梔子的化學(xué)成分及藥理活性研究進(jìn)展

梔子的化學(xué)成分及藥理活性研究進(jìn)展

梔子是薔薇科植物的一個(gè)干燥成熟的果實(shí)。主要產(chǎn)于浙江、福建、江西、湖南和廣東。它又冷又苦，沒有毒。具有清火除怒、清熱除濕、涼血散瘀的功效。主要用于熱病心煩,急性黃疸型肝炎,膀胱炎,目赤腫痛,上消化道出血及局部出血,扭挫傷的治療?，F(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)梔子中含有多種化學(xué)成分,主要有環(huán)烯醚萜類,揮發(fā)油類。2000年左右對(duì)梔子的藥理研究較多,主要是集中在對(duì)中藥梔子傳統(tǒng)作用的研究,并報(bào)道了其抗哮喘作用、抗炎鎮(zhèn)痛作用、利膽保肝作用、抗病毒作用及對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)的作用等。之后,梔子的新的藥理研究不斷被報(bào)道,為梔子研究提供了新的思路。本文從梔子的最新藥理作用及其機(jī)制方面作一概述。1梔子糖蛋白和其他抗氧化化合物人體代謝過程包括氧化作用,此氧化作用必然會(huì)產(chǎn)生自由基,自由基具有高度的化學(xué)活性,是人體防御系統(tǒng)中不可缺少的一部分。但是當(dāng)自由基過多時(shí),它會(huì)攻擊人體內(nèi)的糖蛋白質(zhì)脂肪和核酸,從而促進(jìn)衰老和誘發(fā)癌癥及一系列退行性疾病。由于自由基對(duì)人體有廣泛而嚴(yán)重的危害,因此在一切抗衰老和防癌的研究中抗氧化即抗自由基都是一個(gè)重要的課題。梔子糖蛋白在無細(xì)胞系統(tǒng)中對(duì)DPPH,脂類過氧化物,超氧負(fù)離子和羥基有清除作用。在NIH/3T3細(xì)胞的葡萄糖氧化酶和次黃嘌呤/黃嘌呤氧化酶誘導(dǎo)的細(xì)胞毒性和細(xì)胞程序性死亡中,分別利用3-(4,5-diinettiylthiazol-2-yl)-2,5-聯(lián)苯四唑溴,DNA斷裂和H33342/乙啡啶溴染色法,測(cè)定梔子糖蛋白的保護(hù)和抗細(xì)胞凋亡活性。結(jié)果顯示梔子糖蛋白有劑量依賴的阻斷葡萄糖或次黃嘌呤/黃嘌呤誘導(dǎo)的細(xì)胞毒性和程序性死亡。除此之外,利用蛋白印記分析法和電泳遷移率變動(dòng)分析法,在萄萄糖或次黃嘌呤/黃嘌呤誘導(dǎo)程序性死亡NIH/3T3細(xì)胞中,研究是否梔子糖蛋白阻斷了蛋白激酶Cα和核因子κB這兩種氧化還原敏感的信使物質(zhì)的活性。我們可以看到,100μg·mL-1的梔子糖蛋白對(duì)PKCα易位和NF-κB的DNA結(jié)合活性有抑制作用。這里,推測(cè)梔子糖蛋白在NIH/3T3細(xì)胞中是一個(gè)天然的抗氧化劑,并是細(xì)胞凋亡信號(hào)路徑的其中一個(gè)調(diào)節(jié)器。研究發(fā)現(xiàn)京尼平苷具有依靠誘導(dǎo)GSHS-轉(zhuǎn)移酶(GST)活性和GSTM1和GSTM2亞基的表達(dá)而抗氧化的活性。實(shí)驗(yàn)中,研究了京尼平苷引導(dǎo)GST活性的路徑。對(duì)細(xì)胞分裂素活化蛋白激酶(MAPK)抑制劑存在與不存在狀態(tài)下的原代培養(yǎng)的大鼠肝細(xì)胞,分別給以京尼平苷,測(cè)定GST活性、GSTM1和GSTM2亞基的表達(dá)和MAPK信號(hào)蛋白的蛋白水平。免疫印跡法數(shù)據(jù)證明京尼平苷誘導(dǎo)GSTM1和GSTM2的蛋白水平增加。京尼平苷誘導(dǎo)GSTM1和GSTM2蛋白水平增加的作用能夠受MEK-1抑制劑PD98059抑制,但不被其他MAPK抑制劑抑制。MEK-1抑制劑PD98059也選擇性的抑制GSTM1和GSTM2轉(zhuǎn)錄物的RT-PCR和GST活性。