點(diǎn)是由自動(dòng)化的專門(mén)設(shè)備按一定的程序自動(dòng)完成整個(gè)清潔過(guò)程的方式。通常只要將清洗裝置同待清洗的設(shè)備相連接，由清洗裝置按預(yù)定的程序完成整個(gè)清潔過(guò)程，整個(gè)清潔過(guò)程通常不需要人工檢查已清潔的程度，乃至干預(yù)程序的執(zhí)行。這兩種主要的清潔方式在實(shí)際生產(chǎn)中應(yīng)用很廣，清潔方式的選擇應(yīng)當(dāng)全面考慮設(shè)備的材料、構(gòu)造、產(chǎn)品的性質(zhì)、設(shè)備的用途及清潔方法能到達(dá)的效果等各個(gè)方面。舉例來(lái)說(shuō)，如果設(shè)備體積龐大且外表光滑無(wú)死角；生產(chǎn)使用的物料和產(chǎn)品易溶于水或一定的清潔劑，這種情況下比擬適合采用自動(dòng)或半自動(dòng)的在線清洗方式：清潔劑和淋洗水在泵的驅(qū)動(dòng)下以一定的溫度、壓力、速度和流量流經(jīng)待清洗設(shè)備的管道，或通過(guò)專門(mén)設(shè)計(jì)的噴淋頭均勻噴灑在設(shè)備外表從而到達(dá)清洗的目的。大容量注射劑的配制系統(tǒng)多采用這種方式。如果生產(chǎn)設(shè)備死角較多，難以清潔，或生產(chǎn)的產(chǎn)品易粘結(jié)在設(shè)備外表、易結(jié)塊，則需要進(jìn)展一定程度的拆卸并用人工或?qū)Ｓ迷O(shè)備清洗。大容量注射劑的灌裝機(jī)、小容量注射劑的灌裝機(jī)、膠囊填充機(jī)及制粒機(jī)、壓片機(jī)等一般都可采用采用人工清洗方式。不管采取何種清潔方式，都必須制定一份詳細(xì)的書(shū)面規(guī)程，規(guī)定每一臺(tái)設(shè)備的清洗程序，從而保證每個(gè)操作人員都能以一樣的方式實(shí)施清洗，并獲得一樣的清潔效果。這是進(jìn)展清潔驗(yàn)證的前提。從保證清潔重現(xiàn)性及驗(yàn)證結(jié)果的可靠性出發(fā)，清潔規(guī)程至少應(yīng)對(duì)以下方面作出規(guī)定。①清潔開(kāi)場(chǎng)前對(duì)設(shè)備必要的拆卸要求和清潔完成后的裝配要求。②所用清潔劑的名稱、成分和規(guī)格。③清潔溶液的濃度和數(shù)量。④清潔溶液的配制方法。⑤清潔溶液接觸設(shè)備外表的時(shí)間、溫度、流速等關(guān)鍵參數(shù)。⑥淋洗要求。⑦生產(chǎn)完畢至開(kāi)場(chǎng)清潔的最長(zhǎng)時(shí)間。⑧連續(xù)生產(chǎn)的最長(zhǎng)時(shí)間。⑨已清潔設(shè)備用于下次生產(chǎn)前的最長(zhǎng)存放時(shí)間。二、清潔規(guī)程的要點(diǎn)1.拆卸應(yīng)規(guī)定清潔一臺(tái)設(shè)備需要拆卸的程度。大多數(shù)設(shè)備，如大容量注射劑的灌裝機(jī)、一步制粒機(jī)等在清潔前需要預(yù)先拆卸到一定程度，小針的灌裝機(jī)則幾乎可以說(shuō)是完全拆卸。應(yīng)有書(shū)面的、容清晰完整的拆卸指導(dǎo)，最好附有圖表或示意圖，以使操作人員容易理解。2．預(yù)洗/檢查預(yù)洗的目的是除去大量的(可見(jiàn)的)剩余產(chǎn)品或原料，為此后的清潔創(chuàng)造一個(gè)根本一致的起始條件。由于清潔規(guī)程往往不是專用的，它需要適用于生產(chǎn)多種產(chǎn)品和濃度或劑量規(guī)格的通用設(shè)備，以簡(jiǎn)化管理及操作，因此需進(jìn)展預(yù)洗。預(yù)洗的作用是確立一個(gè)相對(duì)一致的起始點(diǎn)，以提高隨后各步操作的重現(xiàn)性。預(yù)洗所使用水質(zhì)不必苛求，通常飲用水或經(jīng)一定程度凈化(如過(guò)濾)的飲用水已經(jīng)足夠。使用水管或手持高壓噴槍以新鮮的流水沖洗設(shè)備以除去殘留物。對(duì)于殘留物物理性質(zhì)差異較大的情況，有的企業(yè)希望制定一份產(chǎn)品與預(yù)洗參數(shù)如水溫、壓力、時(shí)間等一一對(duì)應(yīng)的對(duì)照表，由操作人員按實(shí)際產(chǎn)品選擇參數(shù)。這種方法在實(shí)施時(shí)并不十分理想。由于操作人員的素質(zhì)及習(xí)慣，從一大堆方案中去選擇應(yīng)當(dāng)采用的方案反而容易造成過(guò)失。比擬簡(jiǎn)單而切合實(shí)際的方法是讓操作者檢查是否還有可見(jiàn)的殘留物，讓他們持續(xù)噴淋設(shè)備直至可見(jiàn)殘留物消失，以此作為預(yù)洗的終點(diǎn)。因此，操作者判斷預(yù)洗完成與否的標(biāo)準(zhǔn)必須盡可能的明確，特別是應(yīng)檢查的部位。例如，可在規(guī)程中作出這樣的規(guī)定：用熱的飲用水持續(xù)噴淋機(jī)器的所有外表，使所有可見(jiàn)的殘留顆粒消失。特別注意檢查不易清潔的部位。3．清洗此步的目的用清潔劑以一定的程序(如固定的方法、清洗時(shí)間等)除去設(shè)備上看不到的產(chǎn)品。這種一致性是進(jìn)展驗(yàn)證的根底。在預(yù)洗后，下一步即對(duì)設(shè)備或部件進(jìn)展實(shí)際的清洗。如果清潔程序中要使用專用的清潔劑，即在本步使用。為獲得穩(wěn)定的結(jié)果，減小偏差的發(fā)生，必須明確規(guī)定清潔劑的名稱、規(guī)格和使用的濃度以及配制該清潔溶液的方法。應(yīng)明確清潔劑的組成，以便驗(yàn)證時(shí)檢查是否有殘留的清潔劑。從本質(zhì)上看，這一步的清潔是溶劑對(duì)殘留物的溶解過(guò)程，而溶解往往隨溫度的升高而加快，因此，溫度是這一過(guò)程的重要的參數(shù)，必須規(guī)定溫度控制的圍、測(cè)量及控制溫的方法。為提高清洗效率，可采用多步清洗的方式。在這種情形下兩步清洗之間可參加淋洗操作。