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文檔簡介
一、動物實驗設(shè)計的定義動物實驗設(shè)計是指研究者根據(jù)實驗?zāi)康暮鸵?,運用有關(guān)科學知識和原理,結(jié)合統(tǒng)計分析及倫理學的要求而制定的在動物身上進行試驗的實施計劃和方案,并用文字記錄或流程圖表述的實驗方案和技術(shù)路線。動物實驗的結(jié)果能否取得預(yù)期效果、達到研究目的很大程度上取決于研究者動物實驗設(shè)計是否科學、嚴密。1第一頁,共34頁。詞語:公認拼音:gōngrèn解釋:公眾所承認,大家所承認。毛澤東《增強黨的團結(jié),繼承黨的傳統(tǒng)》:“我們黨是一個偉大的、光榮的、正確的黨,這是全世界公認的?!毙爝t《哥德巴赫猜想》:“這篇論文已經(jīng)得到了國際數(shù)學界的公認,譽滿天下?!备鶕?jù)研究課題和目標的不同,動物實驗設(shè)計可以很龐大、復(fù)雜,也可以很小、很簡單。絕大部分研究課題需要研究者進行動物實驗設(shè)計。一些測試、檢驗等的動物實驗方法已經(jīng)被大家公認成為常規(guī),不需要進行動物實驗設(shè)計。2第二頁,共34頁。詞語:結(jié)果拼音:jiē
guǒ解釋:佛教以種樹栽花比喻人的行事,結(jié)果比喻人的歸宿。《壇經(jīng)·付囑品》:“吾本來茲土,傳法救迷情。一花開五葉,結(jié)果自然成?!彼瓮趺髑濉队裾招轮尽肪砣骸胺竵砑殪短煜?,脫禁錮於人間。既往修來,收因結(jié)果。”清紀昀《閱微草堂筆記·灤陽消夏錄五》:“既已種因,終當結(jié)果。”用以指人事的最后結(jié)局?!抖膛陌阁@奇》卷十二:“只為朱晦翁還有一件為著成心上邊硬斷一事,屈了一個下賤婦人,反致得他名聞天子,四海稱揚,得了個好結(jié)果?!薄都t樓夢》第四六回:“你們自以為都有了結(jié)果了,將來都是做姨娘的?!卑徒稹稇涯钍捝骸罚骸捌鋵嵾@是她的一片癡心,結(jié)果只苦了他自己?!背删停怀晒?。清李漁《巧團圓·解紛》:“你看他一貌堂堂,后來不是沒結(jié)果的。”茅盾《陀螺》五:“現(xiàn)在她老人家已經(jīng)把一天工作的結(jié)果分成了六七小堆,等待照例的同時分配,因為孩子們?nèi)碌锰珔柡Γ拖冉o了?!敝^殺死。多見于早期白話。元李文蔚《燕青博魚》第四折:“我們且結(jié)果了那個綁的去,與你拔了這眼中的釘子呢?!薄端疂G傳》第四九回:“他又上上下下都使了財物,早晚間要教包節(jié)級牢里做翻他兩
個,結(jié)果了性命?!濒斞浮秴群啊に帯罚骸奥犝f今天結(jié)果的一個犯人,便是夏家的孩子?!币曛噶侠韱试崾马?。《水滸傳》第二二回:“宋江道:‘這箇容易。我去陳三郎家,買一具棺材與你……我再取十兩銀子與你結(jié)果?!薄都t樓夢》第一○七回:“賈母又道:‘我所剩的東西也有限,等我死了,做結(jié)果我的使用?!眲游飳嶒炘O(shè)計包括三個基本要素:1.處理因素
處理因素是實驗中需進行重點考察的內(nèi)容,處理因素不同,實驗結(jié)果也不同。在整個實驗中處理因素應(yīng)標準化,否則會影響實驗結(jié)果的評價。在一次實驗中處理因素不宜過多,也不應(yīng)過少。過多增加分析的難度,過少則實驗結(jié)果蘊藏的信息量不足。2.受試對象
在動物實驗中,受試對象是實驗動物。根據(jù)研究課題不同,選擇適合本課題研究的動物的種屬、品種品系、年齡、性別(體重)等,確定分組情況、每組的樣本量和受試對象總數(shù)。在一般情況下,應(yīng)優(yōu)先使用標準化實驗動物以保證動物實驗的質(zhì)量。3.實驗效應(yīng)
實驗效應(yīng)是指處理因素作用于受試對象后所起的作用,它通過觀察指標來實現(xiàn)。觀察指標分為主觀指標和客觀指標。為保證實驗數(shù)據(jù)的可靠性和可比性,在選擇指標時應(yīng)盡可能選擇客觀指標,或盡可能將主觀指標轉(zhuǎn)化成客觀指標,并要求有一定的靈敏度和精確性。3第三頁,共34頁。詞語:評價拼音:píngjià解釋:衡量、評定其價值。宋王栐《燕翼詒謀錄》卷五:“今州郡寄居,有丁憂事故數(shù)年不申到者,亦有申部數(shù)年,而部中不曾改正榜示者,吏人公然評價,長貳、郎官為小官時皆嘗有之?!苯鹪脝枴稙殚献吁督稹吩娭唬骸懊髦樵u價敵連城,棄擲泥涂意未平?!鼻妩S六鴻《?;萑珪るs課·牛驢雜稅》:“牛驢牲畜,煙包布花酒麯等稅,交易之所收也,例有牙行經(jīng)紀,評價發(fā)貨。”聶紺弩《<聶紺弩雜文集>序》:“至于它的內(nèi)容,如果真有讀者,將自會領(lǐng)會,自會評價,用不著我自己說什么。”評定的價值。徐朔方《<長生殿>前言》:“吳偉業(yè)要求死后以僧裝下葬,墓碑上不刻任何職名;錢謙益則在死后受到迫害。他們在文學史上應(yīng)該給以適當?shù)脑u價?!蓖跷鲝度说氖澜纭さ谌亦従印罚骸八麧M以為這一次展覽,會使自己的作品得到應(yīng)有的評價和榮譽?!辟徫飼r講價錢?!端问贰る[逸傳上·戚同文》:“﹝宗翼﹞隱而不仕,家無斗粟,怡怡如也,未嘗以貧窶干人。市物不評價,市人知而不欺?!倍?、動物實驗設(shè)計原則(一)對照性原則對照性原則是要求在實驗中設(shè)立可與實驗組比較,用以消除各種無關(guān)因素影響的對照組。對照應(yīng)有可比性:同時同地同條件一個完整實驗除了實驗組外,還應(yīng)包括下列對照組,所有動物應(yīng)根據(jù)隨機原則分配到各組內(nèi)。①
