不同保存條件下對(duì)血液乙醇含量測(cè)定結(jié)果的影響

不同保存條件下對(duì)血液乙醇含量測(cè)定結(jié)果的影響摘要：建立血液中乙醇含量的自動(dòng)頂空氣相色譜質(zhì)譜檢測(cè)方法（HS-GC-MS）；考察靜脈血和心臟血中乙醇在不同保存條件下的穩(wěn)定性。通過(guò)研究靜脈采血消毒劑及消毒操作過(guò)程對(duì)血液中乙醇含量的影響，探討采血對(duì)樣本的可能污染來(lái)源及對(duì)血液中乙醇含量的影響。論文通過(guò)研究血液中乙醇含量的測(cè)定過(guò)程，分析采用HS-GC-MS法測(cè)定血液中乙醇含量的不確定度來(lái)源，給出采用該方法測(cè)定血液中乙醇含量的檢測(cè)結(jié)果的合成標(biāo)準(zhǔn)不確定度和擴(kuò)展不確定度。本文建立了HS-GC-MS法測(cè)定血液中乙醇含量的質(zhì)控圖，為實(shí)驗(yàn)室開(kāi)展日常酒駕檢測(cè)結(jié)果的質(zhì)量控制提供保障。關(guān)鍵詞：氣相色譜；血液；乙醇；Abstract:toestablishanautomaticheadspacegaschromatographymassspectrometry(HS-GC-MS)forthedeterminationofethanolinblood,andtoinvestigatethestabilityofethanolinvenousbloodandheartbloodunderdifferentpreservationconditions.Bystudyingtheinfluenceofvenousbloodcollectiondisinfectantanddisinfectionprocessonthecontentofethanolinblood,thepossiblesourcesofbloodsamplingandtheinfluenceofbloodsamplingonthecontentofethanolwerediscussed.Bystudyingthedeterminationprocessofalcoholcontentinblood,thesourcesofuncertaintyinthedeterminationofethanolcontentinbloodbyHS-GC-MSwereanalyzed.Thestandarduncertaintyandexpandeduncertaintyoftheresultsofthedeterminationofethanolcontentinbloodweregiven.AqualitycontrolchartforthedeterminationofalcoholcontentinbloodbyHS-GC-MSisestablishedinthispaper,whichprovidesaguaranteeforthequalitycontroloflaboratoryresultsofdailyalcoholdrivingtestinthelaboratory.Keywords:gaschromatography;blood;ethanol;

目錄一、頂空氣相色譜法測(cè)定血液中乙醇的含量及血液保存條件的影響 4（一）儀器和試劑 4（二）試劑的配置 4（三）實(shí)驗(yàn)方法 51.標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 52.血液樣品的測(cè)定 53.血液保存條件對(duì)乙醇含量的影響 5（四）結(jié)果與討論 61.標(biāo)準(zhǔn)曲線與線性關(guān)系 62.平衡時(shí)間的影響 7二、血液中乙醇含量檢測(cè)結(jié)果的影響因素及質(zhì)量控制研究 8（一）實(shí)驗(yàn) 81.