胃癌組織中兩種轉(zhuǎn)錄因子表達情況的比較研究

胃癌組織中兩種轉(zhuǎn)錄因子表達情況的比較研究

癌癥的發(fā)生和發(fā)展是復(fù)雜的生物學(xué)過程，有許多因素。目前胃癌的病因得到廣泛認同的是環(huán)境因素和遺傳因素。對于胃癌的院前檢查主要通過血液、糞便以及X線。由于早期胃癌沒有特異癥狀,因此,入院的患者多是已經(jīng)出現(xiàn)了明顯的臨床癥狀,而此時胃癌往往已經(jīng)進入到進展期,預(yù)后情況不好。轉(zhuǎn)錄因子Sp1和stat-3是近些年發(fā)現(xiàn)的兩種轉(zhuǎn)錄因子,筆者探討兩者與各項臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系,以及兩者表達的相關(guān)性,明確兩種轉(zhuǎn)錄因子與胃癌發(fā)生發(fā)展的關(guān)系,期以能為胃癌的治療提供一定的理論依據(jù)。1材料和方法1.1病例選擇選擇標準收集2010年1月—2010年6月期間在包頭市中心醫(yī)院及包頭市腫瘤醫(yī)院手術(shù)切除的標本共39例,分別于癌灶、癌周不典型增生組織以及正常組織取材切片。入選標準:⑴所有病例手術(shù)之前均未行放療或者化療;⑵臨床資料完整;⑶無心臟、肝臟、腦、腎臟等重要器官疾病。切片完成后經(jīng)2名病理醫(yī)師診斷,符合本實驗要求。1.2操作步驟和操作步驟將存檔標本制備4μm切片后,采用免疫組織化學(xué)SP法,具體操作步驟按照說明書進行。分別檢測Sp1和stat-3在胃癌組織、不典型增生組織和正常胃黏膜組織中的表達情況,實驗用多克隆抗體購自上海長島生物技術(shù)有限公司。1.3細胞看色度10個陽性者為細胞內(nèi)出現(xiàn)黃染,在400倍視野范圍內(nèi)隨機選擇視野,計數(shù)100個細胞:⑴著色細胞低于10個為0級;11~25個為1級;26~50為2級;51~75為3級;≥76個為4級。⑵根據(jù)細胞的顏色深度分4個等級:無染色為0級;淺褐色為1級;褐色為2級;深褐色為3級?？偟燃墳榘俜致实燃壟c染色強度等級之積。最后結(jié)果判定:乘積小≤3為陰性,3~6為弱陽性,>6為強陽性。1.4數(shù)據(jù)分析方法采用統(tǒng)計學(xué)軟件SPSS13.0,Sp1與stat-3在不同組織表達的差異性以及與臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系采用χ2檢驗或確切概率法,為計數(shù)資料,兩中轉(zhuǎn)錄因子的相關(guān)性分析采用Spearman相關(guān)性分析。取P<0.05為有統(tǒng)計學(xué)意義。2結(jié)果2.1正常胃黏膜和不典型原生組織中的表達率Sp1陽性細胞為棕黃色或棕褐色顆粒,主要定位于細胞核,在39例胃癌癌組織中的陽性表達率為71.79%(28/39),在正常胃黏膜的表達率為23.08%(9/39),在不典型增生組織中的表達率為38.46%(15/39);癌組織與不典型增生組織、正常組織與癌組織的陽性表達率間差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),不典型增生組織與正常組織的陽性表達率間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)(表1)。2.2正常黏膜及不典型原生組織的表達率stat-3陽性細胞為棕黃色或棕褐色顆粒,主要定位于細胞漿,在39例胃癌癌組織中的陽性表達率為66.67%(26/39),在正常黏膜的表達率為17.95%(7/39),不典型增生組織的表達率為35.90%(14/39);癌組織與不典型增生組織、正常組織與癌組織的陽性表達率間差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),不典型增生組織與正常組織的陽性表達率間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)(表1)。