配制清潔溶液的水可根據(jù)需要采用飲用水或純化水。4．淋洗用水以固定的方法和固定的淋洗時(shí)間淋洗設(shè)備外表，以除去設(shè)備上看不到清潔劑是本操作的目的。清洗步驟通常溶解了大局部殘留物，但設(shè)備上殘留的清洗液中含水、清潔劑和殘留的產(chǎn)品或原料。本步驟用水對(duì)其進(jìn)展充分的淋洗使殘留物的濃度降至預(yù)定限度以下，以不造成新的潛在的污染。為提高淋洗效率，宜采用屢次淋洗的淋洗方法。在淋洗階段，GMP對(duì)水質(zhì)有明確的要求。應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品的類型采用符合藥典標(biāo)準(zhǔn)的純化水或注射用水。當(dāng)然淋洗最初階段，可以使用質(zhì)量較低的水如飲用水。如由電腦按預(yù)定程序自動(dòng)執(zhí)行的淋洗程序進(jìn)展淋洗，淋洗的結(jié)果就比擬平安可靠。從確保淋洗效果出發(fā)，應(yīng)盡可能防止人工法對(duì)不同水質(zhì)的切換——由操作者根據(jù)淋洗步驟選擇水質(zhì)的方式。由于本步驟的目的是除去已溶解的低濃度的殘留物，并使殘留在設(shè)備上的水具有盡可能高的質(zhì)量(最小的可溶性固體，最低的微生物污染水平)，在淋洗水的壓力、流速、淋洗持續(xù)時(shí)間及水溫等諸影響因素中，水溫的重要性相對(duì)下降。當(dāng)然，較高的溫度有助于殘留水的揮發(fā)，并兼有一定的消毒作用。5．枯燥根據(jù)需要決定是否進(jìn)展枯燥。除去設(shè)備外表的殘留水分可防止微生物生長(zhǎng)，由于水膜有可能掩蓋殘留物，一定程度上有礙檢查。因此對(duì)于須暴露保存的設(shè)備，應(yīng)進(jìn)展枯燥。但對(duì)于經(jīng)過(guò)驗(yàn)證的清潔程序，如果設(shè)備淋洗后要進(jìn)展滅菌處理，或是采用高溫、無(wú)菌的注射用水淋洗后并保持密閉的設(shè)備則不一定要進(jìn)展枯燥處理。6．檢查通常經(jīng)過(guò)驗(yàn)證的清潔程序應(yīng)保證清潔后的設(shè)備不殘留可見(jiàn)的剩余物。進(jìn)展目檢可在發(fā)生意外時(shí)，仍能及時(shí)發(fā)現(xiàn)而采取補(bǔ)救措施，而不危及下批產(chǎn)品。因此在規(guī)程中可作出類似規(guī)定，如：目檢所有設(shè)備的外表，不得有剩余物。如發(fā)現(xiàn)剩余物，向工段長(zhǎng)匯報(bào)以采取糾偏措施。7．儲(chǔ)存規(guī)定已清潔設(shè)備和部件的儲(chǔ)存條件和最長(zhǎng)儲(chǔ)存時(shí)間，以防止再次污染。8．裝配應(yīng)規(guī)定將被拆卸部件重新裝配的各步操作，附以圖表和示意圖以利于操作者理解。此外，要注意裝配期間防止污染設(shè)備和部件。三、清潔劑的選擇清潔劑應(yīng)能有效溶解殘留物，不腐蝕設(shè)備，且本身易被去除。人用藥品注冊(cè)技術(shù)要求國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)協(xié)調(diào)會(huì)(ICH)在“殘留溶劑指南〞將溶劑分為3個(gè)級(jí)別，對(duì)其使用和殘留限度有明確的要求。隨著環(huán)境保護(hù)標(biāo)準(zhǔn)的提高，還應(yīng)要求清潔劑對(duì)環(huán)境盡量無(wú)害或可被無(wú)害化處理。滿足以上要求的前提下應(yīng)盡量廉價(jià)。根據(jù)這些標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)于水溶性殘留物，水是首選的清潔劑。從驗(yàn)證的角度，不同批號(hào)的清潔劑應(yīng)當(dāng)有足夠的質(zhì)量穩(wěn)定性。因此不宜提倡采用一般家用清潔劑，因其成分復(fù)雜、生產(chǎn)過(guò)程中對(duì)微生物污染不加控制、質(zhì)量波動(dòng)較大且供給商不公布詳細(xì)組成。使用這類清潔劑后，還會(huì)帶來(lái)另一個(gè)問(wèn)題，即如何證明清潔劑的殘留到達(dá)了標(biāo)準(zhǔn)"應(yīng)盡量選擇組成簡(jiǎn)單、成分確切的清潔劑。根據(jù)殘留物和設(shè)備的性質(zhì)，企業(yè)還可自行配制成分簡(jiǎn)單效果確切的清潔劑，如一定濃度的酸、堿溶液等。企業(yè)應(yīng)有足夠靈敏的方法檢測(cè)清潔劑的殘留情況，并有能力回收或?qū)U液進(jìn)展無(wú)害化處理。第三節(jié)清潔驗(yàn)證方案的準(zhǔn)備參照物質(zhì)或最難清潔物質(zhì)、最難清潔部位和取樣部位，如何制訂驗(yàn)證的合格標(biāo)準(zhǔn)即最大允許殘留清潔驗(yàn)證方案必須符合一般驗(yàn)證方案的共性要求。驗(yàn)證方案中最關(guān)鍵技術(shù)問(wèn)題為如何確定限度，用什么手段能準(zhǔn)確地定量殘留量，這包括取樣方法和檢測(cè)方法的開(kāi)發(fā)和驗(yàn)證。一、參照物質(zhì)與最難清潔物質(zhì)一般藥品都由活性成分和輔料組成。對(duì)于復(fù)方制劑，含有多個(gè)活性成分。所有這些物質(zhì)的殘留物都是必須除去的。在清潔驗(yàn)證中是否需要為所有殘留物都制定限度標(biāo)準(zhǔn)并一一檢測(cè)呢"這是不切實(shí)際且沒(méi)有必要的。在一定的意義上，清潔的過(guò)程是個(gè)溶解的過(guò)程，因此，通常的做法是從各組分中確定最難清潔(溶解)的物質(zhì)，以此作為參照物質(zhì)。通常，相對(duì)與輔料，人們最更關(guān)注活性成分的殘留，因?yàn)樗赡苤苯佑绊懴屡a(chǎn)品的質(zhì)量、療效和平安性。因此活性成分的殘留限度必須作為驗(yàn)證的合格標(biāo)準(zhǔn)之一。如當(dāng)存在兩個(gè)以上的活性成分時(shí)，其中最難溶解的成分即可作為最難清潔物質(zhì)論處。