出生前DEHP暴露對(duì)大鼠下丘腦神經(jīng)細(xì)胞及生殖腺細(xì)胞凋亡的影響

出生前DEHP暴露對(duì)大鼠下丘腦神經(jīng)細(xì)胞及生殖腺細(xì)胞凋亡的影響目的:通過(guò)檢測(cè)大鼠下丘腦神經(jīng)細(xì)胞及卵巢/睪丸細(xì)胞凋亡相關(guān)基因的相對(duì)表達(dá)水平,探討出生前DEHP暴露對(duì)子代大鼠神經(jīng)系統(tǒng)及生殖系統(tǒng)毒性的潛在作用機(jī)制。方法:32只健康SD孕鼠隨機(jī)均分為對(duì)照組(玉米油溶劑對(duì)照)和2mg/kg、10mg/kg、50mg/kgDEHP染毒組,每組8只。于孕14天(gestationday14,G14)-G19給予孕鼠每天1次灌胃染毒。仔鼠出生后,每窩隨機(jī)選取雌雄大鼠各1只24h內(nèi)處死,其余大鼠由母乳喂養(yǎng)至3周后斷乳并雌雄分籠正常飼養(yǎng),于10周齡時(shí),每窩隨機(jī)選取雌雄子代大鼠2只,其中1只斷頭處死,另一只多聚甲醛灌流固定后處死。采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)新生大鼠下丘腦神經(jīng)細(xì)胞、成年大鼠視前區(qū)(preopticarea,POA)組織、成年大鼠卵巢/睪丸組織凋亡相關(guān)基因Bcl-2、Bax、Caspase-3的相對(duì)表達(dá)水平,采用TUNEL法檢測(cè)成年大鼠POA細(xì)胞凋亡情況。結(jié)果:1.各處理組間子代新生雌性大鼠下丘腦神經(jīng)組織凋亡相關(guān)基因Caspase-3、Bcl-2、Bax表達(dá)水平以及Bcl-2/Bax比值的差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。2.各處理組間子代新生雄性大鼠下丘腦神經(jīng)組織凋亡相關(guān)基因Caspase-3、Bcl-2、Bax表達(dá)水平以及Bcl-2/Bax比值的差異也均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。3.各處理組間子代成年雌性大鼠POA區(qū)腦組織Bcl-2基因表達(dá)水平的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);Bax基因表達(dá)水平的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),與對(duì)照組相比,2mg/kg、10mg/kg劑量組Bax基因表達(dá)水平均下降,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),而50mg/kg劑量組Bax基因表達(dá)水平與對(duì)照組相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);各組間Bcl-2/Bax比值的差異也有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),與對(duì)照組相比,10mg/kg劑量組Bcl-2/Bax比值升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),而2mg/kg和50mg/kg劑量組Bcl-2/Bax比值與對(duì)照組相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。4.各處理組間子代成年雄性大鼠POA區(qū)腦組織Bcl-2基因表達(dá)水平的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),與對(duì)照組相比,2mg/kg、10mg/kg及50mg/kg劑量組Bcl-2基因表達(dá)水平均下降,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);各組間Bax基因表達(dá)水平的差異也有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),與對(duì)照組相比,2mg/kg、10mg/kg及50mg/kg劑量組Bax基因表達(dá)水平均下降,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);各組間Bcl-2/Bax比值的差異也有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),與對(duì)照組相比,2mg/kg、10mg/kg劑量組Bcl-2/Bax比值升高,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),而50mg/kg劑量組Bcl-2/Bax比值與對(duì)照組相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。5.DEHP染毒后成年子代大鼠POA區(qū)腦組織均未檢測(cè)到凋亡細(xì)胞。6.各處理組間子代成年雌性大鼠卵巢組織Bcl-2、Bax基因表達(dá)水平以及Bcl-2/Bax比值的差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。7.各處理組間子代成年雄性大鼠睪丸組織Bcl-2、Bax基因表達(dá)水平的差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);Bcl-2/Bax比值的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),與對(duì)照組相比,10mg/kg和50mg/kg劑量組Bcl-2/Bax比值均下降,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),而2mg/kg劑量組Bcl-2/Bax比值與對(duì)照組相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論:1.本研究條件下,未發(fā)現(xiàn)出生前暴露DEHP對(duì)新生子代大鼠下丘腦組織細(xì)胞凋亡相關(guān)基因表達(dá)水平有影響。2.本研究條件下,未發(fā)現(xiàn)出生前暴露DEHP對(duì)成年子代大鼠POA腦組織有促細(xì)胞凋亡作用。3.出生前DEH