長(zhǎng)白山野生繡球菌菌絲體組織分離及營(yíng)養(yǎng)特性研究課件

延邊大學(xué)本科畢業(yè)論文長(zhǎng)白山野生繡球菌菌絲體組織分離及營(yíng)養(yǎng)特性研究The

Mycelium

Tissue

Isolation

and

The

Study

onNutritional

Characteristics

of

Wide

Sparassia

crispaof

Changbai

Mountain主要內(nèi)容前

言材料與方法12結(jié)果與分析結(jié)

論342前

言3繡球菌[Sparassiacrispa（Wulf.）Fr.]又名繡球蕈、對(duì)花菌、干巴菌、椰菜菌、蜂窩菌、白繡球花、繡球蘑。分類學(xué)上隸屬于擔(dān)子菌亞門、層菌綱、非

褶菌目、繡球菌科、繡球菌屬（Sparassis）。4繡球菌子實(shí)體肉質(zhì)潔白細(xì)嫩，有茴香氣味，鮮美異常，營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高，含有17種氨基酸，基本包含所有的必需氨基酸。5藥用價(jià)值增加白血球，提高人體免疫力，對(duì)癌細(xì)胞具有直接殺傷作用繡球菌素具抗真菌活性治療高血壓、糖尿病、肝病等多種疾病6本試驗(yàn)對(duì)采自長(zhǎng)白山林區(qū)的野生繡球菌進(jìn)行組織分離，并研究其菌絲體生長(zhǎng)的營(yíng)養(yǎng)條件，篩選出適宜長(zhǎng)白山林區(qū)野生繡球菌菌絲生長(zhǎng)的最佳營(yíng)養(yǎng)條件，為開發(fā)、利用這一野生資源提供理論依據(jù)。7材

料8本研究所用野生繡球菌標(biāo)本由延邊大學(xué)農(nóng)學(xué)院食用真菌實(shí)驗(yàn)室課題組成員于2010年7月采自長(zhǎng)白山林區(qū)，由吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)圖力古爾教授鑒定。將標(biāo)本帶回

室內(nèi)自然陰干，干燥后即可用于子實(shí)體組織分離菌種，純化培養(yǎng)，獲得試驗(yàn)所用菌株。試驗(yàn)材料9供試培養(yǎng)基10PDA培養(yǎng)基：馬鈴薯200

g，葡萄20

g，瓊脂20

g，加水至1000ml，pH自然。基礎(chǔ)培養(yǎng)基：葡萄糖20

g，蛋白胨2

g，MgSO4

0.5g，瓊脂20

g，加水至1000ml，pH自然。試驗(yàn)方法111.組織分離材料及用具野生繡球菌型大、顏色正、無(wú)霉、無(wú)蟲害的子實(shí)體，無(wú)菌超凈工作臺(tái)，斜面培養(yǎng)基（10管），剪刀，鑷子，酒精燈組織分離組織分離過程在超凈工作臺(tái)內(nèi)，整個(gè)過程要遵循無(wú)菌操作。純化培養(yǎng)12剪刀剪取部分繡球菌子實(shí)體75%酒精棉擦拭2-3遍子實(shí)體約1min無(wú)菌剪刀將四周邊緣剪掉酒精棉包住剪取的選取遠(yuǎn)離基部的組織長(zhǎng)≈0.5㎝寬≈0.2㎝無(wú)菌鑷子夾取酒精燈

外焰上方

2-3次接種于斜面培養(yǎng)基中下部25℃恒溫培養(yǎng)箱暗培養(yǎng)12天左右新生長(zhǎng)出的菌絲接種塊接種于平板培養(yǎng)基上25℃培養(yǎng)室純化培養(yǎng)所得菌絲接種于斜面培養(yǎng)基上25℃恒溫培養(yǎng)箱暗培養(yǎng)菌絲長(zhǎng)滿試管后4℃冰箱中保存132.不同碳源對(duì)繡球菌菌絲體培養(yǎng)特性的影響14碳源處理：分別設(shè)置果糖、淀粉、乳糖、蔗糖、甘露醇、麥芽糖包括葡萄糖各20g為碳源處理，以不加任何碳源為對(duì)照。重復(fù)次數(shù)：5次測(cè)定項(xiàng)目：菌絲長(zhǎng)速，菌絲長(zhǎng)勢(shì)，菌落色澤及菌落邊緣等特征。數(shù)據(jù)分析：采用

