雜質(zhì)研究思路

藥物雜質(zhì)研究的基本

思路及案例分析

1整理課件主要內(nèi)容一.概述二.國內(nèi)外對藥物雜質(zhì)研究的相關(guān)技術(shù)要求三.雜質(zhì)研究的基本思路2整理課件一.概述1.雜質(zhì)定義、分類及來源2.雜質(zhì)研究的重要性3.目前雜質(zhì)研究存在的主要問題3整理課件1.雜質(zhì)定義、分類及來源雜質(zhì)定義—任何影響藥物純度的物質(zhì)1)有毒副作用的物質(zhì)2)本身無毒副作用，但影響藥物的穩(wěn)定性和療效的物質(zhì)3)本身無毒副作用，也不影響藥物的穩(wěn)定性和療效，但影響藥物的科學管理的物質(zhì)4整理課件

雜質(zhì)分類：有機雜質(zhì)、無機雜質(zhì)、殘留溶劑有機雜質(zhì)—包括工藝中引入的雜質(zhì)和降解產(chǎn)物等，可能是已知的或未知的。化學結(jié)構(gòu)與活性成分的分子式類似或具淵源關(guān)系，通常稱為有關(guān)物質(zhì)。無機雜質(zhì)—原料藥及制劑生產(chǎn)或傳遞過程中產(chǎn)生的雜質(zhì)，通常是已知的。殘留溶劑—原料藥及制劑生產(chǎn)過程中使用的有機溶劑，一般具有已知毒性。5整理課件雜質(zhì)來源：工藝雜質(zhì)、降解產(chǎn)物等工藝雜質(zhì)—工藝過程中引入的雜質(zhì)，包括反應物、中間體、副產(chǎn)物、試劑、催化劑等降解產(chǎn)物—由藥物降解產(chǎn)生，如水解、氧化、開環(huán)、聚合等反應產(chǎn)物，與藥物的結(jié)構(gòu)特征密切相關(guān)6整理課件2.雜質(zhì)研究的重要性保證藥品安全有效是藥品研發(fā)及藥品評價所要遵循的一個基本原則；藥品質(zhì)量的穩(wěn)定可控是保證藥品安全有效的前提和基礎；雜質(zhì)研究是藥物質(zhì)量研究的一項重要內(nèi)容；雜質(zhì)研究及控制是藥品質(zhì)量保證的關(guān)鍵要素之一；雜質(zhì)研究是一項系統(tǒng)工程；與工藝研究、質(zhì)量研究其他項目、穩(wěn)定性研究、藥理毒理及臨床研究間存在著密切關(guān)系，直接關(guān)系到上市藥品的質(zhì)量及安全性。7整理課件3.目前雜質(zhì)研究存在的主要問題研究基礎薄弱雜質(zhì)來源不清雜質(zhì)的種類和數(shù)量不清，無法判斷檢查方法的全面性和可行性科學的雜質(zhì)研究，不清楚雜質(zhì)的來源、產(chǎn)生或引入過程、降解途徑雜質(zhì)檢查方法缺乏針對性不知控制何種雜質(zhì)以及為何控制，缺乏安全性數(shù)據(jù)的支持雜質(zhì)檢查結(jié)果難于評價無法判斷與被仿制藥是否一致