以復(fù)方18氨基酸注射液為例，它有18種氨基酸，均為活性成分。其中最難溶解的為胱氨酸，僅微溶于熱水，因此可將其作為最難清潔物質(zhì)。這樣一來(lái)，清潔驗(yàn)證就找到了殘留的“參照物〞而用不著為其他易溶組分操心。二、最難清潔部位和取樣點(diǎn)在討論如何確定最難清潔部位前，首先應(yīng)當(dāng)對(duì)清洗的機(jī)制有所了解。除手工擦洗主要依靠機(jī)械摩擦力將附著在設(shè)備外表的殘留物除去外，常規(guī)的清洗過(guò)程可從清洗液對(duì)殘留物的作用角度大致分為溶解、乳化和化學(xué)反響等不同的機(jī)制。不管何種機(jī)制，都存在殘留物與清洗液接觸、被潤(rùn)濕、脫離設(shè)備外表等共同的過(guò)程。在此以使用最普遍的清洗機(jī)制——溶解為例詳細(xì)進(jìn)展討論。以溶解為機(jī)制的清洗過(guò)程主要是通過(guò)溶劑(清洗液)對(duì)殘留物的溶解作用以及流動(dòng)的清洗液對(duì)殘留物的沖擊而使附著在設(shè)備外表的殘留物進(jìn)入溶劑中。微觀上看溶解的速度取決于單位時(shí)間由溶質(zhì)外表進(jìn)入溶液的溶質(zhì)分子數(shù)與從溶液中回到溶質(zhì)外表的分子之差。一旦差值為零，外表溶解過(guò)程到達(dá)動(dòng)態(tài)平衡，此溶液即為飽和溶液。溶解過(guò)程中從溶質(zhì)外表很快形成一薄層飽和溶液，飽和溶液中的溶質(zhì)分子不斷向溶液深處擴(kuò)散，形成從溶質(zhì)外表到溶液深處的一個(gè)遞減的濃度梯度。如果處于飽和層的溶質(zhì)分子不能迅速進(jìn)入溶液深處，就會(huì)降低溶解的速度。因此可以觀察到即使是溶解度很大的物質(zhì)，如蔗糖的塊狀結(jié)晶(俗稱冰糖)在無(wú)攪拌的靜止?fàn)顟B(tài)下的溶解速度是非常緩慢的。提高溶解速度的方法是使溶液流動(dòng)以迫使溶質(zhì)外表的飽和層離開(kāi)。在清洗過(guò)程中，必須使清潔劑在運(yùn)動(dòng)中與殘留物接觸。清潔劑與殘留物的相對(duì)運(yùn)動(dòng)從宏觀上可分解為垂直方向和水平方向的運(yùn)動(dòng)。相對(duì)垂直的運(yùn)動(dòng)可將已溶解的物質(zhì)迅速帶離溶質(zhì)外表，而水平方向的相對(duì)運(yùn)動(dòng)根據(jù)流體力學(xué)的根本原理，可分為層流和湍流兩類情況(圖3－2)。層流指流體在導(dǎo)管中流動(dòng)時(shí)，所有質(zhì)點(diǎn)均沿著與管軸平行的方向流動(dòng)。此時(shí)流體的速度在管道軸心處的速度最大，自軸心至管壁速度逐漸減以至等于零。由此可以推斷，如果清潔劑在待清洗設(shè)備中形成了層流，會(huì)很迅速地在殘留物外表形成一穩(wěn)定的飽和溶液層，殘留物的溶解速度會(huì)急劇下降，這與靜止?fàn)顟B(tài)下的溶解過(guò)程非常相似，從而清潔效率也隨之明顯下降。因此在清潔中應(yīng)防止層流的產(chǎn)生。流體以湍流形式流動(dòng)時(shí)，雖然宏觀上流體沿管道向一個(gè)方向流動(dòng)，但從微觀上看各質(zhì)點(diǎn)的運(yùn)動(dòng)速度在大小和方向上都隨時(shí)發(fā)生變化。總有局部質(zhì)點(diǎn)的運(yùn)動(dòng)方向相對(duì)垂直于管軸或管壁。這樣殘留物外表再也不會(huì)形成穩(wěn)定的飽和層，溶解的速度就大大提高了，清潔的效率也隨之提高。因此，在清洗過(guò)程中，必須保證清潔液以湍流形式流動(dòng)。流體以何種形式流動(dòng)取決于流體雷諾準(zhǔn)數(shù)Re的大小。Re＝dwρ/μ式中，d為管道直徑；w為流速；ρ為流體的密度；μ為黏度。當(dāng)Re＜2300時(shí)，為層流；Re＞10000時(shí)，為湍流；2300＜Re＜10000時(shí)，為層流和湍流的過(guò)渡階段。Re越大，外表湍流越劇烈，即質(zhì)點(diǎn)運(yùn)動(dòng)方向和速率的變化越大，殘留物溶解的速度越快。在已確定清潔劑和淋洗液的情況下，Re正比于管徑與流速的乘積：Re∝wd比擬普遍的在線清洗過(guò)程都有清潔劑在泵的驅(qū)動(dòng)下在設(shè)備與管道中循環(huán)的步驟。對(duì)已確定的系統(tǒng)，清潔劑的流量V是固定的。根據(jù)液體的不可壓縮特性，在沒(méi)有平行管道和分叉的情況下，不管管徑如何變化，管各點(diǎn)的流量必然一樣。因V＝wS＝wπR2＝π/4×wd2，其中為管道截面積，則＝4/π×V/d2；則Re∝V/d，如V為定值，則Re∝l/d由此可知，在系統(tǒng)中，管徑較大的部位或管徑由小變大的部位Re值較小，相對(duì)容易發(fā)生層流，較難被清潔。對(duì)有多根平行管道尤其是管徑不同的系統(tǒng)，因各管道的流速變化、流量分配各不一樣，通常將這些部位列為較難清潔的部位。此外，切不可無(wú)視哪些似乎不直接接觸產(chǎn)品的部位，如復(fù)方氨基酸注射液配制系統(tǒng)一般需安裝防爆平安伐(膜)的歧管、排氣管、充氮管、抽真空管等。這些管道或由于投料時(shí)物料微粒的飛揚(yáng)，或因?yàn)榕渲乒揿F化的小液滴隨充氮、抽真空等工藝過(guò)程四處飄散而可能被污染。有時(shí)這種污染很輕微，但如果清潔程序未能考慮這些管路，日積月累就可能產(chǎn)生嚴(yán)重的后果。綜合而言，但凡死角、清潔劑不易接觸的部位如帶密封墊圈的管道連接處，壓力、流速迅速變化的部位如有歧管或岔管處、管徑由小變大處、容易吸附殘留物的部位如外表不光滑處等，都應(yīng)視為最難清潔的部位。顯然，取樣點(diǎn)應(yīng)包括各類最難清潔部位。乳化和化學(xué)反響的機(jī)制在微觀上與溶解過(guò)程相似，都有清潔劑分子作用于殘留物外表，使其外表的分子脫離或反響生成其他物質(zhì)進(jìn)而溶解，因此宏觀上不容易形成湍流的部位也是難清潔的部位。