自動(dòng)生化分析技術(shù)課件

自動(dòng)生化分析技術(shù)1自動(dòng)生化分析技術(shù)是指將生物化學(xué)分析過(guò)程中的取樣、加試劑、去干擾、混合、保溫反應(yīng)、自動(dòng)檢測(cè)、結(jié)果計(jì)算、數(shù)據(jù)處理和打印報(bào)告，以及實(shí)驗(yàn)后的清洗等步驟自動(dòng)化的分析檢測(cè)技術(shù)。特點(diǎn)靈敏準(zhǔn)確快速節(jié)約標(biāo)準(zhǔn)化2自動(dòng)生化分析儀種類繁多，根據(jù)不同分類標(biāo)準(zhǔn)，可分成不同的種類。第一節(jié) 自動(dòng)生化分析儀3456根據(jù)儀器的功能及復(fù)雜程度小型自動(dòng)生化分析儀中型自動(dòng)生化分析儀

大型自動(dòng)生化分析儀

超大型自動(dòng)生化分析儀7根據(jù)同時(shí)可測(cè)定項(xiàng)目數(shù)量單通道多通道封閉系統(tǒng)根據(jù)開(kāi)放程度開(kāi)放系統(tǒng)8第二節(jié) 半自動(dòng)生化分析儀9一、結(jié)構(gòu)特點(diǎn)與設(shè)計(jì)原理特點(diǎn)：體積小，結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，靈活性大，價(jià)格便宜；一般不受試劑、方法的限制。工作原理：連續(xù)流動(dòng)式分析，其流動(dòng)管道中的特定位置有一微型比色杯稱為流動(dòng)比色杯，無(wú)不同比色杯之間的吸光度差異。二、分析儀性能評(píng)價(jià)鍵盤

顯示器多功能軟件參數(shù)設(shè)置全自動(dòng)方式波長(zhǎng)選擇結(jié)果存儲(chǔ)測(cè)試方法類型質(zhì)控恒溫裝置微量流動(dòng)比色杯比路式泵結(jié)果打印10三、操作程序及注意事項(xiàng)開(kāi)機(jī)前的準(zhǔn)備工作開(kāi)啟儀器沖洗流動(dòng)比色池設(shè)定儀器系統(tǒng)參數(shù)設(shè)定質(zhì)控參數(shù)設(shè)定試驗(yàn)參數(shù)進(jìn)行試驗(yàn)操作打印分析結(jié)果11注意事項(xiàng)：由于檢測(cè)所加試劑及樣品量都很少，要特別注意取樣和加試劑的準(zhǔn)確性；使用過(guò)程中，嚴(yán)禁吸入強(qiáng)酸試劑；每次使用完畢，必須用蒸餾水沖洗比色杯和管道；應(yīng)用連續(xù)檢測(cè)法檢測(cè)時(shí)，非線性反應(yīng)不得超過(guò)所定范圍（<10%）；12做酶動(dòng)力學(xué)檢測(cè)時(shí)，要特別注意起始的吸光度值，應(yīng)注意每次試驗(yàn)檢測(cè)試劑空白；如反復(fù)多次吸入蒸餾水后，不能調(diào)整零點(diǎn)或吸光度不穩(wěn)，應(yīng)使用清潔液浸泡比色池后再用水清洗；儀器若長(zhǎng)時(shí)間不使用，應(yīng)在一個(gè)月內(nèi)至少通電一次。13四、保養(yǎng)和維護(hù)141.日常保養(yǎng)：每天工作結(jié)束之前進(jìn)行的儀器保養(yǎng)拔去電源插頭后，用微濕的抹布輕抹儀器的外殼，注意不要讓水滴入儀器；檢查打印機(jī)的電纜線是否接上，打印紙是否足夠第二天使用；將廢液瓶中液體倒掉并進(jìn)行清洗；按儀器規(guī)定要求用清潔劑和蒸餾水依次清洗管道及比色杯，2.定期維護(hù)：吸光度的調(diào)零檢測(cè)或儀器部件的檢查與更新。第三節(jié) 全自動(dòng)生化分析儀一、分立式分析儀目前臨床實(shí)驗(yàn)室所用的大部分分析儀都屬于分立式，具有結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、檢測(cè)速度快等優(yōu)點(diǎn)。日立7180型分析儀15分立式自動(dòng)生化分析儀是按手工操作的方式編排程序，并以有序的機(jī)械操作代替手工操作，用加樣探針將樣品加入各自的反應(yīng)杯中，試劑探針按一定時(shí)間自動(dòng)定量加入試劑，經(jīng)攪拌器充分混勻后，在一定條件下反應(yīng)，反應(yīng)后進(jìn)行比色測(cè)定。各環(huán)節(jié)用傳送帶連接，按順序依次操作。16吸樣加入第一試劑攪拌保溫測(cè)試杯空白清洗反應(yīng)杯數(shù)據(jù)處理打印結(jié)果比色分析加入第二試劑攪拌保溫全自動(dòng)生化分析儀工作流程圖17分立式自動(dòng)生化分析儀的結(jié)構(gòu)包括：樣品盤（架）、取樣裝置、試劑室（瓶）、取液裝置、反應(yīng)盤、混勻裝置、溫控裝置、光學(xué)監(jiān)測(cè)系統(tǒng)、清洗系統(tǒng)和計(jì)算機(jī)控制系統(tǒng)等。試劑盤1試劑盤2試劑針2試劑針1樣品針樣品盤反應(yīng)盤攪拌器清洗裝置181.樣品盤或樣品架樣品盤：放置一定數(shù)量的樣品，通過(guò)樣品盤的轉(zhuǎn)動(dòng)來(lái)控制不同樣品的進(jìn)樣。樣品架：由步進(jìn)馬達(dá)控制移動(dòng)，以樣品架上的條形碼或底部編碼孔識(shí)別樣品架及樣品位置號(hào)。傳送條帶狀樣品架19圓盤狀樣品架2.取樣裝置：由注射器、步進(jìn)馬達(dá)或傳動(dòng)泵、加樣臂和樣品探針等組成，能定量吸取樣品并加入到反應(yīng)杯中。取樣容量：一般2μl-35μl，步進(jìn)0.1μl不等交叉污染：在吸取不同樣品時(shí)可產(chǎn)生攜帶交叉污染防止措施：對(duì)樣品針內(nèi)外壁進(jìn)行水沖洗特殊功能：液面感應(yīng)：取樣針尖上設(shè)有電子感應(yīng)器防碰撞裝置：遇到阻礙時(shí)取樣針立即停止運(yùn)動(dòng)并報(bào)警阻塞報(bào)警：某些取樣針有20213.試劑室：存儲(chǔ)試劑，大多數(shù)試劑室具有冷藏裝置，條形碼檢測(cè)系統(tǒng)。試劑轉(zhuǎn)盤式：放置一定形狀試劑瓶，數(shù)量不等，試劑盤轉(zhuǎn)動(dòng)可使某個(gè)試劑瓶到達(dá)特定的試劑吸取位置。試劑架形式：放置大容量任意形狀的試劑瓶，由每個(gè)試劑瓶?jī)?nèi)引出一條試劑管路及其噴嘴，不同試劑間無(wú)交叉污染22①③試劑②④條碼閱讀器23試劑室4.取液裝置：用于定量吸取試劑加入反應(yīng)杯。取試劑量：一般為20-380μl，步進(jìn)1-5μl不等交叉污染：吸取不同樣品時(shí)可產(chǎn)生攜帶交叉污染防止措施：對(duì)樣品針內(nèi)外壁進(jìn)行水沖洗特殊功能：液面感應(yīng)