陰性對照組
陰性對照組包括空白對照組、正常對照組和假手術(shù)組,需要根據(jù)實驗的具體情況設(shè)置②
陽性對照組
陽性對照組是用已知的能達到預(yù)期陽性試驗結(jié)果的處理因素作用于動物,其余非處理因素應(yīng)與其它組一致。陽性對照組有2個作用,一是檢驗試驗體系是否正確,如果陽性對照未出現(xiàn)陽性結(jié)果,就應(yīng)該檢查試驗體系的哪個環(huán)節(jié)出現(xiàn)問題;二是以陽性對照作為參照物,比較和評價實驗組的陽性結(jié)果是高于還是低于陽性對照。③
實驗對照組(模型對照組)
實驗對照組是指在研究過程中,給對照組施加部分處理因素,但不是被研究的處理因素。例如:為了研究某種藥物對某一病種或證型的治療作用,常常采用一定的動物模型。對動物模型的處理方法實驗治療組和實驗對照組完全相同,但是治療組給予藥物,而實驗對照組不給藥物。4第四頁,共34頁。④標準對照組在以動物為實驗對照組時,常設(shè)立一個不造模處理的正常對照組,即標準對照組,在與實驗組和治療組同樣的條件和環(huán)境中完全按常規(guī)飼養(yǎng)。例如在老年病研究中,除了設(shè)立老年對照組外,還需設(shè)立一個青年對照組。青年對照組的動物種類、性別與老年對照組和治療組相同,只是月齡小(成年)。在這里,青年對照組相當于標準對照組,其實驗數(shù)據(jù)對于老年對照組(模型對照組)而言,相當于標準值或正常值。有的實驗還可設(shè)自身對照。同一個體身上觀察實驗處理前后某種指標的變化同一動物在施加實驗因素的一側(cè)與不施加實驗因素的另一側(cè)作左右的對照。自體對照可有效減少個體差異對試驗處理反應(yīng)的影響。凡可進行自身對照設(shè)計的實驗應(yīng)盡量加以采用。在藥理學和毒理學試驗中,實驗組還進一步分成多個劑量組,以此觀察不同劑量的量效關(guān)系。不同劑量組也可互視為劑量對照組。5第五頁,共34頁。(二)隨機性原則隨機性原則就是按照機遇均等的原則來進行分組。其目的是使一切干擾因素造成的實驗誤差盡量減少,而不受實驗者主觀因素或其他偏性誤差的影響。隨機化的手段可采用編號卡片抽簽法,隨機數(shù)字表或采用計算器的隨機數(shù)字鍵。(三)重復(fù)性原則重復(fù)性原則是指同一處理要設(shè)置多個樣本數(shù)。重復(fù)的主要作用是估計試驗誤差、降低試驗誤差和增強代表性,提高實驗結(jié)果的精確度,保證實驗結(jié)果能在同一個體或不同個體中穩(wěn)定地重復(fù)出來。6第六頁,共34頁。(四)一致性原則一致性原則是指在實驗中實驗組與對照組除了處理因素不同外,非處理因素基本保證均衡一致。均衡一致是處理因素具有可比性的基礎(chǔ)。非處理因素:實驗對象:動物品系、體重、年齡、性別、實驗條件:飼料和飼養(yǎng)方式、實驗環(huán)境:實驗室溫度、濕度、氣壓、季節(jié)實驗時間:藥品:藥物廠商、批號、純度、劑型、劑量、注射容量和速度、酸堿度、溫度、給藥途徑和給藥順序儀器、設(shè)備:儀器種類、型號、靈敏度、精確度、零點漂移、電壓穩(wěn)定性操作人員:操作步驟熟練程度7第七頁,共34頁。詞語:力戒拼音:lìjiè解釋:極力防止:~驕傲。(五)客觀性原則動物實驗設(shè)計中要力戒主觀偏性干擾,選擇觀察指標時,不用或盡量少用帶主觀成分的指標。結(jié)果判斷要客觀,更不能以主觀的意愿對結(jié)果或數(shù)據(jù)作任意的改動和取舍。如中醫(yī)辨證“氣虛”癥狀為面色晃白,頭暈?zāi)垦#贇鈶醒?,神疲乏力,甚則暈厥。在大小鼠辯證中可用自發(fā)活動儀記錄小鼠的自發(fā)活動情況、舌苔顏色可用拍照和與標準色卡對比記錄,并與正常對照組比較。8第八頁,共34頁。詞語:如何拼音:rúhé解釋:怎樣?!稌虻洹罚骸暗墼唬骸幔杪?,如何?’”宋蘇軾《贈包安靜先生》詩之二:“建茶三十斤,不審味如何?!泵魈祈樦队翁梁钛补吩姡骸岸[生狂態(tài)復(fù)如何?一刺懷中半滅磨?!眲⒋蟀住陡铥湶搴獭吩姡骸安搴屉m多,割禾如何?”奈何。怎么辦。《詩·秦風·晨風》:“如何如何,忘我實多?!薄稘h書·霍光傳》:“光曰:‘昌邑王行昏亂,恐危社稷,如何?’”唐白居易《上陽白發(fā)人》詩:“上陽人,苦最多:少亦苦,老亦苦。少苦老苦兩如何?”奈何。對付,處置?!兑住ば∵^》:“‘飛鳥以兇’,不可如何也?!备吆嘧ⅲ骸安豢扇绾?,無可奈何?!惫簟度绾窝芯吭姼枧c文藝》:“母親要這樣教我們,當然不是我們主觀上所能如何的事?!蹦魏?。亦指對付、處置的辦法?!稘h書·曹參傳》:“相舍后園近吏舍,吏舍日飲歌呼。從吏患之,無如何,乃請參游后園?!鼻逦涸础妒ノ溆洝肪砹骸叭罨葑詾樘┑峦酰崡澴詾猷嵕竿?,兩竝抗,黎王無如何也?!痹趺?;為什么?!蹲髠鳌べ夜辍罚骸皞醇?/p>
