動(dòng)物腹腔鏡技術(shù)在卵巢卵巢發(fā)育中的應(yīng)用

動(dòng)物腹腔鏡技術(shù)在卵巢卵巢發(fā)育中的應(yīng)用

與傳統(tǒng)的腹部手術(shù)相比，腹部外科技術(shù)具有體修復(fù)少、術(shù)后動(dòng)物恢復(fù)快等優(yōu)點(diǎn)。在國(guó)外，它被廣泛用于動(dòng)物疾病的診斷和治療、動(dòng)物生產(chǎn)和胚胎移植等生物工程。近十多年來(lái),國(guó)內(nèi)腹腔鏡技術(shù)迅速發(fā)展,其在臨床醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用范圍也逐漸擴(kuò)大,但在獸醫(yī)診療和家畜生產(chǎn)中的應(yīng)用相對(duì)滯后。隨著腹腔鏡技術(shù)的快速發(fā)展,相信在不久的將來(lái)國(guó)內(nèi)動(dòng)物腹腔鏡技術(shù)也會(huì)有廣闊的使用前景。1國(guó)外動(dòng)物腹腔技術(shù)的研究1.1犬貓的臨床應(yīng)用大多數(shù)肝膽疾病和許多胰臟疾病可以通過腹腔鏡檢查來(lái)進(jìn)行確診。腹腔鏡檢查術(shù)通?？蓪?duì)超聲檢查出的疑似病變,通過直視檢查而有助于確診。對(duì)肝外膽管阻塞的疾病,可以通過腹腔鏡技術(shù)用鈍性探頭對(duì)膽囊進(jìn)行觸診,為確診提供依據(jù)。腹腔鏡技術(shù)可以用來(lái)直接進(jìn)行活體組織取樣。在進(jìn)行活體組織取樣時(shí),尤其是鏡頭從腹右側(cè)壁進(jìn)入時(shí),可以對(duì)腰脊柱和腹側(cè)壁的所有臟器的表面直視,并且可以在對(duì)其他器官幾乎沒有造成損傷的前提下取到所有需要的活體組織。HarringtonDP等認(rèn)為,腹腔鏡可以安全地完成胰臟活體取樣而不會(huì)損傷胰臟,也不會(huì)引起犬貓?jiān)诨顧z后的炎癥反應(yīng)。將病犬貓仰臥保定后,可以用腹腔鏡來(lái)進(jìn)行膀胱和生殖道的檢查?？梢杂^察卵巢表面以判定卵泡的生長(zhǎng)發(fā)育情況,同時(shí)可以對(duì)子宮角進(jìn)行操作來(lái)完成人工授精的過程。通過相似的方法也可對(duì)膀胱完成檢查。腹腔鏡還可用來(lái)進(jìn)行胃腸道的檢查與取樣。在犬貓的臨床,除以上適應(yīng)證外,腹腔鏡技術(shù)還可用來(lái)進(jìn)行腹部創(chuàng)傷的檢查,主要包括肝臟和脾臟的破裂,以及膈疝、膀胱破裂、腎臟破裂、腹壁疝等的檢查。腹腔鏡技術(shù)還可以用來(lái)進(jìn)行腹腔腫瘤的診斷,通過直視觀察和活檢,還可判定腫瘤的病程,從而可以為外科醫(yī)生進(jìn)行開腹手術(shù)治療提供可靠依據(jù)。在國(guó)外,腹腔鏡技術(shù)在犬貓臨床診療中主要用于犬的子宮切除術(shù)和卵巢切除術(shù)。近年來(lái)的臨床試驗(yàn)表明,用腹腔鏡對(duì)母犬進(jìn)行卵巢子宮切除術(shù),與常規(guī)開腹手術(shù)進(jìn)行比較,腹腔鏡手術(shù)對(duì)犬的應(yīng)激和免疫等方面的影響小。VanGoethemBBJ等結(jié)合臨床病例,進(jìn)行腹腔鏡手術(shù)切除犬卵巢的非隨機(jī)性、前矚性試驗(yàn),發(fā)現(xiàn)在手術(shù)過程中使用雙極電凝比單極電凝要省時(shí),可以減少術(shù)中出血,并且容易把卵巢切除。