谷子碎米黃酒生理功效的初步研究

谷子碎米黃酒生理功效的初步研究黃酒(Chinesericewine,CRW)作為我國歷史悠久的傳統(tǒng)釀造酒,以獨(dú)特的復(fù)式發(fā)酵釀造工藝,與葡萄酒、啤酒并列成為世界三大釀造酒,成為人們廣為熟知的養(yǎng)生佳品,亦作為我國傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)處方中理想的、常用的藥引子?，F(xiàn)代科學(xué)研究發(fā)現(xiàn),黃酒中含有種類豐富和較高含量的營養(yǎng)成分:黃酒中含有綠原酸、阿魏酸、兒茶素、槲皮素和沒食子酸等十五種以上的多酚,使其具有良好的體外抗氧化功效。γ-氨基丁酸(γ-aminobutyricacid,GABA)是機(jī)體內(nèi)重要的抑制性神經(jīng)遞質(zhì),在多種生理功能調(diào)節(jié)的活動(dòng)中具有舉足輕重的地位。GABA的缺少與阿爾茨海默病等退行性疾病有著密不可分聯(lián)系,而黃酒中GABA的含量十分豐富,可高達(dá)360mg/L。氨基酸不僅是合成蛋白質(zhì)的底物原料,也是調(diào)節(jié)機(jī)體多種生命活動(dòng)的重要參與者;活性肽具有調(diào)節(jié)酶和激素活性,促進(jìn)機(jī)體生長,增強(qiáng)免疫功能,清除體內(nèi)自由基,降低膽固醇含量等眾多生理功能。在釀造酒行列中,黃酒的蛋白質(zhì)含量位居第一,其氨基酸含量和多肽的含量分別是啤酒的7.55倍和4.25倍。黃酒中多糖的含量也遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于葡萄酒和啤酒。低聚糖作為一種不為機(jī)體腸道所消化糖類,在腸部為雙歧菌和其他有益菌所利用,促進(jìn)有益菌增殖,抑制有害菌的生長,從而調(diào)節(jié)胃腸功能。低聚糖也可以促進(jìn)免疫調(diào)節(jié),增強(qiáng)抵抗力。黃酒中還含有包含鎂、鉀、磷等常量元素和鋅、鐵、硒等微量元素在內(nèi)的高達(dá)18種以上的無機(jī)成分;維生素A、維生素B族、維生素C和維生素E等多種維生素在黃酒中也有較高的含量。但對(duì)于黃酒的研究大多只集中于發(fā)酵的工藝和成分的理化分析,雖然目前已有報(bào)道,黃酒對(duì)腸道中的乳桿菌、體內(nèi)的抗氧化能力和黃酒多糖對(duì)小鼠免疫功能的方面具有積極作用;通過鉛中毒模型小鼠發(fā)現(xiàn),黃酒對(duì)鉛中毒具有拮抗作用;且大鼠Y-型電迷宮實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,黃酒可增強(qiáng)大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力。但是,對(duì)黃酒生理保健功效研究僅局限于上述方面的少數(shù)報(bào)道,其他研究甚少,遠(yuǎn)不及對(duì)紅酒保健功能研究得透徹。因此本文通過動(dòng)物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)和生物化學(xué)等技術(shù)方法,對(duì)黃酒養(yǎng)生保健功能進(jìn)行了研究,為提升黃酒的價(jià)值和黃酒進(jìn)一步的推廣提供理論依據(jù)。本實(shí)驗(yàn)研究分為下列三部分:1.黃酒對(duì)運(yùn)動(dòng)小鼠抗疲勞能力的影響以肝糖原(Hepaticglycogen,HG)、血乳酸(Bloodlacticacid,BLC)和血清尿素氮(Bloodureanitrogen,BUN)作為指標(biāo),灌胃給藥探究黃酒對(duì)小鼠抗疲勞能力的影響。小鼠分別灌胃給予0.4ml、0.25ml和0.15ml劑量的黃酒和蒸餾水,連續(xù)灌胃15天,檢測游泳后小鼠肝糖原的含量、尿素氮和血乳酸的變化。結(jié)果發(fā)現(xiàn):黃酒能顯著增加小鼠體內(nèi)HG(p<0.01)的儲(chǔ)備量;提高運(yùn)動(dòng)后小鼠BLC(p<0.05)和BUN(p<0.05)的廓清率。提示黃酒可明顯提高運(yùn)動(dòng)后小鼠的抗疲勞能力。2.黃酒對(duì)小鼠抗氧化、抗衰老能力的影響小鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、衰老模型對(duì)照組、衰老模型黃酒組1和衰老模型黃酒組2,分別用雙蒸水和不同濃度的黃酒灌胃,每天一次,連續(xù)灌胃56天。給藥的同時(shí),衰老模型對(duì)照組、衰老模型黃酒組1與衰老模型黃酒組2小鼠,每日按200mg·kg-1的劑量腹腔注射D-半乳糖,對(duì)照組小鼠腹腔注射相同體積的生理鹽水。(1)以小鼠血清、肝臟中超氧化物歧化酶(Superoxidedismutase,SOD)活性、丙二醛(Malondialdehyde,MDA)含量、肝臟中總膽固醇(Totalcholesterol,TC)、體質(zhì)量變化、胸腺指數(shù)以及脾臟指數(shù)為指標(biāo),研究黃酒對(duì)D-半乳糖所致亞急性衰老小鼠抗氧化能力的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn):各組小鼠血清中SOD活性和MDA含量無明顯差異,不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;但與衰老模型對(duì)照組相比,其余各組血清SOD活性均有不同程度的升高,MDA的含量也具有明顯的降低趨勢;肝臟組織中SOD活性則明顯升高(p<0.01),MDA的含量明顯下降(p<0.01);肝組織中TC含量顯著降低,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.01);體質(zhì)量明顯增加(p<0.05);胸腺指數(shù)顯著提高(p<0.01);脾臟指數(shù)亦有提高(p<0.05)。