新癌胚抗原CEA方法學驗證報告

癌胚抗原CEA辦法學驗證辦法學驗證的內(nèi)容：對的度、精密度、線性范疇確實認、臨床可報告范疇的驗證、及參考區(qū)間確實認驗證人員：王愛林馬力張衛(wèi)李琳檢測系統(tǒng)信息項目：CEA儀器名稱全自動電化學發(fā)光免疫分析儀儀器型號Cobase601試劑及廠商：羅氏診療有限公司檢測辦法：雙抗體夾心法廠商提供的有關參數(shù)需驗證參數(shù)廠商參數(shù)驗證成果分析敏捷度0.20ng/ml沿用廠家闡明書線性范疇0.200-1000ng/ml3.35-966.8ng/ml臨床可報告范疇0.600-50000ng/ml1.68-1063.48ng/ml參考區(qū)間0-3.4ng/ml已驗證三、驗證過程1、對的度：目的：評價儀器測量成果與真值的一致程度。通過實驗室檢測數(shù)據(jù)的偏倚從而評價和驗證明驗室檢測成果的精確性評價辦法：參加衛(wèi)生部臨檢中心的室間質(zhì)評，本組參加室間質(zhì)評的項目一律用回報成果作為評價原則，近來一次參加衛(wèi)生部室間質(zhì)評對的度驗證明驗數(shù)據(jù)統(tǒng)計表項目名稱/單位癌胚抗原（CEA）/ng/ml檢測設備/編號RocheE601/103檢測試劑/批號Roche試劑/162341校準品/批號Roche校準品/159181質(zhì)控品/批號Roche質(zhì)控品(PCTM)/158274檢測辦法雙抗體夾心法近來一次參加的衛(wèi)生部室間質(zhì)評回報日期：-07-15樣本編號我室成果靶值PT允許范疇PT得分與靶值偏倚VIS允許范疇VIS得分113.63.72.8-4.6100%-2.7--1215.716.712.5-20.9100%-5.98--1315.816.712.5-20.9100%-5.39--142.72.92.2-3.6100%-6.90--155861.245.9-76.5100%-5.23--判斷原則：<1/2CV總誤差：12.5%對的度驗證成果：■滿足規(guī)定□不滿足規(guī)定結(jié)論：羅氏E601免疫分析儀所檢測項目CEA對的度在允許范疇內(nèi)統(tǒng)計者：李琳王愛林統(tǒng)計日期：審核者：審核日期：2精密度(Precision)批內(nèi)精密度目的：考察儀器檢測辦法的隨機誤差原理：在檢測系統(tǒng)處在優(yōu)良的條件下，持續(xù)測定20個成果，判斷這20個獨立成果間的一致程度辦法：選擇新鮮混合血清標本（病人高值、低值）20份，測量前先定標，再做質(zhì)控，質(zhì)控成果在控制范疇內(nèi)，持續(xù)重復測定20次，計算SD，CV，得到批內(nèi)精密度。標原來源：高、低值標本均為混合血清成果：本室CEA批內(nèi)精密度低值CV為：0.26%高值CV為：0.9%成果判斷方式：根據(jù)衛(wèi)生部臨床檢查中心室間質(zhì)量評價原則的總誤差（CV總誤差）為評判原則重復性精密度驗證明驗數(shù)據(jù)統(tǒng)計表項目名稱/單位癌胚抗原（CEA）/ng/ml檢測設備/編號RocheE601/103檢測試劑/批號Roche試劑/162341校準品/批號Roche校準品/159181質(zhì)控品/批號Roche質(zhì)控品(PCTM)/158274檢測辦法雙抗體夾心法重復性精密度數(shù)據(jù)低值樣本條碼號：混合樣本高值樣本條碼號：混合樣本測定次數(shù)測定成果測定次數(shù)測定成果測定次數(shù)測定成果測定次數(shù)測定成果14.52114.52151.181150.1524.50124.50253.111250.1134.51134.51351.071350.2144.52144.52452.751450.6454.50154.53548.061549.364.53164.52652.721651.2474.54174.51751.091750.1984.50184.50852.451850.8694.51194.51948.881950.09104.53204.521049.092050.89低濃度均值：1.51原則差：0.01變異系數(shù)：0.26％高濃度均值：50.7原則差：1.35變異系數(shù)：2.7％判斷原則：<1/4CV總誤差：6.25%重復性精密度驗證成果：■滿足規(guī)定□不滿足規(guī)定結(jié)論：本室所檢測項目CEA低值、高值重復性精密度均在允許范疇內(nèi)，可接受。