實(shí)驗(yàn)動物學(xué)：人類疾病動物模型完整版

人類疾病動物模型AnimalModelsofHumanDiseases疾病對人類健康和生存已構(gòu)成重大威脅，成為全球性社會問題健康家族遺傳生活習(xí)慣不良嗜好環(huán)境污染傳染病意外事故……阿爾茨海默病如何開展人類疾病的研究？人類疾病動物模型—解決人類健康問題DISEASEPROCESSMETABOLOMEPROTEOMETRANSCRIPTOME

GENOME動物模型比較醫(yī)學(xué)MedicineTherapy病因發(fā)病機(jī)制診斷措施治療措施預(yù)防手段主要內(nèi)容1發(fā)展史2概念3研究意義ONTENTSC4復(fù)制原則5分類6復(fù)制方法一、發(fā)展史無論是近代醫(yī)學(xué)、現(xiàn)代醫(yī)學(xué)，傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)還是蒙醫(yī)、藏醫(yī)等發(fā)展之路都凝集著動物模型的功績。貓木乃伊狒狒木乃伊1628年《心血運(yùn)動論》威廉·哈維一、發(fā)展史對40余種動物進(jìn)行解剖

威廉·哈維哥白尼伽利略牛頓《心血運(yùn)動論》一書也像《天體運(yùn)行論》、《關(guān)于托勒密和哥白尼兩大體系的對話》、《自然哲學(xué)之?dāng)?shù)學(xué)原理》等著作一樣，成為科學(xué)革命時期以及整個科學(xué)史上極為重要的文獻(xiàn)?？茖W(xué)革命的巨匠一、發(fā)展史一、發(fā)展史巴甫洛夫在心臟生理、消化生理和高級神經(jīng)活動三個方面作出了重大貢獻(xiàn)，利用犬實(shí)施各種外科手術(shù)，改進(jìn)實(shí)驗(yàn)方法，建立消化腺神經(jīng)支配動物模型，形成了條件反射的概念，開辟了高級神經(jīng)活動生理學(xué)。一、發(fā)展史沒有對活動物進(jìn)行試驗(yàn)和觀察，人們就無法認(rèn)識有機(jī)界的各種規(guī)律，這是無可爭辯的。

———巴甫洛夫二、概念人類疾病動物模型(AnimalModelsofHumanDiseases)醫(yī)學(xué)研究中建立的具有人類疾病模擬表現(xiàn)的動物實(shí)驗(yàn)對象和相關(guān)材料。

動物實(shí)驗(yàn)對象：以動物整體作為研究對象相關(guān)材料：以器官、組織、細(xì)胞為研究對象三、研究意義1、作為人類的替難者，避免對人體實(shí)驗(yàn)造成傷害三氯乙烯職業(yè)危害臨床上外傷、中毒、放射病、職業(yè)病、腫瘤等研究三、研究意義2、可提供發(fā)病率低、潛伏期長和病程長等少見疾病的動物模型＜10歲

2.28/100000

全世界1/10000遺傳病代謝性疾病內(nèi)分泌疾病血液性疾病白血病白化病三、研究意義3、實(shí)驗(yàn)條件可嚴(yán)格控制，實(shí)驗(yàn)結(jié)果具有可比性疾病發(fā)生發(fā)展病人年齡性別體質(zhì)遺傳社會因素動物品種品系健康狀態(tài)微生物實(shí)驗(yàn)條件單一病因造模三、研究意義4、樣品收集方便，實(shí)驗(yàn)結(jié)果易分析

可根據(jù)實(shí)驗(yàn)的需要采取各種樣品，及時或分批處死動物、收集標(biāo)本，了解疾病發(fā)生的全過程。三、研究意義5、有助于我們更全面的認(rèn)識疾病的本質(zhì)人畜共患?。呵萘鞲小ARS四、復(fù)制原則1、相似性