防碰撞裝置預(yù)熱試劑245.反應(yīng)盤：由100只或更多的反應(yīng)杯圍成一圈組成，有的分析儀具有兩圈反應(yīng)杯反應(yīng)盤作恒速圓周運(yùn)動(dòng)，轉(zhuǎn)動(dòng)到某些特定位置時(shí)短暫停止，在反應(yīng)杯中加入樣品、試劑或進(jìn)行攪拌混勻反應(yīng)杯：是樣品與試劑進(jìn)行化學(xué)反應(yīng)的場(chǎng)所由透光性好的硬質(zhì)玻璃或石英玻璃制成25266.混勻裝置：反應(yīng)杯里的樣品與試劑需要混勻混勻方式：攪拌混勻：用攪拌棒，多數(shù)超聲混勻：可杜絕攜帶污染，極大程度較少泡沫產(chǎn)生攪拌棒攪拌棒形狀：扁平棒狀或扁平螺旋狀，表面疏水材料工作方式：旋轉(zhuǎn)式攪拌震動(dòng)攪拌防交叉污染：水洗27287.恒溫裝置：反應(yīng)杯需浸浴在恒溫環(huán)境中，一般固定在37℃，溫度波動(dòng)不能大于±0.1℃。溫浴方式：空氣浴恒溫：升溫速度快，不穩(wěn)定，受環(huán)境溫度影響大。水浴循環(huán)恒溫式：溫度穩(wěn)定，需加防腐劑保持水潔凈，并要定期更換循環(huán)水。恒溫液循環(huán)間接加熱式：兼具空氣和水浴的優(yōu)點(diǎn)，用一種無(wú)污染、惰性的不蒸發(fā)液體，用很小的縫隙的空氣把比色杯與恒溫液隔開(kāi)。29308.清洗系統(tǒng)樣品針、試劑針和攪拌棒的隨時(shí)清洗在用于下一個(gè)樣品、試劑或反應(yīng)杯前需清洗一次，多數(shù)為去離子水沖洗反應(yīng)杯的隨時(shí)清洗多數(shù)全自動(dòng)生化分析儀具有反應(yīng)杯清洗裝置