結(jié)果提示:黃酒能有效提高小鼠體內(nèi)抗氧化酶的活性,降低氧化物含量,抑制衰老小鼠免疫器官的衰退。(2)以小鼠大腦皮質(zhì)中谷胱甘肽過氧化物酶(GlutathionePeroxidase,GSH-Px)活性、過氧化物酶(Catalase,CAT)活性和海馬中乙酰膽堿酯酶(Acetylcholinesterase,AchE)含量為指標(biāo),研究黃酒對(duì)D-半乳糖所致亞急性衰老小鼠腦部的保護(hù)功能。結(jié)果發(fā)現(xiàn):與衰老模型對(duì)照組相比,黃酒組小鼠的大腦皮質(zhì)中GSH-Px(p<0.01)和CAT活性(p<0.05)均有顯著提高;海馬中AchE含量顯著下降,且具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)。結(jié)果提示:黃酒對(duì)衰老小鼠的腦部具有保護(hù)的功效。(3)以小鼠腸道菌群的改變?yōu)橹笜?biāo),研究黃酒對(duì)亞急性衰老小鼠腸道菌群的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn):厚壁菌門和擬桿菌門作為優(yōu)勢菌群在各組小鼠腸道中占有主導(dǎo)地位;與衰老模型對(duì)照組相比,黃酒組小鼠結(jié)腸內(nèi)擬桿菌門相對(duì)豐度升高,厚壁菌門相對(duì)豐度降低;在屬水平上,黃酒組小鼠腸道內(nèi)乳桿菌屬、普雷沃菌屬、Allobaculum等益生菌屬,相對(duì)豐度較衰老模型對(duì)照組均有升高,而Erysipelotrichaceae和Fusobacterium等條件致病菌以及乳球菌屬、根瘤菌屬等致病菌相對(duì)豐度有所降低。3.黃酒對(duì)離體蟾蜍心臟和大鼠離體結(jié)腸運(yùn)動(dòng)曲線波形的影響(1)以離體蟾蜍心臟的收縮幅度和收縮頻率為指標(biāo),以蛙心灌流的方式觀察黃酒對(duì)蟾蜍離體心臟運(yùn)動(dòng)曲線波形的影響。將黃酒、與黃酒相同酒精含量的乙醇水溶液分別用任氏液稀釋至相同濃度(0.5%,1%,2%,5%),進(jìn)行蛙心灌流實(shí)驗(yàn)并分別觀察記錄離體蟾蜍心臟給藥前后的收縮幅度和收縮頻率。結(jié)果發(fā)現(xiàn):與任氏液相比,不同濃度的黃酒均能明顯抑制離體蟾蜍心臟的收縮幅度(P<0.01);不同濃度的酒精對(duì)離體蟾蜍心臟收縮幅度均無明顯影響,0.5%酒精組對(duì)收縮頻率具有抑制作用(P<0.05);黃酒組與酒精組相比,黃酒組離體心臟在收縮幅度(P<0.01)和收縮頻率(P<0.05)上與酒精組具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果提示:黃酒可以明顯抑制離體蟾蜍心臟的收縮幅度,且酒精并非有效成分。(2)以大鼠離體結(jié)腸平滑肌生理曲線的幅度和頻率為指標(biāo),觀察黃酒對(duì)大鼠離體結(jié)腸運(yùn)動(dòng)曲線波形的影響,并通過免疫組化陽性反應(yīng)單標(biāo)記法對(duì)結(jié)腸肌間神經(jīng)叢中pERK1/2陽性神經(jīng)元的情況進(jìn)行了初步探索。將黃酒、與黃酒相同酒精含量的乙醇水溶液和去多酚黃酒分別用臺(tái)氏液稀釋至相同濃度(1.5%,3.5%,10%),進(jìn)行離體結(jié)腸平滑肌實(shí)驗(yàn)并分別觀察記錄離體結(jié)腸給藥前后的收縮幅度和收縮頻率;對(duì)臺(tái)氏液、3.5%和10%黃酒組的離體結(jié)腸腸段進(jìn)行免疫組化處理。結(jié)果發(fā)現(xiàn):與臺(tái)氏液相比,不同濃度的黃酒組均能明顯抑制離體結(jié)腸的收縮幅度和頻率(P<0.01);3.5%和10%酒精組對(duì)離體結(jié)腸收縮幅度具有明顯抑制作用(P<0.01),10%酒精組對(duì)離體結(jié)腸收縮頻率具有明顯抑制作用(P<0.01);不同濃度的去多酚黃酒組能均能明顯抑制離體結(jié)腸的收縮幅度(P<0.01),1.5%和10%去多酚黃酒組對(duì)離體結(jié)腸收頻率度具有明顯抑制作用(P<0.05);通過黃酒組分別與酒精組和去多酚黃酒組比較,發(fā)現(xiàn)各組酒精組在收縮幅度和頻率上抑制率均有所下降(P<0.05),而去多酚黃酒組只有高劑量組對(duì)離體結(jié)腸具有明顯的抑制作用(P<0.05)。此外,免疫組化結(jié)果顯示,3.5%和10%黃酒組的離體結(jié)腸腸段中,肌間神經(jīng)叢內(nèi)pERK1/2陽性神經(jīng)元與臺(tái)氏液相比較,均出現(xiàn)降低。結(jié)果提示:黃酒中的多酚對(duì)離體結(jié)腸平滑肌收縮運(yùn)動(dòng)的抑制具有一定作用,但除多酚外,黃酒中含有的其他物質(zhì)