三、殘留物限度確實(shí)定如何確定殘留物限度是個(gè)相當(dāng)復(fù)雜的問(wèn)題，但卻是驗(yàn)證方案無(wú)法回避，必須解決的問(wèn)題。FDA在其"清潔規(guī)程驗(yàn)證檢查指南"中指出：“FDA不打算為清潔驗(yàn)證設(shè)立一個(gè)通用方法或限度標(biāo)準(zhǔn)。那是不切實(shí)際的，因?yàn)樵虾椭苿┥a(chǎn)企業(yè)使用的設(shè)備和生產(chǎn)的產(chǎn)品千差萬(wàn)別，確立殘留物限度不僅必須對(duì)所有有關(guān)物質(zhì)有足夠的了解，而且所定的限度必須是現(xiàn)實(shí)的、能到達(dá)和可被驗(yàn)證的。〞也就是說(shuō)，鑒于生產(chǎn)設(shè)備和產(chǎn)品性質(zhì)的多樣性，由藥品監(jiān)視機(jī)構(gòu)設(shè)立統(tǒng)一的限度標(biāo)準(zhǔn)和檢驗(yàn)方法是不現(xiàn)實(shí)的。企業(yè)應(yīng)當(dāng)根據(jù)其生產(chǎn)設(shè)備和產(chǎn)品的實(shí)際情況，制定科學(xué)合理的，能實(shí)現(xiàn)并能通過(guò)適當(dāng)?shù)姆椒z驗(yàn)的限度標(biāo)準(zhǔn)。目前企業(yè)界普遍承受的限度標(biāo)準(zhǔn)基于以下原則：①分析方法客觀能到達(dá)的能力，如濃度限度——百萬(wàn)分之十(10×10－6)；②生物活性的限度，如正常治療劑量的l／1000；③以目檢為依據(jù)的限度，如不得有可見(jiàn)的殘留物。最后一項(xiàng)系半定量標(biāo)準(zhǔn)，是限度標(biāo)準(zhǔn)的補(bǔ)充。(一)殘留物濃度限度10×10－6－6將殘留物濃度限度定為10×10多為興旺國(guó)家生產(chǎn)液體制劑如溶液、乳劑等劑型的企業(yè)采用。其要規(guī)定由上一批產(chǎn)品殘留在設(shè)備中的物質(zhì)全部溶解到下一批產(chǎn)品中所致的濃度不得高于10×10。對(duì)液體制劑而言，這就是進(jìn)入下批各瓶產(chǎn)品的殘留物濃度。一般說(shuō)來(lái)，除非是高活性、高敏感性的藥品，該限度是足夠平安的，因此，企業(yè)可進(jìn)一步將其簡(jiǎn)化成最終淋洗水樣品中－6殘留物的濃度限度為10×10。驗(yàn)證時(shí)一般采用收集清潔程序最后一步淋洗完畢時(shí)的水樣，或淋洗完成后在設(shè)備中參加一定量的水(小于最小生產(chǎn)批次量)，使其在系統(tǒng)循環(huán)后取樣，測(cè)定相關(guān)物質(zhì)的濃度。實(shí)驗(yàn)室通常配備的儀器如HPLC，紫外—可見(jiàn)分光光度計(jì)、薄層色譜等的靈敏度一般都能到達(dá)10×10－6－6以上，因此該限度標(biāo)準(zhǔn)不難被檢驗(yàn)。從殘留物濃度限度可推導(dǎo)出設(shè)備外表的單位面積殘留物限度(外表殘留物限度)，單位為μg／cm2。計(jì)算前需假設(shè)殘留物均勻分布在設(shè)備外表上，在下批生產(chǎn)時(shí)全部溶解在產(chǎn)品中。設(shè)下批產(chǎn)品的生產(chǎn)批量為B(kg)，因殘留物濃度最高為10×10－6，即10mg／kg，則殘留物總量最大為B×10×10－6＝10B(mg)；單位面積殘留物的限度為殘留物總量除以測(cè)總外表積，設(shè)設(shè)備總外表積為SA(cm2)，則外表殘留物限度L為10B／SA(mg／cm2)；為確保平安，一般應(yīng)除以平安因子F，即得L＝10B／(SA·F)(mg／cm2)；如取平安因子F＝10，則L＝B／SA(mg／cm2)＝103B／SA(μg／cm2)。對(duì)于確定的設(shè)備，外表積是定值，批量值應(yīng)取最小批量，以獲取最差情況下的外表殘留物限度。根據(jù)上述推算過(guò)程得到的外表殘留物限度的前提是殘留物溶解到下批產(chǎn)品后均勻分配到各瓶／片產(chǎn)品中。實(shí)際生產(chǎn)中確實(shí)可能存在*些特殊外表，如灌封頭，殘留物溶解后并不均勻分散到整個(gè)批中，而是全部進(jìn)入一瓶產(chǎn)品中。在這種情況下，上述限度就不適用了，必須為這些特殊部位制定特殊的限度。制定特殊外表限度的依據(jù)就是以最低日治療劑量為根底的生物學(xué)活性的限度。(二)生物學(xué)活性的限度——最低日治療劑量的l／1000依據(jù)藥物的生物學(xué)活性數(shù)據(jù)——最低日治療劑量(minimumtreatmentdailydosage,MTDD)確定殘留物限度是制藥企業(yè)普遍采用的方法。從確保平安的角度出發(fā)，一般取最低日治療劑量的l／1000為殘留物限度的計(jì)算出發(fā)點(diǎn)(表3—44)。其依據(jù)是任何藥物上市前都必須通過(guò)臨床試驗(yàn)取得使用劑量的數(shù)據(jù)，上市后也必須不斷跟蹤其使用效果和臨床副作用，從而確定對(duì)大多數(shù)人適用的發(fā)揮預(yù)期治療作用的劑量圍。在該劑量圍的下限(即最低日治療劑量)以下，也還會(huì)產(chǎn)生一些生理活性。特別是對(duì)*些特別敏感的病人，產(chǎn)生活性或副作用的劑量可能低于MTDD很多倍。不同藥物，不同人群的個(gè)體差異是不同的。根據(jù)臨床藥理學(xué)、毒理學(xué)和臨床應(yīng)用的觀察統(tǒng)計(jì)，極少或根本未見(jiàn)藥物個(gè)體差異到達(dá)1000倍的報(bào)道，也就是說(shuō)，對(duì)于非常敏感的病人，如果服用了MTDD的l／1000，也不會(huì)由此產(chǎn)生藥理反響。這樣就符合了GMP足夠平安的理念。因此高生物活性藥物宜使用本法來(lái)確定殘留物限度。清潔的目的是保證在使用產(chǎn)品B時(shí)，不出現(xiàn)A產(chǎn)品的生理作用。