一個(gè)反應(yīng)杯內(nèi)的化學(xué)反應(yīng)和吸光度檢測(cè)結(jié)束后該反應(yīng)杯就被沖洗系統(tǒng)及時(shí)沖洗沖洗過(guò)程：吸液針吸去廢液→排液針注入清洗液1（堿性）→吸去廢液→水洗并吸干→注入清洗液2（酸性）→吸去廢液→水洗并吸干→擦干→吸光度檢查3132反應(yīng)杯清洗裝置339.光學(xué)監(jiān)測(cè)系統(tǒng)：由光源、單色器和信號(hào)檢測(cè)器組成（1）光源：一般采用鹵素?zé)艋蝠逕?，?dāng)燈的發(fā)光強(qiáng)度不夠時(shí)，儀器會(huì)自動(dòng)報(bào)警，應(yīng)及時(shí)更換。（2）單色器：多采用光柵分光，常在340-800nm范圍內(nèi)設(shè)10-12種固定的單色光分光方式：前分光：光源→分光元件→單色光→反應(yīng)液→檢測(cè)器后分光：光源→反應(yīng)液→分光元件→單色光→檢測(cè)器分光后取多個(gè)固定單色光同時(shí)通過(guò)各自的信號(hào)傳送通路傳輸?shù)綄?duì)應(yīng)的信號(hào)檢測(cè)器優(yōu)點(diǎn)：?jiǎn)紊髦袥](méi)有轉(zhuǎn)動(dòng)部分提高了檢測(cè)精確到和速度后分光的特點(diǎn)：（1）不需移動(dòng)儀器光學(xué)系統(tǒng)中的任何部件?？赏瑫r(shí)選用雙波長(zhǎng)或多波長(zhǎng)進(jìn)行測(cè)定，這樣可降低比色的噪聲。提高分析的精確度和減少故障率3435（3）信號(hào)檢測(cè)系統(tǒng)光信號(hào)→光敏二極管→電信號(hào)→放大電路→模數(shù)轉(zhuǎn)換電路→數(shù)字信號(hào)→微處理器按各測(cè)定項(xiàng)目的分析參數(shù)選擇其波長(zhǎng)的吸光度值可選擇1或2個(gè)波長(zhǎng)36數(shù)據(jù)管理37結(jié)果打印和計(jì)算恒溫調(diào)控沖洗控制儀器故障的報(bào)警樣品和試劑識(shí)別10.計(jì)算機(jī)系統(tǒng)二、干片式分析儀38應(yīng)用干化學(xué)技術(shù)將測(cè)定一個(gè)項(xiàng)目所需要的試劑固定在待定載體上，成為干片試劑。測(cè)定方式：在干片試劑上滴加液態(tài)樣品，載體上試劑溶解并與樣品中待測(cè)成分發(fā)生反應(yīng)，測(cè)定檢測(cè)信號(hào)的反射光強(qiáng)度“干化學(xué)”技術(shù)是相對(duì)于經(jīng)典的“濕化學(xué)”而言，實(shí)際上干化學(xué)也是在一定潮濕狀態(tài)下的化學(xué)反應(yīng)干片式分析儀與配套試劑組成一個(gè)檢測(cè)系統(tǒng)包括：血糖儀血氨測(cè)定儀尿液化學(xué)分析儀全自動(dòng)干化學(xué)分析儀：急診化驗(yàn)室常用優(yōu)點(diǎn)：體積小、操作簡(jiǎn)便。標(biāo)本用量少、檢測(cè)結(jié)果快速、準(zhǔn)確缺點(diǎn)：成本偏高39根據(jù)試劑載體的復(fù)雜程度可將干化學(xué)分析技術(shù)分為雙層膜法和多層膜法，專用小型生化分析儀使用的試紙條為雙層膜法，大型全自動(dòng)生化分析儀的干片為多層膜法。多層膜法是目前生化檢驗(yàn)中最具代表性的干化學(xué)法。多層膜法干片試劑的結(jié)構(gòu)從上到下共有四個(gè)指示劑層入射光 反射光功能層，依次為擴(kuò)散層、試劑層、顯色劑層、和支持層。擴(kuò)散層試劑層支持層40擴(kuò)散層：快速吸附液體樣品并使之迅速。均勻地滲透，阻擋固體物質(zhì)和大分子物質(zhì)進(jìn)入試劑層，同時(shí)為反射光檢測(cè)提供反射背景。試劑層：根據(jù)實(shí)際測(cè)定的需要，由數(shù)個(gè)至數(shù)十個(gè)功能試劑層組成。實(shí)現(xiàn)試劑與待測(cè)物質(zhì)進(jìn)行化學(xué)反應(yīng)。指示劑層：包含染料或相似的指示劑，使反應(yīng)產(chǎn)物到達(dá)指示劑成后生成了有色化合物，其顏色變化與分析物濃度成比例。支持層：由透明塑料制成，起支持其他層的作用，且允許光線百分之百透過(guò)。41三、離心式分析儀42運(yùn)行特點(diǎn)：樣品和試劑分別置于轉(zhuǎn)盤中各自相應(yīng)的凹槽內(nèi)，樣品在外側(cè)，試劑在內(nèi)側(cè)，離心使內(nèi)側(cè)試劑受離心力甩向外側(cè)凹槽內(nèi)，與樣品相互混合發(fā)生反應(yīng)，最后流入轉(zhuǎn)盤外圈的比色凹槽內(nèi)由比色計(jì)檢測(cè)。分析過(guò)程中，樣品與試劑的混合、反應(yīng)和檢測(cè)等每一步驟幾乎都是同時(shí)完成，故又稱“同步分析”。缺點(diǎn)：同一個(gè)離心盤一般只能同時(shí)分析一個(gè)項(xiàng)目反應(yīng)盤無(wú)自動(dòng)清洗功能分析速度慢離心式生化分析儀工作原理示意圖43四、連續(xù)流動(dòng)式分析儀測(cè)定項(xiàng)目相同的各待測(cè)樣品與試劑混合后的化學(xué)反應(yīng)，均在同一管道中經(jīng)流動(dòng)過(guò)程完成，又稱管道式分析儀。單通道管道式自動(dòng)分析儀結(jié)構(gòu)示意圖44第四節(jié) 自動(dòng)生化分析方法和校準(zhǔn)45一、自動(dòng)生化分析的方法用自動(dòng)生化分析儀進(jìn)行的生物化學(xué)物質(zhì)檢測(cè)的方法稱自動(dòng)生化分析方法。1.終點(diǎn)法：被測(cè)物質(zhì)經(jīng)過(guò)一定反應(yīng)時(shí)間后，當(dāng)反應(yīng)達(dá)到平衡時(shí)測(cè)定吸光度，根據(jù)終點(diǎn)吸光度大小求出被測(cè)物濃度，稱為終點(diǎn)法。包括一點(diǎn)終點(diǎn)法和兩點(diǎn)終點(diǎn)法。（1）一點(diǎn)終點(diǎn)法：指加入標(biāo)本和試劑后，當(dāng)反應(yīng)達(dá)到一定階段時(shí)（或終點(diǎn)）測(cè)定吸光度值計(jì)算待測(cè)物質(zhì)濃度的方法。主要用于總蛋白、白蛋白、血糖、甘油三酯和膽固醇等項(xiàng)目測(cè)定。計(jì)算公式：CU=（待測(cè)吸光度AU-試劑空白吸光度

