濾膜吸附在制劑溶出方法開發(fā)中的應(yīng)用

在一定程度上，體外溶出方法已經(jīng)作為評(píng)價(jià)制劑質(zhì)量一致（當(dāng)制劑研發(fā)過程中，發(fā)生生產(chǎn)場(chǎng)地，生產(chǎn)設(shè)備，生產(chǎn)處方與工藝變更，制劑溶出一致性，可以保證治療質(zhì)量的一致性。），保證批次間質(zhì)量不發(fā)生變化，甚至指導(dǎo)創(chuàng)新藥制劑研發(fā)（一般情況下，創(chuàng)新藥開發(fā)過程中，溶出度最大化作為追求，進(jìn)而提高藥物在體內(nèi)的釋放與吸收，增加藥物在體內(nèi)的暴露量，進(jìn)而可以考察創(chuàng)新藥在患者中的療效）。如何開發(fā)出穩(wěn)健的溶出方法，在創(chuàng)新藥開發(fā)中起到舉足輕重的作用。介紹如何去開發(fā)溶出方法的文章不勝枚舉，而濾膜吸附作為溶出開發(fā)中至關(guān)重要的一步，卻鮮有人去介紹。不同時(shí)間點(diǎn)的溶出液溶解不同量原料藥，其中亦包含難以溶解的輔料。包含難溶性顆粒的溶出液是不能直接進(jìn)高效液相色譜去檢測(cè)的，即使是使用紫外分光光度計(jì)去檢測(cè)，難溶性顆粒也會(huì)導(dǎo)致檢測(cè)基線不穩(wěn)定，進(jìn)而影響檢測(cè)結(jié)果的真實(shí)性與重現(xiàn)性。這個(gè)時(shí)候，通常會(huì)使用濾膜過濾其溶出液。那么就牽涉到濾膜的選擇性問題。一般濾膜可以分為水膜系和有機(jī)膜系。水膜系可以過濾水性介質(zhì)，過濾有機(jī)溶劑易于造成濾膜溶解，介質(zhì)中會(huì)增加不必要的雜質(zhì)。有機(jī)膜系作為疏水的濾膜，一般過濾有機(jī)溶劑，當(dāng)然可以也可以用于水性介質(zhì)的過濾，只是在過濾水性介質(zhì)的時(shí)候，會(huì)有吃力感覺。所以如果水膜滿足過濾要求，還是建議用水膜。水膜系濾膜中具有不同的孔徑，一般為0.22μm、0.45μm和0.8μm。以前在學(xué)校養(yǎng)細(xì)胞的時(shí)候，通常會(huì)使用0.22μm的膜去過濾PBS和細(xì)胞培養(yǎng)液，制備無菌溶液。0.8μm少用。目前在制劑溶出開發(fā)中，多見0.45μm，可以過濾去難溶性的顆粒，滿足液相以及紫外檢測(cè)的需要，對(duì)于特殊的檢測(cè)儀器可能要對(duì)溶液中的顆粒大小要求更加嚴(yán)格，具體情況具體分析。建議在研發(fā)過程中，使用同一廠家的濾膜，畢竟不能決定每個(gè)廠家的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)是否一致，生產(chǎn)的濾膜的質(zhì)量是否有差異。當(dāng)我們選擇多個(gè)不同材質(zhì)的0.45μm的水系濾膜，就可以開展濾膜吸附研究了。有的制劑研究工作者通過制備原料藥的溶液，然后原料藥溶液過膜與離心，比較這兩種處理所帶來的差異，去判斷藥物的吸附情況。還有研發(fā)人員通過制備原料藥與空白全輔料（制劑處方中可能用到的全部輔料）的混和溶液，混和溶液通過過濾與離心處理，比較這兩種處理方式對(duì)溶出液所造成的差異，進(jìn)而判斷藥物的吸附情況。無論上述操作方法對(duì)錯(cuò)與否，我們不妨從濾膜過濾的原理以及其影響因素的角度去探究一下。一般情況下，濾膜主要是通過孔徑的大小來限制溶液通過的。難溶性顆粒大于濾膜控制，將被濾膜拒之門外。濾膜的表面化學(xué)官能團(tuán)與原料藥間的作用力亦影響著藥物的通過。當(dāng)藥物以及輔料分散在溶出介質(zhì)中，輔料特別是具有酸堿性輔料，將會(huì)影響溶出介質(zhì)的pH大小，進(jìn)而影響原料藥在溶液中的電荷情況，最終影響藥物與濾膜的作用力，抑制藥物吸附濾膜或增加藥物與濾膜的作用力。在USP1092中介紹到，過濾器的選擇是根據(jù)評(píng)價(jià)過程中溶出程序開發(fā)的早期階段，在后期試驗(yàn)中可能需要重新考慮，比如藥品或成分的變化以及輔料質(zhì)量的變化（微晶纖維素粒徑的改變）。這句話也就表明了，輔料對(duì)于濾膜吸附的重要影響，在制劑開發(fā)過程中，關(guān)注處方變化，同時(shí)需要驗(yàn)證濾膜吸附試驗(yàn)是否匹配新的處方；同時(shí)，也表明我們?cè)跒V膜吸附實(shí)驗(yàn)中使用空白全輔料似乎不能代替處方中輔料對(duì)于原料藥的影響。建議在處方尚未確定之前，可以離心處理溶出液，避免多次開發(fā)的麻煩。當(dāng)我們確定制劑開發(fā)處方，使用原料藥與處方量輔料配制混和溶液，當(dāng)然我們可以平行配制原料藥溶液。兩種溶液分別通過離心與過濾濾膜才處理。通過比對(duì)，兩種溶液吸附情況，探究輔料是否對(duì)于原料吸附有影響。當(dāng)然，實(shí)際實(shí)驗(yàn)中，我們可以直接使用原料藥與處方量輔料配制混和溶液，分別離心與過膜處理即可。我們通常會(huì)比較通過濾膜0、3、7ml的出液與離心處理的溶出液的差異，進(jìn)而判斷通過多少溶出液后，濾膜達(dá)到飽和。溶出試驗(yàn)時(shí)，會(huì)采用不同的取樣時(shí)間點(diǎn)，開始的幾個(gè)點(diǎn)制劑一般難以溶出完全，溶出液中藥物濃度也相對(duì)較低。一般情況下，溶出液濃度越高，濾膜越快達(dá)到飽和。濾膜吸附實(shí)驗(yàn)中所采用的溶出液濃度應(yīng)該囊括最低與最高溶出量所對(duì)應(yīng)的溶出液濃度。一般情況，可以根據(jù)前期研究，制劑溶出情況，來確定最低溶出量與最高溶出量，具體范圍可以稍微往外擴(kuò)延。溶出方法的開發(fā)在制劑研究中不可被取代，濾膜吸附試驗(yàn)雖然在溶出開發(fā)過程中微不足道，但