B產(chǎn)品每天服用數(shù)多，平安性下降，因此，上述最低日治療劑量的l／1000，系指B產(chǎn)品最多日使用制劑數(shù)中允許A產(chǎn)品殘存的量，不超過(guò)因服用B產(chǎn)品而帶人體的A產(chǎn)品的最低日治療劑量的l／1000。最低日治療劑量數(shù)據(jù)來(lái)自藥品標(biāo)簽和使用說(shuō)明書(shū)上的有關(guān)數(shù)據(jù)計(jì)算：MTDD＝每次給藥片(粒)數(shù)×每片有效成分含量×每日最少給藥次數(shù)藥品標(biāo)簽和使用說(shuō)明書(shū)基于藥品研發(fā)過(guò)程進(jìn)展的動(dòng)物試驗(yàn)與各期臨床的統(tǒng)計(jì)資料，并經(jīng)過(guò)政府主管部門(mén)批準(zhǔn)，是生產(chǎn)企業(yè)必備的資料，因而MTDD的應(yīng)用非常方便。根據(jù)MTDD計(jì)算單位面積殘留物限度的過(guò)程如下。(1)將相關(guān)設(shè)備生產(chǎn)的所有產(chǎn)品列表，在表中相應(yīng)位置填寫(xiě)MTDD(mg)，最小生產(chǎn)批量B(kg)，單個(gè)制劑的質(zhì)量Uw(g)和每日最多使用制劑數(shù)Dd。(2)計(jì)算設(shè)備外表積SA(cm2)。(3)確定特殊部位面積SSA(cm2)。(4)取最小批量B為計(jì)算參數(shù)。(5)取上述4中對(duì)應(yīng)產(chǎn)品的單位制劑質(zhì)量Uw和日最大使用成品(制劑數(shù))Dd為計(jì)算參數(shù)。(6)計(jì)算該批產(chǎn)品理論成品數(shù)UU＝1000B／Uw。(7)計(jì)算一般外表殘留物限度LdLd＝允許殘留物總量／總外表積允許殘留物總量＝MTDD／1000×U×l／Dd＝MTDD／1000×1000B／Uw×l／Dd則Ld＝MTDD／1000×1000B／Uw×l／Dd×l／SA×1000(μｇ／cm2)＝MTDD×B／Uw×l／Dd×l／SA×l000(μｇ／cm2)可根據(jù)具體情況決定是否再除以平安因子以確保平安。(8)計(jì)算特殊外表殘留物限度外表殘留物限度計(jì)算表見(jiàn)表3—45。Ld＝MTDD／1000×1／Dd×l／SSA×1000(μｇ／cm2)＝MTDD／Dd×l／SSA(μｇ／cm2)同樣，可根據(jù)具體情況決定是否再除以平安因子以確保平安。也有文獻(xiàn)建議采用最低生物活性量為出發(fā)點(diǎn)計(jì)算殘留物限度，其原理與實(shí)際計(jì)算過(guò)程與上述MTDD法根本一樣。但由于最低生物活性量數(shù)據(jù)不易獲取，也缺乏法定依據(jù)，使用起來(lái)不如MTDD方便可靠。(三)肉眼觀察限度——不得有可見(jiàn)的殘留物有文獻(xiàn)稱如果設(shè)備外表拋光良好，殘留物與設(shè)備外表有較大反差，目檢能發(fā)現(xiàn)低至1μｇ／cm2的殘留物。雖然這是非常經(jīng)歷化的數(shù)據(jù)，與個(gè)人的視力、照明、設(shè)備的尺寸形狀和觀察的角度等許多因素有關(guān)，不可能作為定量、半定量的依據(jù)，也無(wú)法驗(yàn)證，但目檢最簡(jiǎn)單，且能直觀、定性地評(píng)估清潔的程度，有助于發(fā)現(xiàn)已驗(yàn)證的清潔程序在執(zhí)行過(guò)程中發(fā)生的偏差，對(duì)于日常監(jiān)控是有價(jià)值的。因此清潔規(guī)程中都要求在清潔完成或*些步驟完成后檢查不得有可見(jiàn)的殘留物。(四)特殊情況下限度的制定上述各種限度制定方法的注意力都集中在產(chǎn)品中的活性成分或最難清潔的物質(zhì)上，其共同的特點(diǎn)是都要求其殘留量低于規(guī)定的限度，而對(duì)活性成分的化學(xué)穩(wěn)定性未加考慮。從微觀上看清潔后的殘留物在設(shè)備外表形成一層薄膜，因此有非常大的比外表積。而清洗過(guò)程中和清洗完畢后殘留物充分暴露在水分、氧氣和通常較高的溫度下(如需高溫清洗和滅菌)，因此不難設(shè)想如果活性成分的化學(xué)性質(zhì)不很穩(wěn)定，或者在清潔和隨后的儲(chǔ)存條件下不穩(wěn)定，生成了其他物質(zhì)，就可能使為檢測(cè)微量活性物質(zhì)而建立的檢驗(yàn)方法無(wú)法真實(shí)地反映實(shí)際的情況。因?yàn)轵?yàn)證的目的是證實(shí)有關(guān)物質(zhì)被“清洗掉〞，而不是通過(guò)化學(xué)反響使目標(biāo)物轉(zhuǎn)變?yōu)槠渌镔|(zhì)而“消失了〞o另外，有些藥物的活性成分經(jīng)轉(zhuǎn)化后成為藥品中的雜質(zhì)，如該雜質(zhì)對(duì)人體有更大的毒性則須限制其在成品中的含量。這種情況下，制定殘留物的限度必須考慮這類雜質(zhì)對(duì)下批產(chǎn)品帶來(lái)的不利影響。如阿司匹林片，其活性成分乙酰水酸很容易水解為游離水酸，中國(guó)藥典規(guī)定后者相對(duì)于乙酰水酸的含量應(yīng)低于0．3％。以下就以生產(chǎn)阿司匹林片為例，具體分析如何確定殘留物限度。為簡(jiǎn)化計(jì)算，假設(shè)生產(chǎn)設(shè)備為阿司匹林片專用，產(chǎn)品規(guī)格分別為0．1g／片、0．3g／0．5g／片。則按MTDD計(jì)算的乙酰水酸的外表殘留物限度為：Ld=MTDD／1000×1000B／Uw×l／Dd×l／SA×1000(μｇ／cm2)=900／1000×1000×100／0．5×1／15×l／50000×1000=240μｇ／cm2如從限制每片游離水酸的角度考慮，則應(yīng)以最小片重產(chǎn)品中允許的游離水酸為基準(zhǔn)，再乘以最小批量的片數(shù)，即得批產(chǎn)品中允許的游離水酸總量，再除以設(shè)備總面積即得單位面積游離水酸的限度。應(yīng)當(dāng)指出，游離水酸一方面來(lái)自殘留的乙酰水酸的水解，另一方面來(lái)自原料本身以及生產(chǎn)過(guò)程中產(chǎn)生的水酸。