需要提高雜質(zhì)研究水平，包括雜質(zhì)檢查方法和驗證水平8整理課件二.國內(nèi)外對藥物雜質(zhì)研究的相關(guān)技術(shù)要求9整理課件有機雜質(zhì):1)特定雜質(zhì)(SpecifiedImpurities)指在質(zhì)量標準中分別規(guī)定了明確的限度，并單獨進行控制的雜質(zhì)。包括:----結(jié)構(gòu)已知的雜質(zhì)----結(jié)構(gòu)未知的雜質(zhì)對于結(jié)構(gòu)未知的雜質(zhì)，為便于在標準中進行指認，一般采用代號（如未知雜質(zhì)A等）或合適的定性分析指標（如相對保留時間為0.8的雜質(zhì)）加以區(qū)分10整理課件2)非特定雜質(zhì)(UnspecifiedImpurities)指在質(zhì)量標準中未單獨列出，而僅采用一個通用的限度進行控制的一系列雜質(zhì)，其在藥品中出現(xiàn)的種類與幾率并不固定。由于非特定雜質(zhì)的不確定性，因此，在藥品的臨床前與臨床研究中，很難對這些雜質(zhì)的安全性進行評價ICH的指導原則對其限度做了明確的規(guī)定----在原料藥質(zhì)量標準中任一單個非特定雜質(zhì)的限度不得過鑒定限度----在制劑的質(zhì)量標準中僅控制降解產(chǎn)物，在制劑質(zhì)量標準中任一單個非特定降解產(chǎn)物的限度不得過鑒定限度11整理課件原料藥的雜質(zhì)限度12整理課件制劑的雜質(zhì)限度13整理課件報告限度（ReportingThreshold）：超出此限度的雜質(zhì)均應在檢測報告中報告，并應報告具體的檢測數(shù)據(jù)。鑒定限度（IdentificationThreshold）：超出此限度的雜質(zhì)均應進行定性分析，確定其化學結(jié)構(gòu)。質(zhì)控限度（QualificationThreshold）：質(zhì)量標準中一般允許的雜質(zhì)限度，如制訂的限度高于此限度，則應有充分的依據(jù)。14整理課件雜質(zhì)限度研究可以采用下面三種方法:第一，對比分析法第二，科學文獻和主要代謝物法第三，遺傳毒性研究法15整理課件雜質(zhì)合理控制的基本原則就是考慮其安全因素。如果滿足以下一點或幾點要求，某雜質(zhì)基本可認為得到合理控制：----當實測水平和擬接受的雜質(zhì)標準沒有超過FDA已批同類藥品的雜質(zhì)水平----當雜質(zhì)本身就是原料藥的主要代謝物----當實測水平和擬接受的雜質(zhì)標準得到科學文獻的充分論證----當實測水平和擬接受的雜質(zhì)標準未超過體內(nèi)遺傳毒性研究的雜質(zhì)水平16整理課件《化學藥物雜質(zhì)研究的技術(shù)指導原則》

本指導原則的特點和指導思想：為雜質(zhì)研究提供基本的思路和方法，而不是對雜質(zhì)研究作出硬性的機械要求。具有指導作用，具備先進性和前瞻性，方法學要求盡量與國際發(fā)達國家和組織的指導原則一致。不完全照搬國外的指導原則，在充分考慮藥品的安全與質(zhì)量可控前提下，以我國藥品研發(fā)的實際情況為本指導原則制訂的基礎。17整理課件內(nèi)容設置及考慮

總體考慮：以“創(chuàng)新藥”和“仿制藥”為切入點，闡明雜質(zhì)研究基本的思路和方法，其它類型注冊現(xiàn)象，依據(jù)創(chuàng)新程度和能否獲取對照藥物，參考上述研發(fā)思路。內(nèi)容設置：明確雜質(zhì)的含義和分類；提供雜質(zhì)研究方法的規(guī)范思路；如何有效控制雜質(zhì)－方法選擇和限度確定、優(yōu)化制備工藝、確定有效期等。18整理課件概述：主要說明雜質(zhì)研究的主要內(nèi)容及其重要性，說明起草本指導原則的指導思想，明確其適用范圍。雜質(zhì)的分類：簡要敘述雜質(zhì)的種類。分析方法：主要說明分析方法驗證中的注意事項，并分析幾種常用定量方式及適用范圍。雜質(zhì)檢測的數(shù)據(jù)積累：強調(diào)在研究中數(shù)據(jù)積累的重要性，并對數(shù)據(jù)的報告提出規(guī)范化的要求。雜質(zhì)限度的確定：明確提出確定雜質(zhì)限度時需要考慮的三個重要因素，并就限度確定提出具體要求。雜質(zhì)研究的階段性：簡要說明在臨床研究申請階段和上市生產(chǎn)申請階段，雜質(zhì)研究中需解決的問題。結(jié)語：主要總結(jié)本指導原則的一些重要觀點。19整理課件三.雜質(zhì)研究的基本思路20整理課件創(chuàng)新藥雜質(zhì)研究的思路