儀器 82.試劑 83溶液配制 9（二）頂空一氣相色譜一質(zhì)譜條件 91.頂空條件 92.氣相色譜條件 9（三）實(shí)驗(yàn)方法 9（四）采血消毒對(duì)乙醇污染的影響 101.對(duì)象及條件 102.分組和采血 10（五）結(jié)果與討論 11三、直接進(jìn)樣氣相色譜法測(cè)定血液中乙醇的含量 12（一）儀器和試劑 12（二）實(shí)驗(yàn)方法 131.外標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 132.內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 133.血液樣品的測(cè)定 13（三）結(jié)果與討論 141.基體效應(yīng) 142.標(biāo)準(zhǔn)曲線與線性關(guān)系 143.測(cè)定結(jié)果比較 15結(jié)論 15參考文獻(xiàn) 16

一、頂空氣相色譜法測(cè)定血液中乙醇的含量及血液保存條件的影響（一）儀器和試劑在下表1.1中所展示的是此次實(shí)驗(yàn)所使用的儀器和相關(guān)試劑，在下表1.2中展示的是此次實(shí)驗(yàn)儀器操作的相關(guān)參數(shù)，除了柱溫，其他各項(xiàng)都依照著公共安全行業(yè)的相關(guān)要求來(lái)實(shí)施。表1.1儀器設(shè)備及試劑一覽表表1.2儀器工作參數(shù)一覽表（二）試劑的配置（1）對(duì)于乙醇標(biāo)準(zhǔn)溶液予以制備，取無(wú)水乙醇（2000）放在的容量瓶中，然后加水實(shí)施定容并搖晃混合均勻，獲得乙醇標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備容液（2000/）。稱取此儲(chǔ)備溶液6份，分別為0.50，1.00，2.00，4.00，8.00以及10.00，然后置入提前添加了蒸餾水的容量瓶中，加水定容至刻度并搖勻，得到濃度分別為10，20，40，80，160以及200mg/的乙醇標(biāo)液。（2）對(duì)于叔丁醇標(biāo)準(zhǔn)液予以制備，取無(wú)水叔丁醇2000放在的容量瓶中，然后添水予以定容并搖晃混合均勻，獲得叔丁醇標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液（2000/）。精取0.1此溶液置入提前添加了蒸餾水的容量瓶?jī)?nèi)（），然后再添水予以定容，并且要搖晃混合均勻，最終獲得濃度是2/的叔丁醇標(biāo)液。（三）實(shí)驗(yàn)方法1.標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制利用移液槍精取空白全血共6份，然后分別放在6個(gè)頂空瓶（20）中，再添加標(biāo)液進(jìn)而制備成乙醇的含量分別是5，10，20，40，80，100/的血樣。依次對(duì)這六個(gè)頂空瓶添加的2/叔丁醇來(lái)當(dāng)做內(nèi)標(biāo)，然后用聚四氟乙烯薄膜以及硅橡膠對(duì)瓶口予以密封，最后使用壓蓋器對(duì)鋁蓋予以壓實(shí)。將頂空瓶中的溶液充分混勻，把其放在70的水浴箱中進(jìn)行12的加熱處理，最后吸取上層氣體l并實(shí)施進(jìn)樣檢驗(yàn)。根據(jù)檢驗(yàn)所得的數(shù)據(jù)實(shí)施內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)工作曲線繪制，其縱坐標(biāo)代表著準(zhǔn)備檢測(cè)的乙醇和內(nèi)標(biāo)物叔丁醇兩者之間的峰面積比值，而橫坐標(biāo)則代表著乙醇和叔丁醇在含量方面的比值。2.