統(tǒng)計(jì)過(guò)去生產(chǎn)的多批產(chǎn)品中游離不酸的化驗(yàn)結(jié)果可確定來(lái)自原料和生產(chǎn)過(guò)程產(chǎn)生的水酸的平均水平。具體計(jì)算過(guò)程如下：成品中游離水酸的限度0.3％最小批量片數(shù)1000000片最小片質(zhì)量0.1g多批產(chǎn)品平均游離水酸含量0.2％最小批量l00kg總外表積50000cm2允許由殘留乙酰水酸水解而產(chǎn)生的游離水酸的量為：(0.3％－0.2％)×0.1×1000000×1000=100000(μｇ)假設(shè)所有殘留下的乙酰水酸全部水解為游離水酸，則允許由上批產(chǎn)品殘留的乙酰水酸總量為100000μｇ，乙酰水酸的外表殘留限度為100000／50000＝2(μｇ／cm2)該限度大大低于根據(jù)MTDD計(jì)算得到的限度。因此，如果制定限度標(biāo)準(zhǔn)僅以MTDD為依據(jù)，就會(huì)在實(shí)際生產(chǎn)中遇到很大的質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)。四、殘留溶劑的限度標(biāo)準(zhǔn)藥品生產(chǎn)和清潔中可能用到除水外的有機(jī)溶劑。人用藥品注冊(cè)技術(shù)要求國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)協(xié)調(diào)會(huì)(ICH)在“殘留溶劑指南〞將溶劑分為3個(gè)級(jí)別。一級(jí)溶劑——由于毒性或危害環(huán)境等原因應(yīng)防止在制藥生產(chǎn)中使用的溶劑。如果確實(shí)無(wú)法替代，其濃度限度見(jiàn)表3—46。二級(jí)溶劑——為動(dòng)物非誘變致癌溶劑、或可能有神經(jīng)毒性或致畸性等不可逆轉(zhuǎn)性毒性并疑心有其他明顯但可逆轉(zhuǎn)毒性的溶劑。在藥品生產(chǎn)中這類溶劑的控制標(biāo)準(zhǔn)如表3—47。三級(jí)溶劑——具有潛在低毒性的溶劑。其名稱列于表3—48。ICH“殘留溶劑指南〞規(guī)定，一級(jí)溶劑、二級(jí)溶劑僅在不可替代的情況下用于藥品生產(chǎn)，但不能用作清潔劑。在無(wú)法防止時(shí)，三級(jí)溶劑可作為清潔劑，其在下批生產(chǎn)中允許的溶劑殘留濃度不應(yīng)超過(guò)初始溶劑濃度的0．5％。五、微生物污染控制標(biāo)準(zhǔn)微生物污染水平的制定應(yīng)滿足生產(chǎn)和質(zhì)量控制的要求。興旺國(guó)家GMP一般明確要求控制生產(chǎn)各步的微生物污染水平，尤其對(duì)無(wú)菌制劑，產(chǎn)品最終滅菌或除菌過(guò)濾前的微生物污染水平必須嚴(yán)格控制。如果設(shè)備清潔后立即投入下批生產(chǎn)，則設(shè)備中的微生物污染水平必須足夠低，以免產(chǎn)品配制完成后微生物工程超標(biāo)。微生物的特點(diǎn)是在一定環(huán)境條件下會(huì)迅速繁殖，數(shù)量急劇增加。而且空氣中存在的微生物能通過(guò)各種途徑污染已清潔的設(shè)備。設(shè)備清洗后存放的時(shí)間越長(zhǎng)，被微生物污染的幾率越大。因此企業(yè)應(yīng)綜合考慮其生產(chǎn)實(shí)際情況和需求，自行制定微生物污染水平應(yīng)控制的限度及清洗后到下次生產(chǎn)的最長(zhǎng)貯存期限。六、取樣與檢驗(yàn)方法學(xué)(一)最終淋洗水取樣為大面積取樣方法，其優(yōu)點(diǎn)是取樣面大，對(duì)不便拆卸或不宜經(jīng)常拆卸的設(shè)備也能取樣。因此其適用于擦拭取樣不易接觸到的外表，尤其適用于設(shè)備外表平坦、管道多且長(zhǎng)的液體制劑的生產(chǎn)設(shè)備。淋洗水樣品的缺點(diǎn)是如上節(jié)討論的溶解與流體力學(xué)原理，當(dāng)溶劑不能在設(shè)備外表形成湍流進(jìn)而有效溶解殘留物時(shí)，或者殘留物不溶于水或干結(jié)在設(shè)備外表時(shí)，淋洗水就難以反映真實(shí)的情況。取樣的方法為根據(jù)淋洗水流經(jīng)設(shè)備的線路，選擇淋洗線路相對(duì)最下游的一個(gè)或幾個(gè)排水口為取樣口。分別按照微生物檢驗(yàn)樣品和化學(xué)檢驗(yàn)樣品的取樣規(guī)程收集清潔程序最后一步淋洗即將完畢時(shí)的水樣。也可在淋洗完成后在設(shè)備中參加一定量的工藝用水，用量必須小于最小生產(chǎn)批量，使其在系統(tǒng)循環(huán)后在相應(yīng)位置取樣。如在驗(yàn)證試驗(yàn)中采用后一方法，其結(jié)果的可靠性要好一些，這是可以預(yù)見(jiàn)的。對(duì)淋洗水樣一般檢查殘留物濃度和微生物污染水平。如生產(chǎn)有澄明度與不溶性微粒要求的制劑，通常要求淋洗水符合相關(guān)劑型不溶性微粒和澄明度的標(biāo)準(zhǔn)。(二)擦拭取樣擦拭取樣優(yōu)點(diǎn)是能對(duì)最難清潔部位直接取樣，通過(guò)考察有代表性的最難清潔部位的殘留物水平評(píng)價(jià)整套生產(chǎn)設(shè)備的清潔狀況。通過(guò)選擇適當(dāng)?shù)牟潦萌軇?、擦拭工具和擦拭方法，可將清洗過(guò)程中未溶解的，已“干結(jié)〞在設(shè)備外表或溶解度很小的物質(zhì)擦拭下來(lái)，能有效彌補(bǔ)淋洗取樣的缺點(diǎn)。檢驗(yàn)的結(jié)果能直接反映出各取樣點(diǎn)的清潔狀況，為優(yōu)化清潔規(guī)程提供依據(jù)。擦拭取樣的缺點(diǎn)是很多情況下須拆卸設(shè)備前方能接觸到取樣部位，對(duì)取樣工具、溶劑、取樣人員的操作等都有一定的要求，總的來(lái)說(shuō)比擬復(fù)雜。