應(yīng)再現(xiàn)所要研究的人類疾病，動物疾病表現(xiàn)應(yīng)與人類疾病相類似，最好能找到與人類疾病相同的動物模型。動物自發(fā)性疾病：大鼠自發(fā)性高血壓——人類原發(fā)性高血壓小型豬自發(fā)性動脈粥樣硬化——人類冠心病復(fù)制動物模型動物的選擇：豬的皮膚結(jié)構(gòu)和生理代謝與人相似四、復(fù)制原則2、重復(fù)性理想的人類疾病動物模型應(yīng)該是可重復(fù)的、可標(biāo)準(zhǔn)化的，不能重復(fù)的動物模型是無法進(jìn)行應(yīng)用研究的。要求：選擇標(biāo)準(zhǔn)化的動物選擇標(biāo)準(zhǔn)化的實(shí)驗(yàn)設(shè)施試劑、儀器及實(shí)驗(yàn)操作等模型制備影響因素動物因素環(huán)境因素營養(yǎng)因素技術(shù)因素四、復(fù)制原則3、可靠性可靠地反映人類疾病，即可特異地反映該種疾病或某種機(jī)能、代謝、結(jié)構(gòu)變化；具備該種疾病的主要癥狀和體征，并經(jīng)受一系列檢測(如心電圖、臨床生理、生化指標(biāo)檢驗(yàn)、病理切片等)得以證實(shí)。

如：蒙古沙鼠鉛中毒模型大鼠鉛中毒模型（易與地方性肺炎及進(jìn)行性腎病混淆）四、復(fù)制原則4、適用性和可控性設(shè)計(jì)復(fù)制人類疾病動物模型，應(yīng)盡量考慮在今后臨床能應(yīng)用和便于控制其疾病的發(fā)展，以利于研究工作的開展。

如：雌激素能終止大鼠和小鼠的早期妊娠，但不能終止人的妊娠四、復(fù)制原則5、易行性和經(jīng)濟(jì)性復(fù)制動物模型設(shè)計(jì)，應(yīng)盡量做到方法容易執(zhí)行和合乎經(jīng)濟(jì)原則。動物的選擇模型復(fù)制方法檢測指標(biāo)五、分類按產(chǎn)生原因分類

1、自發(fā)性動物模型

2、誘發(fā)性動物模型

3、抗疾病型動物模型五、分類1、自發(fā)性動物模型(Spontaneousanimalmodel)實(shí)驗(yàn)動物未經(jīng)任何人工處置，在自然條件下動物自然發(fā)生、或由于基因突變的異常表現(xiàn)通過遺傳育種保留下來的動物模型。經(jīng)典模型：自發(fā)性高血壓大鼠中國地鼠自發(fā)性真性糖尿病小鼠各種自發(fā)性腫瘤山羊家族性甲狀腺腫五、分類1、自發(fā)性動物模型(Spontaneousanimalmodel)優(yōu)點(diǎn)：完全在自然條件下發(fā)生的疾病，排除了人為的因素，疾病的發(fā)生、發(fā)展與人類相應(yīng)的疾病很相似。缺點(diǎn)：來源比較困難，種類有限。五、分類2、誘發(fā)性動物模型(Experimentalanimalmodel)典型模型：藥物性糖尿病模型（注射四氧嘧啶、鏈脲佐菌素）誘發(fā)性動脈粥樣硬化模型豚鼠支氣管痙攣模型小鼠肺癌模型五、分類2、誘發(fā)性動物模型(Experimentalanimalmodel)優(yōu)點(diǎn)：制作方法簡便,實(shí)驗(yàn)條件比較簡單,其它因素容易控制,在短時間內(nèi)可以復(fù)制大量的動物模型。缺點(diǎn)：誘發(fā)動物模型與人類自然產(chǎn)生的疾病在某些方面存在差異。五、分類3、抗疾病型動物模型(Negativeanimalmodel)特定的疾病不會在某種動物身上發(fā)生，從而可以用來探討為何這種動物對該疾病有天然的抵抗力的動物模型。五、分類3、抗疾病型動物模型(Negativeanimalmodel)1）抗腫瘤3）耐低氧4）抗病毒感染能力強(qiáng)5）骨骼維穩(wěn)能力強(qiáng)6）疼痛耐受力強(qiáng)2）抗衰老裸鼴鼠五、分類按系統(tǒng)范圍分類1、疾病的基本病理構(gòu)成動物模型發(fā)熱、缺氧、水腫、休克、電解質(zhì)紊亂等基本病理過程

2、各系統(tǒng)疾病動物模型消化、呼吸、泌尿、心血管、神經(jīng)等各個系統(tǒng)五、分類按模型種類分類整體動物、離體器官和組織、細(xì)胞株和數(shù)字模型按中醫(yī)藥體系分類按中醫(yī)證分類：陰虛、陽虛、氣虛、血虛、脾虛和腎虛、厥脫證動物模型按中藥理論分類：有解表藥、清熱藥、瀉下藥、祛風(fēng)濕藥、止血藥、化痰藥、補(bǔ)益藥、理氣藥等動物模型。六、復(fù)制方法（一）腫瘤動物模型1、自發(fā)性腫瘤（spontaneoustumor）動物模型