血液樣品的測(cè)定從準(zhǔn)備檢測(cè)的血液內(nèi)精取l.0，添加0.5叔丁醇之后，按序使用聚四氟乙烯薄膜和硅橡膠密封墊對(duì)頂空瓶進(jìn)行密封，最后使用壓蓋器將鋁蓋予以壓實(shí)，在充分混勻之后把其放在70的水浴箱中進(jìn)行12的加熱處理，最后吸取上層氣體1實(shí)施進(jìn)樣檢驗(yàn)。3.血液保存條件對(duì)乙醇含量的影響分別制備出乙醇含量是20、40、100/的3種血液樣品，并且把每個(gè)樣品分為四份。在貯存方面分為下面幾種：（1）密封之后在室溫（25-30）環(huán)境中予以貯存；（2）密封冰箱保存（(4-8）；（3）在室溫環(huán)境中予以敞開(kāi)貯存；（4）在冰箱中進(jìn)行敞開(kāi)貯存。最后對(duì)于以上各個(gè)貯存方法中的血樣實(shí)施不同時(shí)間的檢測(cè)（立即檢測(cè)、1d后檢測(cè)、3d后檢測(cè)以及一周后檢測(cè)，最終得出相應(yīng)的乙醇濃度狀況。（四）結(jié)果與討論1.標(biāo)準(zhǔn)曲線與線性關(guān)系根據(jù)上文的實(shí)驗(yàn)方式制作出標(biāo)準(zhǔn)曲線，對(duì)于所有血樣均實(shí)施兩次的平行檢測(cè)，將標(biāo)準(zhǔn)血樣的濃度當(dāng)做X，將乙醇和叔丁醇兩者的峰面積比值當(dāng)做Y，從而制作出過(guò)原點(diǎn)線性方程為：。其中的0.2492是相關(guān)系數(shù)，最終繪制出標(biāo)準(zhǔn)曲線在下圖1.3中展示：圖1.3因?yàn)榘凑招袠I(yè)標(biāo)準(zhǔn)儀器的相關(guān)要求難以有效的分離叔丁醇與乙醇，也無(wú)法獲得最好的色譜流出圖。故而，在這一章節(jié)中主要是對(duì)于色譜柱的相關(guān)柱溫實(shí)施了多種條件實(shí)驗(yàn)。分析后得出影響柱效的主要因素包括流動(dòng)相流速、填料的顆粒大小以及色譜柱溫三大方面。而對(duì)于氣相色譜來(lái)講，柱溫就成為了最為關(guān)鍵的一個(gè)影響因素，故而，挑選柱溫也成為了挑選儀器的重要條件之一，由于其能夠?qū)τ谏V柱的柱效與分析效率均會(huì)形成較大的影響。一般來(lái)講，挑選柱溫的前提條件就是保障混合物內(nèi)的全部構(gòu)成部分均可以非常好的分離，以此為基礎(chǔ)，盡量使用比較低的溫度。當(dāng)增高柱溫的時(shí)候，可以減短分析所需要的時(shí)間，能夠有效提升工作效率；當(dāng)柱溫降低的時(shí)候，則可以讓色譜柱有著更強(qiáng)的選擇性，讓其使用壽命增長(zhǎng)，并且能夠讓色譜柱穩(wěn)定性增大。按照上文1.3中的相關(guān)實(shí)驗(yàn)方式，其他條件相同，自150開(kāi)始慢慢減小柱溫，分別使用標(biāo)準(zhǔn)血樣為/,20/100,80/實(shí)施檢測(cè)和對(duì)比。這里采用/當(dāng)做例子予以介紹，在圖1.2中展示的是150柱溫的相應(yīng)色譜圖，依照定性實(shí)驗(yàn)?zāi)軌蛑溃寒?dāng)保留的時(shí)間是2.83的為叔丁醇，而保留的時(shí)間是3.63的就為乙醇。在圖1.3中所展示的是120柱溫的相應(yīng)色譜圖，依照定性實(shí)驗(yàn)?zāi)軌蛑溃寒?dāng)保留時(shí)間是4.99的就為叔丁醇，而保留的時(shí)間是7.72的就為乙醇。從圖示能夠知道，緊隨柱溫的減小會(huì)讓保留時(shí)間逐漸增大，在分離度方面也表現(xiàn)的更好。在實(shí)施了數(shù)次研究后得出，以實(shí)驗(yàn)預(yù)定色譜條件為基礎(chǔ)，在120的時(shí)侯，則乙醇和叔丁醇具有著最佳的分離狀況與峰形，并且在雜質(zhì)峰方面也影響極小，故而，在此次試驗(yàn)中就選擇使用120的柱溫。