微生物標(biāo)本的規(guī)范化采集和送檢-36

質(zhì)

量

就

是

生

命-檢驗(yàn)科科訓(xùn)微生物標(biāo)本的規(guī)范化采集與送檢1肆

學(xué)習(xí)內(nèi)容一、規(guī)范化送檢的重要性和基本原則二、

臨床各類(lèi)標(biāo)本的采集三、培養(yǎng)與涂片結(jié)合的重要性四、微生物常見(jiàn)不合格標(biāo)本情況歸類(lèi)一、規(guī)范化送檢的重要性和基本原則為什么要規(guī)范化送檢?規(guī)范化送檢的重要性監(jiān)測(cè)及預(yù)防醫(yī)院感染

的發(fā)生細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè)與分

析，為臨床抗感染經(jīng)

驗(yàn)性治療提供依據(jù)提供最接近真實(shí)的藥

敏結(jié)果，指導(dǎo)臨床合

理使用抗菌藥物提供快速，準(zhǔn)確的病

原學(xué)診斷321Speamencollectonand

tarspot

in

climicalmcnbiology行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)WS/

T640-2018于2019-6-1實(shí)施MS/T640—2018前言…………………………Ⅱ1范圍………………………12規(guī)范性引用文件

……………13

術(shù)語(yǔ)和定義

………………………………14標(biāo)本采集、轉(zhuǎn)運(yùn)及處理的總原則……………………………25臨床常見(jiàn)標(biāo)本的采集、轉(zhuǎn)運(yùn)及處理

…………………………10參考文獻(xiàn)……………………21本標(biāo)準(zhǔn)是按照

/T1.1—2009給出的規(guī)則起草。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：北京大學(xué)人民醫(yī)院、中日友好醫(yī)院、安激省立醫(yī)院、首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京友誼醫(yī)院、北京醫(yī)院、北京市垂楊柳醫(yī)院。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：王輝、劉飄粉、張正、馬筱玲、蘇建來(lái)、胡云建、寧永忠、王魔娟.人民

共和國(guó)

衛(wèi)

生

行

業(yè)

標(biāo)

準(zhǔn)WST640-2018臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)本的采集和轉(zhuǎn)運(yùn)中華人民共和國(guó)國(guó)家衛(wèi)生健康委員會(huì)

發(fā)布WS2019-06-01實(shí)施2018-12-11發(fā)布ICS

tt

.020c中

華目

次前

言NS/T640—2018如何去規(guī)范采樣檢驗(yàn)?zāi)康牡倪x擇o無(wú)菌體液標(biāo)本、組織標(biāo)本、痰標(biāo)本、支氣管肺泡灌洗液，尿液標(biāo)本

和膿液標(biāo)本等宜同時(shí)選擇標(biāo)本直接涂片染色鏡檢和培養(yǎng)；o

懷疑隱球菌感染的腦脊液標(biāo)本：宜同時(shí)選擇墨汁染色、隱球菌莢膜

多糖抗原檢驗(yàn)和培養(yǎng)；o懷疑分枝桿菌感染的標(biāo)本：宜同時(shí)選擇抗酸染色、分枝桿菌培養(yǎng)和分枝桿菌核酸檢驗(yàn)；o

懷疑厭氧菌感染的標(biāo)本：宜同時(shí)選擇革蘭染色和厭氧培養(yǎng)，不能排

除需氧菌時(shí)，宜同時(shí)做需氧培養(yǎng)；o懷疑諾卡菌感染的標(biāo)本：宜同時(shí)選擇革蘭染色、弱抗酸染色和培

養(yǎng)；o懷疑侵襲性真菌感染的標(biāo)本：宜同時(shí)選10%

KOH壓片、真菌培養(yǎng)和真菌抗原檢驗(yàn)。另可進(jìn)行乳酸酚棉蘭染色或熒光染色等；特定培養(yǎng)宜進(jìn)行慶氧菌的培養(yǎng)。例如：肝膿腫等封朝膿腫，腹膜

炎，腹腔感染和糖尿病足等。解剖部

位適合普通細(xì)菌培養(yǎng)的標(biāo)本不適合普通細(xì)菌培養(yǎng)的標(biāo)本下呼吸道痰

、BALF、保護(hù)性毛刷、氣管內(nèi)抽吸物唾液、口咽分泌物、鼻咽部竇內(nèi)引流物泌尿道中段尿液、直接導(dǎo)尿液、恥骨上膀胱穿刺

尿液、膀胱鏡檢或其它手術(shù)過(guò)程中采集的

尿液、嬰幼兒的尿袋尿液導(dǎo)尿管收集袋中的尿液、導(dǎo)尿管管尖淺表傷口膿抽吸物、真皮下的膿拭子表面拭子或被表面物污染的標(biāo)本深部傷口膿液、壞死組織、或從深部取的組織被表面物污染的標(biāo)本胃腸道新鮮糞便、內(nèi)窺鏡檢時(shí)采集的排泄物、直腸拭子(特定情況下)靜脈血抗微生物藥物使用前從不同靜脈穿刺點(diǎn)采集2～4套血標(biāo)本凝固的血液潰瘍或褥瘡組織、抽吸物被表面物污染的標(biāo)本表1,特定解剖部位中適合/不適合普通細(xì)菌培養(yǎng)的標(biāo)本類(lèi)型適合厭氧菌培養(yǎng)的標(biāo)本不適合厭氧菌培養(yǎng)的標(biāo)本抽取物(用注射器)、支氣管鏡保護(hù)性毛刷痰、BALF、氣管內(nèi)抽吸物、氣管切口分泌物鼻竇(抽取)鼻咽拭子、鼻竇沖洗或拭子不能作為鼻竇炎的病原學(xué)診斷尿液(恥骨上穿刺膀胱尿液)尿液(排出或從導(dǎo)管導(dǎo)出)穹窿穿刺液、輸卵管液或組織(抽吸/活檢標(biāo)