發(fā)現(xiàn)了京尼平苷誘導(dǎo)MEK-1上、下游效應(yīng)分子的蛋白水平,包括Ras,Raf,Erk1/2和Erk1/2的磷酸化部位,顯示了京尼平苷的兩相效應(yīng)。結(jié)果表明京尼平苷通過激活MEK-1途徑和增加Ras/Raf/MEK-1細(xì)胞信號(hào)介質(zhì)的表達(dá)來誘導(dǎo)GST活性和GSTM1和GSTM2行為的表達(dá)。探討梔子對(duì)重癥急性胰腺炎(SAP)胰腺細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的影響及其與一氧化氮(NO)、內(nèi)毒素、氧自由基(OFR)的關(guān)系。經(jīng)膽胰管逆行注射1.5%去氧膽酸鈉建立SAP模型,給予梔子水提取物治療,觀察血中淀粉酶、內(nèi)毒素、一氧化氮(NO)、過氧化脂質(zhì)(LPO)以及胰腺細(xì)胞線粒體琥珀酸脫氫酶(SDH)活性、溶酶體酸性磷酸酶(ACP)釋放率、微粒體細(xì)胞色素P450的變化,并進(jìn)行相關(guān)分析及胰腺組織病理學(xué)檢查。與對(duì)照組比較,模型組血中淀粉酶、NO、內(nèi)毒素、LPO以及溶酶體ACP釋放率明顯升高(P<0.05),線粒體SDH活性和微粒體細(xì)胞色素P450則顯著降低(P<0.05),光鏡下胰腺組織病理損害明顯;梔子治療后上述各檢測(cè)指標(biāo)均較模型組明顯改善(P<0.05);相關(guān)分析顯示淀粉酶、NO、內(nèi)毒素、LPO與溶酶體ACP釋放率呈正相關(guān),與線粒體SDH和微粒體細(xì)胞色素P450呈明顯負(fù)相關(guān)。因此,梔子水提取物能夠減輕NO、內(nèi)毒素、OFR對(duì)胰腺細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能的破壞,保護(hù)胰腺細(xì)胞。而其部分機(jī)制為梔子的抗氧自由基即抗氧化作用。2用于心血管系統(tǒng)的藥物2.1梔子及其所含化合物對(duì)高血脂癥的影響梔子的水提取物抑制胰脂酶的活性。西紅花酸和西紅花素作為胰脂酶抑制劑從梔子水提物中分離出來。西紅花素和西紅花酸明顯抑制玉米油喂養(yǎng)誘導(dǎo)的高血脂小鼠的血清甘油三脂水平的升高,對(duì)TritonWR-1339誘導(dǎo)的高血脂小鼠的血清甘油三酸脂和LDL膽固醇水平升高也同樣抑制。對(duì)于分別用高膽固醇、高脂肪和高碳水化合物膳食5周誘導(dǎo)的高血脂小鼠,這兩種化合物仍然顯示了降血脂活性。結(jié)果顯示梔子及其所含化合物西紅花素的降血脂活性可能是由于其對(duì)胰脂酶的抑制作用;西紅花素及其代謝產(chǎn)物西紅花酸能夠改善高血脂癥。LiangSheng等研究梔子和藏紅花中的活性物質(zhì)西紅花素在大鼠體內(nèi)的降血脂機(jī)理。飲食誘導(dǎo)的高血脂大鼠,按每天25~100mg·kg-1劑量連續(xù)十天給西紅花素顯著降低了血清甘油三酸脂、總膽固醇,低密度脂蛋白膽固醇和極低密度脂蛋白膽固醇。改良脂肪負(fù)荷法(modifiedfat-loadingmethod)的結(jié)果顯示西紅花素抑制脂肪和膽固醇的吸收,這種抑制作用與脂肪的水解作用有關(guān)。改良脂肪平衡法(modifiedfat-balancemethod)證明西紅花素增強(qiáng)了大鼠體內(nèi)的脂肪和膽固醇的糞便排泄,但對(duì)膽汁酸排泄無影響。原位環(huán)法和酶鑒定結(jié)果顯示西紅花素不能直接阻止大鼠的膽固醇的空腸吸收,但是能夠作為競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑選擇性的抑制胰脂酶。結(jié)果發(fā)現(xiàn)了同樣的西紅花素的降血脂機(jī)制:抑制胰脂酶,導(dǎo)致脂肪和膽固醇的吸收不良。2.2cct對(duì)家兔內(nèi)皮依賴和皮爾克氏體外擴(kuò)張的影響曾有報(bào)道從梔子中提取的西紅花酸有抗動(dòng)脈粥樣硬化的效果。