2、誘發(fā)性腫瘤（inducedtumor）動物模型3、移植性腫瘤（transplanttumor）動物模型六、復(fù)制方法（一）腫瘤動物模型1、自發(fā)性腫瘤（spontaneoustumor）動物模型

（1）定義實(shí)驗(yàn)動物未經(jīng)任何有意識的人工處置，在自然情況下發(fā)生的腫瘤所形成的模型。六、復(fù)制方法（一）腫瘤動物模型1、自發(fā)性腫瘤（spontaneoustumor）動物模型

（2）優(yōu)點(diǎn)：自發(fā)性腫瘤與人體腫瘤相似，是研究相應(yīng)腫瘤的發(fā)生、治療和防治理想的模型。缺點(diǎn)：生長緩慢，不易同時獲得大批病程基本一致的動物，多用于腫瘤發(fā)病機(jī)理等深入研究，很少用于一般藥效學(xué)研究。六、復(fù)制方法（一）腫瘤動物模型1、自發(fā)性腫瘤（spontaneoustumor）動物模型

（3）小鼠自發(fā)性腫瘤腫瘤種類易發(fā)品系和自發(fā)率乳腺腫瘤C3H(90%)、A系經(jīng)產(chǎn)(60-80%)、CBA/J(60-65%)肺腫瘤A(90%)、SWR(80%)、PRA(77%)(18月齡以上)肝腫瘤C3H(72-90%)、CBA(65%)(14月齡以上，雄高于雌)淋巴細(xì)胞性白血病C58(95-97%)、AKR(76-90%)卵巢腫瘤C3H(64%)、CE(33%)(19月齡以上的生育雌鼠)胃腸道腫瘤A(胃腫瘤90%）；NZO(十二指腸腫瘤15-20%）垂體腫瘤C57BL(老年生育雌鼠33%)六、復(fù)制方法（一）腫瘤動物模型1、自發(fā)性腫瘤（spontaneoustumor）動物模型

（4）大鼠自發(fā)性腫瘤腫瘤種類易發(fā)品系和自發(fā)率乳腺腫瘤SD（55%）、F344（50%）、ACI（11%）睪丸腫瘤F344(86%)、ACI(46%)

子宮腫瘤F344(21%)、ACI(13%)腎上腺腫瘤ACI(雄鼠16%、雌鼠為6%)垂體腫瘤F344(雌鼠36%、雄鼠24%)、ACI(雌鼠為21%、雄鼠5%)六、復(fù)制方法（一）腫瘤動物模型2、誘發(fā)性腫瘤動物模型（1）定義經(jīng)物理、化學(xué)、生物等致癌因素在動物體上誘導(dǎo)產(chǎn)生的腫瘤(包括良性和惡性)，稱為誘發(fā)性腫瘤動物模型。六、復(fù)制方法（一）腫瘤動物模型2、誘發(fā)性腫瘤動物模型（2）誘發(fā)方法①原位誘發(fā)：指將致癌物直接與動物靶組織或靶器官接觸而誘發(fā)該組織或器官發(fā)生腫瘤，接觸方法可通過涂抹、灌注、喂養(yǎng)或埋置等。②異位誘發(fā)：將與致癌物接觸后的動物組織或器官埋置于該動物或另一正常動物皮下而產(chǎn)生的該組織或器官的腫瘤。異位誘發(fā)腫瘤具有易于觀察和取材的優(yōu)點(diǎn)。六、復(fù)制方法（一）腫瘤動物模型2、誘發(fā)性腫瘤動物模型（3）常用的給藥基本方法和途徑①涂抹法：將致癌物涂抹于動物背側(cè)及耳部皮膚，多用于誘發(fā)皮膚腫瘤。②經(jīng)口給藥法：將致癌物溶于飲水或以某種方式混合于動物食物中自然喂養(yǎng)或灌喂動物而使之發(fā)生腫瘤，多用于誘發(fā)消化道腫瘤如食管癌、胃癌、肝癌、大腸癌等。

