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植物組織培養(yǎng)脫毒技術(shù)進展研究主講人:小組成員:邱智海,史麗麗,王珍,熊化鑫,徐德貴,徐小金,鄢惠慶,楊林,余歡,曾國敏組織培養(yǎng)脫毒脫毒技術(shù)的發(fā)展過程1脫毒技術(shù)的未來4無病毒植株檢測方法3常用的脫毒技術(shù)22植物組織培養(yǎng)常用脫毒方法莖尖大小和脫毒率熱處理~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~抗病毒化學藥劑超低溫保存返回3病毒抑制劑原理:利用抗病毒化學藥劑來抑制病毒核酸與蛋白質(zhì)的合成或是改變寄主的代謝方式化學抗病毒試劑:9-(2-羥二氧)甲基鳥嘌呤,2-硫尿嘧啶,疊氮胸苷,

2,4-氧六氫三氮雜苯(DHT)和類似嘌呤堿基代謝物質(zhì)三氮唑核苷(病毒唑)優(yōu)點:與莖尖培養(yǎng)相結(jié)合,可較容易脫去多種病毒,而且此法對取材要求不嚴,接種莖尖可大于1mm,易于分化出苗,提高成活率缺點:不能脫去所有病毒,尚不能完全抑制病毒使其失活231返回4無病毒植株檢測酶聯(lián)免疫吸附反應(ELISA)分子生物學法脫毒后的無病毒植株須經(jīng)嚴格的病毒鑒定和檢測證明確屬無毒良種種源,并采取嚴密的防病毒重復污染措施才能取得預期效果建立快速,高靈敏度,高通量的病毒檢測體系是病毒害預防和綜合防治的先決條件5展望現(xiàn)有的脫毒技術(shù)多種多樣,各有優(yōu)缺點,目前應用的趨勢是將不同的方法結(jié)合起來,從而阻止植物病毒的擴散如采用莖尖培養(yǎng)和熱處理都不能除去懸鉤子叢矮病毒(RBDV),若熱處后,再采用莖尖玻璃化超低溫保存,存活的植株中35%無該病毒返回7脫毒甘蔗單擊此處添加段落文字內(nèi)容 單擊此處添加段落文字內(nèi)容單擊此處添加段落文字內(nèi)容 單擊此處添加段落文字內(nèi)容返回8脫毒工作室單擊此處添加 單擊此處添加段落文字內(nèi)容 段落文字內(nèi)容文字內(nèi)容 文字內(nèi)容 文字內(nèi)容單擊此處添加 單擊此處添加段落文字內(nèi)容 段落文字內(nèi)容返回10超低溫優(yōu)點無需昂貴儀器或設(shè)備出無毒苗所需時間短植株再生后無毒去除原菌感染存活率,再生率和脫毒率高意義:超低溫保存是種資源長久保存的理想方法,在液氮中亦可保證材料的遺傳穩(wěn)定性.原理:在冰凍和凍融期間,細胞的結(jié)構(gòu)和功能受損嚴重,含有病毒的頂端細胞液泡較大,水分多,易形成冰晶而致死,分生組織含水分少,胞質(zhì)濃,不易被凍死返回11自1952年法國莫勒爾使用生長點培養(yǎng)法獲得無病毒植株后,該種脫毒技術(shù)被

廣泛使用。通過脫毒,使植株恢復種性,增強抗性,生長健壯,光合作用增強,

明顯提高了植株的產(chǎn)量和品質(zhì)。尤其是

該技術(shù)在馬鈴薯和甘薯上的應用,對其

種植逐步走向規(guī)?;瑯藴驶?,區(qū)域化具有重要意義。脫毒技術(shù)的發(fā)展過程與應用返回12莖尖脫毒法指示植物鑒定:a.摩擦接種法b.嫁接法原理:病毒在寄主植物內(nèi)靠維管系統(tǒng)運輸,莖尖分生組織中未形成維管束,所以病毒的運動受阻,所以莖尖組織中不含或只含低濃度病毒依據(jù): 病毒在植物體內(nèi)分布是不均一的,越接近生長點約(0.1-1mm區(qū)域),病毒濃度越稀,因此有可能采用小的莖尖離體培養(yǎng)而脫除植物病毒技術(shù)關(guān)鍵:1.被脫毒植物攜帶病毒的診斷及其在體內(nèi)的分布;2.母體植株的選擇和預處理;3.莖尖的剝離;4.脫毒效果檢測;5.影響脫毒效果的因素返回14脫毒率莖尖脫毒的關(guān)鍵是莖尖大小和脫毒率,脫毒的成功率與所切莖尖分生組織大小成反比,為了提高脫毒率,須切下足夠小莖尖分生組織(0.2~0.5mm)同時其再生能力與分生組織大小成正比席夢利等對宜興百合脫毒培養(yǎng)得出接種

0.3~0

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