2.平衡時(shí)間的影響用移液槍取5mg/的乙醇溶液，的lmg/叔T醇溶液，以及0.2的空白全血放在頂空瓶?jī)?nèi)，總共需要制備四份，在密封及70環(huán)境中保存不同的時(shí)間并進(jìn)行有效的檢測(cè)。最終的相關(guān)數(shù)據(jù)在下表1.4中詳細(xì)展示。表1.4從上表1.4能夠看出，在加熱時(shí)間為12的時(shí)侯，則得到了乙醇和叔丁醇的最大比值，其較高的乙醇峰面積也反映出此時(shí)的反應(yīng)趨于平衡。由于此次試驗(yàn)使用的是手動(dòng)頂空進(jìn)樣，所以說(shuō)會(huì)在時(shí)間以及溫度上出現(xiàn)誤差，那么10到12的平衡時(shí)間均是可以的，最終選擇了12。如下圖1.5中所示，（a）一（c）分別為不同保存方式對(duì)乙醇含量20，40，100mg/血樣的影響結(jié)果，血液在室溫中貯存，不管是不是密封均會(huì)產(chǎn)生乙醇含量改變，尤其是含量為40/的血液在此種環(huán)境貯存3d則乙醇會(huì)全部揮發(fā)，而在室溫密封貯存條件中也會(huì)在一周時(shí)間將乙醇全部揮發(fā)。在冰箱（4-8）中予以貯存的血樣，當(dāng)處于密封時(shí)則一周時(shí)間也并未產(chǎn)生明顯的變化，然而在敞開(kāi)條件下卻降低很多，并且是濃度越高時(shí)則降低的就越快。故而，對(duì)于血樣需要保存一段時(shí)間時(shí)，一定要給予密封和冰箱儲(chǔ)存，從而才可以保障檢驗(yàn)的結(jié)果更真實(shí)，才可以為一些酒后駕車的鑒定事件提供更有力的根據(jù)。圖1.5不同保存方式對(duì)血液中不同乙醇含量的影響二、血液中乙醇含量檢測(cè)結(jié)果的影響因素及質(zhì)量控制研究（一）實(shí)驗(yàn)1.儀器和試劑此次試驗(yàn)所使用的儀器設(shè)備及試劑：自動(dòng)頂空-氣相色譜-質(zhì)譜系統(tǒng)（），其配置了0.1定量鎳管進(jìn)樣環(huán)以及20的頂空瓶；氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀器（），配置了電子轟擊離子源；超純水儀；能夠予以調(diào)節(jié)的移液器（吉爾森，P1000，P200與P100）；7號(hào)針頭；真空抗凝采血管；乙醇標(biāo)液；叔丁醇（99.8）；去離子水（）則是通過(guò)超純水儀（）予以配制的；TI型安爾碘消毒液（乙醇65-75）；醋酸洗必泰消毒液（無(wú)乙醇）。2溶液配制對(duì)于叔丁醇標(biāo)液的制備：在室溫環(huán)境中稱取40叔丁醇溶液放在提前盛有合理數(shù)量去離子水（）的500容量瓶?jī)?nèi)，使用去離子水進(jìn)行稀釋后搖晃混合均勻，最終制備出叔丁醇儲(chǔ)備液（0.l0/）500，然后放在4冰箱中保存。精密度與回收率樣本制備：抽取相同空白血樣共四份，然后分別加入乙醇標(biāo)液，讓血液內(nèi)所含的乙醇濃度是0.04，0.20，1.00與5.00/。（二）頂空一氣相色譜一質(zhì)譜條件1.頂空條件爐溫設(shè)置為60予以20平衡處理，并選擇中速振搖。線溫度為90，在進(jìn)樣時(shí)選擇3的時(shí)間間隔，另外在樣品瓶的加壓、定量環(huán)沖入和進(jìn)樣等均耗時(shí)大概10s。2.氣相色譜條件在色譜柱方面主要是使用毛細(xì)管柱,，柱溫是60并且要保持1.8；使用的載氣是氦氣（純度>99.999），其流速則是1/；在進(jìn)樣口的溫度是150，并采用了分流比是1：30予以進(jìn)樣。3.質(zhì)譜條件離子源與傳輸線都是250，在電離方法上是電子轟擊，而電離能為70eV。