液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基對(duì)麗格海棠愈傷組織和試管苗擴(kuò)繁研究

液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基對(duì)麗格海棠愈傷組織和試管苗擴(kuò)繁研究

1試驗(yàn)的目本文在研究液體培養(yǎng)的基礎(chǔ)上，選擇了麗江復(fù)合培養(yǎng)的優(yōu)勢(shì)和劣勢(shì)，并對(duì)麗江復(fù)合培養(yǎng)進(jìn)行了經(jīng)濟(jì)有效的培養(yǎng)方法。2試驗(yàn)時(shí)間：1999年11月至2000年3月：寶縣生物技術(shù)中心實(shí)驗(yàn)室3試驗(yàn)材料和方法3.1培養(yǎng)基動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室內(nèi)原有的麗格海棠愈傷組織和試管苗各10組。培養(yǎng)基:PH=5.6~5.8蔗糖20g/L分化培養(yǎng)基:固體:MS+BA0.4mg/L+NAA0.1mg/L液體:MS+BA0.4mg/L+NAA0.1mg/L生根培養(yǎng)基:固體:MS液體:MS注:液體培養(yǎng)基不加瓊脂或其它凝聚素,其余成分與固體培養(yǎng)基完全相同。3.2分化和生根培養(yǎng)將20組試驗(yàn)材料分別接種到固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基上,每瓶接種生長(zhǎng)狀態(tài)相同的愈傷組織5塊(直徑5~6mm)或試管苗10株。在相同的溫度(22~24℃)、濕度、光照(800Lx,每天10小時(shí))等條件下進(jìn)行分化和生根培養(yǎng)。接種10天后開始觀察各組試驗(yàn)材料的生長(zhǎng)情況,完成一次分化和生根周期時(shí)調(diào)查全瓶苗體積和株高,記載周期天數(shù),出瓶移栽后調(diào)查其成活率及長(zhǎng)勢(shì)。4結(jié)果與分析4.1液體培養(yǎng)的穩(wěn)定性以全瓶苗體積和繼代周期作為比較指標(biāo),調(diào)查結(jié)果列于表1。由表1結(jié)果可以看出,進(jìn)行液體培養(yǎng)的麗格海棠愈傷組織完成一次分化周期時(shí)全瓶苗體積平均是固體培養(yǎng)的842.43%,表明麗格海棠愈傷組織進(jìn)行液體培養(yǎng)時(shí)分化不定芽數(shù)量達(dá)固體培養(yǎng)的8倍以上;再由繼代周期對(duì)比可以看出,麗格海棠愈傷組織采用液體培養(yǎng)比固體培養(yǎng)的繼代周期短10天,說(shuō)明液體培養(yǎng)分化的不定芽長(zhǎng)勢(shì)較快。由此可以確定,液體培養(yǎng)麗格海棠愈傷組織是一種較固體培養(yǎng)易分化、增殖迅速的培養(yǎng)方式。4.2液體培養(yǎng)的株高和莖粗以每瓶?jī)?nèi)最高一株記株高,以株高、莖粗和生根周期作為比較指標(biāo),調(diào)查結(jié)果列于表2。由表2結(jié)果可以看出,液體培養(yǎng)麗格海棠試管苗生根移栽時(shí)平均株高是固體培養(yǎng)的404.20%,莖粗是固體培養(yǎng)的193.3%,表明麗格海棠試管苗采用液體培養(yǎng)不但長(zhǎng)勢(shì)快,而且更粗壯。再由兩種培養(yǎng)方式下麗格海棠試管苗生根周期對(duì)比來(lái)看,采用液體培養(yǎng)的試管苗比采用固體培養(yǎng)的生根時(shí)間平均短10天,表明麗格海棠試管苗進(jìn)行液體培養(yǎng)可以早生根,早移栽。由此可以確定麗格海棠試管苗采用液體培養(yǎng)方式比固體培養(yǎng)既有利于培養(yǎng)壯苗,又可以加速培養(yǎng)周期,是一種更適宜的快繁培養(yǎng)方式。4.3液體培養(yǎng)的麗格海棠試劑苗移栽成活率分析試管苗移栽后長(zhǎng)出新根為成活標(biāo)志。調(diào)查結(jié)果列于表3。由表3結(jié)果可以看出,液體培養(yǎng)的麗格海棠試管苗移栽后成活率較固體培養(yǎng)的高10%,表明液體培養(yǎng)的麗格海棠試管苗移栽后更易成活。因此,大規(guī)模的擴(kuò)繁麗格海棠生產(chǎn)中,采用液體培養(yǎng)方式的試管苗從生產(chǎn)成本上比固體培養(yǎng)的要低10%左右。5結(jié)論5.1液體培養(yǎng)的麗格海棠、種子苗的生長(zhǎng)和移栽、栽植、栽苗的時(shí)間麗格海棠擴(kuò)繁研究中采用液體培養(yǎng)方式可以使愈傷組織分化出不定芽數(shù)量高于固體培養(yǎng)的8倍,而且不定芽長(zhǎng)勢(shì)快。另外,液體培養(yǎng)的麗格海棠試管苗長(zhǎng)勢(shì)既快于固體培養(yǎng)的試管苗,而且秧苗健壯,生根早,移栽后易成活。因此可以確定,在麗格海棠的擴(kuò)繁生產(chǎn)中,采用液體培養(yǎng)方式不但可行,而且可以達(dá)到比固體培養(yǎng)更理想的效果。5.2液體培養(yǎng)的時(shí)間液體培養(yǎng)的麗格海棠愈傷組織和試管苗繼代和生根周期都較固體培養(yǎng)的時(shí)間短,說(shuō)明麗格海棠采用液體培養(yǎng)時(shí)養(yǎng)分吸收利用快,因此,進(jìn)行液體培養(yǎng)時(shí),養(yǎng)分補(bǔ)充一定要及時(shí),否則會(huì)失去液體培養(yǎng)的優(yōu)勢(shì)。5.3液體培養(yǎng)的成本液體培養(yǎng)基與固體培養(yǎng)基相比,成本約低70%(瓊脂占培養(yǎng)基成本的70%),而且采