死,如何勿重?若愛重傷,則如勿傷?!碧祈n愈《宿龍宮灘》詩:“如何連曉語,一半是思鄉(xiāng)?”宋歐陽修《荷葉》詩:“如何江上
思,偏動越人悲?”表反詰。猶言那又是什么。《左傳·襄公二十三年》:“夫鼠晝伏夜動,不穴於寢廟,畏人故也。今君聞晉之亂而后作焉。寧將事之,非鼠如何?”《公羊傳·宣公六年》:“爾為仁為義,人弒爾君,而復(fù)國不討賊,此非弒君如何?”傳說中的樹名。《神異經(jīng)·南方經(jīng)》:“南方大荒有樹焉,名曰如何,三百歲作華,九百歲作實……金刀剖之則酸,籚刀剖之則辛?!薄短接[》卷九六一引晉顧愷之《啟蒙記》:“如何隨刀而改味?!比?、動物實驗設(shè)計的主要內(nèi)容(一)動物實驗設(shè)計前應(yīng)考慮的問題1.動物福利和動物實驗倫理問題在進行動物實驗設(shè)計前,實驗者必須思考:①這個實驗是否一定要用動物才能達到實驗?zāi)康??是否可用其它試驗方法來代替?②如果實驗必須要在動物身上進行,那么應(yīng)該如何善待動物,在實驗中減輕動物的痛苦和不安?實驗者必須提出令人信服的理由證明這個實驗必須要用動物做,而且在實驗設(shè)計中采取了善待動物和減輕動物痛苦的具體措施,并承諾本動物實驗方法和目的符合人類的道德倫理標準和國際慣例,在動物試驗期間遵守有關(guān)的法規(guī)、實驗動物倫理福利原則和動物實驗室的規(guī)章制度。9第九頁,共34頁。詞語:意外拼音:yìwài解釋:料想不到;意料之外。南朝宋劉義慶《世說新語·賞譽》:“﹝王汝南﹞答對甚有音辭,出濟意外?!彼翁K軾《辭免起居舍人第二狀》:“若驟膺非分之寵,恐別生意外之憂?!鼻宥艦F《九日一草亭時將與天章別感賦》:“秋深雨廉纖,意外晴此日?!卑徒稹盾婇L的心》三:“他這句意外的問話倒把我難住了。”指意料之外的不幸事件?!端螘ぶx述傳》:“如其已致意外,述亦無心獨
存?!泵骱鷳?yīng)麟《少室山房筆叢·九流緒論下》:“太宗以五代文人失職,慮生意外,故厚其廩祿,俾編集諸類書。”魏巍《東方》第四部第十二章:“為了防備意外,大夯首先將郭祥隱蔽在草叢之中。”2.實驗條件問題實驗者必須了解進行本實驗的所有條件是否均已具備,如相應(yīng)的動物設(shè)施、動物來源、儀器設(shè)備、試劑、人員、技術(shù)熟練程度等,這些實驗條件的描述將充分體現(xiàn)在實驗方案中。3.經(jīng)費預(yù)算問題動物實驗是需要經(jīng)費支持的,一般來說,同一課題經(jīng)費不同,所選擇的實驗條件會不同,研究的層次也會不同。本著節(jié)約經(jīng)費的原則,有多少經(jīng)費做多少事情,量入為出。特別注意的是實驗過程中會發(fā)生很多不可預(yù)見的意外,增加額外的經(jīng)費。充分估計到各種情況就能保證實驗方案的順利實施。10第十頁,共34頁。(二)實驗方案的制定一個完整的動物實驗方案應(yīng)包括以下內(nèi)容:1.實驗動物種屬、品種品系、性別、年齡(體重)的選擇2.實驗組數(shù)的確定3.動物實驗分組設(shè)計的基本類型①單組比較設(shè)計②完全隨機化設(shè)計③隨機區(qū)組設(shè)計④配對設(shè)計11第十一頁,共34頁。4.每組樣本量的確定每組的樣本量反映了同一處理的重復(fù)個數(shù)。樣本量過小,抽樣誤差大,不易發(fā)現(xiàn)實際存在的差異,得不出統(tǒng)計學意義的結(jié)論;樣本量過大,不符合動物福利的原則,也浪費人力、物力和財力。一般情況下嚙齒類大小鼠實驗分組每組10-20只,雌雄各半即可滿足統(tǒng)計學分析的要求。大動物如兔、犬和豬的實驗一般每組6-10只。一般來說,各組樣本量相等時,統(tǒng)計效率最高。在實際工作中,因一批動物中個別不均一性而剔出、實驗人員操作技術(shù)不熟練或技術(shù)復(fù)雜、高劑量組因毒性的不確定等而在實驗中致動物死亡等的情況屢有發(fā)生,因而實際使用的動物數(shù)量應(yīng)比理論計算的樣本量要適當增加。12第十二頁,共34頁。詞語:取材拼音:qǔcái解釋:選取材料?!蹲髠鳌る[公五年》:“故講事以度軌量,謂之軌;取材以章物采,謂之物。”《新唐書·五行志一》:“蓋王者之有天下也,順天地以治人,而取材于萬物以足用。若政得其道,而取不過度,則天地順成,萬物茂盛?!焙樯睢蹲罱膫€人的見
解》:“因為我們現(xiàn)在工作的對象是廣東的農(nóng)村大眾;故劇本的取材,需要適合于廣東一般農(nóng)村大眾,在生活體驗中所能理解的事實?!辈枚?。材,通“裁”?!墩撜Z·公冶長》:“子曰:‘道不行,乘桴浮于海。從我者,其由與?’子路聞之喜。子曰:‘由也好勇過我,無所取材。’”朱熹注:“﹝夫子﹞譏其不能裁度事理?!?.實驗處理方法和指標的選定實驗處理包括處理因素、處理時間、次數(shù)、強度(劑量)、途徑等,這些都要在實驗方案中確定下來。動物實驗指標一般包括兩部分:試驗期間活體觀察指標和實驗結(jié)束處死解剖觀察取材測試指標。試驗期間活體觀察指標包括一般觀察、無創(chuàng)傷性測定指標和創(chuàng)傷性測定指標。一般觀察包括動物的精神、行為、營養(yǎng)、被毛、攝食情況、大小便及口鼻耳陰部分泌物等,一般無需驚動動物;無創(chuàng)傷性測定指標包括心電圖、血壓、呼吸、自主活動等測試,有的需要無線遙控設(shè)備。