藥學研究

---雜質(zhì)的預測,鑒定

---分析方法的建立

---數(shù)據(jù)的積累安全性研究

---對毒理學和臨床用樣品中雜質(zhì)毒性的評估,為最終產(chǎn)品中雜質(zhì)限度的確定提供安全性依據(jù)21整理課件創(chuàng)新藥雜質(zhì)研究的一般過程1)原料藥合成工藝路線和制劑處方的研究和確定;2)根據(jù)合成路線分析雜質(zhì)的類型,初步確定雜質(zhì)的結(jié)構(gòu);3)建立分析方法,進行系統(tǒng),規(guī)范的方法學驗證;4)確定毒理學研究用樣品的批次,進行毒理學研究;5)根據(jù)早期研究的結(jié)果確定初步的限度;6)確定臨床研究用樣品的批次,進行臨床研究;22整理課件7)臨床研究期間,進一步優(yōu)化工藝,減少雜質(zhì)的量;積累多批大規(guī)模樣品的試驗數(shù)據(jù);對于高于鑒定限度的雜質(zhì)進行結(jié)構(gòu)確證;專注可能因雜質(zhì)引發(fā)的不良反應;8)綜合藥學,藥理毒理和臨床研究的結(jié)果制訂合理的雜質(zhì)限度;完善質(zhì)量標準;9)上市后,如需要進行工藝變更,需對因工藝變更產(chǎn)生的新雜質(zhì)進行毒理學研究的橋接試驗.23整理課件仿制藥雜質(zhì)的研究思路特點:主要是采用橋接的研究思路,通過質(zhì)量一致性的確認，橋接已上市藥品的安全有效性結(jié)果研究基礎：擬仿產(chǎn)品的相關(guān)信息（質(zhì)量標準、實測結(jié)果等為研究工作的重要參考）研究目標：雜質(zhì)水平不超過擬仿產(chǎn)品基本考慮結(jié)合雜質(zhì)研究指導原則要求、擬仿產(chǎn)品的信息開展研究工作24整理課件雜質(zhì)研究的主要內(nèi)容

進行雜質(zhì)譜的分析建立合適的分析方法確定合理的限度要求25整理課件1.雜質(zhì)譜的分析

(1)分析起始原料中可能存在的雜質(zhì)(2)分析合成過程中副反應引入的雜質(zhì)(3)分析合成過程中產(chǎn)生的降解產(chǎn)物

通過對藥物中的不穩(wěn)定基團和活潑基團進行分析,可以初步推測藥物的降解途徑和降解產(chǎn)物。如:

不穩(wěn)定結(jié)構(gòu):---酯鍵(包括內(nèi)酯)、---酰胺鍵(包括內(nèi)酰胺)、---季銨鍵活潑基團:---酚羥基、---噻吩基、---吡啶基、---醛基26整理課件2.雜質(zhì)分析方法的研究

根據(jù)主成分及雜質(zhì)的理化性質(zhì)、化學結(jié)構(gòu)、雜質(zhì)的控制要求，采用適當手段將雜質(zhì)的信號放大，易于辨認和定量?；衔锝Y(jié)構(gòu)特征、理化性質(zhì)、劑型特征、工藝過程、標準要素、……綜合設計、嚴謹研究、規(guī)范驗證。專屬、靈敏、準確、簡捷。分析方法各有局限，注意不同原理分析方法間的相互補充和驗證。27整理課件專注之一.方法的合理性

色譜方法（HPLC、TLC、GC）HPLC：雜質(zhì)是否有UV吸收(檢測器的選擇)、溶液是否穩(wěn)定、方法本身是否引起藥物降解等TLC：固定相的選擇、顯色方式（UV吸收的差異、顯色劑靈敏度的差異）、溶液是否穩(wěn)定性、薄層固定相是否會引起藥物的降解等28整理課件專注之二.測定值是否真實反映雜質(zhì)的含量