在溶劑切除的時(shí)間上為1.2；掃描選用了離子監(jiān)測(cè)方式（）且為0.ls間隔；乙醇與叔丁醇兩者的監(jiān)測(cè)離子是m/z=29，31，45，46和m/z=41，43，57，59，定量離子分別為m/z=45和m/z=59。（三）實(shí)驗(yàn)方法對(duì)于貯存溫度與時(shí)間影響心臟血液樣本中乙醇穩(wěn)定性的測(cè)驗(yàn)，此實(shí)驗(yàn)共選擇了20例血液樣本，初始的濃度分別是：9.4、42.8、44.3、52.6、87.7、91.9、100.0、105.9、143.1、143.2、156.1、158.4、162.8、171.8、189.9、231.2、235.6、279.2、322.9以及323.9/；編號(hào)是120號(hào)。將這20例樣本每一例均分為3份，并分別放在Ep管內(nèi)，每個(gè)管內(nèi)放置0.75；在血液樣品的貯存時(shí)間方面分別為Oh、2h、6h、12h、24h、168h（一周）、336h（兩周）以及720h（一個(gè)月）；在其貯存的溫度方面分別為室溫（大概為25）、4與零下18；此次檢測(cè)要重復(fù)兩次的平行檢驗(yàn)，然后對(duì)其結(jié)果實(shí)施統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理，然后給予方差分析以及配對(duì)t測(cè)驗(yàn)，在結(jié)果方面則采用了“”來(lái)表示。以p<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；在重復(fù)測(cè)定方差分析的時(shí)候，首先實(shí)施的球形度測(cè)驗(yàn)，并將當(dāng)做未滿足球形分布假定，應(yīng)實(shí)施自由度調(diào)整，在調(diào)整系數(shù)方面則為（下面簡(jiǎn)稱）；對(duì)于貯存溫度與時(shí)間影響靜脈血液樣本中乙醇穩(wěn)定性的測(cè)驗(yàn)，此次檢測(cè)取10例靜脈血液樣本，在初始濃度方面分別是22.8、21.9、19.2、18.4、25.1、90.5、93.5、91.9、97.4以及96.1/。在貯存時(shí)間方面為0h、24h、48h與72h；在貯存溫度方面為25；此次測(cè)定實(shí)施平行檢驗(yàn)兩次，然后對(duì)相關(guān)數(shù)據(jù)采用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件予以處理，并采用配對(duì)t測(cè)驗(yàn)，最終的結(jié)果則是采用來(lái)表示。（四）采血消毒對(duì)乙醇污染的影響1.對(duì)象及條件共有30名參加研究的志愿者，男、女各一半，在年齡方面是從20歲到55歲之間，在身體方面均為健康人群。志愿者在進(jìn)行采血之前的48h都沒(méi)有飲酒，另外在飲酒史的影響方面也經(jīng)由自身對(duì)照實(shí)施剖析，故而可以忽略不計(jì)。2.分組和采血將志愿者分成3組，每個(gè)組包括5名男性和5名女性。對(duì)第1組采用II型安爾碘消毒液清潔右肘靜脈位置消毒，并在消毒劑還沒(méi)有干燥時(shí)就進(jìn)行采血；對(duì)第2組采用一樣的消毒劑，但要在消毒劑干燥30s之后才進(jìn)行采血；同時(shí)對(duì)于第1和2組的左肘靜脈位置使用醋酸洗必泰（無(wú)乙醇）實(shí)施一樣的消毒方式以及采血；對(duì)于第3組采用II型安爾碘消毒液處理左肘靜脈，在沒(méi)有干燥時(shí)就實(shí)施采血；同時(shí)在右肘實(shí)施相同方式消毒，但要干燥30s之再予以采血。在此次實(shí)驗(yàn)中，對(duì)于第1和2組的抽血著均使用干燥棉簽壓穿刺點(diǎn)并拔針，對(duì)于第3組則是使用了安爾碘消毒液浸潤(rùn)后的棉簽壓穿刺點(diǎn)并拔針。