六、復(fù)制方法（一）腫瘤動物模型2、誘發(fā)性腫瘤動物模型（3）常用的給藥基本方法和途徑③注射法：將致癌物制成溶液或懸浮物，經(jīng)皮下、肌肉、靜脈、胸腔及腹腔等途徑注入體內(nèi)而誘發(fā)腫瘤。④氣管灌注法：將顆粒性致癌物制成懸浮液直接注入或用導(dǎo)液管注入動物氣管內(nèi)，常用于誘發(fā)肺癌。

六、復(fù)制方法（一）腫瘤動物模型2、誘發(fā)性腫瘤動物模型（3）常用的給藥基本方法和途徑⑤穿線法：將多芳香烴類致癌物直接置于某特定部位或器官，如宮頸、卵巢、腺胃等。將一定量的致癌物放置于無菌試管內(nèi)，加熱使致癌物升華，吸附于預(yù)制的線節(jié)上，將含有致癌物的線穿入靶器官或組織。⑥埋藏法：將致癌物包埋于皮下或其他組織內(nèi)，或?qū)⒔?jīng)致癌物作用過的細(xì)胞、組織、器官移植于同種或同品系動物皮下誘發(fā)腫瘤。

六、復(fù)制方法（一）腫瘤動物模型2、誘發(fā)性腫瘤動物模型（4）經(jīng)典模型①二乙基亞硝胺(DEN)誘發(fā)小鼠肺癌小鼠皮下注射1％DEN生理鹽水溶液，每周一次，(每次劑量為56mg/kg體重，總劑量為868mg)。觀察時間為100d左右。此模型誘發(fā)率約40%。若將DEN總劑量增到1176mg時，半年誘發(fā)率可達(dá)90％以上。

六、復(fù)制方法（一）腫瘤動物模型2、誘發(fā)性腫瘤動物模型（4）經(jīng)典模型②亞胺基偶氮甲苯(OAAT)誘發(fā)小鼠肝癌

1％OAAT苯溶液涂于動物兩肩胛間皮膚上，隔日1次，每次2-3滴、一般涂100次。7個月以上誘發(fā)肝腫瘤約55％。③黃曲霉素誘發(fā)大鼠肝癌在大鼠飼料中加入黃曲霉素，含0.011-0.015ppm，喂養(yǎng)6個月，誘發(fā)率達(dá)80％。六、復(fù)制方法（一）腫瘤動物模型2、誘發(fā)性腫瘤動物模型（5）優(yōu)點(diǎn)瘤細(xì)胞增殖動力學(xué)與人類腫瘤較接近，是癌變機(jī)理及癌前阻斷研究的理想模型。缺點(diǎn)誘發(fā)腫瘤需時較長，動物腫瘤的發(fā)生往往先后不齊，生長慢，癌細(xì)胞增殖比率低，倍增時間長，常有防護(hù)問題；難于觀察腫瘤的動態(tài)發(fā)生、發(fā)展，常缺乏客觀測量腫瘤發(fā)生、發(fā)展或退縮的指標(biāo)，所以多用于抗致癌作用的研究。

六、復(fù)制方法（一）腫瘤動物模型3、移植性腫瘤動物模型（1）定義將動物或人體腫瘤移植到同系、同種或異種動物體內(nèi)，經(jīng)連續(xù)傳代而培養(yǎng)出的模型。六、復(fù)制方法（一）腫瘤動物模型3、移植性腫瘤動物模型（2）按移植對象不同同種移植：將動物腫瘤組織移植于同品系或同種屬動物體內(nèi)。異種移植：腫瘤組織來源于人體或其他動物，移植到另一種屬的受體動物體內(nèi)。六、復(fù)制方法（一）腫瘤動物模型3、移植性腫瘤動物模型（3）按移植部位及用途不同異位移植：皮下、腎包膜下、肌肉、腦內(nèi)、腹腔等移植。原位移植：將腫瘤組織（或細(xì)胞懸液）移植到與腫瘤原發(fā)部位相對應(yīng)的移植宿主器官組織內(nèi)，如人的肝癌細(xì)胞移植于裸鼠的肝臟、人的胃癌細(xì)胞移植于裸鼠的胃。六、復(fù)制方法原位移植手術(shù)器械六、復(fù)制方法六、復(fù)制方法兩種免疫缺陷動物胃原位移植六、復(fù)制方法（一）腫瘤動物模型3、移植性腫瘤動物模型（4）移植方法①實(shí)體瘤移植