AB）×K,K為校正系數(shù)。吸光度時(shí)間吸光度一點(diǎn)終點(diǎn)法反應(yīng)曲線時(shí)間46（2）兩點(diǎn)終點(diǎn)法：主要用于雙試劑分析中，在第二試劑加入以前，選擇某一點(diǎn)讀取吸光度A1，相當(dāng)于樣品空白。追加第二試劑，反應(yīng)到達(dá)終點(diǎn)后選擇第二個(gè)點(diǎn)，讀取吸光度A2，兩點(diǎn)吸光度之差用于計(jì)算結(jié)果，稱兩點(diǎn)終點(diǎn)法。二點(diǎn)法又稱為二點(diǎn)終點(diǎn)法，使用雙試劑進(jìn)行分析時(shí)多采用二點(diǎn)法主要用于總膽紅素、直接膽紅素、甘油三酯和膽固醇等項(xiàng)目測(cè)定。計(jì)算公式：CU=（待測(cè)吸光度A1-待測(cè)吸光度A2）×K能有效地消除溶血、黃疸和脂濁等樣品本身光吸收造成的干擾。兩點(diǎn)終點(diǎn)法反應(yīng)曲線47兩點(diǎn)終點(diǎn)法的意義：一定條件下可降低樣品對(duì)反應(yīng)或反應(yīng)本身的特異性于擾(主要指色度干擾溶血（hemolysis）、黃疸（icterus）和脂濁（lipo-turbid）)。常采用雙試劑，多以加R2前某一點(diǎn)作測(cè)定始點(diǎn)；某些情況下，也可以加R2后一點(diǎn)作測(cè)定始點(diǎn)。482.固定時(shí)間法：指在時(shí)間-吸光度曲線上選擇兩個(gè)測(cè)光點(diǎn)，此兩點(diǎn)既非反應(yīng)初始吸光度亦非終點(diǎn)吸光度，這兩點(diǎn)的吸光度差值用于結(jié)果計(jì)算，稱為固定時(shí)間法（fixed-time essay），其計(jì)算公式與兩點(diǎn)終點(diǎn)法相同，為CU=(A2-A1)×K。主要用于Jaffe法測(cè)定肌酐。A1A2吸光度時(shí)間A1A2吸光度時(shí)間固定時(shí)間法反應(yīng)曲線49固定時(shí)間法與兩點(diǎn)終點(diǎn)法的區(qū)別只是在：50測(cè)定讀數(shù)的末點(diǎn)不在反應(yīng)平衡區(qū)段，而是根據(jù)方法學(xué)選擇。如血清肌酐(苦味酸法)測(cè)定?？辔端岱y(cè)定肌酐，反應(yīng)的最初30s內(nèi)，血清中快反應(yīng)干擾物（如微生物、丙酮酸、乙酰乙酸等）能與堿性苦味酸反應(yīng)；在第二個(gè)30s時(shí)堿性苦味酸主要與肌酐反應(yīng)，且此段時(shí)間－吸光度曲線的線性較好（故也可用連續(xù)監(jiān)測(cè)法測(cè)定肌酐）；在80～120s及其以后，堿性苦味可與蛋白質(zhì)以及其它慢反應(yīng)干擾物反應(yīng)。3.連續(xù)監(jiān)測(cè)法：根據(jù)酶促反應(yīng)的特點(diǎn)，當(dāng)?shù)孜餄舛茸銐虼髸r(shí)，當(dāng)酶促反應(yīng)達(dá)到最大時(shí)，單位時(shí)間內(nèi)底物的消耗量和產(chǎn)物的生成量維特不變，即單位時(shí)間內(nèi)吸光度變化值不變，在酶促反應(yīng)的零級(jí)反應(yīng)區(qū)內(nèi)選取兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)，計(jì)算出出每分鐘吸光度變化，吸光度變化值同酶活性大小成正比。速率A法常應(yīng)用于酶活性的測(cè)定。K算公式：CU=ΔA/min計(jì)