具體的消毒和采血環(huán)節(jié)情況在下表2.1中展示。表2.1（五）結(jié)果與討論1.GC-MS監(jiān)測(cè)離子的選擇在上圖中的色譜圖：a為甲醇，b為乙醇，c為叔丁醇，d為正丙醇。采用全掃描方式進(jìn)行數(shù)據(jù)采集，掃描的質(zhì)量范圍是29^}1SOu，來(lái)確定叔丁醇和乙醇的定性與定量離子，在得到的質(zhì)譜圖和譜庫(kù)內(nèi)挑選出叔丁醇與乙醇的相應(yīng)特證離子。其中的叔丁醇采用59來(lái)當(dāng)做其定量離子，乙醇采用45來(lái)當(dāng)做其定量離子。三、直接進(jìn)樣氣相色譜法測(cè)定血液中乙醇的含量（一）儀器和試劑在下表3.1中所展示的是此次實(shí)驗(yàn)所使用的儀器和相關(guān)試劑，在下表3.2中展示的是此次實(shí)驗(yàn)儀器操作的相關(guān)參數(shù)，各項(xiàng)分析條件都依照著公共安全行業(yè)的相關(guān)要求來(lái)實(shí)施。3.13.2儀器工作參數(shù)一覽表3.2.2試劑的配置對(duì)于乙醇標(biāo)準(zhǔn)溶液予以制備，取無(wú)水乙醇（2000）放在的容量瓶中，然后加水實(shí)施定容并搖晃混合均勻，獲得乙醇標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備容液（2000/）。稱取此儲(chǔ)備溶液5份，分別為0.25，1.00，2.00，4.00以及8.00，然后置入提前添加了蒸餾水的容量瓶中，加水予以定容并搖晃混合均勻，最后獲得濃度分別是5，20，40，80以及100/的乙醇標(biāo)準(zhǔn)液。對(duì)于6的高氯酸溶液予以制備，先精取高氯酸6.0并置入100的容量瓶中，然后添水予以定容并搖晃混合均勻，此時(shí)即獲得6高氯酸液。對(duì)于無(wú)水叔丁醇標(biāo)液予以制備，取無(wú)水叔丁醇2000放在的容量瓶中，然后添水予以定容并搖晃混合均勻，獲得叔丁醇標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液（2000/）。精取0.5此溶液置入提前添加了蒸餾水的容量瓶?jī)?nèi)（），然后再添水予以定容，并且要搖晃混合均勻，最終獲得濃度是10/的叔丁醇標(biāo)液。（二）實(shí)驗(yàn)方法1.外標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制將濃度為5，20，40，80，100mg/的乙醇標(biāo)液均量取1進(jìn)樣，然后去獲得它們的峰面積，各個(gè)濃度均平行進(jìn)樣三次，然后制作出外標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線，其中的縱坐標(biāo)是乙醇峰面積，而橫坐標(biāo)是乙醇的濃度。2.內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制精取0.4濃度分別是5，20，40，80，100mg/的乙醇標(biāo)液，然后放在頂空瓶?jī)?nèi)，再分別添加0.2的10/叔丁醇與0.2的高氯酸（6%）并充分混勻，最后精取1予以進(jìn)樣并詳細(xì)記錄它們的峰面積，各個(gè)濃度的樣品要實(shí)施平行進(jìn)樣三次的檢測(cè)，依此制作出內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，其縱坐標(biāo)是準(zhǔn)備檢測(cè)的構(gòu)成部分（乙醇）和內(nèi)標(biāo)物（叔丁醇）所具有的峰面積比值，而橫坐標(biāo)則是乙醇和叔丁醇兩者的含量比值。3.