因?yàn)閮?nèi)皮功能障礙強(qiáng)烈地促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化的起始與發(fā)展,近年有學(xué)者的研究致力于調(diào)查是否CCT(西紅花酸)能夠改善這種異常并探索其可能的機(jī)制。在體內(nèi)用高膽固醇飲食飼養(yǎng)家兔,在體外用被氧化的LDL處理牛主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞,通過以上兩種方法誘導(dǎo)內(nèi)皮異常。從家兔中分離的胸動(dòng)脈可判斷乙酰膽堿可誘發(fā)內(nèi)皮依賴的舒張,而硝普鈉可介導(dǎo)非內(nèi)皮依賴的舒張。結(jié)果顯示,只用高碳水化合物飼養(yǎng)的家兔的內(nèi)皮舒張功能被嚴(yán)重的損傷,乙酰膽堿(10-5.5)誘導(dǎo)的最大的舒張僅僅是用普通膳食飼養(yǎng)的對(duì)照組家兔的54%。口服補(bǔ)充CCT(15,30mg·kg-1)能夠劑量依賴地改善這種損傷,并且能分別使最大舒張?zhí)岣叩綄?duì)照組的68%和80%。然而,所有組中的EIDR仍然有可比性。與那些只用高碳水化合物飼養(yǎng)的家兔相比,補(bǔ)充給予CCT(15,30mg·kg-1)的家兔能同時(shí)提高血清中一氧化氮的水平,正調(diào)節(jié)血管活性和內(nèi)皮一氧化氮合成酶的mRNA的合成,并調(diào)節(jié)血管中環(huán)磷鳥苷酸的含量。所有的組中可誘導(dǎo)的一氧化氮合成酶的活性仍然不能改變。在BAECs,氧化修飾低密度脂蛋白能降低一氧化氮的生成,向下調(diào)節(jié)eNOS的活性和mRNA的表達(dá)。然而那些降低和向下調(diào)節(jié)能被以劑量依賴方式同時(shí)給予的CCT(0.1,1,10μM)所抑制。這些發(fā)現(xiàn)提示CCT能顯著恢復(fù)高膽固醇家兔胸主動(dòng)脈內(nèi)皮舒張。這可以通過它具有提高血管eNOS活性,導(dǎo)致一氧化氮合成增加來解釋。2.3松弛作用結(jié)果應(yīng)用小動(dòng)脈等長(zhǎng)收縮測(cè)定技術(shù)研究梔子提取物對(duì)Wistar大鼠腦、腎、心臟、腸系膜組織離體小動(dòng)脈的松弛作用,結(jié)果表明桅子提取物對(duì)Wistar大鼠以上各組織小動(dòng)脈均有松弛作用,且呈劑量依賴關(guān)系并有一定的選擇性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示桅子提取液通過阻斷去甲腎上腺素激動(dòng)阻力動(dòng)脈α-受體引起的收縮反應(yīng)和阻滯力動(dòng)脈電壓依賴的鈣通道,降低外周阻力,引起血管擴(kuò)張,這些可能是其降血壓作用的機(jī)理。2.4抗血小板聚集活性京尼平苷及其代謝產(chǎn)物京尼平能夠影響體內(nèi)血栓因子及血小板聚集,能顯著延遲生化反應(yīng)中大鼠股動(dòng)脈血栓閉塞時(shí)間,抑制磷脂酸酶的活性,該酶受到抑制是抗血小板聚集的作用機(jī)理。3小鼠和關(guān)鍵品種kss的藥效試驗(yàn)Kamishoyosan(KSS)是一種用于治療女性停經(jīng)精神性癥侯群的漢方,由十味草藥組成。梔子為其中重要藥味。通過小鼠群居接觸(SI)試驗(yàn)研究了KSS的抗焦慮活性,并用曠野運(yùn)動(dòng)試驗(yàn)對(duì)KSS的藥效是否歸因于其刺激和/或鎮(zhèn)靜效應(yīng)進(jìn)行了驗(yàn)證。為鑒定KSS中的重要藥味,通過SI試驗(yàn)對(duì)KSS全方及減去一味草藥后的KSS的藥效進(jìn)行測(cè)定。薄荷與梔子的熱水提取物可增加SI時(shí)間,與KSS的療