腫瘤細(xì)胞皮下接種——7-10d處死荷瘤動物——選擇生長良好、無壞死液化的瘤組織——2-3ml生理鹽水或其它營養(yǎng)液——無菌套管針抽吸——接種同種受體動物右前腋窩皮下。六、復(fù)制方法六、復(fù)制方法六、復(fù)制方法六、復(fù)制方法（一）腫瘤動物模型3、移植性腫瘤動物模型（4）移植方法②腹水瘤移植腫瘤細(xì)胞皮下接種——7-10d處死荷瘤動物——取腹水——含葡萄糖平衡鹽水稀釋至適當(dāng)濃度——腹腔注射（腹水瘤）。六、復(fù)制方法六、復(fù)制方法（二）神經(jīng)系統(tǒng)疾病動物模型1、疼痛動物模型2、記憶動物模型六、復(fù)制方法（二）神經(jīng)系統(tǒng)疾病動物模型1、疼痛動物模型疼痛作為主觀的感受和體驗(yàn)，是一種復(fù)雜的生理心理反應(yīng)。動物實(shí)驗(yàn)只能間接借助由于傷害性刺激引起的“痛”反應(yīng)作為測量指標(biāo)。按刺激性質(zhì)可分為四大類，即熱刺激法、電刺激法、機(jī)械刺激法和化學(xué)刺激法。六、復(fù)制方法（二）神經(jīng)系統(tǒng)疾病動物模型1、疼痛動物模型①造模機(jī)制用小型聚光燈產(chǎn)生一定強(qiáng)度的光束，經(jīng)凸透鏡聚焦照射大鼠的尾巴以致痛，大鼠以甩尾為痛反應(yīng)指標(biāo)。儀器：鼠尾光照測痛儀（1）大鼠光熱法六、復(fù)制方法（二）神經(jīng)系統(tǒng)疾病動物模型1、疼痛動物模型②造模方法ⅰ200g雄性大鼠，裝入固定器內(nèi)，尾巴外露，先用75％乙醇擦凈尾部，用墨汁在尾部下1/3處標(biāo)出光刺激點(diǎn)的位置(墨汁能易于吸熱)。ⅱ調(diào)節(jié)輻射熱測痛儀的焦距，在聚焦的鼠臺檔板作標(biāo)記，使鼠尾光刺激點(diǎn)位置與檔板上標(biāo)記重合。每次實(shí)驗(yàn)于每日同一時間進(jìn)行。（1）大鼠光熱法六、復(fù)制方法（二）神經(jīng)系統(tǒng)疾病動物模型1、疼痛動物模型②造模方法ⅲ照射開始到甩尾反應(yīng)的潛伏期為痛閾。負(fù)載電壓20V，選用潛伏期在5s以內(nèi)的動物。實(shí)驗(yàn)開始時先測3次，每次間隔5min，計(jì)算其平均值為基礎(chǔ)痛閾。ⅳ為防止皮膚灼傷，光照截止時間10s或以潛伏期升高150％為限。（1）大鼠光熱法六、復(fù)制方法（二）神經(jīng)系統(tǒng)疾病動物模型1、疼痛動物模型③模型評價(jià)大鼠甩尾法操作方便，反應(yīng)恒定，重復(fù)性好，對于篩選麻醉性鎮(zhèn)痛藥及非麻醉性鎮(zhèn)痛藥均適用，故使用最多。但甩尾反應(yīng)是一種脊髓反應(yīng)，骨骼肌松弛藥也可出現(xiàn)陽性結(jié)果。（1）大鼠光熱法六、復(fù)制方法（二）神經(jīng)系統(tǒng)疾病動物模型1、疼痛動物模型①造模機(jī)制把小鼠放在事先加熱到55℃的熱板上，以舔后足或跳躍作為疼痛反應(yīng)指標(biāo)。（2）小鼠熱板法六、復(fù)制方法（二）神經(jīng)系統(tǒng)疾病動物模型1、疼痛動物模型②造模方法ⅰ恒溫水浴至55±0.5℃，底板接觸水面，記錄小鼠自投入熱板至出現(xiàn)舔后足的時間(s)作為該鼠的痛閾值。ⅱ給藥前先測定每只小鼠的痛閾(共測2次，以平均值不超過30s者為合格)。給藥后每隔0.5-1h測定1次，連續(xù)數(shù)次。ⅲ痛閾值超過60s，即停止測試并按60s計(jì)(時間過久，易燙傷足部)。（2）小鼠熱板法六、復(fù)制方法（二）神經(jīng)系統(tǒng)疾病動物模型1、疼痛動物模型六、復(fù)制方法（二）神經(jīng)系統(tǒng)疾病動物模型1、疼痛動物模型③模型評價(jià)ⅰ本法簡便易行，痛感指標(biāo)明確易于觀察，對組織損傷小，動物可反復(fù)利用，為目前常用的方法之一，但對作用較弱的鎮(zhèn)痛藥不太敏感。ⅱ室溫對實(shí)驗(yàn)有影響，室溫過低小鼠反應(yīng)遲鈍，過高則敏感，易引起跳躍。室溫在13-18℃范圍內(nèi)動物反應(yīng)波動較小。（2）小鼠熱板法六、復(fù)制方法（二）神經(jīng)系統(tǒng)疾病動物模型2、記憶動物模型動物實(shí)驗(yàn)前應(yīng)通過跳臺試驗(yàn)(stepdowntest)、避暗試驗(yàn)(stepthroughtest)、迷津(maze，包括Y型迷宮、水迷宮等)進(jìn)行訓(xùn)練，使動物建立一定的條件反射，學(xué)習(xí)和記憶逃避電擊或?qū)ひ捠澄锏哪芰Γ缓蠼o予損害中樞神經(jīng)系統(tǒng)因素后，觀察動物記憶的保留情況。六、復(fù)制方法水迷宮六、復(fù)制方法（三）心血管疾病動物模型高脂飼料誘發(fā)高血脂及動脈粥樣硬化癥模型