本)、胎盤(pán)組織(通過(guò)剖腹產(chǎn)手術(shù))、宮內(nèi)節(jié)育器(針對(duì)放線菌屬)、前庭大腺分泌物會(huì)陰拭子、宮頸分泌物、

惡

露

、陰道或外陰

分泌物、前列腺液或精液、尿道分泌物培養(yǎng)艱難梭菌的糞便標(biāo)本直腸拭子血液、骨髓、外科(術(shù)中抽取物或組織)眼部標(biāo)本(淚道/結(jié)膜等結(jié)石、房水、前房液

(穿刺)、玻璃體洗液(術(shù)中采集)表2,適合/不適合厭氧菌培養(yǎng)的標(biāo)本類(lèi)型肆標(biāo)本采集原則√

在抗微生物藥物治療之前或者在起始治療后立即采集標(biāo)本，治療

中為評(píng)估治療效果或治療后為評(píng)估結(jié)局可以進(jìn)行相應(yīng)采樣?！虘?yīng)當(dāng)盡快在疾病初發(fā)時(shí)采集首份標(biāo)本?！?/p>

標(biāo)本采集時(shí)應(yīng)嚴(yán)格無(wú)菌操作，減少或避免機(jī)體正常菌群及定植菌

污染√

對(duì)于有多種細(xì)菌定植的部位，宜選擇合適的方法檢驗(yàn)特定的病原

菌，并防止非致病定植菌群的污染?！?/p>

檢驗(yàn)呼吸道病毒宜采用植絨拭子采集鼻咽標(biāo)本。普通拭子標(biāo)本不宜用于厭氧菌培養(yǎng)。√

無(wú)菌體液除了血液標(biāo)本外，其他所有標(biāo)本進(jìn)行厭氧培養(yǎng)前均應(yīng)進(jìn)

行革蘭染色(糞便艱難梭菌培養(yǎng)除外)。肆標(biāo)本采集原則√

體液(例如胸水、滑膜液、心包液和腦脊液)宜放入無(wú)菌管(注意

某些抗凝劑對(duì)一些細(xì)菌有抑制作用，如果使用，則需告知臨床其中的

影響)送檢，也可注入一定量的體液到血培養(yǎng)瓶中進(jìn)行增菌培養(yǎng)；懷

疑細(xì)菌或真菌感染時(shí)，除了血液標(biāo)本之外，

所有無(wú)菌體液標(biāo)本均宜進(jìn)行革蘭染色鏡檢?！掏饪剖中g(shù)標(biāo)本，

宜送液體或組織做涂片和培養(yǎng)，

拭子標(biāo)本僅用于特殊情況。√采集靜脈血時(shí)，

應(yīng)首先采集血培養(yǎng)標(biāo)本，再采集用于其他檢驗(yàn)的標(biāo)

本?！陶婢囵B(yǎng)宜采集深部標(biāo)本或組織標(biāo)本?！?/p>

特殊情況下(如懷疑厭氧菌感染時(shí))可以考慮床旁采樣?！虡?biāo)本采集須符合生物安全規(guī)定。肆標(biāo)本采集的量■

采集足夠量的標(biāo)本用于常規(guī)細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)，當(dāng)送檢標(biāo)本體積不足時(shí)，與臨

床溝通，并根據(jù)醫(yī)囑選擇優(yōu)先檢驗(yàn)項(xiàng)目。-腦脊液標(biāo)本通常

2

mL～5mL;-胸水和腹水10

mL;腹透液

50

mL;-膿液

2

mL～5mL;-BALF10mL～20mL(≥5mL);-羊水、膽汁、關(guān)節(jié)穿刺液、心包液、滑膜液大于

1

mL;-眼前房液大于

0.1mL,-玻璃體洗液大于1

mL。采集足夠量的標(biāo)本用于病毒學(xué)檢驗(yàn)，特別是液體標(biāo)本(如腦脊液和血

液),并嚴(yán)格遵照臨床標(biāo)準(zhǔn)的流程操作。腦脊液標(biāo)本通常

2mL～5mL,血液

3

mL～5

mL;肆標(biāo)本運(yùn)送原則■

用于細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)的標(biāo)本：-

a

)用于普通細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)的標(biāo)本：宜在2

h

內(nèi)送到實(shí)驗(yàn)室。如果轉(zhuǎn)運(yùn)

時(shí)間超過(guò)

2

h,

宜使用轉(zhuǎn)運(yùn)培養(yǎng)基或在冷藏條件下轉(zhuǎn)運(yùn)；

一般而言，

用于細(xì)菌培養(yǎng)的標(biāo)本室溫下保存不能超過(guò)

24

h;血培養(yǎng)標(biāo)本不可以

冷藏轉(zhuǎn)運(yùn)；b)可能分離出對(duì)低溫敏感細(xì)菌的標(biāo)本：采集后不宜冷藏，

如腦脊液、生殖道、眼部、中耳及呼吸道標(biāo)本。對(duì)低溫敏感的細(xì)菌如淋病奈瑟菌、腦膜炎奈瑟菌、流感嗜血桿菌和肺炎鏈球菌。c)標(biāo)本量較少的體液標(biāo)本(<1

mL)

或組織標(biāo)本(<1cm3):宜

在30

min

內(nèi)送到實(shí)驗(yàn)室。大體積的標(biāo)本或采集于保存培養(yǎng)基中的標(biāo)本，可以保存

24

h。d)用于厭氧菌培養(yǎng)的標(biāo)本：在常溫下轉(zhuǎn)運(yùn)，標(biāo)本量較少的標(biāo)本宜在

采集后30

min

內(nèi)送到實(shí)驗(yàn)室，轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程中標(biāo)本盡可能與空氣隔絕。e)

用于真菌培養(yǎng)的標(biāo)本《除頭發(fā)、皮膚和支架宜于燥送檢外),宜

濕潤(rùn)條神下送檢。二、臨床各類(lèi)標(biāo)本的采集肆采集內(nèi)容■血培養(yǎng)操作規(guī)范■導(dǎo)管相關(guān)性血流感染(CRBSI)