(三)擦拭工具和溶劑進(jìn)展擦拭取樣時(shí)應(yīng)注意擦拭工具和溶劑對(duì)檢驗(yàn)的干擾。常用的擦拭工具為藥簽，在一定長(zhǎng)度的尼龍或塑料棒的一端纏有不掉纖維的織物。藥簽應(yīng)耐一般有機(jī)溶劑的溶解。棉簽容易脫落纖維，故在使用前應(yīng)用取樣用溶劑預(yù)先清洗，以免纖維遺留在取樣外表。溶劑用于擦拭時(shí)溶解殘留物并將吸附在擦拭工具上的殘留物萃取出來(lái)以便檢測(cè)。用于擦拭和萃取的溶劑可以一樣也可不同。一般為水、有機(jī)溶劑或兩者的混合物，也可含有外表活性劑等以幫助殘留物質(zhì)溶解。選擇溶劑的原則：①溶劑不得在設(shè)備上遺留有毒物質(zhì)；②應(yīng)使擦拭取樣有較高的回收率；③不得對(duì)隨后的檢測(cè)產(chǎn)生干擾。藥簽的選擇原則：①能被擦拭溶劑良好地潤(rùn)濕；②有一定的機(jī)械強(qiáng)度和韌性，足以對(duì)設(shè)備外表施加一定的壓力和摩擦力，并不易脫落纖維；③能同擦拭和萃取溶劑相兼容，不對(duì)檢測(cè)產(chǎn)生干擾。(四)擦拭取樣操作規(guī)程①計(jì)算所要擦拭外表的面積。每個(gè)擦拭部位擦拭的面積應(yīng)以獲取的殘留物的量在檢測(cè)方法的線性圍為原則。通?？扇?5cm或100cm。②用適宜的溶劑潤(rùn)濕藥簽，并將其靠在溶劑瓶上擠壓以除去多余的溶劑。③將藥簽頭按在取樣外表上，用力使其稍彎曲，平穩(wěn)而緩慢地擦拭取樣外表。在向前移動(dòng)的同時(shí)將其從一邊移到另一邊。擦拭過(guò)程應(yīng)覆蓋整個(gè)外表。翻轉(zhuǎn)藥簽，讓藥簽的另一面也進(jìn)展擦拭。但與前次擦拭移動(dòng)方向垂直，見(jiàn)圖3—3④擦拭完成后，將藥簽放人試管，并用螺旋蓋旋嚴(yán)密封。⑤按照下述方法制備對(duì)照樣品：按步驟2濕潤(rùn)藥簽，將藥簽直接放人試管并旋嚴(yán)密封。將該樣品與其他樣品一起送至試驗(yàn)室。⑥取樣完成后應(yīng)在試管上注明有關(guān)取樣信息。擦拭取樣也用于設(shè)備外表微生物的取樣。應(yīng)使用無(wú)菌的擦拭棒，按取外表微生物樣的要求取樣。(五)檢驗(yàn)方法檢驗(yàn)方法應(yīng)經(jīng)過(guò)驗(yàn)證。檢驗(yàn)方法對(duì)被檢測(cè)物質(zhì)應(yīng)有足夠的專屬性和靈敏度。方法驗(yàn)證還包括檢測(cè)限度，精細(xì)度，線性圍，回收率試驗(yàn)。對(duì)用于清潔驗(yàn)證的檢驗(yàn)方法的定量要求不必像成品質(zhì)量檢驗(yàn)?zāi)菢訃?yán)格。一般要求線性圍應(yīng)到達(dá)殘留物限度的50％～150％。代表精細(xì)度的RSD小于10％即可。方法的回收率可與取樣的回收率結(jié)合進(jìn)展。(六)取樣方法驗(yàn)證取樣過(guò)程需經(jīng)過(guò)驗(yàn)證。通過(guò)回收率試驗(yàn)驗(yàn)證取樣過(guò)程的回收率和重現(xiàn)性。要求包括取樣回收率和檢驗(yàn)方法回收率在的綜合回收率一般不低于50％，有的企業(yè)甚至要求不低于80％，屢次取樣回收率的RSD不大于20％。取樣過(guò)程的驗(yàn)證實(shí)際上是對(duì)藥簽、溶劑的選擇、取樣人員操作、殘留物轉(zhuǎn)移到藥簽、樣品溶出(萃取)過(guò)程的全面考察。驗(yàn)證方法如下。①準(zhǔn)備一塊與設(shè)備外表材質(zhì)一樣的500mm×500mm的板材。如平整光潔的不銹鋼板。②在鋼板上用鋼錐劃出400mm×400mm的區(qū)域，每隔l00mm劃線，形成16塊100mm×100mm的方塊。③配制含待檢測(cè)物濃度為0.016％的溶液，定量裝入噴霧器。④將約10ml溶液盡量均勻地噴在400mm×400mm的區(qū)域。原因⑤根據(jù)實(shí)際噴出的溶液量計(jì)算單位面積的物質(zhì)量(約1μｇ／cm2)。⑥自然枯燥或用電吹風(fēng)溫和地吹干不銹鋼板。⑦用選定的擦拭溶劑潤(rùn)濕擦拭工具，按前述擦拭取樣操作規(guī)程擦拭鋼板，每擦一個(gè)方塊(100cm2)換一根擦拭棒，共擦6～10個(gè)方塊。⑧將擦拭棒分別放人試管中，蓋上試管蓋，參加預(yù)定溶劑10ml，加塞，輕搖試管，并放置10min，使物質(zhì)溶出。⑨用經(jīng)歷證的檢驗(yàn)方法檢驗(yàn)，計(jì)算回收率和回收率的RSD。取樣員的取樣方式是產(chǎn)生較大RSD的主要原因。應(yīng)盡可能采用固定的力度、擦拭速度和線路。取樣員可根據(jù)擦拭棒彎曲的程度估算加在擦拭外表的壓力。七、驗(yàn)證方案清潔驗(yàn)證方案可有多種形式，其共性是必須表達(dá)方案韻科學(xué)性。一般而言應(yīng)當(dāng)包含的容有。(1)目的明確待驗(yàn)證的設(shè)備和清潔方法。(2)清潔規(guī)程待驗(yàn)證的清潔方法的SOP即清潔規(guī)程應(yīng)當(dāng)在驗(yàn)證開(kāi)場(chǎng)前確定下來(lái)，在驗(yàn)證方案中列出清潔規(guī)程以說(shuō)明清潔規(guī)程已經(jīng)制定。(3)驗(yàn)證人員列出參加驗(yàn)證人員的，說(shuō)明參加者所屬的部門(mén)和各自的職責(zé)，對(duì)相關(guān)操作人員的培訓(xùn)要求(4)確定參照物和限度標(biāo)準(zhǔn)在本局部應(yīng)詳細(xì)闡述確定參照物的依據(jù)，確定限度標(biāo)準(zhǔn)的計(jì)算過(guò)程和結(jié)果。一般可將相關(guān)設(shè)備列表，計(jì)算總外表積，特殊外表面積；將相關(guān)產(chǎn)品列表，列入主要活性成分及其相關(guān)物理化學(xué)性質(zhì)，MTDD值等，確定參照物質(zhì)，計(jì)算限度標(biāo)準(zhǔn)。(5)檢驗(yàn)方法學(xué)本局部應(yīng)說(shuō)明取樣方法、工具、溶劑，主要檢驗(yàn)儀器，取樣方法和檢驗(yàn)方法的驗(yàn)證情況等。