檢測者：王愛林、李琳檢測日期：-07審核者：審核日期：日間精密度：目的：考察現(xiàn)在實驗室檢測辦法批間精密度原理：在檢測系統(tǒng)處在優(yōu)良的條件下，持續(xù)測定20天，獲得20個成果，判斷這20個獨立成果間的一致程度。辦法：新鮮混合血清（高值、低值）分裝20份冷凍，每天取兩份隨標本持續(xù)測定10天，測定前定標做質(zhì)控，計算CV，SD，得到日間精密度。成果：本室CEA日間精密度平均低值CV：3.6%平均高值CV：3.1%成果判斷方式：根據(jù)衛(wèi)生部臨床檢查中心室間質(zhì)量評價原則的總誤差（CV總誤差）為評判原則日間精密度驗證明驗數(shù)據(jù)統(tǒng)計表項目名稱/單位癌胚抗原（CEA）/免疫激素檢測設備/編號RocheE601/103檢測試劑/批號Roche試劑/162341校準品/批號Roche校準品/159181質(zhì)控品/批號Roche質(zhì)控品(PCTM)/158274檢測辦法雙抗體夾心發(fā)日間精密度數(shù)據(jù)低值樣本：混合樣本高值樣本：混合樣本測定天數(shù)測定成果測定天數(shù)測定成果測定天數(shù)測定成果測定天數(shù)測定成果11.60111.601149.411150.421.67121.672152.712151.431.65131.643152.913154.841.63141.604148.714156.951.59151.645147.615145.961.62161.596138.316146.871.60171.427149.217158.981.59181.678150.11815791.60191.669154.319155.3101.65201.7110153.520154.7低濃度均值：1.62原則差：0.058變異系數(shù)：3.6％高濃度均值：151.44原則差：4.75變異系數(shù)：3.1％判斷原則：<1/3CV總誤差：8.33%日間精密度驗證成果：■滿足規(guī)定□不滿足規(guī)定結(jié)論：本室所檢測項目CEA低值、高值日間精密度均在允許范疇內(nèi)。檢測者：王愛林、李琳檢測日期：審核者：審核日期：3線性范疇（Linearityrange,AMR）目的：在擬定某項目檢測上限的同時檢測其上下限與否呈線性關系，從而確保該濃度范疇檢測成果的精確性。標本規(guī)定：高值標本可使用病人混合血清。普通地樣本的高值推薦在AMR上限的90％，低值推薦在AMR下限的10％，但這不是絕對的規(guī)則。最佳有5個或以上的系列濃度的實驗樣品，數(shù)據(jù)點數(shù)不得低于4個，濃度范疇遍及整個預期可報告范疇。辦法：以50ul為一種體積單位，將高值標本與低值標本以3：1、2：2、1：3的體積比例混合，加上高低值標本共5個標本按照由低到高測定，統(tǒng)計成果。線性統(tǒng)計：以直接測定成果計算得出的對應濃度為X，以通過稀釋測定成果為Y，回歸辦法學統(tǒng)計，得到a、b及r值。成果判斷：若b在0.97-1.03范疇內(nèi)，r2>0.95，作a與0有無明顯性差別的t檢查，如果P>0.05，則可直接判斷線性范疇在實驗已涉及濃度。若b不在0.97-1.03范疇內(nèi)，a較大，舍去高值或低值組數(shù)據(jù)，另做回歸統(tǒng)計，直至縮小的分析范疇其回歸方程的a和b的判斷符合規(guī)定，則該范疇為線性范疇。線性范疇驗證明驗數(shù)據(jù)統(tǒng)計表項目名稱/單位癌胚抗原（CEA）/ng/ml檢測設備/編號RocheE601/103檢測試劑/批號Roche試劑/162341校準品/批號Roche校準品/159181質(zhì)控品/批號Roche質(zhì)控品(PCTM)/158274檢測辦法雙抗體夾心法廠家聲明線性范疇：0.200-1000ng/ml，線性方程：Y=bX+a，R2＞0.95樣本編號配制比例測定值1測定值2測定均值預期值差值143.333.363.353.35023L240.60240.80240.70244.213.5132L486.20486.60486.40485.08-1.324L+3H736.7736.6737.7726.04-11.6654H965.80965.70966.80966.80平均斜率b1.0063采用線性回歸，以預期值為X，以按比例稀釋的實測均值為Y，得線性方程：Y=1.0063X-1.1618線性回歸散點圖：計算每一稀釋度測定均值和預期值的差值。