2.3臨床病例參數(shù)胃癌組織中Sp1的陽性表達情況與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及穿破漿膜等臨床病例參數(shù)有關(guān)(P<0.05),而與年齡、性別、部位、分化程度、大體類型等臨床病例參數(shù)無關(guān)(P>0.05)(表2)。2.4臨床病理參數(shù)與臨床病例參數(shù)的關(guān)系胃癌組織中stat-3的陽性情況與分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、大體分期以及穿破漿膜等臨床病理參數(shù)密切相關(guān),而與年齡、性別、部位等臨床病例參數(shù)無關(guān)(P>0.05)(表3)。2.5小星標組中的sp1基因和stat-3基因的關(guān)系胃癌組織中轉(zhuǎn)錄因子Sp1與stat-3的表達水平之間呈正相關(guān)(r=0.403,P<0.05)(表4)。3轉(zhuǎn)錄因子sp1和stat-3的相關(guān)性轉(zhuǎn)錄因子Sp1是第一個被發(fā)現(xiàn)的轉(zhuǎn)錄因子,屬于Sp1/Kruppel家族,參與多種多樣的細胞功能(增殖、凋亡、分化),主要借助GC/GT盒發(fā)揮對基因轉(zhuǎn)錄的作用。目前在多種惡性腫瘤(例如食管癌、大腸癌以及胰腺癌)中都已經(jīng)發(fā)現(xiàn)有高表達的Sp1。其次,與Sp1密切相關(guān)的腫瘤發(fā)生信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路有很多,其中經(jīng)典的一條為TGF-β(轉(zhuǎn)化生長因子-β)通路,另外,Spl與TGF-β之間有一定的反饋關(guān)系,Sp1可以直接調(diào)控TGF-β及其受體的表達水平,后者也可以增強Sp1的親和力。Sp1與腫瘤的關(guān)系密切,VEGF與腫瘤發(fā)生發(fā)展密切相關(guān),其中就包含著Sp1的結(jié)合位點,與此類似的還有Notch/DLL4通路;另外,有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn),Sp1的表達率在癌組織明顯高于正常組織,與浸潤情況和淋巴轉(zhuǎn)移等臨床病理參數(shù)相關(guān)。本研究發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)錄Sp1在正常組織中成弱陽性或無表達,而在胃癌組織中多呈現(xiàn)陽性表達,兩種組織中表達具有明顯差異。此外,Sp1的高表達與淋巴轉(zhuǎn)移及漿膜穿破密切相關(guān),因此推斷,轉(zhuǎn)錄因子Sp1在胃癌發(fā)生發(fā)展以及浸潤轉(zhuǎn)移等各個方面都發(fā)揮重要作用,針對胃癌的靶向治療以及早期的監(jiān)測,甚至對于晚期的干預(yù),Sp1都是一個非常有價值的靶點及檢測指標。stat-3是家族的代表因子,目前多數(shù)學(xué)者認為它是癌基因,其家族成員廣泛參與各種組織腫瘤的發(fā)生發(fā)展,其中,實體腫瘤以及血液系統(tǒng)疾病與stat-3的關(guān)系尤為密切。另外,stat-3在腫瘤血管生成生長過程中也發(fā)揮著重要作用。本研究發(fā)現(xiàn),stat-3由正常組織至胃癌組織,其表達情況呈遞增趨勢,且胃癌組織中stat-3的陽性表達情況與分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、大體分期以及出漿膜情況相關(guān),而與年齡、性別、部位等病理參數(shù)之間關(guān)系不大(P>0.05)。因此推斷,stat-3的可以作為預(yù)測胃癌患者預(yù)后的指標,利用特異性藥物來抑制胃癌中stat-3在的異常高表達,可能有助于阻止胃癌的快速發(fā)展,從而改善胃癌患者的預(yù)后情況。本研究發(fā)現(xiàn)在胃癌組織中,Sp1和stat-3的表達水平之間具有一定的相關(guān)性(r=0.403,P<0.05),結(jié)合近年來提出的多基因