的采集■尿液標(biāo)本的采集■痰液標(biāo)本的采集■腦脊液標(biāo)本的采集■胸腹水標(biāo)本的采集■燒傷、傷口拭子、膿液、組織標(biāo)本的采集■眼、耳、鼻、喉分泌物標(biāo)本的采集■糞便標(biāo)本的采集■生殖道標(biāo)本的采集組織標(biāo)本的君集151、菌血癥：■

發(fā)熱

(≥38℃)或低溫(≤36℃)或寒戰(zhàn)■

白細(xì)胞計(jì)數(shù)增多(計(jì)數(shù)>10.0×109/

L,

特別有“核左移”

時(shí))或減少(計(jì)數(shù)<3.0×109/

L);C反應(yīng)蛋白升高，降鈣

素原

(PCT)

升高，1,3-β-D-

葡聚糖

(G試驗(yàn))升高等；■

有皮膚黏膜出血，昏迷，多器官衰竭，休克，血壓降低等

全身感染癥狀體征；■

尤其伴有醫(yī)院獲得性肺炎，留置中心靜脈導(dǎo)管，PICC等血

管導(dǎo)管≥48小時(shí)，或免疫缺陷病人。2、感染性心內(nèi)膜炎：■

凡原因未明的發(fā)熱，持續(xù)在1周以上，伴有心臟雜音或心

臟超聲發(fā)現(xiàn)贅生物■

或原有心臟基礎(chǔ)疾病、人工心臟瓣膜植入患者，均應(yīng)多

次進(jìn)行血培養(yǎng)檢測(cè)。3、導(dǎo)管相關(guān)血流感染血培養(yǎng)采血指征公美式室山16血培養(yǎng)操作規(guī)范■

采血時(shí)間盡可能在患者寒戰(zhàn)開(kāi)始時(shí)，發(fā)熱高峰前30-60分鐘內(nèi)

采血；用抗菌藥物之前或者換藥前采集。

血培養(yǎng)套數(shù)應(yīng)同時(shí)采集3-4套血培養(yǎng)(不同部位)。只有在懷疑

感染性心內(nèi)膜炎或其它血管內(nèi)感染(如導(dǎo)管相關(guān)性感

染)時(shí)，才有必要間隔多次采集血培養(yǎng)。對(duì)于新生兒，采集2瓶?jī)和柩跗浚送瑫r(shí)做尿液和腦脊液培養(yǎng)。肆血培養(yǎng)套數(shù)陽(yáng)性率陽(yáng)性率(%)—

陽(yáng)性率

(

%)96.1580.0074.2660.0040.0020.001套

2套

3套

4套100.00血培養(yǎng)操作規(guī)范■

采血量成人每瓶采血量8mL～10mL,12

歲以下兒童2mL~

5mL,

但不應(yīng)超過(guò)患兒總血量的1%。■采血量順序血量充足的患者先厭氧瓶，再需氧瓶血量不足的患者

先將充足血量注入需氧瓶，再將剩余血液注入

厭氧瓶先需氧瓶，再厭氧瓶肆血液采集和培養(yǎng)瓶接種厭氧瓶需氧瓶佳抽血位置最佳抽血位置兒童瓶通

呢

0

…

…

…

4

心

2◆

血培養(yǎng)采集程序采集血培養(yǎng)標(biāo)本之前首先做好手

衛(wèi)生。靜脈穿刺點(diǎn)選定后，去除

血培養(yǎng)瓶的塑料瓶帽，

切勿打開(kāi)

金屬封口環(huán)和膠塞，

75%乙醇消

毒，自然干燥60s◆

在穿刺前或穿刺期間，防止靜脈

滑動(dòng)，可戴無(wú)菌乳膠手套固定靜脈◆

穿刺點(diǎn)皮膚消毒

采血部位為肘靜

脈，切忌在靜滴抗菌藥物的靜脈

處采血血培養(yǎng)操作規(guī)范21肆血培養(yǎng)操作規(guī)范三步法消毒①75%酒精擦拭靜脈穿刺部位，待干30s

以上②

1%～2%碘酊作用30s

或10%碘伏60s,從穿刺點(diǎn)向外畫(huà)圈消毒至消毒區(qū)

域直徑達(dá)3cm以上③

75%酒精脫碘：對(duì)碘過(guò)敏的患者，用75%酒精消毒60s,待酒精揮發(fā)干

燥后采血。穿刺點(diǎn)消毒后不可再接觸用注射器無(wú)菌穿刺取血后，勿換針頭(如果行第二次穿刺，換針頭),直接

注入血培養(yǎng)瓶。采用真空采血裝置降低污染率血液接種到培養(yǎng)瓶后，輕輕顛倒混勻以防血液凝固完成工作后洗手標(biāo)本運(yùn)送：采血后應(yīng)該立即送檢，如不能立即送檢，

需室溫保存或置35℃~37℃孵箱中，切勿冷藏。自動(dòng)化連續(xù)監(jiān)測(cè)系統(tǒng)雖有允許延遲上機(jī)監(jiān)

測(cè)微生物生長(zhǎng)的原理，還是應(yīng)該盡量減少延遲上機(jī)時(shí)間肆

導(dǎo)管相關(guān)性血流感

(CRBSI)患者帶有血管內(nèi)導(dǎo)管超過(guò)1天，或者拔除導(dǎo)管

未超過(guò)48

小時(shí)，出現(xiàn)發(fā)熱(>

38℃

)、寒戰(zhàn)

或低血壓等全身感染表現(xiàn)，除導(dǎo)管外沒(méi)有其他明確的感染源。肆

導(dǎo)管和血培養(yǎng)如何采集保留導(dǎo)管：需至少采集2套血培養(yǎng)，其中一套

不保留導(dǎo)管：從獨(dú)立的外周靜脈采集2套血培來(lái)自外周靜脈，并做好標(biāo)記；另外一套從導(dǎo)