×R51吸光度時(shí)間單試劑連續(xù)監(jiān)測(cè)法雙試劑連續(xù)監(jiān)測(cè)法連續(xù)監(jiān)測(cè)法反應(yīng)曲線52二、自動(dòng)生化分析儀的校準(zhǔn)53生化分析儀應(yīng)定期進(jìn)行校準(zhǔn)（定標(biāo)），使儀器性能狀態(tài)符合儀器的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。1.用校準(zhǔn)品進(jìn)行校準(zhǔn)用儀器廠商配套的試劑及校準(zhǔn)品進(jìn)行相應(yīng)測(cè)定項(xiàng)目的校準(zhǔn)，參考操作手冊(cè)，執(zhí)行校準(zhǔn)程序，當(dāng)已知濃度的校準(zhǔn)品吸光度測(cè)出后，儀器會(huì)自動(dòng)計(jì)算出校準(zhǔn)常數(shù)K，存儲(chǔ)于計(jì)算機(jī)中，供樣品測(cè)定時(shí)計(jì)算用。用校準(zhǔn)品進(jìn)行校準(zhǔn)應(yīng)注意：①選擇合適的校準(zhǔn)品，以保證檢測(cè)結(jié)果的可溯源性②根據(jù)試驗(yàn)項(xiàng)目確定校準(zhǔn)的頻度，但每6個(gè)月至少進(jìn)行一次校準(zhǔn)；③室內(nèi)質(zhì)控出現(xiàn)異常的趨勢(shì)或者偏移時(shí)的項(xiàng)目應(yīng)重新校準(zhǔn)；④注意區(qū)別定值質(zhì)控血清和校準(zhǔn)品，絕不可用定值質(zhì)控血清代替校準(zhǔn)品進(jìn)行校準(zhǔn)校準(zhǔn)方法可采用兩點(diǎn)或多點(diǎn)校準(zhǔn)。542.用實(shí)際K值進(jìn)行校準(zhǔn)多用于酶活性測(cè)定中，因酶活性尚無(wú)公認(rèn)的校準(zhǔn)品可用，因而根據(jù)酶活性的國(guó)際單位定義得出酶活性的計(jì)算公式為：U/L=ΔA/min×KK=106×TV55ε×L×SVε為理論摩爾吸光系數(shù)，由此計(jì)算的K值稱為理論K值。采用理論K值得前提應(yīng)當(dāng)是樣品和試劑的加量準(zhǔn)確、比色杯的光徑準(zhǔn)確，溫度控制精確以及波長(zhǎng)準(zhǔn)確等。事實(shí)上由于各型分析儀的性能不一，特別是儀器的加樣系統(tǒng)、分光系統(tǒng)等方面的差異，以及溫度的影響，使儀器達(dá)不到理論上的最佳狀態(tài)，從而導(dǎo)致該儀器的實(shí)際K值與理論K值不一致，因而有必要獲得實(shí)際的摩爾吸光系數(shù)，然后用來(lái)計(jì)算的K值稱為實(shí)際K值。使用實(shí)際K值應(yīng)注意：①不同的儀器，實(shí)際K值不同②同一儀器的不同時(shí)期，特別是儀器進(jìn)行了維修甚至更換了重要部件，實(shí)際K值不同③不同的檢測(cè)系統(tǒng)K值不同56第五節(jié)自動(dòng)生化分析儀的參數(shù)設(shè)置57儀器的參數(shù)就是儀器工作的指令，參數(shù)的正確設(shè)置和合理使用是儀器正常工作的前提條件。封閉式生化分析儀的參數(shù)及開(kāi)放式生化分析儀的有些參數(shù)由廠家提供無(wú)需設(shè)定。開(kāi)放式生化分析儀的部分參數(shù)，應(yīng)在使用前根據(jù)各自實(shí)驗(yàn)室及各自使用儀器不同，正確設(shè)置。（一）基本參數(shù)設(shè)置試驗(yàn)名稱：指測(cè)定項(xiàng)目的標(biāo)示符，常以項(xiàng)目的英文縮寫來(lái)表示。方法類型：自動(dòng)生化分析儀分析方法是在常規(guī)檢測(cè)方法的基礎(chǔ)上，借助儀器的機(jī)械和電子裝置做進(jìn)一步擴(kuò)展。常用的方法一點(diǎn)終點(diǎn)法、兩點(diǎn)終點(diǎn)法、固定時(shí)間法、連續(xù)監(jiān)測(cè)法等。根據(jù)被測(cè)物質(zhì)的檢測(cè)方法原理選擇其中相應(yīng)的分析方法。583.反應(yīng)溫度：自動(dòng)生化分析儀通常設(shè)有25℃、30℃、37℃三種溫度，為了使反應(yīng)的溫度與體內(nèi)溫度一致，一般選用37℃。4.測(cè)定波長(zhǎng)：①單波長(zhǎng)：當(dāng)測(cè)定體系中只有一種組分或混合溶液中待測(cè)組分的吸收峰與其他共存物質(zhì)的吸收峰無(wú)重疊時(shí)，可用單波長(zhǎng)檢測(cè)。②自動(dòng)生化分析儀常用雙波長(zhǎng)或多波長(zhǎng)。根據(jù)光吸收曲線選擇被測(cè)物質(zhì)反應(yīng)產(chǎn)物最大吸收峰作為主波長(zhǎng)，盡量避開(kāi)或減少來(lái)自試劑空白和樣品空白的干擾；次波長(zhǎng)的選擇原則是干擾物主波長(zhǎng)的吸收與次波長(zhǎng)吸光度越接近越好，測(cè)定時(shí)主波長(zhǎng)的吸光度減去次波長(zhǎng)的吸光度可消除溶血、濁度等干擾物的影響。59反應(yīng)方向：正向反應(yīng)和負(fù)向反應(yīng)，吸光度增加為正向反應(yīng)，吸光度下降為負(fù)向反應(yīng)。樣品量和試劑量：樣品量與試劑量一般按照試劑說(shuō)明書上的比例，并結(jié)合儀器的特性，即樣品和試劑最小加樣量及加樣范圍、最小反應(yīng)體積等，進(jìn)行設(shè)置。亦可按比例縮減或重新設(shè)計(jì)，但需考慮儀器的檢測(cè)靈敏度及線性范圍，盡可能使稀釋倍數(shù)大些，以降低樣品中其他成分的影響。總反應(yīng)容量：一般是180-350μl，總反應(yīng)容量太小，無(wú)法進(jìn)行吸光度測(cè)定。60樣品空白：終點(diǎn)法用，即依據(jù)是否需要扣除空白，選擇YES或NO。孵育時(shí)間：終點(diǎn)法是樣品與試劑混勻開(kāi)始至反應(yīng)終點(diǎn)為止的時(shí)間；固定時(shí)間法是第一吸光度選擇點(diǎn)開(kāi)始至第二吸光度選擇點(diǎn)為止。延遲時(shí)間：連續(xù)監(jiān)測(cè)法用，是樣品與反應(yīng)試劑（第二試劑）混勻至連續(xù)監(jiān)測(cè)期第一吸光度選擇點(diǎn)之間的時(shí)間。連續(xù)監(jiān)測(cè)時(shí)間：在延遲時(shí)間之后即開(kāi)始，一般為60-120s，不少于4個(gè)吸光度監(jiān)測(cè)點(diǎn)。61標(biāo)準(zhǔn)液濃度：已知線性較好者只需一個(gè)濃度，非線性方法學(xué)可5-6個(gè)濃度。校準(zhǔn)K值或理論K值：通過(guò)校準(zhǔn)得到的K值為校準(zhǔn)