無線遙控無創(chuàng)傷觀察測試可避免干擾動物,減少動物應(yīng)激,因而測試數(shù)據(jù)準確、可靠。創(chuàng)傷性測定指標包括手術(shù)、取血取材等,對動物長期觀察忽多忽少產(chǎn)生影響。實驗設(shè)計時要考慮研究團隊有無技術(shù)基礎(chǔ)和實驗條件,以及評估創(chuàng)傷性試驗對動物試驗的影響。實驗結(jié)束處死解剖觀察取材測試涉及到麻醉、取全血/血漿/血清、臟器稱重、病理組織取材及固定等一系列步驟,可依據(jù)實驗?zāi)康暮蜋z測指標選擇部分或全部進行。13第十三頁,共34頁。詞語:級別拼音:jíbié解釋:等級的區(qū)別。多指工人、軍人、教師和機關(guān)工作人員的等級。楊沫《懷念》:“我們從來沒有什么級別高低之分的念頭。”由于動物實驗幾乎涉及到基礎(chǔ)和臨床各個學科,不同的研究有不同的目的和要求,所用的試驗方法、儀器設(shè)備和指標也各不相同,但無論選擇何種實驗方法,均應(yīng)力求做到以下幾點:(1)可靠性:即方法切實可行、指標穩(wěn)定可靠,是受大家公認的方法,也稱經(jīng)典方法??陀^性:盡量選用儀器設(shè)備檢測,避免主觀描述;能定量的就不要選用定性指標。先進性:當今重大科研成果的出現(xiàn)幾乎都利用了先進的儀器設(shè)備、技術(shù)和檢測指標,將整體動物實驗與細胞水平、分子水平檢測指標結(jié)合起來進行綜合分析。因此充分利用本單位或其它單位的先進儀器設(shè)備為自己的課題服務(wù)對于提升課題的級別,提高試驗質(zhì)量有著重要意義。14第十四頁,共34頁。詞語:以上拼音:yǐshàng解釋:表示品第、數(shù)量、級別、位置等在某一點之上?!斗Y梁傳·僖公二年》:“且夫玩好在耳目之前,而患在一國之后,此中知以上乃能慮之?!薄妒酚洝ど叹袀鳌罚骸懊裼卸幸陨喜环之愓撸镀滟x?!彼侮慁]《耆舊續(xù)聞》卷四:“天禧元年八月敕,自今兩省、諫舍、宗室、將軍以上,許乘狨毛煖座?!比纾喊肷揭陨希壐噶?。表示時代在前的,猶言以前?!蹲髠鳌は骞?/p>
年》:“昔匄之祖,自虞以上為陶唐氏?!鼻謇顫O《閑情偶寄·詞曲·結(jié)構(gòu)》:“豈《西廂》以前,別有跳墻之張珙;《琵琶》以上,另有剪髮之趙五娘乎?”指前面的話或文字。如:以上是我對這個問題的看法;以上寫西湖初夏的景色。6.實驗周期的確定一個動物實驗周期要持續(xù)多長時間取決于實驗?zāi)康暮褪欠衲軓膭游飳嶒炛械玫剿枰脑囼灲Y(jié)果。例如,用兔制作動脈粥樣硬化模型,飼喂高脂、高膽固醇飼料后一個半月,兔的主動脈上可產(chǎn)生肉眼可見粥樣斑塊,表明造模成功。如果此時用藥物干預(yù)治療,還需要再增加4周以上治療時間,總的實驗周期在3個月左右。在實驗設(shè)計中需參照文獻報道或根據(jù)相關(guān)實驗室的經(jīng)驗,或通過預(yù)試驗摸索。15第十五頁,共34頁。(三)藥物劑量的設(shè)計和換算中醫(yī)藥實驗研究中很大一部分是藥效學和毒理學研究,實驗研究結(jié)果的好壞與劑量設(shè)計有很大的關(guān)系。一個療效好的藥物劑量過小可能在實驗中顯示不出藥效,劑量過大可能暴露其毒性作用。因此準確的劑量設(shè)計對試驗的成功起著重要的作用。如果研究的是一種新藥,沒有臨床資料和動物試驗資料,那么只能通過設(shè)置多個劑量進行預(yù)試驗摸索。如果有人的臨床用藥劑量或動物實驗參考劑量,那么可轉(zhuǎn)換成不同動物的等效劑量。研究證明藥物的等效劑量不是與動物的體重成正比的,而是與單位體重體表面積成正比的,因此小動物的等效劑量往往是人的數(shù)倍。16第十六頁,共34頁。詞語:豚鼠拼音:tún
shǔ解釋:小豬和老鼠。喻弱小者。元張養(yǎng)浩《山坡羊·澠池》曲:“秦如狼虎,趙如豚鼠,秦強趙弱非虛語?!辈溉閯游铮眢w像兔而較小,有須,耳短,前肢短,后肢長,無尾,毛白色帶黃色或黑色的斑。亦名天竺鼠,通稱荷蘭豬。種屬小鼠b(0.02)大鼠b(0.150)地鼠b(0.080)豚鼠b(0.4)兔b(1.8)比格犬b(10.0)獼猴b(3.0)成人b(60.0)小鼠a1.000.500.600.3750.250.1500.250.081大鼠a2.001.001.200.750.500.300.500.162地鼠a1.671.201.000.6250.4170.250.4170.135豚鼠a2.671.331.601.000.6670.400.6670.216兔a4.002.002.401.501.000.601.000.324比格犬a(chǎn)6.673.334.002.501.671.001.670.541獼猴a4.002.002.401.501.000.601.000.324人a12.336.177.404.633.081.853.081.00注:引自黃繼漢等,藥理試驗中動物間和動物與人間的等效劑量換算.中國臨床藥理學與治療學.2004,9(9):1069-1072。括號中數(shù)值單位為kg。標準體重動物由動物a到動物b的mg/kg換算系數(shù)17第十七頁,共34頁。中醫(yī)在長期的臨床實踐中,對一般常用中藥的用量積累了豐富的經(jīng)驗,規(guī)定了每味中藥的臨床用量。在實驗研究中,可將人的臨床用量換算成動物的用量?!吨袊幍洹?010年版規(guī)定中藥雄黃的人臨床用量為0.05-0.1g,換算成小鼠的用量是多少?答:按人臨床最高用量0.1g、體重60kg計算,得1.7mg/kg,換算成小鼠用量時查表1人a行小鼠b列的換算系數(shù)為12.33,故小鼠的等效劑量是
