種子擴(kuò)大培養(yǎng) 種子質(zhì)量的影響及控制

4種子擴(kuò)大培養(yǎng)4.4.2種子質(zhì)量影響因素及控制種子質(zhì)量影響因素及控制影響孢子質(zhì)量的因素通常有：培養(yǎng)基、培養(yǎng)條件、培養(yǎng)時(shí)間和冷藏時(shí)間等。影響因素1、培養(yǎng)基2、培養(yǎng)條件3、培養(yǎng)時(shí)間

和冷藏時(shí)間4、接種量種子質(zhì)量影響因素及控制生產(chǎn)過(guò)程中經(jīng)常出現(xiàn)種子質(zhì)量不穩(wěn)定的現(xiàn)象，其主要原因是原材料質(zhì)量波動(dòng)。例如：

在四環(huán)素、土霉素生產(chǎn)中，配制產(chǎn)孢子斜面培養(yǎng)基用的麩皮，因小麥產(chǎn)地、品種、加工方法及用量的不同對(duì)孢子質(zhì)量的影響也不同。蛋白胨加工原料不同如魚(yú)胨或骨胨對(duì)孢子影響也不同。

原材料質(zhì)量的波動(dòng)，起它要作用的是其中無(wú)機(jī)離子含量不同，如微量元素Mg2+、Cu2+、Ba2+能刺激孢子的形成。磷含量太多或太少也會(huì)影響孢子的質(zhì)量。水質(zhì)的影響：地區(qū)不同、季節(jié)變化和水源污染，均可造成水質(zhì)波動(dòng)，影響種子質(zhì)量。1、培養(yǎng)基種子質(zhì)量影響因素及控制解決措施：（1）培養(yǎng)基所用原料要經(jīng)過(guò)發(fā)酵試驗(yàn)合格才可使用；（2）嚴(yán)格控制滅菌后培養(yǎng)基的質(zhì)量；（3）斜面培養(yǎng)基使用前，需在適當(dāng)溫度下放置一定時(shí)間；（4）供生產(chǎn)用的孢子培養(yǎng)基要用比較單一的氮源，作為選種或分離用的培養(yǎng)基則采用較復(fù)雜的有機(jī)氮源。種子質(zhì)量影響因素及控制1、培養(yǎng)基

菌種在固體培養(yǎng)基上可呈現(xiàn)多種不同代謝類(lèi)型的菌落，氮源品種越多，出現(xiàn)的菌落類(lèi)型也越多，不利于生產(chǎn)的穩(wěn)定。溫度對(duì)多數(shù)品種斜面孢子質(zhì)量有顯著的影響。例如：土霉素生產(chǎn)菌種在高于37℃培養(yǎng)時(shí)，孢子接入發(fā)酵罐后出現(xiàn)糖代謝變慢，氨基氮回升提前，菌絲過(guò)早自溶，效價(jià)降低等現(xiàn)象。一般各生產(chǎn)單位都嚴(yán)格控制孢子子斜面的培養(yǎng)溫度。（1）溫度種子質(zhì)量影響因素及控制2、培養(yǎng)條件制備斜面孢子培養(yǎng)基的濕度對(duì)孢子的數(shù)量和質(zhì)量有較大的影響。例如：土霉素生產(chǎn)菌種龜裂鏈霉菌，孢子制備時(shí)發(fā)現(xiàn)：在北方氣候干燥地區(qū)孢子斜面長(zhǎng)得較快，在含有少量水分的試管斜面培養(yǎng)基下部孢子長(zhǎng)得較好，而斜面上部由于水分迅速蒸發(fā)呈干疤狀，孢子稀少。在氣溫高含濕度大的地區(qū)，斜面孢子長(zhǎng)得慢，主要由于試管下部冷凝水多而不利于孢子的形成。從表中看出相對(duì)濕度在40%~45%時(shí)孢子數(shù)量最多，且孢子顏色均勻，質(zhì)量較好。（2）濕度種子質(zhì)量影響因素及控制2、培養(yǎng)條件（2）濕度不同相對(duì)濕度對(duì)龜裂鏈霉菌斜面生長(zhǎng)的影響種子質(zhì)量影響因素及控制2、培養(yǎng)條件相對(duì)濕度（%）斜面外觀活孢子計(jì)數(shù)（億/支）16.5~1925~3640~45上部稀薄、下部稠略黃上部薄、中部均勻發(fā)白一片白，孢子豐富，稍皺1.22.35.7（1）培養(yǎng)時(shí)間一般來(lái)說(shuō)，衰老的孢子不如年輕的孢子，因?yàn)樗ダ系逆咦右言谥鸩竭M(jìn)入發(fā)芽階段，核物質(zhì)趨于分化狀態(tài)。過(guò)于衰老的孢子會(huì)導(dǎo)致生產(chǎn)能力的下降。解決措施：孢子培養(yǎng)的時(shí)間應(yīng)該控制在孢子量多、孢子成熟、發(fā)酵產(chǎn)量正常的階段終止培養(yǎng)。種子質(zhì)量影響因素及控制3、培養(yǎng)時(shí)間和冷藏時(shí)間（2）冷藏時(shí)間斜面冷藏對(duì)孢子質(zhì)量的影響與孢子成熟程度有關(guān)。

例如：土霉素生產(chǎn)菌種孢子斜面培養(yǎng)4天左右即于4℃冰箱保存，發(fā)現(xiàn)冷藏7~8天菌體細(xì)胞開(kāi)始自溶。而培養(yǎng)5天以后冷藏，20天未發(fā)現(xiàn)自溶。冷藏時(shí)間對(duì)孢子的生產(chǎn)能力也有影響。

例如：在鏈霉素生產(chǎn)中，斜面孢子在6℃冷藏兩個(gè)月后的發(fā)酵單位比冷藏一個(gè)月降低18%，冷藏3個(gè)月后降低35%。