養(yǎng)，75%酒精清潔導(dǎo)管周?chē)つw，并無(wú)菌操管中心采集，做好標(biāo)記。兩個(gè)來(lái)源的采血時(shí)

作撥除導(dǎo)管，滅菌剪刀剪下導(dǎo)管尖端或是近間必須接近，

一般不超過(guò)5分鐘

心端5cm放進(jìn)無(wú)菌容器當(dāng)中。不導(dǎo)管尖端外周靜脈1外周靜脈2結(jié)果判斷+++CRBSI可能++一一+一培養(yǎng)為金葡菌或念

珠菌、且缺乏其它

感染的證據(jù)則提示可能為CRBSI—+++導(dǎo)管定植菌不是CRBSI導(dǎo)管外周靜脈條件結(jié)果判斷十+CRBSI可能++導(dǎo)管較外周報(bào)陽(yáng)快120分鐘提示為CRBSI導(dǎo)管組菌濃度較外周高5倍不能確定不

是CRBS1喜回。當(dāng)患者出現(xiàn)尿頻、尿急、尿痛、血尿、腎區(qū)疼痛等癥狀，同時(shí)可能伴有寒戰(zhàn)、高熱、白

細(xì)胞計(jì)數(shù)升高，懷疑存在泌尿系感染時(shí)；尿常規(guī)結(jié)果提示泌尿系感染時(shí)；■無(wú)癥狀的患者不建議常規(guī)進(jìn)行尿培養(yǎng)檢測(cè)；■

留置導(dǎo)尿管患者出現(xiàn)發(fā)熱時(shí)。尿培養(yǎng)指征肆

尿液標(biāo)本的采集中段尿(5-10ml)1、

肥皂水或是用清水清洗外陰(成人

和嬰幼兒)2、

指導(dǎo)女性把陰唇分開(kāi)，棄去前段尿

液，用一個(gè)無(wú)菌容器收集中段尿3、

指導(dǎo)男性翻開(kāi)包皮(未割包皮的),

棄去前段尿后收集到無(wú)菌容器4、

尿液培養(yǎng)不得添加防腐劑和消毒劑5

、嬰幼兒用兒科尿液收集袋錄性使用痰杯內(nèi)市為爾康醫(yī)用品銀公習(xí)26肆尿液標(biāo)本的采集對(duì)留置導(dǎo)尿者：◆

夾住導(dǎo)尿管10min-20min,

先75%酒精

消毒導(dǎo)管采集部位，按無(wú)菌操作方法用

注射器穿刺導(dǎo)尿管吸取尿液5-10ml。◆

尿液標(biāo)本不能通過(guò)收集袋引流管口流出

的方式采集◆

帶有留置管的患者48h-72h就會(huì)有定值

菌，且常為多種細(xì)菌。最長(zhǎng)使用時(shí)間為7天，須更換新管。恥骨上膀胱穿刺尿液a)使用皮膚消毒劑消毒臍部至恥骨區(qū)域；b)待消毒劑徹底揮發(fā)后，麻醉穿刺部位(恥骨上2cm或2橫指);c)從膀胱吸取約20mL尿液；d)

無(wú)菌操作將尿液轉(zhuǎn)入無(wú)菌容器內(nèi)送檢。此法適用于做厭氧菌培養(yǎng)和無(wú)法配合而獲得清潔尿的時(shí)候圖5-10

膀胱穿刺采集尿液尿液標(biāo)本的采集建

下呼吸道培養(yǎng)指征■

咳嗽、膿性痰，伴有發(fā)熱，影像學(xué)檢查

出現(xiàn)新的或擴(kuò)大的浸潤(rùn)影；氣道開(kāi)放患

者，出現(xiàn)膿痰或血性痰；考慮下呼吸道

感染患者采集痰液標(biāo)本，同時(shí)送血培養(yǎng)

標(biāo)本。肆痰液標(biāo)本的采集1.咳痰■a)向患者說(shuō)明痰和唾液的區(qū)別；■

b)

帶假牙的患者摘掉假牙；■c)

請(qǐng)患者用清水漱口；■d)

指導(dǎo)患者用力咳出深部痰，勿將唾液和鼻后

分泌物當(dāng)作痰送檢；■e)

立即蓋好蓋子并擰緊，立即送檢；■f)最好選擇晨起漱口后，咳出的深部痰送檢。2.誘導(dǎo)痰■a)

當(dāng)咳嗽無(wú)痰或少痰時(shí)，可采集誘導(dǎo)痰；■b)

患者先刷牙(口腔粘膜、舌頭和牙齦),勿用牙膏；■C)再用無(wú)菌水或生理鹽水漱口；■d)用超聲霧化器，患者吸入3%

NaCl約3mL～5mL;■

注：有氣道高反應(yīng)者慎用高滲NaCl誘導(dǎo)?！?/p>

e)

用無(wú)菌螺帽寬口容器收集誘導(dǎo)痰標(biāo)本。3.

氣管吸引物■

通過(guò)氣管內(nèi)導(dǎo)管收集標(biāo)本。肆痰液標(biāo)本的采集支氣管肺泡灌洗液

(BALF):將支氣管鏡頂端緊密嵌頓在目標(biāo)

支氣管段或亞段開(kāi)口，末端連接無(wú)菌樣本采集杯和負(fù)壓吸引器。經(jīng)操作孔道分5次快速注入總量為60mL～100

mL

的37

℃或室溫滅菌生理鹽水，每次灌入20mL～50

mL生理鹽水后，以合適的負(fù)