1.7mg*12.33=21.0mg/kg。已知某藥20g小鼠用4mg/kg,換算成8kg比格犬的用藥劑量?答:查表1小鼠a行,比格犬b列的換算系數(shù)為0.15,故比格犬的劑量=4×0.15=0.60mg/kg以上換算是在各種動物標準體重情況下進行的。如果動物a和動物b中一種或兩種都不是標準體重,就需要根據(jù)表9-2折算成與標準體重的比率(B=W/W標),再乘以校正系數(shù)。18第十八頁,共34頁。詞語:體重拼音:tǐzhòng解釋:身體的重量。洪深《電影戲劇表演術(shù)》第三章:“基盤的寬狹,與體重的分配,錯綜地變化著,有種種不同的意義?!北?非標準體重動物的校正系數(shù)19B=W/W標校正系數(shù)Sa校正系數(shù)Sb0.30.6691.4940.40.7371.3570.50.7941.2600.60.8431.1860.70.8881.1260.80.9281.0770.90.9651.0361.01.0001.0001.11.0320.9691.21.0630.9411.31.0910.9161.41.1190.8941.51.1450.8741.61.1700.8551.71.1930.8381.81.2160.8221.91.2390.8072.01.2600.7942.21.3010.7692.41.339第十九頁,共34頁。0.747詞語:劑量拼音:jìliàng解釋:猶衡量。宋劉克莊《代陳玄謝啟》:“潤色廟謨,不假丹青之力;劑量人品,尤嚴皂白之分。”調(diào)節(jié)籌劃。明徐渭《賀兵侍江公擢戶書啟》:“蓋國脈所關(guān),既莫重於泉布,而邊儲告匱,久無望於倉箱,必須劑量之才,以設(shè)通融之法?!狈萘俊K翁K軾《東坡志林·梁工說》:“工日治其訣,更增益劑量,其貪婪無厭。”明陳繼儒《讀書鏡》卷七:“人之受用,自有劑量。省嗇淡泊,有久長之理,是可以養(yǎng)壽也?!彼幤返氖褂梅至?。非標準動物的換算:①
非標準動物換算成標準動物:給藥劑量×校正系數(shù)Sa
×換算系數(shù)②標準動物換算成非標準動物:給藥劑量×換算系數(shù)×校正系數(shù)Sb③非標準動物換算成非標準動物:給藥劑量×校正系數(shù)Sa
×換算系數(shù)×校正系數(shù)Sb例3:長期毒性試驗350g大鼠用10mg/kg,換算成8kg比格犬的用藥劑量?
答:查表2,B=W/W標=350/150=2.3,校正系數(shù)Sa=1.301。再查表1大鼠a行,比格犬b列的換算系數(shù)為0.30,故8kg比格犬的劑量=10×1.301×0.30=3.90mg/kg20第二十頁,共34頁。詞語:動物拼音:dòngwù解釋:自然界中生物的一大類,與植物相對。多以有機物為食料,有神經(jīng),有感覺,能運動?!吨芏Y·地官·大司徒》:“辨五地之物生:一曰山林,其動物宜毛物,其植物宜早物?!泵魅~子奇《草木子·觀物》:“動物本諸天,所以頭順天而呼吸以氣;植物本諸地,所以根順地而升降以津?!泵┒堋渡形闯晒Α罚骸叭说降资歉星榈膭游镅健!敝^感動或感化萬物。三國魏嵇康《琴賦》:“其感人動物,蓋亦弘矣?!蹦铣夯垧ā陡呱畟鳌こ獙Аふ摗罚骸肮室詰┣懈腥?,傾誠動物,此其上也?!薄抖Y記·中庸》“唯天下至誠為能化”宋朱熹集注:“誠能動物?!被顒踊蚰軌蚧顒又?。宋蘇舜欽《復(fù)辨》:“象曰‘雷在地中復(fù)’,蓋雷者,陽物也,動物也?!薄吨熳诱Z類》卷六二:“心本是箇動物,不審未發(fā)之前,全是寂然而靜,還是靜中有動意?”第二節(jié)
動物實驗準備與預(yù)實驗一、知識和技術(shù)的準備掌握有關(guān)實驗動物方面的基礎(chǔ)知識掌握有關(guān)動物實驗方法學方面的基本技術(shù)。二、實驗條件的準備準備好實驗儀器、藥品、試劑和實驗動物等,盡可能使實驗手段和實驗方法標準化。應(yīng)注意以下幾個方面問題:1)了解和熟悉進行動物實驗的各項規(guī)章制度,并嚴格遵守這些規(guī)章制度。21第二十一頁,共34頁。詞語:登記拼音:dēngjì解釋:把有關(guān)事項或東西登錄記載在冊籍上。明李頤《條陳海防疏》:“兵部量發(fā)馬價,於密、薊、永三道,每道二萬兩,聽專備前項買馬造器及海防雜辦一應(yīng)必需之物,詳為登記。”《英烈傳》第四五回:“太祖出宮,排駕直到演武場中坐下,即謂起居郎官詹司,從旁登記今日比試勝負於簿上,以便賞罰?!薄抖昴慷弥脂F(xiàn)狀》第九五回:“書吏便一一查點東西登記?!壁w樹理《小二黑結(jié)婚》八:“人家說只要男女本人愿意,就能到區(qū)上登記?!?)