DB2312T 088-2023 禽用油乳劑滅活疫苗細菌內毒素含量檢驗技術操作規(guī)程

ICS11.220CCSB41

DB2312黑 龍 江 省 綏 化 市 地 方 標 準DB2312/T088—2023禽用油乳劑滅活疫苗細菌內毒素含量檢驗技術操作規(guī)程2023-11-30發(fā)布 2024-01-01實施綏化市市場監(jiān)督管理局發(fā)布DB2312/T088—2023DB2312/T088—2023II前 言本文件按照GB/T1.1-2020《標準化工作導則 第1部分：標準化文件的結構和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請注意本文件的某些內容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構不承擔識別專利的責任。本文件由綏化市農業(yè)農村局歸口。本文件起草單位：黑龍江省百洲生物工程有限公司、明水縣農業(yè)綜合行政執(zhí)法大隊。本文件主要起草人：張越、張洪楠、李山峰、汪洋、王海楠、王東升。DB2312/T088—2023DB2312/T088—2023PAGEPAGE1禽用油乳劑滅活疫苗細菌內毒素含量檢驗技術操作規(guī)程范圍本文件規(guī)定了禽用油乳劑滅活疫苗細菌內毒素含量檢驗方法，本法為凝膠法是利用鱟試劑檢測或量化由革蘭氏陰性菌產(chǎn)生的內毒素的方法。本文件適用于獸用生物制品生產(chǎn)企業(yè)以及經(jīng)營企業(yè)對禽用油乳劑滅活疫苗細菌內毒素含量范圍的檢測。規(guī)范性引用文件下列文件中的內容通過文中的規(guī)范性引用而構成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適《中華人民共和國獸藥典》（2020版）一部附錄“細菌內毒素檢查法”。術語和定義《中華人民共和國獸藥典》（2020版）一部附錄“細菌內毒素檢查法”界定的術語和定義適用于本文件。主要技術內容被檢疫苗處理1-2024h～48h，待其完全凍結后，將其取出置24h～48h3～43500r/min15min供試品溶液稀釋用細菌內毒素檢查用水（0.015EU/ml）10倍、1005001000鱟試劑靈敏度復核實驗當使用新批號的鱟試劑或實驗條件發(fā)生了任何可改變實驗結果的改變時，應根據(jù)《中華人民共和國獸藥典》現(xiàn)行版一部附錄“細菌內毒素檢查法”進行靈敏度復核實驗，確定鱟試劑的靈敏度與標示值相符。供試品干擾試驗供試品初次進行細菌內毒素實驗之前，需根據(jù)《中華人民共和國獸藥典》現(xiàn)行版一部附錄“細菌內毒素檢查法”先進行干擾試驗，以檢測供試品對內毒素檢測試驗是否有干擾或抑制作用，供試品如對實驗有干擾，可通過對供試品進行更大倍數(shù)的稀釋或通過其他適宜的方法(如過濾、中和、透析或加熱處理等)排除干擾。檢測步驟實驗前準備主要儀器超凈工作臺、恒溫培養(yǎng)箱、干燥箱、旋渦混合儀、離心機、移液槍、無熱源槍頭（或去熱源的刻度吸管外徑1×75m25℃干烤1。試劑鱟試劑（0.1ml/支、細菌內毒素工作標準品（10EU/支、細菌內毒素檢查用水（內毒素小于0.015EU/ML。操作步驟按照《中華人民共和國獸藥典》現(xiàn)行版一部附錄“細菌內毒素檢查法”進行檢驗,制備供試品溶0.1ml/支的鱟試20.1ml20.1mlλ的內毒素供試液溶液（分別用相對應的待測稀釋倍數(shù)下的供試品溶液稀20.ml濃度為20.ml內毒素37℃±160min±2min180°。若管內形成凝膠并且凝膠不變形、不從管壁脫落者為陽性；未形成凝膠或形成的凝膠不堅實、變形并從管壁脫落者為陰性。記錄結果。結果判定若陰性對照管均為陰性，陽性對照管均為陽性，供試品陽性對照管均為陽性，判定試驗有效。若供試品管均為陰性，判定供試品內毒素含量小于測定值。若供試品管均為陽性，則判定供試品內毒素4檢驗記錄填寫檢驗記錄，并建立檢驗檔案，內容包