壓(推薦小于-100mmHg的負(fù)壓)吸引回收灌洗液，可直接使用標(biāo)本采集器送檢，也可在無(wú)菌操作下吸取10mL～20mLBALF(

≥5mL)到帶螺帽無(wú)菌容器中，立即送檢。注：每次回吸收量不低于灌入量的5%

(總回收率以

≥30%為宜)。若每次的回收率均<5%,

則要及時(shí)停止灌洗以免液體大量潴留

于肺內(nèi)。兒科患者只能灌入(1mL～2

mL)/kg,通常兒童的回

收量不超過(guò)10

mL,

大于10

mL

的兒童標(biāo)本可離心提高陽(yáng)性率。支氣管肺泡灌洗液的采集肆

保護(hù)毛刷和支氣管吸出物的采集◆

支氣管毛刷：

將檢查用毛刷插入支氣管鏡，推進(jìn)毛刷直至推出護(hù)

套，刷取標(biāo)本后將刷子抽回護(hù)套，取出整個(gè)毛刷，用無(wú)菌剪刀將

刷子頭剪下，放入1mL

生理鹽水或乳酸鈉林格溶液中，立即送實(shí)

驗(yàn)室?！?/p>

支氣管吸引物：

通過(guò)支氣管鏡直接抽吸呼吸道較大管道內(nèi)的分泌

物。肆腦脊液培養(yǎng)的指征■臨床出現(xiàn)不明原因的頭痛、發(fā)熱、腦膜刺激征(頸項(xiàng)

強(qiáng)直、克氏征、布氏征陽(yáng)性)、腦神經(jīng)病理征象■腦積水■懷疑分枝桿菌、隱球菌或慢性腦膜炎時(shí)，可能需多次

采集腦脊液標(biāo)本■腦性低鈉血癥等癥狀，懷疑中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染時(shí)應(yīng)送

檢腦脊液培養(yǎng)標(biāo)本，并同時(shí)送檢血培養(yǎng)標(biāo)本■懷疑細(xì)菌性腦膜炎時(shí)，建議同時(shí)送檢2-4套血培養(yǎng)◆

采集方法：臨床醫(yī)師75%酒精消毒局部

皮膚，做腰椎穿刺，收集腦脊液每管2-

5ml送檢，建議同時(shí)開(kāi)“找新型隱球菌”?！?/p>

第一管用于生化學(xué)檢驗(yàn)，第二管用于微

生物學(xué)檢驗(yàn)，第三管用于細(xì)胞學(xué)、分子

核酸檢驗(yàn)。也可直接注入血培養(yǎng)瓶(約

5ml,需氧瓶+厭氧瓶)做培養(yǎng)送檢◆

顱內(nèi)高壓患者必要時(shí)可脫水治療再行穿

刺采集◆

注意：引流液和腦脊液的區(qū)別建腦脊液標(biāo)本的采集◆

胸水、腹水、關(guān)節(jié)液、心包積液、膽汁等無(wú)

菌體液，臨床醫(yī)師局部皮膚消毒后，行穿刺

或外科方式采集體內(nèi)可疑感染部位的體液標(biāo)

本

(胸水、腹水約10ml,

羊

水

、膽汁、關(guān)節(jié)

穿刺液、心包液、滑膜液、玻璃體洗液大于

1ml)

注入無(wú)菌試管立即送檢。眼前房液大

于0.1ml,腹透液50ml?！?/p>

胸、腹水、腹透液可抽取10ml注入血培養(yǎng)瓶

(需氧瓶+厭氧瓶各10ml),混勻后立即送

檢。膿性標(biāo)本除外如懷疑厭氧菌感染，可作床邊接種或?qū)⒆⑸?/p>

器內(nèi)空氣排空，抽取標(biāo)本后，同時(shí)將針頭插

入滅菌膠塞內(nèi)，以防空氣進(jìn)入，并立即送檢胸水、腹水、關(guān)節(jié)液、心包積液、膽汁標(biāo)本的采集皮膚、結(jié)締組織及傷口標(biāo)本a)

閉合性膿腫：消毒皮膚后，用注射器抽取膿腫物，無(wú)菌轉(zhuǎn)移所有抽吸物至厭氧和需

氧轉(zhuǎn)運(yùn)裝置中。b)

開(kāi)放性膿腫：用無(wú)菌生理鹽水或75%酒

精擦拭去除表面分泌物，盡可能采集抽吸物

,或?qū)⒉蓸邮米硬迦胫敛≡畹牡撞炕蚰撃[壁

取其新鮮邊緣部分。c)膿皰或水皰：酒精消毒揮發(fā)后，挑破膿

皰，用拭子收集膿液；較大的膿皰消毒后宜

直接用注射器抽取。陳舊的膿皰，去除損傷

表面，用拭子擦拭損傷基底。肆■■■■燒傷、傷口拭子、膿液的采集■

d)蜂窩織炎液化后宜先注射無(wú)菌生理鹽水隨后抽吸，可以

獲得足量的標(biāo)本進(jìn)行培養(yǎng)。若

患者病情迅速進(jìn)展，或蜂窩織

炎沒(méi)有液化則需要采集組織活

檢標(biāo)本。e)

傷口標(biāo)本：區(qū)分淺表傷口標(biāo)本、深部傷口標(biāo)本及外科手

術(shù)傷口標(biāo)本。宜從感染進(jìn)展的

前緣采集活檢標(biāo)本?；顧z標(biāo)本

和抽吸物(膿液、滲出液)優(yōu)

于拭子標(biāo)本；淺表傷口標(biāo)本不能進(jìn)行厭氧培養(yǎng)。f)燒傷傷口：清潔并清除燒

傷創(chuàng)面，有液體滲出時(shí)，用拭

子擦拭取樣。燒傷的組織宜做定量培養(yǎng)，定量檢驗(yàn)結(jié)果≥1

05

CFU/g則可預(yù)示有可能

進(jìn)展為創(chuàng)傷相關(guān)膿毒癥。g)

