皮革產(chǎn)品甲醛含量測定方法（征求意見稿）

1皮革產(chǎn)品甲醛含量測定方法本文件規(guī)定了高效液相色譜法（HPLC）測定皮革、毛皮中游離和水解的甲醛含量的方法。本文件適用于各種皮革、毛皮及其制品中甲醛含量的測定。2規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法(GB/T6682—2008,ISO3696：1987,MOD)GB/T19941.2皮革和毛皮甲醛含量的測定第2部分：分光光度法QB/T1267-2012毛皮化學(xué)、物理和機械、色牢度試驗取樣部位QB/T1272-2012毛皮化學(xué)試驗樣品的準(zhǔn)備QB/T1273-2012毛皮化學(xué)試驗揮發(fā)物的測定QB/T2706皮革化學(xué)、物理、機械和色牢度試驗取樣部位QB/T2716-2018皮革化學(xué)試驗樣品的準(zhǔn)備QB/T2717-2018皮革化學(xué)試驗揮發(fā)物的測定3原理在規(guī)定條件下用萃取溶液萃取試樣，萃取液同2,4-二硝基苯肼混合，甲醛與其反應(yīng)生成甲醛腙，通過反相高效液相色譜法在規(guī)定波長處定量測定。4試劑和材料4.1水，試驗用水應(yīng)符合GB/T6682中三級水的規(guī)定。4.2萃取溶液，0.1%十二烷基磺酸鈉溶液或十二烷基硫酸鈉溶液(萃取溶液)，1g十二烷基磺酸鈉或十二烷基硫酸鈉溶于1000mL蒸餾水中。4.32,4-二硝基苯肼(DNPH)溶液,2,4-二硝基苯肼0.3g溶于100mL濃磷酸(85%)中。4.4乙腈，色譜純。5儀器和設(shè)備5.1容量瓶，10mL、500mL和1000mL。5.2錐形瓶，100mL和250mL。5.3玻璃纖維過濾器,GF8（或玻璃過濾器G3,直徑70mm~100mm）。25.4恒溫水浴振蕩器，振蕩頻率為（50±10）次/min。5.5溫度計，范圍0℃~100℃,分度值0.1℃。5.6高效液相色譜系統(tǒng)（HPLC）,配有紫外檢測器（UV）,波長（355±5）nm。5.7聚酰胺過濾膜,0.45μm。5.8分析天平，精度為0.1mg。6試驗步驟6.1取樣及試樣的制備6.1.1取樣皮革按照QB/T2706規(guī)定取樣。毛皮按照QB/T1267-2012規(guī)定取樣。若試樣無法按照QB/T2706或QB/T1267-2012的要求取樣（如鞋面、皮革服裝上的皮革），應(yīng)在報告中注明取樣過程。6.1.2試樣的制備皮革試樣的制備按照QB/T2716規(guī)定進行。毛皮試樣的制備按照QB/T1272-2012規(guī)定進行，制樣過程中應(yīng)盡量保持毛被完好，避免損傷毛被。6.2萃取稱取試樣（2.0士0l）g,精確至0.01g,放入100mL的錐形瓶中，加入50mL已預(yù)熱到40℃的萃取溶液（4.2）,蓋緊塞子，在（40±1）℃的水浴中輕輕振蕩（60±2）min。溫?zé)岬妮腿∫毫⒓赐ㄟ^玻璃纖維過濾器真空（真空度不低于5kPa）過濾至另一錐形瓶中，密閉后將錐形瓶中的濾液冷卻至室溫（18°C~26℃)。6.3與2,4-二硝基苯肼反應(yīng)將4.0mL乙腈（4.4）、5mL過濾后的萃取液（6.2）和0.5mL2,4-二硝基苯肼（DNPH）溶液（4.3）移入10mL的容量瓶中，用蒸餾水稀釋到刻度，充分搖勻后放置60min~180min，經(jīng)濾膜（5.7）過濾后，進行色譜測定。注：當(dāng)甲醛含量較高時100mg/kg）,可減少試樣的稱取量或減少濾液的移取量。當(dāng)移取的濾液不足5mL時，用6.4色譜（HPLC）條件流速1.0mL/min流動相乙腈：水=60：40分離柱C18反相柱，帶預(yù)柱（1cm，RP18）紫外（UV）檢測波長(355±5)nm進樣體積20μL6.5標(biāo)準(zhǔn)工作曲線的繪制6.5.1用甲醛儲備液繪制3按附錄C配制甲醛標(biāo)準(zhǔn)儲備液。將2mL甲醛標(biāo)準(zhǔn)儲備液，移入裝有100mL蒸餾水的500mL容量瓶中，振蕩搖勻后用蒸餾水稀釋至刻度（甲醛質(zhì)量濃度接近4μg/mL）,該溶液即為甲醛標(biāo)準(zhǔn)溶液。也可直接使用市售甲醛標(biāo)準(zhǔn)溶液或2，4-二硝基苯肼-甲醛衍生物標(biāo)準(zhǔn)溶液配制甲醛標(biāo)準(zhǔn)溶液。在6個10mL容量瓶中，分別加入4mL乙腈（4.4）,然后分別加入0.25mL、1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL的甲醛標(biāo)準(zhǔn)溶液，該系列標(biāo)準(zhǔn)工作溶液中的甲醛質(zhì)量濃度范圍為0.1μg/mL~2.0μg/mL（在給出的條件下，相當(dāng)于樣品中甲醛含量范圍5mg/kg~100mg/kg立即加入0.5mL2,4-二硝基苯肼（DNPH）溶液（4.3）,用蒸餾水稀釋至刻度，搖勻后放置60min~180min,經(jīng)濾膜（5.7）過濾后，進行色譜分析。