進行咨詢和預(yù)約登記,如實申報動物實驗的名稱、課題來源、動物實驗的起止日期、所用動物的品種品系、等級、數(shù)量、年齡、性別等,并說明供試品是否有毒、有害、有感染性或放射性等、實驗的特殊條件和要求,以求得與實驗動物室進行溝通,落實動物到達時間,安排飼養(yǎng)和實驗場所。3)對于有毒、有害、有感染性或放射性的動物實驗,應(yīng)在相應(yīng)的動物實驗設(shè)施設(shè)備內(nèi)進行,并執(zhí)行有關(guān)的規(guī)章制度。4)由于屏障系統(tǒng)管理嚴格,為防止病原微生物的帶入,從屏障系統(tǒng)內(nèi)拿出的動物不允許再進入屏障系統(tǒng),因此動物實驗中所需的儀器設(shè)備需在實驗動物室的指導下經(jīng)消毒后方可帶入屏障系統(tǒng)。22第二十二頁,共34頁。詞語:成功拼音:chénggōng解釋:成就功業(yè)或事業(yè)?!稌び碡暋罚骸坝礤a玄圭,告厥成功?!睗h桓寬《鹽鐵論·結(jié)和》:“黃帝以戰(zhàn)成功,湯武以伐成孝?!薄缎瓦z事》后集:“汪伯彥、黃潛善力主遷幸東南之議,忌宗澤成功,屢沮撓之?!薄段饔斡洝返诹换兀骸癌z羅剎﹞磕頭禮拜道:‘望菩薩饒我夫妻之命,愿將此扇奉承孫叔叔成功去也。’”成就的功業(yè),既成之功。《史記·秦始皇本紀》:“今名號不更,無以稱成
功,傳后世,其議帝號?!北蔽横B道元《水經(jīng)注·鮑丘水》:“於是二府文武之士,感秦國思鄭渠之績,魏人置豹祀之義,乃遐慕仁政,追述成功?!碧扑究請D《太尉瑯玡王公河中生祠碑》:“大寇既逃,鄰封共慶,遽求罷任,本切歸寧,堅避成功,益彰杰操。
”事情獲得預(yù)期結(jié)果。唐顧況《塞上曲》:“酣戰(zhàn)祈成功,于焉罷邊釁。”《古今小說·臨安里錢婆留發(fā)跡》:“已知兩路人馬,都已成功,合兵回杭州城來。”曹禺《日出》第四幕:“這一次買成功了,我主張以后行里再也不冒這樣的險。”成效?!秶Z·吳語》:“夫諺曰:狐埋之,而狐搰之,是以無成功。”宋蘇洵《上皇帝書》:“此所謂用力少而成功多,法無便於此者矣?!鼻尻惪奠鳌独蓾摷o聞》卷一:“道光二十二年,河決開封,公奉命往治,駐工六閲月,糜帑少而成功速,皖豫之民至今德之?!笔斋@。《左傳·襄公四年》:“邊鄙不聳,民狎其野,穡人成功。”《漢書·元帝紀》:“元元之民,勞於耕耘,又亡成功,困於饑饉,亡以相
救。”三、預(yù)實驗預(yù)實驗是實驗者在正式實驗前對實驗方法和條件以及實驗對象磨合為一個整體的過程,是正式實驗前的模擬或者演習,其目的在
于檢查各項準備工作是否完善,人員是否配齊,實驗方法和步驟是否切實可行,技術(shù)是否熟練,儀器設(shè)備是否運行正常,測試指標是否穩(wěn)定可靠,劑量是否設(shè)計合理等,了解實驗結(jié)果與預(yù)期結(jié)果的距離,從而為正式實驗提供補充、修正的意見和經(jīng)驗,是動物實驗必不可少的重要環(huán)節(jié)。預(yù)實驗可有效地避免匆忙進入正式試驗后才發(fā)現(xiàn)很多實驗細節(jié)準備不充分,以至于影響實驗進展的現(xiàn)象。因此,預(yù)實驗不僅不會浪費錢財,而且會有事半功倍的效果,增強正式實驗成功的信心。預(yù)備實驗可使用少量動物進行,實驗方法和觀測指標應(yīng)和正式試驗一樣。但是,預(yù)備實驗的結(jié)果不能歸入正式試驗的最后結(jié)果中一同分析。23第二十三頁,共34頁。詞語:視頻拼音:shìpín解釋:第三節(jié)
動物實驗數(shù)據(jù)收集與處理動物實驗數(shù)據(jù)是指在動物實驗過程中對動物采取某種(或多種)處理的觀察記錄或用物理、化學的方法檢測而獲取的原始資料或數(shù)據(jù)。原始資料還包括照片、圖片和視頻記錄。通過對實驗數(shù)據(jù)的記錄,貯存,分類和整理,可使研究資料系統(tǒng)化,便于后期對實驗數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計處理??梢哉f,實驗數(shù)據(jù)的收集和整理是實驗結(jié)果分析和評判的基礎(chǔ),也是動物實驗最重要的工作內(nèi)容之一。24第二十四頁,共34頁。一、實驗數(shù)據(jù)的記錄與貯存(一)實驗數(shù)據(jù)的記錄設(shè)計記錄實驗數(shù)據(jù)的表格準確記錄實驗數(shù)據(jù)保存儀器設(shè)備自動打印的原始數(shù)據(jù)(二)實驗數(shù)據(jù)的貯存一般記錄的介質(zhì)有實驗專用記錄本(卡)、計算機的硬盤、光盤、U盤等。應(yīng)做好必要的數(shù)據(jù)備份。25第二十五頁,共34頁。詞語:整理拼音:zhěnglǐ解釋:整齊而有條理。漢王符《潛夫論·本訓》:“是故法令刑賞者,乃所以治民事而致整理爾,未足以興大化而升太平也。”《南史·范泰傳》:“博贍不可及之,整理未必愧也。”整頓,使有條理。《敦煌變文集·張義潮變文》:“僕射即令整理隊伍,排比兵