如:HPLC檢測波長的選擇---

申報資料中比較常見的做法：

(a)直接將主藥的最大吸收波長選作檢測波長;(b)簡單地套用含量測定的色譜條件。實際仍是以主藥的最大吸收波長作為有關(guān)物質(zhì)檢測波長;(c)以樣品進行破壞性試驗（酸、堿、熱、光照、氧化等）后的溶液做紫外掃描。由于未破壞主藥所占比例較大，故破壞性試驗后溶液的最大吸收波長一般仍為主藥的最大吸收波長。問題：若盲目地將主藥的最大吸收波長確定為檢測波長，則雜質(zhì)在此波長下的吸收可能偏低，某些雜質(zhì)甚至無吸收，這樣會造成對雜質(zhì)含量的低估甚至漏檢，從而不能反映產(chǎn)品的真實質(zhì)量。29整理課件

正確的做法：(a)對產(chǎn)品中可能存在的雜質(zhì)（合成原料、中間體、副產(chǎn)物以及降解產(chǎn)物）的紫外吸收特性進行研究。---已知雜質(zhì)的紫外吸收特性可采用對其流動相溶液直接進行掃描的方法考察;---未知雜質(zhì)（如未知降解產(chǎn)物等）可通過二極管陣列檢測器考察其紫外吸收情況。(b)根據(jù)各主要雜質(zhì)及主成分的紫外吸收特性，選取響應值基本一致的波長作為有關(guān)物質(zhì)的檢測波長。

若對不同雜質(zhì)難于找到均適宜的檢測波長：----可選擇在不同波長下分別測定，----或采用加校正因子的主成分自身對照法。30整理課件專注之三.建立的方法是否可有效檢出所有雜質(zhì)

如:HPLC洗脫方法的選擇---等度洗脫、梯度洗脫-----極性大的化合物可能被掩蓋；極性小的化合物難以被洗脫，甚至保留在柱上----無紫外吸收或檢測波長處吸收相差較大的多種化合物，有時在單一檢測波長處不能檢出31整理課件梯度洗脫－雜質(zhì)研究中值得借鑒的手段有效檢出極性相差懸殊的系列雜質(zhì)驗證等度洗脫法對各類雜質(zhì)的檢出能力32整理課件專注之四.注意多種方法聯(lián)用由雜質(zhì)多樣性復雜性和方法局限性所決定單一方法不能滿足多個雜質(zhì)的檢測時，可采用兩種或兩種以上的方法互為補充，控制雜質(zhì)

1）、化學法、色譜法、光譜法、生物檢定法

2）、同一方法采用不同的測試條件，如正相HPLC、反相HPLC、不同流動相的反相HPLC等

3）、分離技術(shù)與檢測手段聯(lián)用，較為有效，如HPLC、GC、LC-MS、GC-MS、HPLC-DAD、CE等33整理課件專注之五.檢測方法的規(guī)范性驗證專屬性：指在一些可能存在的組分，如雜質(zhì)、殘存中間體、降解物、基質(zhì)等存在時，對被分析物準確可靠測定的能力。靈敏度：試樣中能被檢測（或定量）的最低量---通常用檢測限及定量限表征---直觀評價、信噪比、響應值的標準差和斜率獲得。精密度：在規(guī)定的測試條件下，同一個均勻樣品經(jīng)多次取樣測定所得結(jié)果之間的接近程度---重復性(在相同條件下由同一分析人員測定所得結(jié)果的精密度)---中間精密度(在同一實驗室，不同時間由不同分析人員用不同設備測定結(jié)果的精密度)---重現(xiàn)性(在不同實驗室由不同分析人員測定結(jié)果的精密度)34整理課件準確度：測定結(jié)果與真實值或參考值接近程度。---已知雜質(zhì)：回收率（根據(jù)精密度、專屬性、線性）推斷---未知雜質(zhì)：與另一成熟方法比對、根據(jù)質(zhì)量平衡原理結(jié)合含量等結(jié)果進行粗略判定，必要時研究幾種不同色譜條件甚至不同測定原理的方法進行比較選用線性：在設計范圍內(nèi)，檢測響應值與待測物質(zhì)量之間成正比例關(guān)系的程度。范圍：檢測方法能達到一定精密度、準確度和線性的高、低濃度或量的區(qū)間－范圍應在規(guī)定限度的±20%間或定量限至限度的+20%間，若含量測定和雜質(zhì)檢查同用一套色譜系統(tǒng)，則線性范圍應為雜質(zhì)限度的-20%至含量限度（上限）的+20%間耐用性：指測定條件有小的變動時，測定結(jié)果不受影響的承受程度35整理課件專注之六.定量方法的選擇