六、復(fù)制方法（三）心血管疾病動物模型高脂飼料誘發(fā)高血脂及動脈粥樣硬化癥模型（1）造模機(jī)制①動物飼料中加入過量的膽固醇和脂肪，飼養(yǎng)一定時間后，其主動脈及冠狀動脈處逐漸形成粥樣硬化斑塊，并出現(xiàn)高血脂癥。②高膽固醇和高脂飲食，加入少量膽酸鹽，可增加膽固醇的吸收，如再加入甲狀腺抑制藥（甲基硫氧嘧啶或丙基硫氧嘧啶）可進(jìn)一步加速病變的形成。六、復(fù)制方法（三）心血管疾病動物模型高脂飼料誘發(fā)高血脂及動脈粥樣硬化癥模型（2）造模方法①小型豬選用Gottigen系小型豬較為理想，用1％～2％高脂食物飼喂6個月即可形成動脈粥樣硬化病變。

評價(jià)：形成動脈粥樣硬化病變特點(diǎn)及分布都與人類近似。六、復(fù)制方法（三）心血管疾病動物模型高脂飼料誘發(fā)高血脂及動脈粥樣硬化癥模型（2）造模方法②猴

選用3.5～10.5kg，3～6歲的恒河猴飼喂高脂飼料(50％麥粉、8％玉米粉、8％麥麩、1％膽固醇、8％蛋黃、8％豬油、17％白糖及適量的小蘇打和食鹽)。1個月后造成猴的實(shí)驗(yàn)性高血脂癥。血清膽固醇較正常時升高3.1～3.2倍。

評價(jià)：猴的膽固醇代謝、血漿脂蛋白組成及高脂血癥與人相似，是較理想的模型。六、復(fù)制方法（三）心血管疾病動物模型高脂飼料誘發(fā)高血脂及動脈粥樣硬化癥模型（2）造模方法③兔體重2kg左右，每天膽固醇0.3g，4個月后形成主動脈粥樣硬化斑塊；劑量增至0.5g，3個月出現(xiàn)斑塊；增至1.0g，可縮為2個月。在飼料中加入15％蛋黃粉、0.5％膽固醇和5%豬油，3周后，將膽固醇減去再喂3周，可使斑塊發(fā)生率達(dá)100％，血清膽固醇可升高至2000mg％。評價(jià)：對喂飼膽固醇非常敏感，在短期內(nèi)便能出現(xiàn)明顯的病變。因?yàn)橥脤ν庠葱阅懝檀嫉奈章士筛哌_(dá)75％～90％，對高血脂的清除能力低(靜脈注射膽固醇后，高脂血癥可持續(xù)3～4天)。

六、復(fù)制方法（三）心血管疾病動物模型高脂飼料誘發(fā)高血脂及動脈粥樣硬化癥模型（2）造模方法④大鼠飼料配方一(1％-4％膽固醇、10％豬油、0.2%甲基硫氧嘧啶、89％-86％基礎(chǔ)飼料)，喂服7～10天。可形成高膽固醇血癥。飼料配方二(10％蛋黃粉、5％豬油、0.5％膽鹽、85％基礎(chǔ)飼料)，喂服7天可形成高膽固醇血癥。