K值，由計(jì)算得到的K值為理論K值。計(jì)量單位小數(shù)點(diǎn)位數(shù)：按有效數(shù)字設(shè)定。線性范圍：用于設(shè)定吸光度的最大值和最小值。當(dāng)吸光度在線性范圍時(shí)，認(rèn)為吸光度和物質(zhì)濃度成

正比。超過(guò)線性范圍應(yīng)增加樣品量或減少樣品量重測(cè)6217.底物耗盡：在負(fù)反應(yīng)的酶活性測(cè)定中可設(shè)置此參數(shù)，以規(guī)定一個(gè)吸光度下限。若低于此限時(shí)底物已太少，不足以維持零級(jí)反應(yīng)而導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果不準(zhǔn)確6318.參考值范圍：對(duì)超出此范圍的檢測(cè)結(jié)果，儀器會(huì)打印出提示。ü

質(zhì)控參數(shù)l通常每個(gè)項(xiàng)目要求至少兩個(gè)水平的質(zhì)控品。l每個(gè)質(zhì)控品的名稱、批號(hào)、每個(gè)檢測(cè)項(xiàng)目的靶值和標(biāo)準(zhǔn)差均需設(shè)置于自動(dòng)生化分析儀中。（二）特殊分析參數(shù)試劑空白吸光度范圍試劑空白速率樣品預(yù)稀釋前區(qū)檢查方法學(xué)補(bǔ)償系數(shù)底物耗盡限值64第六節(jié)自動(dòng)生化分析儀的性能指標(biāo)65性能指標(biāo)是評(píng)價(jià)儀器的主要依據(jù)，正確評(píng)價(jià)儀器的性能，合理選用適合自己實(shí)驗(yàn)室的儀器，對(duì)每個(gè)實(shí)驗(yàn)室來(lái)說(shuō)，都非常重要。在自動(dòng)生化分析儀的發(fā)展過(guò)程中，儀器的結(jié)構(gòu)和性能不斷完善，功能和技術(shù)指標(biāo)不斷更新，自動(dòng)程度越來(lái)越高，檢測(cè)速度越來(lái)越快，檢測(cè)結(jié)果的精密度和準(zhǔn)確度也越來(lái)越高。（一）自動(dòng)化程度66自動(dòng)化程度指儀器能夠獨(dú)立完成生化檢驗(yàn)操作程序的能力。一般而言，自動(dòng)化程度越高的儀器使用越簡(jiǎn)單，但維護(hù)要求很高。生化分析儀自化程度的高低，取決于儀器的計(jì)算機(jī)處理功能和軟件的智能化程度，表現(xiàn)為：能否自動(dòng)處理樣品、自動(dòng)加樣、自動(dòng)清洗、自動(dòng)開(kāi)關(guān)機(jī)等。單位時(shí)間處理樣品的能力、可同步分析的項(xiàng)目數(shù)量等。軟件支持功能是否強(qiáng)大，例如，是否有樣品針和試劑針的自動(dòng)報(bào)警功能、試劑剩余量的預(yù)示功能、數(shù)據(jù)分析和處理能力、故障自我診斷功能等。（二）分析效率67分析效率是指在分析方法相同的情況下分析速度的快慢，反應(yīng)單位時(shí)間內(nèi)儀器可處理標(biāo)本的能力。效率的高低取決于一次測(cè)定中可測(cè)樣品的多少和可測(cè)項(xiàng)目的多少。不同類型的自動(dòng)生化分析儀，由于其結(jié)果和設(shè)計(jì)原理以及微機(jī)應(yīng)用程度不同，分析效率差別很大。單通道自動(dòng)生化分析儀一次只能檢測(cè)一個(gè)項(xiàng)目，分析效率低；多通道自動(dòng)生化分析儀可同時(shí)檢

