紫外譜線組法檢測牡蠣油的研究

紫外譜線組法檢測牡蠣油的研究

椰子油是一種珍貴的刺激性中藥。根據(jù)《中國藥典》（2005年版）的注冊，這是中國青蛙科的拉納特mp拉納雇員，該雇員在收獲后干燥。具有補(bǔ)腎益精、養(yǎng)陰潤肺的功效。臨床多用于陰虛體弱,神疲乏力,心悸失眠,盜汗不止,癆嗽咳血。國內(nèi)蛤蟆油的使用較為混亂,由于正品蛤蟆油價(jià)格較貴,市場上常有以偽品蛤蟆油充當(dāng)正品蛤蟆油銷售使用的情況,其外觀性狀較為相似,尤其是蛤蟆油常粉成細(xì)粉后調(diào)劑,偽品蛤蟆油更易于正品蛤蟆油混淆,誤用、混用現(xiàn)象時(shí)有發(fā)生。為了尋找快速、簡便、準(zhǔn)確地鑒別正品蛤蟆油與偽品蛤蟆油,特別是鑒別粉末的方法,我們對正品蛤蟆油和偽品蛤蟆油的石油醚、三氯甲烷、醋酸乙酯、正丁醇和95%乙醇提取液分別進(jìn)行了紫外光譜法鑒別研究。本文用紫外譜線組法對其進(jìn)行鑒別,此方法鑒別中藥材具有特征性強(qiáng)、取樣量小、簡便、快速、準(zhǔn)確等特點(diǎn)且方法可靠,簡單,重現(xiàn)性強(qiáng),可供鑒別參考?，F(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。1藥材物理性鑒定安捷倫UV8453型分光光度計(jì),石油醚、三氯甲烷、醋酸乙酯、正丁醇和95%乙醇均為分析純,藥材樣品為本院生藥教研室姜大成教授鑒定,見表1～2。2階導(dǎo)數(shù)紫外光譜特征吸收峰位的特征分別取上述干燥藥材碎成粗粉,精密稱定約0.2g,分別加入石油醚10ml,超聲波提取20min,濾過,定容至10ml容量瓶中,配制成濃度相當(dāng)于生藥濃度約為20mg/ml的供試溶液,石油醚為空白液;按分光光度法測定各樣品的紫外吸收及一階導(dǎo)數(shù)紫外吸收,結(jié)果見圖1～2及表3～4。其余步驟同上,分別加入三氯甲烷、醋酸乙酯、正丁醇、95%乙醇超聲提取20min,配制成供試溶液,相應(yīng)的溶劑作為空白液,結(jié)果見表3～4及圖3～10。結(jié)合圖1和表3～4可以總結(jié)出:正品蛤蟆油的石油醚提取液紫外圖譜的峰形較緩,220～250nm之間的峰形類似馬背狀。蛤蟆油正品特征吸收峰值為:(213±2)nm為最強(qiáng)的吸收峰,在(227±2)nm處有一特征吸收峰和在(268±1)nm處有一很弱的吸收峰而且這兩個(gè)吸收峰有時(shí)出現(xiàn)有時(shí)被掩蓋。其一階導(dǎo)數(shù)紫外光譜在(211±1)nm處有最強(qiáng)吸收,在(215±1)nm處有最強(qiáng)吸收,在2151nm處有最弱吸收。結(jié)合圖2和表3～4可以明顯看出樣品中偽品S,T,V與正品A有明顯的差別。從峰形和吸收峰位置可判斷出S,T,V和A有明顯的差別,一階導(dǎo)數(shù)紫外光譜中偽品S與正品在峰位上有明顯的區(qū)別,而且偽品V在268nm處的吸收是較強(qiáng)的吸收也明顯的區(qū)別于正品。結(jié)合圖3和表3～4可以總結(jié)出:正品蛤蟆油三氯甲烷提取液的峰形較緩。蛤蟆油正品三氯甲烷提取液的特征吸收峰值為:(243±1)nm處有最強(qiáng)吸收峰,(275±2)nm處有特征吸收峰,且在200nm附近有明顯的末端吸收。其一階導(dǎo)數(shù)紫外光譜在(239±1)nm處有最強(qiáng)吸收,在(270±1)nm處有次強(qiáng)吸收,在(251±1)nm有最弱吸收,在(291±3)nm處有次弱吸收。結(jié)合圖2和表3～4可以看出偽品S的峰形明顯不同于正品A的峰形,偽品T在275nm附近沒有特征峰的吸收,從表4可以看出偽品W在291nm附近沒有峰谷,固可區(qū)別之。