潰瘍或褥瘡：用無(wú)菌生理

鹽水或75%酒精擦拭去除表面

分泌物，盡可能采集抽吸物?！?/p>

注意：用拭子采集的標(biāo)本培養(yǎng)和涂片肆

燒傷、傷口拭子、膿液的采集a

)結(jié)膜囊分泌物：將植絨拭子用病原體保存液或無(wú)菌生理鹽水預(yù)濕，由內(nèi)眥部開(kāi)始從

內(nèi)到外旋轉(zhuǎn)輕拭下方結(jié)膜囊和下瞼結(jié)膜表面

(注意內(nèi)眥部),采集后立即接種培養(yǎng)基或立即轉(zhuǎn)運(yùn)；接種后制備涂片，將拭子在載玻

片上自內(nèi)而外滾動(dòng)涂成直徑1.0

cm～1.5cm

的近圓形。b)

角膜及結(jié)膜刮片：由眼科專業(yè)人員采集,角膜刮片推薦用15號(hào)手術(shù)刀片刮取潰瘍基底部、潰瘍進(jìn)行緣或損傷部位，將刮取物

直接接種于培養(yǎng)基；瞼結(jié)膜刮片宜翻轉(zhuǎn)上瞼

暴露瞼結(jié)膜，固定后，垂直刮擦組織。將刮

取物直接涂抹于載玻片上，盡量均勻涂開(kāi)。眼、耳、鼻、喉分泌物標(biāo)本的采集口

□眼、耳、鼻、喉分泌物標(biāo)本的

肆采集■

c)房水及玻璃體液：由眼科

b)結(jié)膜感染時(shí)，即使只有一專業(yè)人員采集，將無(wú)菌注射器

只眼睛感染，也宜對(duì)兩眼的結(jié)中的標(biāo)本直接接種于培養(yǎng)基或

膜取樣，有助于正常定植菌與液體增菌培養(yǎng)基，常規(guī)進(jìn)行苛

致病菌的判斷；養(yǎng)菌、真菌及厭氧菌培養(yǎng)，同■

c)結(jié)膜刮片采樣可在使用不時(shí)直接制片或甩片制片。

含防腐劑的表面麻醉劑后進(jìn)行注釋：

,用于細(xì)菌、真菌、沙眼衣原a)角/結(jié)膜刮取物、前房及玻

體、病毒和阿米巴等培養(yǎng)；分璃體抽吸液量很少，宜在診室

泌物采集不建議使用麻醉藥。或患者床邊采集標(biāo)本后直接接

O種培養(yǎng)皿和制備涂片；眼、耳、鼻、喉分泌物標(biāo)本的

肆采集a)取中耳標(biāo)本時(shí)，若鼓膜完

注釋整，先用肥皂水清潔耳道，再

■

a)

對(duì)復(fù)雜的、反復(fù)的或慢性行鼓膜穿刺術(shù)用注射器抽出中

頑固性中耳炎宜做鼓膜穿刺術(shù)耳內(nèi)液體；■

b)

取中耳標(biāo)本時(shí)，若鼓膜穿

■

b)

中耳滲出液直接涂片革蘭孔，通過(guò)耳鏡用軟桿的采樣拭

染色對(duì)臨床很有幫助。子收集液體(僅限于需氧培養(yǎng))■

c)外耳道：用濕拭子將耳道的碎屑或硬皮除去，用一新拭子在外耳道用力旋轉(zhuǎn)拭子取樣鼻咽拭子：■

a)請(qǐng)患者頭部保持不動(dòng)，去除鼻前孔中表

面的分泌物；■

b)

通過(guò)鼻腔輕輕、緩緩插入拭子至鼻咽部;■

c)當(dāng)遇到阻力后即到達(dá)后鼻咽，停留數(shù)秒

吸取分泌物；■

d)

輕輕旋轉(zhuǎn)取出拭子，置于轉(zhuǎn)運(yùn)培養(yǎng)基中;■

e)用于病毒學(xué)檢驗(yàn)的拭子，將拭子頭浸入

病毒運(yùn)送液，尾部棄去，旋緊管蓋；■

f)

不推薦鼻咽拭子做普通細(xì)菌培養(yǎng)，特殊細(xì)菌除外，如百日咳鮑特菌、腦膜炎奈瑟

菌。

鼻咽拭子不能用于檢驗(yàn)鼻竇炎的病原

菌肆

眼、耳、鼻、喉分泌物標(biāo)本的采集圖

5

-

7

咽拭標(biāo)本的采集方法42口咽拭子■

a)請(qǐng)患者坐下，頭后傾，張

大嘴，去除鼻前孔中表面的

分泌物；■

b)

采樣者用壓舌板固定舌頭

,用滌綸或藻酸鈣拭子越過(guò)

舌根到咽后壁及扁桃體隱窩

、側(cè)壁等處；■

c)反復(fù)擦拭3～5次，收集粘

膜細(xì)胞；■

d)輕輕取出拭子，避免觸及

舌頭、懸垂體、口腔粘膜和

唾液；e)

拭子插回采樣裝置中或適

宜的轉(zhuǎn)運(yùn)裝置量。a)

對(duì)化膿性咽炎，口咽拭子

細(xì)菌培養(yǎng)主要用于篩查A群β-溶血鏈球菌和溶血隱秘桿

菌；■

b)

當(dāng)檢驗(yàn)口咽拭子中的淋病

奈瑟菌時(shí)，臨床需提前告知

實(shí)驗(yàn)室；■

c)對(duì)于兒科患者，宜常規(guī)報(bào)

告流感嗜血桿菌；■

d)

一般情況下，不單獨(dú)選用

咽拭子標(biāo)本診斷上呼吸道感

染，宜與鼻咽拭子或鼻咽吸

取物聯(lián)合檢驗(yàn)以提高呼吸道

感染的病原檢出率。自然排便采集法：

a)將糞便排入干燥清潔的便盆，避免使用坐式馬桶

或蹲式便盆。糞便標(biāo)本中不宜混入尿

液及其它異物，采集過(guò)程盡量無(wú)菌操

作；■

b)用無(wú)菌竹簽挑取標(biāo)本中異常部分

(有粘液、膿液和血液的部分)2

mL~5mL糞便懸液或2g～5g糞便標(biāo)本置于無(wú)菌螺帽容器中，立即送檢。腸

炎和發(fā)熱病人宜同時(shí)送檢血培養(yǎng)；直腸拭子法：對(duì)不易獲取糞便者或嬰

幼兒，可用肛拭采集。用肥皂水將肛

門(mén)周?chē)鍧嵏蓛?，將沾有無(wú)菌生理鹽水的拭子插肛門(mén)成人6～7cm

(兒童約

2～3cm)