測(cè)多個(gè)項(xiàng)目，分析效率較高。目前，全自動(dòng)生化分

析儀多數(shù)采用同步分析設(shè)計(jì)原理，加樣品、加試劑、混勻、比色、清洗管道和比色杯同時(shí)進(jìn)行，大大提

高了分析效率。小型生化分析儀使用單針加樣和加試劑，速度較慢，分析效率較低。目前，全自動(dòng)生化分析儀使用樣品針和試劑針?lè)謩e加樣加試劑，甚至使用多針采樣方式，使分析效率大大提高。68（三）準(zhǔn)確度和檢測(cè)精密度69準(zhǔn)確度是一臺(tái)分析儀最重要的性能指標(biāo)。是決定自動(dòng)生物化學(xué)分析儀檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性和可靠性的主要因素，其高低取決于分析儀個(gè)部件的加工精密度和精確的工作狀態(tài)。吸樣、加試劑、溫控準(zhǔn)確度，以及光路系統(tǒng)如波長(zhǎng)、檢測(cè)器準(zhǔn)確度和波譜帶寬等都能影響檢測(cè)準(zhǔn)確度，這些因素往往使相同項(xiàng)目的檢測(cè)結(jié)果向同一方向偏離。吸樣精度以及樣品針、試劑針、反應(yīng)杯的交叉污染是影響精密度的主要因素。目前自動(dòng)生化分析儀采用先進(jìn)的液體感應(yīng)探針，準(zhǔn)確吸樣，使樣品攜帶率低于0.5%。特殊的不粘特力倫材料制作的攪拌裝置，采用旋轉(zhuǎn)的攪拌方式，可調(diào)整攪拌針的轉(zhuǎn)速和旋轉(zhuǎn)方式，不僅使混勻更充分，同時(shí)提高了抗交叉污染的能力。

3.探針的自動(dòng)清洗裝置，各種清洗方式的使用，反應(yīng)杯的溫水清洗、擦干、風(fēng)干等，使交叉污染的程度控制在最低限度，從而保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確度。4.恒溫方式和測(cè)光方式不斷改進(jìn)，使自動(dòng)生化分析儀的分析準(zhǔn)確度達(dá)到相當(dāng)?shù)母叨取?0（四）應(yīng)用范圍71應(yīng)用范圍是衡量自動(dòng)生化分析儀的一個(gè)綜合指標(biāo)，與儀器設(shè)計(jì)原理及結(jié)構(gòu)有關(guān)。自動(dòng)生化分析儀的應(yīng)用范圍包括可測(cè)試的生化項(xiàng)目、反應(yīng)的類型及分析方法的種類等。1.可測(cè)試的生化項(xiàng)目：應(yīng)用范圍廣的分析儀不僅能檢測(cè)多種臨床生化檢驗(yàn)指標(biāo)，而且還可進(jìn)行藥物濃度檢測(cè)和各種特種蛋白分析，微量元素測(cè)定等。分析方法：除了分光光度法外，還能進(jìn)行比濁法、離子選擇電極法、熒光光度法等。既能用終點(diǎn)法，又可用連續(xù)檢測(cè)法測(cè)定。雙波長(zhǎng)或多波長(zhǎng)光路設(shè)計(jì)：目前很多自動(dòng)生化分析儀采用了獨(dú)特的雙波長(zhǎng)或多波長(zhǎng)光路設(shè)計(jì)，可有效消除“背景噪聲”，排除樣品中溶血、脂血、黃疸及膽紅素等成分的干擾。雙試劑功能：雙試劑功能的出現(xiàn)為消除樣品的溶血、脂血、黃疸及內(nèi)源性物質(zhì)的干擾提供了有利條件，使儀器的精密度和準(zhǔn)確度大大提高。72第六節(jié) 自動(dòng)生化分析儀試劑盒（片）的選擇和評(píng)價(jià)第十九章

自動(dòng)生化分析儀73生化試劑盒的發(fā)展生化試劑盒的種類生化試劑盒性能的評(píng)價(jià)指標(biāo)生化試劑盒性能的評(píng)價(jià)方法生化試劑盒性能的選擇74生化試劑盒的發(fā)展75自配試劑向商品化試劑盒過(guò)度?液體試劑盒逐漸取代干粉試劑盒單液體試劑盒向液體雙試劑發(fā)展?專用配套試劑盒??生化試劑盒的種類76干粉試劑凍干試劑片狀試劑一、干試劑：??二、單液體試劑適合于半自動(dòng)生化分析儀及小型自動(dòng)生化分析儀三、雙液體試劑按比例混合后等同于單液體試劑，但分開(kāi)保存穩(wěn)定性明顯優(yōu)于單液體試劑。樣品空白：消除內(nèi)源性干擾有些方法必須分兩步進(jìn)行生化試劑盒性能的評(píng)價(jià)指標(biāo)77準(zhǔn)確性：方法原理的先進(jìn)性、配方的優(yōu)化、原料重復(fù)性：批內(nèi)重復(fù)性批間重復(fù)性穩(wěn)定性：試劑盒保存的穩(wěn)定性工作液的穩(wěn)定性實(shí)用性 ：儀器的適用性，方便性，價(jià)格生化試劑盒性能的評(píng)價(jià)方法78試劑的質(zhì)量指標(biāo)之一試劑空白吸光度試劑空白吸光度變化速率： 底物水解過(guò)快副反應(yīng)過(guò)多時(shí)間進(jìn)程曲線??準(zhǔn)確度抗干擾能力穩(wěn)定性觀察?靈敏度?終點(diǎn)法要求速率法要求基質(zhì)效應(yīng)偏差、回收、對(duì)比干擾試驗(yàn)校正K值變化升溫加速實(shí)驗(yàn)K值

