鎖陽多糖提取工藝的研究

鎖陽多糖提取工藝的研究

近年來的研究表明，多種植物糖具有重要的生理功能。鎖陽是鎖定科的根生植物鎖陽的干燥莖，生長在沙子的廣泛范圍內(nèi)，并與白刺（nifinatima）的根部相連。根據(jù)文獻(xiàn)，鎖陽具有補(bǔ)腎陽、潤腸、強(qiáng)腰膝的功效?，F(xiàn)代研究表明，鎖陽具有良好的排便、去羥基自由基的作用、抗缺氧和抑制血小板聚集，葡萄糖皮質(zhì)激素具有雙向調(diào)節(jié)作用，對體液免疫也有顯著的促進(jìn)作用。同時(shí)，鎖陽對艾滋病毒酶的抑制有文獻(xiàn)報(bào)道。目前，鎖陽的化學(xué)成分研究主要是結(jié)構(gòu)分析，但提取技術(shù)研究尚未報(bào)道。在這項(xiàng)工作中，我們研究了鎖陽中糖的提取過程，為開發(fā)鎖陽活性成分提供了基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。1材料和機(jī)器1.1材料表面選用鎖陽(CynomoriumsongaricumRupr.)的干燥肉質(zhì)莖,2001年1月采自張掖市紅沙窩.1.2主試劑葡萄糖、硫酸、苯酚、乙醇,均為分析純.1.3pla電氣池、電子天平mettletoldo7230G型分光光度計(jì)(上海精密科學(xué)儀器有限公司)、電熱恒溫水浴鍋(上海滬南科學(xué)儀器廠)、電子天平(mettlerToledo,0.01mg/200g).2重量法的建立2.1葡萄糖濃度的測定精確稱取105℃干燥至恒重的標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖0.1000g,置100mL量瓶中,加蒸餾水溶解并稀釋至刻度,葡萄糖濃度為1mg/mL,在使用前稀釋成葡萄糖濃度為0.1mg/mL.2.2碳酸氫鈉餾分溶液4g/l取苯酚200g,加鋁片0.1g,碳酸氫鈉0.05g,蒸餾收集182℃餾分,稱取此餾分10g,加蒸餾水150g,置棕色瓶中備用.2.3濃硫酸溶液的制備吸取葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液(0.1mg/mL)0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2mL,分別置于具塞試管中,各加蒸餾水,使體積為2mL,再加苯酚液1.0mL,搖勻,迅速滴加濃硫酸5.0mL,搖勻后放置5min,置沸水浴加熱15min,取出冷卻至室溫;另以蒸餾水2mL,加苯酚和硫酸,同上操作做空白對照,于490nm處測吸光度.根據(jù)所得吸光度和相應(yīng)葡萄糖含量得標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為Y=0.127387A-0.00073,r=0.9995,Y為葡萄糖含量(mg),A為吸光度,r為相關(guān)系數(shù).3樣品溶液的制備3.1水景浴根據(jù)試驗(yàn)設(shè)計(jì),按一定料液比(鎖陽粉每次稱量為1g)、提取溫度、提取時(shí)間,把樣品置于具塞三角瓶中以防水分損失.3.2粗多糖的制備浸體液離心后,殘?jiān)鼦壢?上清液加入95%乙醇溶液,使含醇量達(dá)到80%,放置過夜后離心,沉淀物用80%乙醇洗滌得粗多糖.粗多糖用蒸餾水溶解后定容100mL瓶中,根據(jù)回歸方程算出多糖的含量.4結(jié)果與分析4.1正交試驗(yàn),確定提取溫度和時(shí)間、料液比是主要因素,采用l933在多糖提取工藝中,影響因素很多,但在因素實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上,選定提取溫度、時(shí)間、料液比為主要因素,采用L9(33)正交試驗(yàn)進(jìn)行提取溫度、提取時(shí)間、料液比三因素三水平的正交組合試驗(yàn),各因素水平見表1.4.2結(jié)果通過正交實(shí)驗(yàn),確定鎖陽多糖的最佳工藝條件,結(jié)果見表2.4.3因素與多酚分布之間的關(guān)系圖4.4提取時(shí)間和溫度對多糖得率的影響從表2和圖1可知,浸提溫度(A)是影響鎖陽多糖得率最主要因素.隨著溫度升高,多糖的得率升高,各水平之間的差別達(dá)到了極顯著.94℃為最佳提取溫度,溫度高于94℃可能會影響多糖的活性,因此浸提溫度不宜過高.料液比(B)對多糖的影響不顯著.鎖陽多糖是一種酸性雜多糖,這種多糖在水中的溶解度可能很大.較低的料液比多糖絕大多數(shù)溶出,因此隨著料液的增加多糖得率不顯著,故選用料液比為1∶15,這樣既省時(shí)又經(jīng)濟(jì).提取時(shí)間對鎖陽多糖影響也較大,隨著提取時(shí)間的延長,多糖得率也隨著增加,但增加趨勢不大,故不需過長時(shí)間的