(6)取樣要求用示意圖、文字等指明取樣點(diǎn)的具體位置和取樣方案，明確規(guī)定何時(shí)、何地、取多少樣品，如何給各樣品標(biāo)記。這局部的容對(duì)方案的實(shí)施和保證驗(yàn)證結(jié)果的客觀性是至關(guān)重要的。(7)可靠性判斷標(biāo)準(zhǔn)在本局部，應(yīng)規(guī)定為證明待驗(yàn)證清潔規(guī)程的可靠性，驗(yàn)證試驗(yàn)須重復(fù)的次數(shù)。一般起碼連續(xù)進(jìn)展3次試驗(yàn)，所有數(shù)據(jù)都符合限度標(biāo)準(zhǔn)方可。第四節(jié)驗(yàn)證的實(shí)施當(dāng)驗(yàn)證方案獲得批準(zhǔn)，所有準(zhǔn)備工作進(jìn)展完畢后，即進(jìn)入了驗(yàn)證實(shí)施階段。驗(yàn)證實(shí)施應(yīng)嚴(yán)格按照批準(zhǔn)的方案執(zhí)行。本階段的關(guān)鍵在于清潔規(guī)程的執(zhí)行和數(shù)據(jù)的采集：取樣與化驗(yàn)。驗(yàn)證實(shí)施后寫(xiě)出驗(yàn)證報(bào)告。應(yīng)及時(shí)、準(zhǔn)確地填寫(xiě)清潔規(guī)程執(zhí)行記錄，保證清潔過(guò)程完全按照規(guī)程進(jìn)展。執(zhí)行規(guī)程的人員應(yīng)當(dāng)是將來(lái)進(jìn)展正式操作的那些人員，而不應(yīng)由方案設(shè)計(jì)人員或其他技術(shù)人員代替。當(dāng)然，有關(guān)技術(shù)人員可在旁觀察規(guī)程的執(zhí)行情況，以便及．時(shí)發(fā)現(xiàn)偏差并予以糾正。取樣應(yīng)由經(jīng)過(guò)專門(mén)培訓(xùn)并通過(guò)取樣驗(yàn)證的人員進(jìn)展，樣品標(biāo)簽可在取樣前貼好，根據(jù)標(biāo)簽的指示取樣，也可在取樣后立即貼上標(biāo)簽，無(wú)論采取何種方式，應(yīng)以方案規(guī)定為準(zhǔn)。檢驗(yàn)應(yīng)按照預(yù)先開(kāi)發(fā)并驗(yàn)證的方法進(jìn)展。所用的試劑、對(duì)照品、儀器等都應(yīng)符合預(yù)定要求。檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)出具的化驗(yàn)報(bào)告及其原始記錄應(yīng)作為驗(yàn)證報(bào)告的容或。驗(yàn)證過(guò)程中出現(xiàn)的偏差均應(yīng)記錄在案，并由專門(mén)人員討論并判斷偏差的性質(zhì)，確定是否對(duì)驗(yàn)證結(jié)果產(chǎn)生實(shí)質(zhì)影響。一般如檢驗(yàn)結(jié)果超出限度，并經(jīng)證明并非化驗(yàn)誤差所致時(shí)，該偏差應(yīng)作為關(guān)鍵偏差。這時(shí)應(yīng)進(jìn)展原因調(diào)查，確定原因并采取必要措施后重新進(jìn)展驗(yàn)證試驗(yàn)。驗(yàn)證結(jié)論應(yīng)在審核了所有清潔作業(yè)記錄、檢驗(yàn)原始記錄、化驗(yàn)報(bào)告、偏差記錄前方能做出。其結(jié)果只有合格或不合格兩種，不可模棱兩可。驗(yàn)證報(bào)告至少包括以下容。(1)清潔規(guī)程的執(zhí)行情況描述，附原始清潔作業(yè)記錄。(2)檢驗(yàn)結(jié)果及其評(píng)價(jià)，附檢驗(yàn)原始記錄和化驗(yàn)報(bào)告。(3)偏差說(shuō)明，附偏差記錄與調(diào)查。(4)驗(yàn)證結(jié)論。第五節(jié)清潔方法的監(jiān)控與再驗(yàn)證一、日常監(jiān)控清潔驗(yàn)證報(bào)告一旦批準(zhǔn)，清潔驗(yàn)證即告完成，該清潔方法即可正式投入使用。同藥品生產(chǎn)工藝過(guò)程一樣，經(jīng)歷證后，清潔方法即進(jìn)人了監(jiān)控與再驗(yàn)證階段，應(yīng)當(dāng)以實(shí)際生產(chǎn)運(yùn)行的結(jié)果進(jìn)一步考核清潔規(guī)程的科學(xué)性和合理性。在日常生產(chǎn)過(guò)程中對(duì)清潔方法進(jìn)展監(jiān)控的目的是進(jìn)一步考察清潔程序的可靠性。驗(yàn)證過(guò)程中進(jìn)展的試驗(yàn)往往是有限的，它包括不了實(shí)際生產(chǎn)中各種可能的特殊情況，監(jiān)控則正好彌補(bǔ)這方面的缺乏。對(duì)手工清洗規(guī)程來(lái)說(shuō)，這點(diǎn)尤其重要，因?yàn)槠渲噩F(xiàn)性很大程度上更取決于對(duì)人員的培訓(xùn)和實(shí)施清潔人的工作態(tài)度。監(jiān)控的方法一般為肉眼觀察是否有可見(jiàn)殘留物，必要時(shí)可定期取淋洗水或擦拭取樣進(jìn)展化驗(yàn)。由于對(duì)指定殘留物的定量分析通常比擬繁瑣，可開(kāi)發(fā)*些有足夠靈敏度且快速的非專屬性檢驗(yàn)方法，如測(cè)定總有機(jī)碳(TOC)。美國(guó)藥典、歐洲藥典已將TOC指標(biāo)確立為注射用水和純水的法定工程，以反映水中有機(jī)物的污染情況。由于該方法的高靈敏性和自動(dòng)化，且絕大多數(shù)殘留物是有機(jī)物，興旺國(guó)家或技術(shù)水平較高的制藥企業(yè)越來(lái)越多地將其作為清潔作業(yè)的日常監(jiān)控方法。如果日常樣品的TOC值低且波動(dòng)較小，則證明清潔效果滿意，清潔規(guī)程得到了良好的遵守。一旦出現(xiàn)異常，則提示可能出現(xiàn)了問(wèn)題，此時(shí)再采用專門(mén)的分析方法對(duì)污染物定性定量。通過(guò)對(duì)日常監(jiān)控?cái)?shù)據(jù)的回憶，以確