合適的靈敏度與樣品量/試劑量單波長(zhǎng)/雙波長(zhǎng)有關(guān)生化試劑盒的選擇791．方法學(xué)選用參考方法WHO推薦的常規(guī)方法已被檢驗(yàn)界所認(rèn)可的方法2.選擇生產(chǎn)廠家衛(wèi)生部的批準(zhǔn)文號(hào)、產(chǎn)品注冊(cè)證、檢驗(yàn)合格證質(zhì)量信譽(yù)好、售后服務(wù)好、供貨及時(shí)有完善的質(zhì)量管理體系和強(qiáng)大的技術(shù)支持3.價(jià)格適宜4.選擇劑型、包裝5

.試劑的性能評(píng)價(jià)和比對(duì)實(shí)驗(yàn)THE

END第十九章

自動(dòng)生化分析儀80二年級(jí)數(shù)學(xué)上冊(cè)主要內(nèi)容81第一單元第二單元第三單元第四單元第五單元第六單元第七單元第八單元長(zhǎng)度單位100以內(nèi)的加法和減法角的初步認(rèn)識(shí)表內(nèi)乘法（一）觀察物體表內(nèi)乘法（二）認(rèn)識(shí)時(shí)間數(shù)學(xué)廣角搭配（一）第一單元長(zhǎng)度單位知識(shí)點(diǎn)821、尺子是測(cè)量物體長(zhǎng)度單位的工具，常用的長(zhǎng)度的單位有：米和厘米。食指的寬度約有1厘米，伸開(kāi)手臂大約1米。1米=100厘米

100厘米=1米2、測(cè)量較短物體通常用厘米做單位，測(cè)量較長(zhǎng)物體通常用米做單位。3、測(cè)量物體長(zhǎng)度時(shí)：把尺子的“0”刻度對(duì)準(zhǔn)物體的左端，再看右端對(duì)著刻度幾，就是幾厘米。物體長(zhǎng)度=較大數(shù)-較小數(shù)例如：從刻度“0”到刻度“6”之間是6厘米（6-0=6），從刻度“6”到刻度“9”之間是3厘米(9-6=3)；還可以用數(shù)一數(shù)的方法數(shù)出物體的長(zhǎng)度。(算，數(shù))4、線段是直的，可以量出長(zhǎng)度。5、畫線段的方法:從尺子的“0”刻度開(kāi)始畫起，長(zhǎng)度是幾就畫到幾。（找點(diǎn)畫線；有時(shí)還要先算出長(zhǎng)度再畫線。如畫一條比6厘米短2厘米的線段。）第二單元

100以內(nèi)的加法和減法知識(shí)點(diǎn)831、用豎式計(jì)算兩位數(shù)加法時(shí)：①相同數(shù)位要對(duì)齊。②從個(gè)位加起。③如果個(gè)位滿10，向十位進(jìn)1。2、用豎式計(jì)算兩位數(shù)減法時(shí)：①相同數(shù)位要對(duì)齊。②從個(gè)位減起。③如果個(gè)位不夠減，從十位退1和個(gè)位組成兩位數(shù)再減，計(jì)算十位時(shí)要記得減去退掉的

1。3、加減混合運(yùn)算，按從左往右的順序計(jì)算，有小括號(hào)的，先算小括號(hào)里的，用分步式計(jì)算。4、求“一個(gè)數(shù)”比“另一個(gè)數(shù)”多多少、少多少？用減法計(jì)算，如70比25多多少？19比46少多少？5、求“比一個(gè)數(shù)多幾的數(shù)”。未知數(shù)比誰(shuí)多幾，就用誰(shuí)加上幾。如：比29多17的數(shù)是多少？（29+17=46）求“比一個(gè)數(shù)少幾的數(shù)”。未知數(shù)比誰(shuí)少幾，就用誰(shuí)減去幾。如：比58少29的數(shù)是多少？

（58-29=29）第三單元 角的初步認(rèn)識(shí)知識(shí)點(diǎn)：841、角有1個(gè)頂點(diǎn)，2條直邊。銳角比直角小，鈍角比直角大，鈍角比銳角大。銳角<直角<鈍角（鈍角>直角>銳角）。2、用三角板可以畫出直角，直角要標(biāo)出直角符號(hào)（也叫垂足符號(hào)）。3、所有的直角都一樣大。要知道一個(gè)角是不是直角，可以用三角板上的直角比一比。長(zhǎng)方形和正方形都有4個(gè)角，4個(gè)都是直角。4、角的大小與兩條邊的長(zhǎng)短無(wú)關(guān)，與兩條邊叉開(kāi)的大小有關(guān)。每一個(gè)三角板上都有3個(gè)角，其中有1個(gè)是直角，另外2個(gè)是銳角。5、角的畫法：從一個(gè)點(diǎn)起，用尺子向不同的方向畫兩條筆直的線，就畫成一個(gè)角。（從一點(diǎn)引出兩條射線所組成的圖形叫作角。）第四、六單元表內(nèi)乘法知識(shí)點(diǎn)851、求幾個(gè)相同加數(shù)的和，用乘法表示更加簡(jiǎn)便。求幾個(gè)相同加數(shù)的和的簡(jiǎn)便運(yùn)算叫做乘法。2、加法和乘法的改寫，如：5+5+5+5寫成乘法算式：5×4或4×5；反之，乘法也可改寫成加法。如：8×4=8+8+8+8(在忘記乘法口訣或口訣記不準(zhǔn)時(shí)，可把乘法算式改寫成加法算式來(lái)計(jì)算。)加法寫成乘法時(shí)，加法的和與乘法的積相同。3、2×7=14讀作：2乘7等于14；3乘4等于