Excel

2003

進(jìn)行整理，用

SPSS

11.Duncan檢驗(yàn)進(jìn)行差異顯著性分析。氮源處理：以基礎(chǔ)培養(yǎng)基為標(biāo)準(zhǔn)，分別設(shè)置酵母膏、麩皮、黃豆粉、KNO3、(NH4)2SO4、NH4Cl包括蛋白胨各2g為不同氮源處理，以不加任何氮源為對(duì)照。重復(fù)次數(shù)、測(cè)定項(xiàng)目、數(shù)據(jù)分析同碳源處理。3.不同氮源對(duì)繡球菌菌絲體培養(yǎng)特性的影響15無(wú)機(jī)鹽處理：分別設(shè)置MnSO4、CaSO4、ZnSO4、CuSO4

包括MgSO4

各0.5g為不同無(wú)機(jī)鹽處理，以不加任何無(wú)機(jī)鹽為對(duì)照。重復(fù)次數(shù)、測(cè)定項(xiàng)目、數(shù)據(jù)分析同碳源處理。4.不同無(wú)機(jī)鹽對(duì)繡球菌菌絲體培養(yǎng)特性的影響16結(jié)果與分析17圖2

分離純化后的繡球菌菌株181.野生繡球菌組織分離2.不同碳源對(duì)繡球菌菌絲體培養(yǎng)特性的影響注：“+”表示菌絲稀疏、纖弱，“++”表示菌絲密、長(zhǎng)勢(shì)壯，“+++”表示菌絲濃密、粗壯。小寫文字母表示P<0.05水平上的差異顯著性。數(shù)據(jù)為5個(gè)重復(fù)的平均值±SE。表1不同碳源對(duì)繡球菌菌絲體生長(zhǎng)的影響Table1

The

effects

of

different

carbon

sources

on

mycelium

growth

of

Sparassia

crispa19圖3不同碳源對(duì)繡球菌菌絲體生長(zhǎng)影響Fig.3

The

effects

of

different

carbon

sources

on

mycelium

growth

of

Sparassia

crispa203.不同氮源對(duì)繡球菌菌絲體培養(yǎng)特性的影響表2不同氮源對(duì)繡球菌菌絲體生長(zhǎng)的影響Table2

The

effects

of

different

nitrogen

sources

on

mycelium

growth

of

Sparassia

crispa注：“+”表示菌絲稀疏、纖弱，“++”表示菌絲密、長(zhǎng)勢(shì)壯，“+++”表示菌絲濃密、粗壯。小寫英文字母表示P<0.05水平上的差異顯著性。數(shù)據(jù)為5個(gè)重復(fù)的平均值±SE。21圖4不同氮源對(duì)繡球菌菌絲體生長(zhǎng)的影響Fig.4

The

effects

of

different

nitrogen

sources

on

mycelium

growth

of

Sparassia

crispa22表3不同無(wú)機(jī)鹽對(duì)繡球菌菌絲體生長(zhǎng)的影響Table3

The

effects

of

different

Inorganic

on

the

growth

of

mycelium

of

Sparassiacrispa4.不同無(wú)機(jī)鹽對(duì)繡球菌菌絲體培養(yǎng)特性的影響注：“+”表示菌絲稀疏、纖弱，“++”表示菌絲密、長(zhǎng)勢(shì)壯，“+++”表示菌絲濃密、粗壯。小寫英文字母表示P<0.05水平上的差異顯著性。數(shù)據(jù)為5個(gè)重復(fù)的平均值±SE。23圖5不同無(wú)機(jī)鹽對(duì)繡球菌菌絲體生長(zhǎng)的影響Fig.5

The

effects

of

different

Inorganic

on

the

growth

of

mycelium

of

Sparassiacrispa24結(jié)論2