戈,展旗幟,動鳴鼉,縱八陣,騁英雄。”《醒世恒言·兩縣令競義婚孤女》:“次早,趙二便去整理衣褶,準備做新郎?!睂O中山《和平統(tǒng)一化兵為工》:“本大總統(tǒng)這次回來,專在整理廣東?!绷侠?;安排。元無名氏《村樂堂》第三折:“小官同知的便是。有我那大夫人。因奸合毒藥藥丈夫。我告防御大人。誰想防御相公不整理。”明唐順之《與項甌東郡守書》:“愿聞兄之所安,整理民事皆是吾人切實工夫,而兩郡之治如何,并愿聞之?!鼻宄翉?fù)《浮生六記·浪游記快》:“蕓為整理小酒榼。”整治,修理。元關(guān)漢卿《魯齋郎》楔子:“我有把銀壺瓶跌漏了,你與我整理一整理?!薄毒劳ㄑ浴ご薮t生死冤家》:“當時宣崔寧見駕,將這玉觀音教他領(lǐng)去,用心整理。”二、實驗數(shù)據(jù)的檢查與核對三、數(shù)據(jù)缺項與差錯的處理四、實驗數(shù)據(jù)的分類與整理應(yīng)先區(qū)別原始數(shù)據(jù)是數(shù)量性狀資料還是質(zhì)量性狀資料。不同類型的數(shù)據(jù)采用不同的整理方法。(一)數(shù)量性狀資料計數(shù)資料:指用計數(shù)方式而獲得的資料。這類資料每個變量或變數(shù)(variable)必須以整數(shù)表示,在兩個相鄰的整數(shù)間不允許有帶小數(shù)的數(shù)值存在。如產(chǎn)仔數(shù)、成活數(shù)、雌雄數(shù)等。計量資料:指通過直接計量而得來的以數(shù)量為特征的資料,系 用度量衡等計量工具直接測定的。如體重、血壓、肺活量、臟 器重量等。26第二十六頁,共34頁。(二)質(zhì)量性狀資料指一些能觀察到而不能直接測量的性狀資料,又稱屬性性狀資料。如毛色、性別、生死等。對于質(zhì)量性狀資料的分析,必須將質(zhì)量性狀數(shù)量化,其方法有:統(tǒng)計次數(shù)法:根據(jù)動物的某一質(zhì)量性狀的類別統(tǒng)計其次數(shù), 以次數(shù)作為質(zhì)量性狀的數(shù)據(jù)。在分組統(tǒng)計時,可按質(zhì)量性狀 的類別進行分組,再統(tǒng)計各組出現(xiàn)的次數(shù)。評分法:對某一質(zhì)量性狀,因類別不同,分別給予評分或用數(shù)字劃分等級,如動物對某一病原的感染程度,可分為0(免疫)、1(一過性感染)、2(頓挫性感染)、3(致死性感染);病理組織壞死情況可分為:無(-),25%以下壞死(+),25~50%壞死(++),50%~75%壞死(+++),75%以上壞死(++++)。這樣就可將質(zhì)量性狀資料量化,以利進一步統(tǒng)計處理與分析。27第二十七頁,共34頁。詞語:比較拼音:bǐjiào解釋:根據(jù)一定標準,在兩種或兩種以上有某種聯(lián)系的事物間,辨別高下、異同。北齊顏之推《顏氏家訓·省事》:“不顧羞慙,比較材能,斟量功伐?!薄吨熳诱Z類》卷十九:“先看一段,次看二段,將兩段比較,孰得孰失,孰是孰非。”明唐順之《答江五坡提學書》:“比較同異,叅量古今。”魯迅《準風月談·喝茶》:“我們試將享清福、抱秋心的雅人,和破衣粗食的粗人一比較,就明白究竟是誰活得下去?!敝副仍囕^量武藝。宋司馬光《乞罷保甲札子》:“若見充弓手人有勇力武藝衰退,許他人指名比較,若勝於舊者,即令充替?!薄段饔斡洝返谌兀骸叭舨皇俏掖笸蹙粗啬氵@行人,就和比較起來?!逼阎莅鹱印稓w宗圖》第一場:“今逢三、六、九,與眾將校場比較弓馬,中軍聽令!”比照。清馮桂芬《請減蘇松太浮糧疏》:“為蘇松太三屬歲徵浮額積弊太深,請比較近年完數(shù),酌中定額?!迸f時官府征收錢糧、緝拿人犯等,立有期限,至期不能完成,須受責罰,然后再限日完成,稱做“比較”。元無名氏《貨郎旦》第四折:“稟爺,這兩箇名下,欺侵窩脫銀一百多兩,帶累小的們比較,不知替他打了多少?!薄缎咽篮阊浴り懳鍧h硬留合色鞋》:“三日一比較,強得利無可奈何,只得將田產(chǎn)變賣上庫?!泵鳉w有光《遺王都御史書》:“鄉(xiāng)民離農(nóng)畝,日在官府聽候比較,晝夜捶楚,流血成溝?!薄缎咽酪鼍墏鳌返谌兀骸斑@樣人也沒得吃的年成,把那錢糧按了分數(shù),定了期限,三四十板打了比較。”比。用以比較性狀、程度的差別。宋司馬光《二十六日作真率會別用韻》:“座中七叟推年紀,比較前人少幾多。”毛澤東《<農(nóng)村調(diào)查>的序言和跋》:“開調(diào)查會……這是比較什么大學還要高明的學校?!北硎揪哂幸欢ǔ潭取C珴蓶|《論人民民主專政》:“錯誤和挫折教訓了我們,使我們比較地聰明起來了。”魏巍《東方》第五部第十五章:“這時敵我雙方的炮火都比較岑寂?!蔽濉嶒灁?shù)據(jù)的統(tǒng)計學處理與物理、化學試驗可精細定量分析不同,動物是一個非常復(fù)雜的生命體,生命現(xiàn)象的特點是具有變異性(個體之間存在差異)、隨機性(變異不能準確推算)和復(fù)雜性(影響因素眾多,有些是未知的),如一組動物接受同一處理后得到的反應(yīng)數(shù)據(jù)是各不相同的,但大多以平均數(shù)為中心作正態(tài)分布。用常規(guī)的數(shù)學方法不能進行分析,只能依靠生物統(tǒng)計學方法用概率進行分析。生物統(tǒng)計學處理數(shù)據(jù)的方法很多,最常用的統(tǒng)計學方法有:各組間計量資料的比較用方差分析法(F檢驗),各組間計數(shù)資料的比較用卡方檢驗(X2檢驗),通過概率計算得出各組間差異是否具有顯著性意義。一般認為兩組數(shù)據(jù)之間差異概率P≤0.05具有顯著性意義,P≤0.01具有極顯著性意義,表明兩組數(shù)據(jù)之間的差異不是抽樣誤差,而是處理因素作用所致?,F(xiàn)在一般實驗數(shù)據(jù)的統(tǒng)計學處理有專用軟件,如SPSS、SAS、SYSTAT、GraphPad