以峰面積為Y軸，以甲醛質(zhì)量濃度(μg/10mL）為X軸繪制甲醛標(biāo)準(zhǔn)工作曲線。6.5.2用2,4-二硝基苯肼-甲醛衍生物繪制在6個10mL的容量瓶中，分別加入4mL乙腈（4.4）,然后分別加入適量的2,4-二硝基苯肼-甲醛衍生物，得到分別含有1.0μg、40μg、80μg、12.0μg.l6.0μg和20.0μg甲醛的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，用蒸餾水稀釋至刻度，搖勻，放置60min~180min,經(jīng)濾膜（5.7）過濾后，進行色譜分析。以峰面積為Y軸，以甲醛質(zhì)量濃度（Mg/10mL）為X軸繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。6.6皮革和毛皮樣品中甲醛含量的計算按式（1）計算樣品中甲醛的含量：式中：WF---樣品中的甲醛含量，單位為毫克每千克（mg/kg）ms---從標(biāo)準(zhǔn)曲線中查得的10ml顯色液（6.3）中的甲醛含量，單位為微克(μgF---稀釋倍數(shù)；m---試樣質(zhì)量，單位為克（g）6.7回收率的測定需要時，按如下步驟測試加標(biāo)回收率。將2.5mL過濾后的萃取液（6.2）移入裝有4.0mL乙腈（4.4）的10mL容量瓶中，然后向容量瓶中加入適量的甲醛標(biāo)準(zhǔn)溶液，使加入的甲醛標(biāo)準(zhǔn)溶液中的甲醛含量與樣品中的甲醛含量幾乎相等。按照6.3的規(guī)定進行色譜分析，添加了甲醛標(biāo)準(zhǔn)溶液的樣液中的甲醛質(zhì)量濃度記作ρs2,在測試報告中記錄試驗的結(jié)果。按式（2）計算回收率：s2-0.5ρs)×100/ρFA1 式中：s2---添加了甲醛標(biāo)準(zhǔn)溶液的樣液中甲醛的質(zhì)量濃度,單位為微克每10毫升(μg/10mLs---未添加甲醛標(biāo)準(zhǔn)溶液的樣液中甲醛的質(zhì)量濃度，單位為微克每10毫升(μg/10mL)；FA1---添加的標(biāo)準(zhǔn)溶液中甲醛的質(zhì)量濃度，單位為微克每10毫升(μg/10mL)；RR---回收率精確至0.1%。7結(jié)果表示試樣中游離甲醛含量以mg/kg表示，精確至0.1mg/kg。4如果測試結(jié)果以絕干狀態(tài)為基準(zhǔn)，則測試結(jié)果應(yīng)乘以換算系數(shù)100/(100-w),w為揮發(fā)物的含量(%)，根據(jù)QB/T1273-2012或QB/T2717測得。本部分的檢出限為5.0mg/kg。本方法的測定結(jié)果與GB/T19941.2的測定結(jié)果應(yīng)具有類似的趨勢，但結(jié)果并不絕對相同，當(dāng)發(fā)生爭議時，以本方法的測試結(jié)果為準(zhǔn)。8試驗報告試驗報告應(yīng)包含以下內(nèi)容：a)本部分編號；b)樣品名稱、編號、類型、廠家(或商標(biāo))；c)甲醛含量的測試結(jié)果，單位為毫克每千克(mg/kg)；d)與本部分規(guī)定的方法的任何偏離；e)如果測試結(jié)果基于絕干狀態(tài)，應(yīng)在報告中注明。5（規(guī)范性附錄）標(biāo)準(zhǔn)儲備甲醛含量的測定A.1試劑和材料A.1.1甲醛溶液，質(zhì)量分數(shù)約37%。A.1.2碘溶液,0.05mol/L,即12.68g/L。A.1.3氫氧化鈉溶液,2.0mol/L。A.1.4硫酸溶液,2.0mol/L。A.1.5硫代硫酸鈉溶液,0.1mol/L。A.1.6淀粉溶液，1%即1g淀粉溶解于100mL蒸餾水中。A.2儀器和設(shè)備A.2.1容量瓶，1000mL。A.2.2錐形瓶，250mL。A.2.3移液管，5mL，10mL。A.3測定方法A.3.1甲醛標(biāo)準(zhǔn)儲備液的制備將5.0mL甲醛溶液(C.1.1)移入裝有約100mL蒸餾水的1000mL容量瓶(C.2.1)中，用蒸餾水稀釋至刻度，該溶液為甲醛標(biāo)準(zhǔn)儲備液。A.3.2測定移取10mL甲醛標(biāo)準(zhǔn)儲備液到250mL錐形瓶(C.2.2)中，加入50mL碘溶液(C.1.2),混合均勻后加入氫氧化鈉溶液(C.1.3),直到變成黃色為止。在18°C~26°C的環(huán)境中放置(15±1)min,然后加入15mL硫酸溶液(C.1.4),振蕩。隨后加入2mL淀粉溶液(C.1.6),過量的碘用硫代硫酸鈉溶液(C.1.5)滴定到顏色發(fā)生變化。平行測定三次。用同樣的方式最少滴定兩次空白溶液。A.3.3結(jié)果計算按式(