以預期值為橫軸，差值為縱軸，制作線性差別圖?；貧w方程：y=1.0063x-1.1618■b在0.97-1.03范疇內(nèi)□b不在0.97-1.03范疇內(nèi)a的P值：0.8204■a與0無明顯性差別□a與0有明顯性差別R2：0.9998■R2≥0.95□R2＜0.95直線回歸方程與否可接受■可接受□不可接受線性范疇延伸：在直線回歸方程可接受基礎上，如果驗證的線性范疇不大于廠家聲明的線性范疇，將驗證的上限擴展為（上限+上限*10%），驗證下限擴展為（下限-下限*50%）；若驗證上限超出廠家聲明上限，以廠家線性范疇為準，若沒有超出廠家聲明上限，以自行驗證為準；擴展后的線性范疇：1.68-1063.48ng/ml結(jié)論：在標本狀態(tài)良好無干擾的狀況下，已驗證CEA測定成果在3.35-966.8ng/ml范疇內(nèi)呈線性，進行線性范疇延伸后，可使用的線性范疇為1.68-1063.48ng/ml檢測者：李琳王愛林檢測日期：審核者：審核日期：4臨床可報告范疇（Clinicalreportablerange,CRR）目的：分析各稀釋濃度的線性關系，擬定最高稀釋倍數(shù)，從而確保高值樣本報告的精確性。原理：未通過任何解決的病人檢查標本，通過檢測系統(tǒng)檢測得到的可靠成果范疇。辦法;本實驗室制訂的CEA的臨床可報告范疇結(jié)合臨床的需求，其檢出限范疇已能滿足臨床，因此將檢出限范疇作為臨床可報告范疇。1結(jié)論：低于低檢出限的值報告<0.200ng/ml超出高檢出限的值報告>1000ng/ml。(見臨床咨詢統(tǒng)計)5分析敏捷度（AnalyticalSensitivity）:直接引用羅氏試劑闡明書上提供的分析敏捷度：0.600U/ml6干擾物質(zhì)干擾物質(zhì)對本項目的影響大小沿用廠商參數(shù)，具體內(nèi)容見本項目作業(yè)指導書。7參考區(qū)間（Referenceintervals）:目的：選擇20份體檢合格的健康人標本，在檢測系統(tǒng)上進行測定，對成果進行統(tǒng)計并與儀器闡明書提供的參考區(qū)間進行比較。原理：收集20例正常健康人血清標本及時檢測，規(guī)定其年紀，性別等均勻分布，對參考范疇進行驗證，只允許10%的數(shù)據(jù)超出所驗證的參考范疇，否則需建立參考范疇。驗證范疇：0-3.4ng/ml辦法：CEA標本的規(guī)定體檢合格健康的篩選者（見調(diào)查表）脂血、溶血均勿用成果：統(tǒng)計方式R=測定的成果在參考范疇例數(shù)≥90%即合格總測定例數(shù)生物參考區(qū)間數(shù)據(jù)及驗證統(tǒng)計表JDYY/LAB-JL-TY-28-03項目名稱/單位癌胚抗原（CEA）/ng/ml檢測設備/編號RocheE601/103檢測試劑/批號Roche試劑/159299校準品/批號Roche校準品/161204質(zhì)控品/批號Roche質(zhì)控品(PCTM)/158274檢測辦法雙抗體夾心法試劑闡明書提供參考范疇：0-3.4ng/ml各編號樣本測定狀況序號條形碼號性別年紀(歲)測定成果1女371.022女501.703女301.204女520.985女511.496女463.297男501.718男282.589女368.1110男271.5211男254.7912女581.8313男302.1314女451.0415男612.1416男313.1417男241.7118男471.3119男463.0320男553.20成果判斷：R=測定的成果在參考范疇例數(shù)≥90%即合格總測定例數(shù)R值：90%■滿足規(guī)定□不滿足規(guī)定結(jié)論：廠家提供的CEA參考范疇0-3.4ng/ml本實驗室所檢測的20個標本其檢測成果18個標本均在