評價(jià)：飼養(yǎng)方便、抵抗力強(qiáng)、食性與人相近。所形成的病理改變與人早期者相似，不易形成似人體的后期病變，較易形成血栓。六、復(fù)制方法（三）心血管疾病動物模型高脂飼料誘發(fā)高血脂及動脈粥樣硬化癥模型（2）造模方法⑤雞

4～8周的萊克亨雞，在飼料中加入1-2％膽固醇或15％蛋黃粉，再加5～10％豬油，經(jīng)過6～10周，血膽固醇即升至1000mg～4000mg％，胸主動脈斑塊發(fā)生率達(dá)100％。評價(jià)：雞為雜食動物，僅在普通飼料中加入膽固醇，就可形成動脈粥樣硬化斑塊。病變發(fā)生較快，在斑塊中有時伴有鈣化和形成潰瘍。六、復(fù)制方法（四）內(nèi)分泌、營養(yǎng)疾病動物模型1、糖尿病動物模型

2、缺鐵性貧血動物模型3、維生素D缺乏性佝僂病動物模型六、復(fù)制方法（四）內(nèi)分泌、營養(yǎng)疾病動物模型1、糖尿病動物模型（1）模型概述①注射致高血糖因子，如生長激素、胰高糖素、糖皮質(zhì)激素以及兒茶酚胺類激素等，復(fù)制出某些繼發(fā)性糖尿病模型。②注射化學(xué)物質(zhì)引起胰島β細(xì)胞的損傷，如鏈脲佐菌素(STZ)、四氧嘧啶、二苯硫代卡肥腙可造成胰島β細(xì)胞不可逆損傷；環(huán)丙庚哌、天門冬素酶、6—氨基尼克酰胺、2—脫氧葡萄糖、甘露庚酮糖可引起β細(xì)胞可逆性損傷。六、復(fù)制方法（四）內(nèi)分泌、營養(yǎng)疾病動物模型1、糖尿病動物模型（1）模型概述③注射生物及生物制品引起β細(xì)胞破壞，如鼠腦炎、心肌炎病毒M型變異可誘發(fā)若干品系的成年小鼠糖尿病，IL—1在一定劑量和范圍內(nèi)對β細(xì)胞有選擇性細(xì)胞毒作用，導(dǎo)致IDDM。④手術(shù)切除胰腺的大部分或全部，并給予高糖飲食刺激，引起繼發(fā)性永久性糖尿病。六、復(fù)制方法（四）內(nèi)分泌、營養(yǎng)疾病動物模型1、糖尿病動物模型（1）模型概述⑤篩選、引種、繁殖遺傳性及自發(fā)性糖尿病，這類動物模型更接近人類糖尿病的自然起病及發(fā)展，尤其適于研究糖尿病的病因?qū)W。六、復(fù)制方法（四）內(nèi)分泌、營養(yǎng)疾病動物模型1、糖尿病動物模型（2）造模方法①病毒誘發(fā)法

DBA/2雌性小鼠，皮下接種腦炎、心肌炎病毒M型變異株4—7天后出現(xiàn)明顯的高血糖，伴有血中及胰腺中胰島素含量降低。評價(jià)：其高血糖為特發(fā)性，伴明顯低胰島素血癥，在某些小鼠中可自然緩解，但糖耐量異常及高血糖在恢復(fù)期中仍將存在，其生化方面與人類MODP相似。六、復(fù)制方法（四）內(nèi)分泌、營養(yǎng)疾病動物模型1、糖尿病動物模型（2）造模方法a.速發(fā)型

STZ用0.1mmol/L無菌枸櫞酸—枸櫞酸鈉緩沖液新鮮配制成2％溶液，調(diào)節(jié)pH至4.5，濾菌器過濾除菌。大鼠禁食10h按50～65mg/kg腹腔內(nèi)或尾靜脈一次性注射，24h內(nèi)隨機(jī)血糖≥16.7mmol/L，穩(wěn)定5d即可作為成功模型。評價(jià)：一次足量給予鏈脲佐菌素，造成β細(xì)胞大量損傷，胰島素合成和分泌減少，引起糖代謝紊亂，導(dǎo)致糖尿病。速發(fā)型模型較適于NIDDM的相關(guān)研究。通常單劑量達(dá)50mg/kg體重不出現(xiàn)自然緩解現(xiàn)象，第6～27天，胰島有一定程度再生，功能部分恢復(fù)，但仍處于高血糖狀態(tài)。六、復(fù)制方法（四）內(nèi)分泌、營養(yǎng)疾病動物模型1、糖尿病動物模型（2）造模方法b.遲發(fā)型