處，與直腸粘膜接觸。輕輕

旋轉(zhuǎn)拭子(可見(jiàn)糞使),置運(yùn)送培養(yǎng)

基內(nèi)送檢肆糞便標(biāo)本、直腸拭子的采集■

方法■

a)無(wú)菌棉拭子用生理鹽水濕

潤(rùn)，輕輕地插入肛門(mén)括約肌

上方(約6

cm～7cm),旋

轉(zhuǎn)，取出，置于運(yùn)輸培養(yǎng)基

中，拭子上可見(jiàn)糞便；b)

對(duì)于淋病奈瑟菌培養(yǎng)，采

集肛環(huán)內(nèi)的肛竇部位，盡量

避免糞便污染；c)立即將淋病奈瑟菌培養(yǎng)拭

子置于運(yùn)輸培養(yǎng)基中，或在

患者床邊接種。。送檢原則■

a)嬰兒或重癥患者腹瀉時(shí)且

暫時(shí)沒(méi)有糞便，才可采集直腸

拭子標(biāo)本檢驗(yàn)腹瀉病原菌；■

b)

肛拭子不宜用于腹瀉病原

菌培養(yǎng)；■

c)常規(guī)培養(yǎng)通常針對(duì)沙門(mén)菌

屬和志賀菌屬，國(guó)際上還包括

彎曲菌屬。如果懷疑其他細(xì)菌

感染，宜先咨詢實(shí)驗(yàn)室。肆

糞便標(biāo)本、直腸拭子的采集◆

男性分泌物：采取尿道口溢出的膿性分泌物或用專用拭子插入尿道內(nèi)2厘米取分泌物(懷疑

淋球菌感染)

尿道分泌物革蘭染色查到白細(xì)

胞內(nèi)革蘭陰性雙球菌可作為男性淋病患者的

診斷依據(jù)?！耜幍婪置谖铮河酶Q器擴(kuò)張陰道，用滅菌拭子采

取陰道口內(nèi)4厘米內(nèi)側(cè)壁或者后穹隆分泌物(常規(guī))■宮頸分泌物：

a)

用溫鹽水濕潤(rùn)陰道窺器；■

b)使用陰道窺器輕輕按壓子宮，打開(kāi)窺器，

使用藻酸鈣、滌綸或沒(méi)有毒性的棉拭子采集

分泌物?；蛘叽蜷_(kāi)窺器，

將拭子插入宮頸管1cm～2cm,

轉(zhuǎn)2

圈～3

圈采集分泌物，必要

時(shí)停留20

s～30

s并轉(zhuǎn)動(dòng)取樣。c)

懷疑淋病奈瑟菌時(shí)可以同時(shí)采集直腸拭子馬事宮頸標(biāo)本。翻

生殖道標(biāo)本的采集女

性

骨

盆

正

中

矢

狀

斷Mediansagittalsectionoffemale

pelvisen

九

"

doedoe生殖道分泌物的采樣容器◆

注意：陰道內(nèi)有大量正常菌群存在，采取宮頸標(biāo)標(biāo)本應(yīng)避免觸及陰道

壁?！?/p>

前列腺按摩液：用肥皂和水清洗陰莖頭，經(jīng)直腸前列腺按摩獲取前列腺

液，用無(wú)菌拭子采集前列腺液。標(biāo)本置于無(wú)菌容器內(nèi)送檢。如果床旁涂

片，可提高顯微鏡下革蘭陰性雙球菌的檢出率?！?/p>

精液：受檢者應(yīng)禁欲3-5天，清洗尿道口，采用手淫或體外排精法，置于

無(wú)菌容器內(nèi)及時(shí)送檢肆生殖道標(biāo)本的采集組織標(biāo)本的采集■采集足夠量的組織標(biāo)本，微生物學(xué)檢驗(yàn)所需

的標(biāo)本量≥1cm3為宜?！鲞x擇無(wú)菌保濕容器運(yùn)輸組織(痰杯),用2ml無(wú)菌水或是生理鹽水保濕，特別小塊的組織標(biāo)本宜放在一個(gè)方形濕潤(rùn)的無(wú)菌紗布里

送檢。■組織標(biāo)本厭氧菌培養(yǎng)，選大塊組織送檢。三、培養(yǎng)與涂片結(jié)合的重要性肆論涂片的重要性■建議：培養(yǎng)與涂片同時(shí)送檢，可提高病原培養(yǎng)的陽(yáng)性率，準(zhǔn)確率!!沒(méi)有涂片的培養(yǎng)就是要流氓肆涂片的分析·判斷標(biāo)本是否合格，主要指開(kāi)放性標(biāo)本，如痰、尿及傷口標(biāo)本。根據(jù)

細(xì)胞的種類(lèi)、數(shù)量、細(xì)菌的種類(lèi)以及細(xì)胞與細(xì)菌之間的相關(guān)性，來(lái)判

斷標(biāo)本是否受常居菌群的污染及污染程度。痰標(biāo)本顯微鏡檢查的分類(lèi)痰標(biāo)本鏡檢分類(lèi)：1~3類(lèi)為不合格標(biāo)本，4~5類(lèi)為合格標(biāo)本細(xì)胞數(shù)/低倍視野白細(xì)胞