Prism等。28第二十八頁,共34頁。詞語:結(jié)論拼音:jiélùn解釋:從前提推論出來的判斷,是三段論法結(jié)構(gòu)中的最后一部分。也叫斷案。一般指對人或事物所下的最后論斷。毛澤東《反對本本主義》:“一切結(jié)論產(chǎn)生于調(diào)查情況的末尾,而不是在它的先頭。”第四節(jié)
動物實驗結(jié)果分析及應(yīng)注意的問題一、實驗結(jié)果的分析與解釋建立在真實可靠的事實和數(shù)據(jù)之上科學、合理的解釋不要輕易否定自己在嚴密的實驗設(shè)計和嚴謹認真的實驗操作下做出的實驗結(jié)果和結(jié)論29第二十九頁,共34頁。詞語:共性拼音:gòngxìng解釋:指不同事物所共有的性質(zhì)。與“個性”相對。毛澤東《矛盾論》三:“矛盾的普遍性和矛盾的特殊性的關(guān)系,就是矛盾的共性和個性的關(guān)系?!鼻啬痢痘ǔ恰ずi熖炜盏纳⑽念I(lǐng)域》:“文學是通過個性表現(xiàn)共性的?!倍游飳嶒灲Y(jié)果的評價1.動物實驗結(jié)果的外推動物和人之間的差異可能導致動物試驗結(jié)果并不一定在人身上可以重復(fù)出來,有的甚至是相反的。因此將動物實驗結(jié)果的數(shù)據(jù)簡單外推到其他物種(包括人類)上將可能是不可靠的。在肯定一個實驗結(jié)果時最好采用兩種以上動物進行比較觀察。一般所選的實驗動物中一種為嚙齒類動物,另—種應(yīng)為非嚙類動物。嚙齒類動物選用小鼠或大鼠,非嚙齒類動物選用犬或猴。如一種實驗處理在多種動物身上產(chǎn)生共性結(jié)果,往往用在人身上也會有意義。30第三十頁,共34頁。詞語:反映拼音:fǎnyìng解釋:猶反照;反射。丁玲《韋護》第二章六:“天花板上被那紅色的小沙燈反映出許多畫著大圓形的黑影。”王西彥《風雪》
五:“黃昏雖已來臨,但因雪光的反映,窗外依然很明亮?!北扔靼芽陀^事物的實質(zhì)表現(xiàn)或顯示出來。巴金《文學的作用》:“文學作品是作者對生活理解的反映。”魏巍《壯行集·春天漫筆》:“這次的討論,牽涉很廣。主要反映了兩個問題?!卑亚闆r或意見等向上級轉(zhuǎn)達、報告。周恩來《關(guān)于武漢工作問題》:“尤其嚴重的是,下層群眾的實際情形還不能反映到指導機關(guān)中來?!薄痘ǔ恰?981年第6期:“據(jù)省歌舞團群眾反映,為了那卑劣的目的,他老婆連琴都不彈了?!笨陀^事物所引起的主觀感受和看法。客觀事物作用于人的感官而引起的模寫(攝影、摹本),即反映,亦稱之為映象。人的感覺、知覺、表象、觀念、概念等都是客觀世界的反映,實踐是反映的基礎(chǔ)。艾青《<詩選>自序》:“詩人要忠于自己的感受。所謂感受就是對客觀世界的反映。”2.
謹慎評價近交系動物實驗結(jié)果近交系動物因其遺傳背景清楚,實驗研究結(jié)果數(shù)據(jù)整齊、重復(fù)型好,目前制作的很多突變系疾病動物模型的突變基因大多導入到近交系遺傳背景中。但不同近交品系具有各自不同的敏感特性,在近交系育成過程中所造成的近交衰退與人體的正常生理條件差異很大,因此在某些研究中很難說正確地反映了人體的條件。對近交系動物的實驗結(jié)果評價更要慎重,避免因?qū)嶒灲Y(jié)果的誤導而造成難以想象的后果。31第三十一頁,共34頁。詞語:手段拼音:shǒuduàn解釋:本領(lǐng);技巧。宋蘇軾《與循守周文之書》之二:“鄭君知其俊敏,篤問學,觀所為詩文,非止科場手段也。”《朱子語類》卷一一五:“因舉禪語云:寸鐵可殺人。無殺人手段,則載一車鎗刀,逐件弄過,畢竟無益?!泵鲃⑷粲蕖蹲弥兄尽わ嬍澈蒙屑o略》:“僱倩貧窮官人,在內(nèi)炊爨烹飪,其手段高者,每月工食可須數(shù)兩,而賞賜不與也?!濒斞浮豆适滦戮帯ぱa天》:“伊倒也很佩服這手段的細巧?!睘檫_到某種目的而采取的方法和措施。秦牧《藝海拾貝·核心》:“塑造人物是表達這種中心思想的非常重要的手段?!敝复颂幨浪玫牟徽?shù)姆椒?。清黃鈞宰《金壺浪墨·點將錄》:“一網(wǎng)打盡之法,與黨人碑同一手段?!辈茇独子辍返诙唬骸澳愀赣H對不起我,他用同樣手段把我騙到你們家來,我逃不開,生了沖兒?!卑徒稹逗5膲簟范骸叭澜绲娜硕急凰麄冇们擅畹氖侄纹垓_了。”手面,排場。指處事、用錢大手大腳?!缎咽篮阊浴ざ抛哟喝腴L安》:“便十二分至戚,情不可卻,也有周濟些的;怎當?shù)米哟哼@個大手段,就是熱鍋頭上,灑著一點水,濟得甚事!”《二刻拍案驚奇》卷十二:“這妮子不知高低,輕意應(yīng)承,豈知同父是個殺人不眨眼的漢子?況且手段揮霍,家中空虛,怎能了得這妮子終身?”第五節(jié)
動物實驗研究的局限性一、動物實驗研究僅是生物醫(yī)學研究諸多手
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