STZ配制同前，福氏佐劑(CFA)按4:1稱取液體石蠟和羊毛脂，研碎混勻，經(jīng)高壓消毒后低溫保存，使用前按1.5mg/0.5ml加入無菌滅活卡介苗。第1天腹腔注射0.5mlCFA，次日按25mg/kg腹腔內(nèi)注射STZ溶液。每周1次，連續(xù)3周，第2周部分大鼠就可成模型，第3周成模率87.5％。評價(jià)：福氏完全佐劑可激發(fā)機(jī)體免疫功能，將小劑量STZ和CFA聯(lián)合使用，可激活大鼠體內(nèi)淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)胰島β細(xì)胞發(fā)生輕度改變，被激活的體內(nèi)淋巴細(xì)胞可將輕度變性的細(xì)胞作靶細(xì)胞攻擊，導(dǎo)致自身免疫，胰島β細(xì)胞損害加重，引起糖尿病。遲發(fā)型模型有免疫學(xué)的改變，更接近人類IDDM的發(fā)生發(fā)展變化。六、復(fù)制方法（四）內(nèi)分泌、營養(yǎng)疾病動物模型1、糖尿病動物模型（2）造模方法四氧嘧啶和鏈脲佐菌素比較評價(jià)：ⅰ化學(xué)誘導(dǎo)是一種簡便，價(jià)廉的方法。其中STZ優(yōu)于四氧嘧啶，其造模穩(wěn)定、快速、無自然緩解，種屬選擇性不強(qiáng)(豚鼠只能用鏈脲菌素造模)，復(fù)制前不需禁食。糖尿病形成后無需特意安排動物飼養(yǎng)條件。STZ可作用于對四氧嘧啶致糖尿作用有抵抗的豚鼠。但價(jià)格較四氧嘧啶貴。六、復(fù)制方法（四）內(nèi)分泌、營養(yǎng)疾病動物模型1、糖尿病動物模型（2）造模方法四氧嘧啶和鏈脲佐菌素比較評價(jià)：ⅱ四氧嘧啶和鏈脲菌素均為一種可以選擇性作用于胰島β細(xì)胞的化學(xué)物質(zhì)，其作用機(jī)制目前有不同認(rèn)識，有人認(rèn)為是破壞了細(xì)胞本身，有人則認(rèn)為僅是細(xì)胞脫顆?；蚴前ど掀咸烟鞘荏w的變化。六、復(fù)制方法（四）內(nèi)分泌、營養(yǎng)疾病動物模型1、糖尿病動物模型（2）造模方法④高糖飼喂誘發(fā)法選用SHR/NLH—CP大鼠5周齡，喂飼含54％蔗糖飲食。1個月時，觀察到OGTT異常，6.5個月時胰島素反應(yīng)異常，9個月時可見體重減輕，衰弱。

評價(jià)：一些動物品系有自發(fā)或在施加誘導(dǎo)的條件下發(fā)生糖尿病的傾向。SHR/NLH-CP大鼠模型某些代謝和組織病理特征與人類非胰島素依賴性糖尿病相似，該模型還可觀察糖尿病肝腎損害。六、復(fù)制方法（四）內(nèi)分泌、營養(yǎng)疾病動物模型2、缺鐵性貧血動物模型(1)造模機(jī)制

由于鐵的攝入不足和/或鐵丟失過多，引起機(jī)體血紅蛋白合成障礙。IDA模型有大鼠、小鼠、兔、雞、貓、狗、猴等，其中以大鼠最為常用。六、復(fù)制方法（四）內(nèi)分泌、營養(yǎng)疾病動物模型2、缺鐵性貧血動物模型(2)造模方法①給予低鐵飲食飼料含鐵量≥50mg/kg能滿足大鼠的基本需要，標(biāo)準(zhǔn)飼料鐵含量為220-270mg/kg，低鐵飼料的鐵含量≤10mg/kg。六、復(fù)制方法（四）內(nèi)分泌、營養(yǎng)疾病動物模型2、缺鐵性貧血動物模型(2)造模方法②給動物逐次少量放血，造成鐵的慢性丟失通常采用剪尾的方法，一方面放血不