HancockRB等用超聲刀輔助腹腔鏡進(jìn)行比格犬子宮卵巢切除術(shù),手術(shù)過程中在凝固卵巢和子宮靜脈時(shí)對(duì)周圍組織造成的損傷小,比常規(guī)開腹手術(shù)切除子宮卵巢能夠減輕犬的疼痛。AustinB等在腹腔鏡下用超聲刀來(lái)完成了9只母犬的卵巢子宮切除術(shù),并統(tǒng)計(jì)手術(shù)所需時(shí)間在術(shù)前和術(shù)后12h通過檢測(cè)犬血清中的肌酸激酶來(lái)衡量手術(shù)對(duì)犬所造成的應(yīng)激反應(yīng)。發(fā)現(xiàn)腹腔鏡手術(shù)進(jìn)行犬的子宮卵巢切除術(shù)是可行的方法,其優(yōu)點(diǎn)有待進(jìn)一步研究。VanNmwegenSA等在腹腔鏡手術(shù)切除犬卵巢時(shí),將雙極電凝與激光切割進(jìn)行比較,發(fā)現(xiàn)雙極電凝不僅能縮短手術(shù)時(shí)間,而且還能減少術(shù)中出血。在進(jìn)行腹腔鏡犬卵巢切除術(shù)時(shí),推薦使用雙極電凝。1.2新生兒的手術(shù)治療從20世紀(jì)30年代中期開始,即有腹腔鏡技術(shù)應(yīng)用于牛的報(bào)道。但在之后的40年中,在牛上腹腔鏡技術(shù),還主要是用來(lái)觀察生殖道的生理學(xué)特點(diǎn)。LambertRD等將內(nèi)窺鏡從牛的右肷部插入腹腔來(lái)檢查卵巢發(fā)育情況并吸取卵泡。NaoiM等在腹腔鏡輔助下進(jìn)行了牛的腎臟活檢。WilsonAD等利用腹腔鏡在直視下進(jìn)行了牛網(wǎng)狀腹膜炎的診斷。AndersonDE等用腹腔鏡來(lái)觀察牛腹腔臟器的正常解剖位置。直到20世紀(jì)90年代后,才報(bào)道用腹腔鏡技術(shù)進(jìn)行新生牛犢和奶牛外科手術(shù)操作。Janowitz等用腹腔鏡進(jìn)行牛的皺胃左方變位的整復(fù)與固定。BoureL等用內(nèi)鏡縫合設(shè)備在腹腔鏡下完成了新生牛犢膀胱頂切除術(shù)和臍疝閉合術(shù)。兩年后他又在腹腔鏡下進(jìn)行了新生犢牛膀胱破裂修補(bǔ)術(shù)效果比較試驗(yàn),發(fā)現(xiàn)一層縫合法在手術(shù)試驗(yàn)中操作快且安全,該手術(shù)方法可以繼續(xù)用于新生小驢和臨床病例中進(jìn)行研究。腹腔鏡技術(shù)對(duì)牛的適應(yīng)癥主要有以下幾個(gè)方面。(1)采用保蟲取卵技術(shù)首先有人用內(nèi)窺鏡通過牛的右肷部進(jìn)入腹腔來(lái)檢查牛的卵巢,并進(jìn)行了活體采卵;繼之又有人用腹腔鏡觀察了小母牛的排卵。之后,相繼報(bào)道了用腹腔鏡進(jìn)行牛的取卵技術(shù)。目前,在繁殖育種學(xué)方面,這些技術(shù)主要被用于小型反芻動(dòng)物的人工授精和胚胎移植的采胚。(2)出血后的活檢在腹腔鏡的引導(dǎo)下進(jìn)行活檢技術(shù)的好處在于,可以直視被檢器官并且可以選擇要活檢器官的確切部位。腹腔鏡活檢可以避免誤傷其他器官,并可及時(shí)地發(fā)現(xiàn)出血并進(jìn)行有效止血。