結(jié)合圖5和表3～4可以看出:正品蛤蟆油的吸收峰峰形呈鵝頭狀,在(270±2)nm處有圓滑最強(qiáng)吸收峰,在(253±2)nm附近有一特吸收峰,但有時(shí)被掩蓋。其一階導(dǎo)數(shù)紫外光譜在(264±4)nm處有最強(qiáng)吸收,在(251±2)nm處有次強(qiáng)吸收(有時(shí)被掩蓋),(287±2)nm處有最弱吸收。結(jié)合圖6和表3～4可以看出偽品S,T與正品A在峰形上有明顯的區(qū)別,且偽品T無270nm附近的特征吸收峰。偽品S,T的一階導(dǎo)數(shù)紫外光譜明顯區(qū)別于正品。結(jié)合圖7和表3～4可以看出蛤蟆油正品的正丁醇提取液在(234±2)nm處有最強(qiáng)吸收,在(272±3)nm處有一明顯的特征吸收峰。其一階導(dǎo)數(shù)紫外光譜在(263±1)nm處有最強(qiáng)吸收。結(jié)合圖8和表3～4可以看出正品蛤蟆油和偽品蛤蟆油有明顯的區(qū)別。從峰形上可以明顯的區(qū)別出偽品S,T,偽品S和V在234nm附近沒有特征吸收,也可以區(qū)別。偽品W在268nm處有特征吸收峰,和正品相比有點(diǎn)紫移,但不是很明顯。偽品T和W的一階導(dǎo)數(shù)紫外光譜的吸收峰峰位明顯區(qū)別于正品。所以用正丁醇提取后再通過紫外檢測的方法可以完全區(qū)別這4種偽品蛤蟆油。結(jié)合圖9和表3～4可以看出蛤蟆油的95%乙醇提取液在(203±1)nm處有最強(qiáng)吸收峰,在(230±5)nm處有明顯的特征吸收峰,而且在200nm附近有較強(qiáng)的末端吸收。其一階導(dǎo)數(shù)紫外光譜在(201±1)nm處有最強(qiáng)吸收。結(jié)合圖10和表3～4可以明顯看出正品蛤蟆油和偽品蛤蟆油之間的區(qū)別。從吸收峰的形狀上可以明顯的區(qū)別偽品S。從表3～4可以看出蛤蟆油的正品和偽品在吸收峰的峰位上沒有明顯的區(qū)別。3紫外光譜分析方法在中藥私家車油和偽品發(fā)酵過程中的應(yīng)用3.1結(jié)合以上實(shí)驗(yàn)可以得出:4種偽品蛤蟆油通過以上5種不同極性的有機(jī)溶劑超聲提取后用紫外光譜及其一階導(dǎo)數(shù)光譜完全可以鑒別出來。其鑒別情況詳見表5。從表5中發(fā)現(xiàn)正丁醇提取液用紫外光譜檢測可以完全鑒別出這4種偽品蛤蟆油,由此,筆者認(rèn)為石油醚、三氯甲烷和正丁醇3種溶劑聯(lián)合使用,是UV光譜鑒別蛤蟆油真?zhèn)纹返淖罴逊椒āＳ么朔N溶劑經(jīng)超聲波提取后再用紫外進(jìn)行檢測,通過其紫外光譜及其一階導(dǎo)數(shù)紫外光譜綜合比較,可以與正品蛤蟆油相區(qū)別。3.2正品蛤蟆油的不同極性有機(jī)溶劑的超聲波提取液在紫外光譜的反復(fù)檢測中,峰形非常的接近,表明正品蛤蟆油的主要成分是類似的,只是由于某些成分的含量不同導(dǎo)致其吸光系數(shù)的差異。從本實(shí)驗(yàn)還可以看出不同產(chǎn)地的正品蛤蟆油其紫外光譜及一階導(dǎo)數(shù)光譜的特征吸收峰波長經(jīng)重復(fù)測定位置較接近,且重現(xiàn)性良好。通過不同極性有機(jī)溶劑提取液紫外光譜及一階導(dǎo)數(shù)紫外光譜特征吸收峰的比較,能區(qū)別出正品蛤蟆油和偽品蛤蟆油。因此,通過紫外譜線組法,比較其紫外吸收峰形狀、紫外特征吸收峰和一階導(dǎo)數(shù)特征吸收峰,可以獲得較好的鑒別效果,并在傳統(tǒng)鑒別方法的基礎(chǔ)上,一定程度地充實(shí)了中藥蛤蟆油的鑒別方法。3.3正品蛤蟆油和偽品蛤蟆油的紫外譜線組圖譜提示,各自的化學(xué)成分組成上或許有相似的部分,又有不同的部分,且相同成分的組成比例不盡相同,因此,使吸收譜圖有一定的差異。在親緣關(guān)系較近、成發(fā)相差不大,用紫外譜線組圖譜方法,通過綜合比較其譜圖的差異,可獲得較好的鑒別效果?？v觀紫外光譜的