雜質(zhì)對照品法定量準確，已知雜質(zhì)，需用雜質(zhì)對照品加校正因子的主成分自身對照法---當各雜質(zhì)在特定波長下檢測時的響應值與主成分的響應值相差較大時定量準確，已知雜質(zhì)，無需長期提供對照品36整理課件不加校正因子的主成分自身對照法前提是假定雜質(zhì)與主成分的響應因子基本相同有一定誤差，可用于未知雜質(zhì)已知雜質(zhì)對主成分的響應因子在0.9～1.1之間，可以用主成分自身對照法計算含量，超出0.9～1.1范圍，宜采用雜質(zhì)對照品法計算含量,否則可能產(chǎn)生較大誤差峰面積歸一法簡便因雜質(zhì)與主成分響應因子不同、線性范圍不同、儀器對它們的積分精度及準確度不同等因素，有一定的局限性37整理課件3.雜質(zhì)限度的確定雜質(zhì)限度:藥品質(zhì)量控制的重要指標之一，臨床用藥的安全性的重要保障；反映藥品生產(chǎn)工藝水平、產(chǎn)品的穩(wěn)定性、有效期的重要指標基本原則：在可行的范圍內(nèi)盡可能低38整理課件(1)創(chuàng)新藥物雜質(zhì)限度確定的思路

雜質(zhì)限度的確定--利弊權(quán)衡的過程39整理課件重點考慮：安全性：雜質(zhì)的活性或毒性－→雜質(zhì)可接受水平－首要依據(jù)生產(chǎn)工藝：生產(chǎn)可行性、工藝耐用性（批內(nèi)和批間的正常波動）分析方法：能達到的檢測水平、可接受的誤差穩(wěn)定性：控制降解的方法和措施40整理課件相關(guān)考慮遺傳毒性雜質(zhì)：優(yōu)化合成工藝過程，消除其生成；體外點突變和染色體畸變試驗進行安全性驗證。代謝產(chǎn)物：動物或人體中的主要代謝產(chǎn)物，則其安全性不為主要考慮，但需制定合理的限度。臨床用藥：根據(jù)用藥人群、劑量、用藥周期、臨床經(jīng)驗、利弊權(quán)衡等，確定合理限度。41整理課件具體策略安全性評價：綜合藥學、藥理毒理及臨床研究結(jié)果---含有一定雜質(zhì)暴露量樣品的安全性試驗和臨床試驗---雜質(zhì)單體直接進行安全性評價---參考相關(guān)文獻產(chǎn)品穩(wěn)定性評價:考慮穩(wěn)定性的影響因素---雜質(zhì)除了來源于制備工藝外,還可能因產(chǎn)品不穩(wěn)定而產(chǎn)生降解產(chǎn)物、聚合物等---對這些與穩(wěn)定性有關(guān)的雜質(zhì),在確定其限度時,就應充分考慮穩(wěn)定性的影響42整理課件生產(chǎn)可行性評價:考慮工藝的正常波動---具體做法:分別計算各批樣品中該雜質(zhì)的平均值與標準偏差,以平均值為中間值,向上浮動3倍標準偏差,即為該雜質(zhì)的限度。---注意以下幾點:①應選取工藝已相對成熟的樣品②批量應盡可能大③批數(shù)盡量多一些所選產(chǎn)品的工藝、批量越接近大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn),批數(shù)越多,所制訂的雜質(zhì)限度也就越能反映生產(chǎn)的實際情況。43整理課件注意:創(chuàng)新藥物“雜質(zhì)研究”的階段性---臨床研究申請---上市生產(chǎn)申請44