1985年,NaoiM等首次報(bào)道用腹腔鏡來(lái)進(jìn)行牛腎臟的活檢。當(dāng)時(shí),腹腔鏡是從右側(cè)腰椎旁的肷窩內(nèi)進(jìn)入腹腔,用活檢穿刺針可以取出直徑1.5mm、長(zhǎng)16mm的活檢器官標(biāo)本。Klein等報(bào)道了用腹腔鏡進(jìn)行牛犢和綿羊的腸管活檢取樣技術(shù),動(dòng)物在全身麻醉后取斜臥位,然后腹腔鏡從背側(cè)位進(jìn)入。在腹腔鏡直視下,用抓鉗把腸管牽拉到腹腔外進(jìn)行活體檢查取樣。(3)登記確定的手術(shù)方法腹腔鏡探查可以確診牛的術(shù)后子宮扭轉(zhuǎn)。早期子宮扭轉(zhuǎn)的診斷并不容易,并且預(yù)后也不確切。從牛的右側(cè)肷窩進(jìn)入腹腔鏡探查對(duì)許多并發(fā)癥的診斷有好處,腹腔鏡術(shù)者可以憑借所觀察到的情況來(lái)評(píng)估子宮的顏色、卵巢的腫脹情況和有無(wú)血栓的形成。腹腔鏡技術(shù)還可以進(jìn)行牛的皺胃左方變位的診斷與治療,皺胃左方變位的縫合固定術(shù)可以通過腹腔鏡來(lái)完成。用腹腔鏡來(lái)探查皺胃,可以發(fā)現(xiàn)包括創(chuàng)傷性皺、網(wǎng)胃炎的穿孔和潰瘍等病變,另外還可以發(fā)現(xiàn)局部的一些可疑病變。對(duì)動(dòng)物術(shù)后臟器粘連的發(fā)生及局部腹膜炎通常只有再次開腹才能確診,而當(dāng)用腹腔鏡來(lái)進(jìn)行探查時(shí),既可看見具體的病變部位,又可減輕探查過程中給動(dòng)物帶來(lái)的應(yīng)激。當(dāng)然,牛的腹腔鏡探查術(shù)也有其局限性,主要表現(xiàn)在不能用其探查整個(gè)腹腔,外科醫(yī)生的探索水平有待提高,以及缺少大型動(dòng)物專用的腹腔鏡設(shè)備等。已經(jīng)報(bào)道3種利用腹腔鏡技術(shù)對(duì)牛的皺胃左方變位進(jìn)行糾正和固定的方法。第1種方法是Janowitz等在腹腔鏡的引導(dǎo)下,將變位的皺胃用針狀套環(huán)縫合2針,然后將兩針縫合材料從套管中拉出并穿過一紗布結(jié)系繃帶打結(jié),固定于腹側(cè)體表保留3周～4周。該方法非常有效,操作迅速,術(shù)后成功率可達(dá)98%,基本沒有復(fù)發(fā),且沒有并發(fā)癥。第2種方法是牛在仰臥保定下,用腹腔鏡將變位的皺胃縫合4針后固定于劍狀突和臍孔間腹白線右側(cè)約3cm～5cm的腹壁上。用該法治療了10頭皺胃左方變位的牛,發(fā)現(xiàn)該技術(shù)安全,快捷(30min),同時(shí)可以產(chǎn)生有力的粘連以防復(fù)發(fā)。用該技術(shù)治療了16頭處于泌乳期的發(fā)病奶牛,術(shù)后奶?？苫菊Ｃ谀?個(gè)月。第3種方法是在第1種方法的基礎(chǔ)上,采用一種特制的縫合針狀材料,將變位的皺胃固定于腹壁上,整個(gè)過程牛取站立姿勢(shì)。1.3新型血栓設(shè)備和手術(shù)治療的應(yīng)用腹腔鏡技術(shù)在馬屬動(dòng)物主要用于馬或驢的子宮卵巢切除術(shù)和隱睪摘除術(shù)等。ChristopherA等報(bào)道了22例馬在站立保定狀態(tài)下,采用腹腔鏡進(jìn)行雙側(cè)卵巢摘除術(shù)。通過局部麻醉后,分別從兩側(cè)的肷窩將腹腔鏡和兩把手術(shù)抓鉗插入腹腔,然后進(jìn)行卵巢摘除和卵巢韌帶切斷后的止血。