血液樣品的測(cè)定外標(biāo)方式：精取0.4全血放在離心管中并添加0.4的高氯酸溶液（6），然后搖晃混合均勻達(dá)到反應(yīng)充分，其中的蛋白質(zhì)能夠完全沉淀，再進(jìn)行4000r/離心處理5，最后精取1上層清液來(lái)實(shí)施進(jìn)樣。內(nèi)標(biāo)方式：精取0.4全血放入離心管并添加0.2叔丁醇（10/）與0.2的高氯酸（6），搖晃混合均勻達(dá)到反應(yīng)充分，其中的蛋白質(zhì)能夠完全沉淀，再進(jìn)行4000r/離心處理5，最后精取1上層清液來(lái)實(shí)施進(jìn)樣。（三）結(jié)果與討論1.基體效應(yīng)現(xiàn)如今，在環(huán)境檢驗(yàn)中常常使用的是相對(duì)分析法，此類使用了“純物質(zhì)”配制的標(biāo)液和現(xiàn)實(shí)環(huán)境樣品有著較大的差異。而因?yàn)榇祟惗喾矫娴男再|(zhì)差異所造成的實(shí)際檢測(cè)誤差就被稱為基體效應(yīng)。由于理論意義上的乙醇加入空白全血進(jìn)行實(shí)驗(yàn)是缺乏現(xiàn)實(shí)意義的，故而，在此次實(shí)驗(yàn)中就討論直接使用乙醇標(biāo)液來(lái)當(dāng)做空白對(duì)照的相關(guān)問(wèn)題。利用移液槍稱取0.2空白血樣并且和200乙醇標(biāo)液均放入試管內(nèi)，再添加0.4高氯酸（6）后進(jìn)行搖晃使其混合均勻，再進(jìn)行離心處理后精取上層清液來(lái)實(shí)施色譜分析。最后的實(shí)驗(yàn)結(jié)論在下表3.3中展示。3.3血液蔽休和基餾水疾體對(duì)比2.標(biāo)準(zhǔn)曲線與線性關(guān)系采用相同的色譜條件，并借助于直接進(jìn)樣氣相色譜方式去制作外標(biāo)曲線與內(nèi)標(biāo)曲線，獲得了兩種方式的回歸方程，在下圖展示的就是相關(guān)系數(shù)與線性范圍。從這些圖能夠知道，相關(guān)系數(shù)r均＞0.999，而線性范圍均處在0-300/內(nèi)，全部達(dá)到了此次檢驗(yàn)的要求。3.測(cè)定結(jié)果比較采用空白血液來(lái)制備乙醇濃度分別是5，20，80/的三類血樣，再分別借助于內(nèi)標(biāo)法與外標(biāo)法實(shí)施6次平行檢測(cè)，最終的結(jié)果在下表3.4中展示，采用格魯布斯方法對(duì)于此類數(shù)據(jù)予以測(cè)驗(yàn)，并未顯示出異常情況。表3.4內(nèi)外標(biāo)法測(cè)定乙醇含量的數(shù)據(jù)結(jié)論在這篇文章中創(chuàng)建了自動(dòng)頂空一氣相色譜一質(zhì)譜檢驗(yàn)方式，并借助于色譜分離與質(zhì)譜定性功能去對(duì)樣品內(nèi)所含的乙醇數(shù)量實(shí)施了比較快和比較精準(zhǔn)的檢測(cè)，在用樣數(shù)量方面僅為0.20，也是此方式的一個(gè)優(yōu)勢(shì)。采用自動(dòng)頂空分析方式，無(wú)需太復(fù)雜的處理程序，并且有著比較快的分析速度，在樣品數(shù)量比較多的時(shí)候還能夠借助于儀器的重疊平衡功能去加快檢驗(yàn)的速度。經(jīng)由此次檢測(cè)得出，依照標(biāo)準(zhǔn)方式予以靜脈采血并使用抗凝劑試管，則能夠在室溫中貯存超過(guò)48h；但是使用不包含抗凝劑的試管，則在貯存溫度與貯存時(shí)間兩方面都具有不同程度的影響，如室溫中的心臟血樣會(huì)在貯存6h之后就出現(xiàn)乙醇濃度增高情況。故而，對(duì)于靜脈血液室溫存放應(yīng)少于2d，而心臟血室溫存放應(yīng)少于2h，此種方式才能夠保障最終結(jié)果的真實(shí)性和有效性。在此次試驗(yàn)中得出，采血過(guò)程中的皮膚消毒對(duì)于血液的乙醇含量并未形成影響，但是若在壓迫穿