扁平上皮細(xì)胞>25

<10>25

10~25>25

>2510~25

>25>25分類(lèi)<105432痰液—合格與不合格的外觀比較人民醫(yī)院痰液—不合格標(biāo)本*來(lái)自口腔咽喉的分泌物，主要成分是唾液。含大量上皮細(xì)胞，正常菌群。密成部市第五人民醫(yī)院痰標(biāo)本：白細(xì)胞>25個(gè)/低倍鏡

上皮細(xì)胞<10個(gè)/低倍鏡

可見(jiàn)白細(xì)胞吞噬革蘭陰性桿菌，考慮致病菌痰標(biāo)本：白細(xì)胞<10個(gè)/

低倍鏡上皮細(xì)胞>25個(gè)/

低倍鏡疑似非下呼吸道標(biāo)本論暴與澤片時(shí)送檢的單性抗酸染色籌黛分枝墨汁染色彝鬣隱革蘭染

色霉菌弱抗酸

染色奴卡菌生殖器標(biāo)本革蘭染色淋球菌涂片革蘭染色奴卡菌

G+

細(xì)菌的斑駁染色與形態(tài)異常26

丁香園直播課-盧先雷-成都市第五人民醫(yī)院紋帶棒狀桿菌金黃色

葡萄球菌肺炎

鏈球菌病人為CAP老年患者，'阿奇霉素治療有效優(yōu)勢(shì)菌為肺炎鏈球菌、大腸埃希菌

吞噬菌為卡他莫拉菌：吞噬菌與優(yōu)勢(shì)菌29

丁香園直播課-盧先雷成都市第五人民醫(yī)院丁香園WWW.DXY,CN銅綠感染，氨曲南治療有效

鮑曼定植30

丁香圓直播課-盧先雷-成都市第五人民醫(yī)院肺炎鏈球菌47

丁香園直播課-盧先雷-成都市第五人民醫(yī)院流感嗜血桿菌48丁香園直播課-盧先雷成都市第五人民醫(yī)院丁香園WWW.DXY,CN鮑曼不動(dòng)桿菌60

丁香園直播課-盧先雷-成都市第五人民醫(yī)院丁香園WWW.DXY,CN奴卡菌WS/T

640—2018

臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)樣本的采集和轉(zhuǎn)運(yùn)2018-12-11發(fā)布2019-06-01實(shí)施本標(biāo)準(zhǔn)是按照

GB/T

1.1—2009

給出的規(guī)則起草。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：北京大學(xué)人民醫(yī)院、中日友好醫(yī)院、安徽省立醫(yī)院、首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京友誼醫(yī)院、北京醫(yī)院、北京市垂楊柳醫(yī)院。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：王輝、劉穎梅、張正、馬筱玲、蘇建榮、胡云建、寧永忠、王曉娟。牽失專家；胡必杰、倪語(yǔ)星、

馬小軍、

肖永紅編寫(xiě)專家(按首字母拼音排序)

:鵝紹噬、陳佰義、褚云卓、高曉東、

顧兵、

黃勛、事光輝、李衛(wèi)光、劉思遠(yuǎn)、劉運(yùn)

喜、陸群、盧曉陽(yáng)、

呂媛、孫白鋪、索珊、湯靈玲、王輝、王明費(fèi)、王選錠、吳安

華、徐英春、顏青、前云松、

戰(zhàn)榕、

張衛(wèi)紅、宗志勇中華預(yù)防醫(yī)學(xué)會(huì)醫(yī)院感染控制分會(huì)20

1

7

年

1

月分真符臨

床

微

生

物

標(biāo)

本

規(guī)

范

化

采

集

和

送

檢中

國(guó)

專

家

共

識(shí)08:20

5

100肆

微生物檢查項(xiàng)目微生物申請(qǐng)單

■緊急■尿液培養(yǎng)

特異性T細(xì)胞個(gè)-干擾素釋放實(shí)驗(yàn)■

一般細(xì)菌涂片(革蘭染色法)■找抗酸桿菌(抗酸染色法)■找革蘭氏陰性觀球菌(革蘭染色法-生殖道：■

真菌涂片(革蘭染色法)■細(xì)菌培養(yǎng)(除血液，尿，便，生殖道或器分■生殖道(器)分泌物培養(yǎng)■厭養(yǎng)菌培養(yǎng)(厭氧環(huán)境下的標(biāo)本)

■血培養(yǎng)需氧培養(yǎng)(需氧瓶)■結(jié)核抗體血清學(xué)檢查①檢驗(yàn)申

請(qǐng)單②微生物③標(biāo)本類(lèi)型定位：■

鏈球菌抗原檢測(cè)呼吸道病毒兩項(xiàng)(快速法)■我新型隱球菌(腦脊液墨汁染色法)■支原體培養(yǎng)及藥敏(生殖道或器分泌物)■

大便(肛拭子)培養(yǎng)■血培養(yǎng)厭氧培養(yǎng)(厭氧瓶)診由類(lèi)型關(guān)聯(lián)論郵編碼西醫(yī)

350.900

發(fā)熱姓名：

測(cè)試

性別：

女年齡：

21歲診研述2101042213據(jù)底路行車(chē)省(1)備注

ID

碼野診根提巨原靠深指(空)門(mén)診號(hào)：四、微生物常見(jiàn)不合格標(biāo)本情況歸類(lèi)一、標(biāo)本不合格1、

條碼上的標(biāo)本類(lèi)型和容器里裝的標(biāo)本不一致，有時(shí)候?qū)懙檬恰疤怠?送的是“尿”2、

送檢容器不規(guī)范，容器必須是無(wú)菌的3、

條碼貼錯(cuò)地方4、血培養(yǎng)抽血量不足(成人8-10ml/

瓶，小兒1-

5ml),血培養(yǎng)存在凝固現(xiàn)象，抽好后要及

時(shí)搖勻。5、

從口腔采集標(biāo)本如痰或是咽拭子之前沒(méi)有漱

口，經(jīng)常送口水當(dāng)痰6、

某些科室成人血培養(yǎng)沒(méi)有雙瓶送檢肆