這不同于過去人們通過腹腔鏡定位后把卵巢拉到體外進(jìn)行手術(shù)操作,也不同于通過陰道切口用絞勒器來(lái)摘除卵巢及進(jìn)行卵巢韌帶的止血。該方法不僅可以減少手術(shù)并發(fā)癥,還可以避免全身麻醉對(duì)動(dòng)物所帶來(lái)的危險(xiǎn)。之后,HandR等用腹腔鏡在站立保定狀態(tài)下對(duì)馬進(jìn)行了雙側(cè)卵巢摘除術(shù),手術(shù)中使用新型止血設(shè)備(LigaSure)進(jìn)行止血試驗(yàn),發(fā)現(xiàn)該設(shè)備不僅止血效果確實(shí),而且還可避免手術(shù)過程中將異物留在馬體內(nèi)。KatjaF等在馬的站立保定下進(jìn)行腹腔鏡雙側(cè)卵巢摘除術(shù),利用超聲刀來(lái)進(jìn)行卵巢韌帶的切斷,認(rèn)為在馬的腹腔鏡卵巢摘除術(shù)中超聲刀優(yōu)于其他止血方法,安全可靠。PepeM等報(bào)道用腔內(nèi)吻合器配合腹腔鏡進(jìn)行了薩丁驢的絕育手術(shù),該方法不僅微創(chuàng)而且簡(jiǎn)單、術(shù)后并發(fā)癥少,在術(shù)后檢查時(shí)沒有睪丸血管的再生形成。DellingU等報(bào)道用手助腹腔鏡可以成功地進(jìn)行馬的子宮卵巢切除術(shù),該方法與傳統(tǒng)術(shù)式比具有微創(chuàng),還能夠增加手術(shù)的安全性,便于術(shù)中與腹腔鏡器械的協(xié)調(diào)配合操作,具有縮短手術(shù)時(shí)間,減少術(shù)后并發(fā)癥等優(yōu)點(diǎn)。腹腔鏡技術(shù)同樣可用來(lái)進(jìn)行馬的活體檢查,并進(jìn)行肝、腎、脾、淋巴結(jié)和其他臟器的取樣。除此之外,近年來(lái)腹腔鏡技術(shù)在馬屬動(dòng)物也開展了一些臨床治療及手術(shù)探討性的研究。BrugmansF等用腹腔鏡進(jìn)行了馬的直腸和結(jié)腸破裂的修補(bǔ)術(shù),同時(shí)采用3種不同的縫合方法來(lái)進(jìn)行修補(bǔ)效果比較研究。HanrathM等回顧性地報(bào)道了10例馬的腹腔鏡隱睪切除術(shù),在手術(shù)過程中使用電凝設(shè)備,能夠安全、可靠、快速地切斷睪丸系膜并很好地止血。DesmaizieresLM等用40匹馬進(jìn)行了在腹腔鏡手術(shù)中與套管插管有關(guān)的并發(fā)癥試驗(yàn)研究,發(fā)現(xiàn)在禁食12h后的馬在取站立姿勢(shì)時(shí)從右側(cè)腹部肷窩處插入套管是安全的。WesleySutterW等對(duì)馬的小腸系膜撕裂病例用腹腔鏡進(jìn)行了修補(bǔ)術(shù)。病馬在站立保定下,通過施行局部麻醉來(lái)完成手術(shù)。MrienT等報(bào)道用5匹健康馬在局部浸潤(rùn)麻醉,站立保定,在未充CO2氣腹情況下,用腹腔鏡來(lái)完成了脾腎韌帶和脾胃韌帶的間隙閉合術(shù),從而探索了一種防止馬屬動(dòng)物大結(jié)腸變位的手術(shù)治療技術(shù)。該術(shù)式可以避免術(shù)中和術(shù)后的并發(fā)癥,并且可保持術(shù)部的外形美觀,與常規(guī)開腹手術(shù)相比,可以縮短術(shù)后康復(fù)期。1.4鏡技術(shù)的應(yīng)用腹腔鏡技術(shù)在其他動(dòng)物的應(yīng)用,開始主要是輔助進(jìn)行人工授精。早在20世紀(jì)80年代,Morcom等報(bào)道開始探討用腹腔鏡進(jìn)行豬的輸卵管人工授精技術(shù)。之后相繼有人研究報(bào)道通過腹腔鏡技術(shù)來(lái)進(jìn)行羊的人工授精,可以提高母羊的受孕率。FantinatiP等報(bào)道對(duì)超排卵的初次發(fā)情母豬進(jìn)行腹腔鏡人工授精時(shí),可以減少精子用量,同時(shí)又不影響受孕率,認(rèn)為此技術(shù)在生物工程領(lǐng)域有廣闊的應(yīng)用前景。隨著腹腔鏡技術(shù)的發(fā)展,人們也開始探索用腹腔鏡來(lái)進(jìn)行胚胎移植。BesenfelderU等用家兔進(jìn)行了胚胎移植試驗(yàn),發(fā)現(xiàn)腹腔鏡技術(shù)在使用過程中方便快捷,而且可明顯減少對(duì)動(dòng)物的手術(shù)應(yīng)激。有人相繼研究了用腹腔鏡來(lái)進(jìn)行家兔的胚胎收集及胚胎移植的新技術(shù)。通過腹腔鏡來(lái)取卵細(xì)胞,可為體外受精及轉(zhuǎn)基因羊等研究提供方便。2利用手術(shù)進(jìn)行胚胎的制備研究目前,國(guó)內(nèi)動(dòng)物腹腔鏡技術(shù)主要用于卵巢、卵泡、黃體及胚胎發(fā)育情況觀察,或在胚胎移植過程中簡(jiǎn)單地使用而已。迄今為止,尚未見關(guān)于腹腔鏡技術(shù)在獸醫(yī)外科和動(dòng)物臨床診療中應(yīng)用的系統(tǒng)研究報(bào)道。王光亞等在我國(guó)首次報(bào)道將腹腔鏡技術(shù)用于山羊胚胎移植研究。探討了山羊在站立保定下進(jìn)行腹腔鏡檢查的方法,用腹腔鏡進(jìn)行山羊供體超排效果觀察及胚胎回收,選擇最佳受體,提高了手術(shù)成功率。丁紅等通過對(duì)綿羊胚胎移植方法比較分析,腹腔鏡法獲得很好的移植效果,對(duì)受體羊的卵巢和黃體觸及很小,對(duì)宮管結(jié)合部的固定、牽引輕微,對(duì)胚胎發(fā)育和著床一般不會(huì)產(chǎn)生不良影響,不發(fā)生粘連;提高了胚胎存活率。馬保華等對(duì)腹腔鏡檢查山羊超排反應(yīng)的準(zhǔn)確性進(jìn)行了手術(shù)評(píng)價(jià),為腹腔鏡技術(shù)在山羊胚胎移植中的擴(kuò)大應(yīng)用奠定了基礎(chǔ)。徐志鵬等用腹腔鏡觀察羊卵巢卵泡發(fā)育狀況后篩選出供手術(shù)采卵供體。徐小波等用腹腔鏡來(lái)觀察山羊的卵巢卵泡發(fā)育情況;董君艷等報(bào)道了用腹腔鏡來(lái)觀察犬的卵巢黃體發(fā)育情況,以確定供體犬的沖卵時(shí)間。陳傳友等借助腹腔鏡,在體內(nèi)觀察山羊卵巢表面發(fā)育情況,用子宮專用鉗將子宮角拉出,注入胚胎后再將其送回原位。手術(shù)切口小,對(duì)羊的損傷小,有利于傷口的愈合和重復(fù)利用。腹腔鏡輸精可直接將精液輸入子宮角,提高母羊的受胎率。利用腹腔鏡手術(shù)觀察供體進(jìn)行取卵,可排除超排效果差的供體,減少手術(shù)麻煩和對(duì)這些供體不必要的手術(shù)損傷。腹腔鏡法可以降低供體山羊的粘連發(fā)生,保證了優(yōu)良供體