大鼠缺血性腦梗死相關(guān)神經(jīng)機能聯(lián)系不能的擴散峰度成像評價

大鼠缺血性腦梗死相關(guān)神經(jīng)機能聯(lián)系不能的擴散峰度成像評價背景和目的缺血性腦梗死是腦血管病的一種較為嚴重的表現(xiàn)形式,其高發(fā)病率、高死亡率以及高致殘率使缺血性腦梗死成為了全球一大公共衛(wèi)生問題。它造成的功能缺陷包括梗死核心內(nèi)的神經(jīng)元死亡以及鄰近或遠隔腦組織結(jié)構(gòu)的繼發(fā)性延遲損傷,神經(jīng)機能聯(lián)系不能被用于描述遠離原發(fā)損傷部位的腦功能或代謝下降現(xiàn)象。臨床研究表明繼發(fā)性的遠隔部位損傷與神經(jīng)癥狀學之間存在聯(lián)系,基于這種現(xiàn)象的針對性治療策略或?qū)⒏纳苹颊叩纳窠?jīng)功能預后。排斥導向分子B（repulsiveguidancemoleculeb,RGMb）參與神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育過程,表達隨生長發(fā)育遞減,成年后中樞神經(jīng)系統(tǒng)一旦受損即重新表達或過表達,此時參與神經(jīng)再生抑制、細胞凋亡等作用。針對RGMb的研究或?qū)⒂兄诟纳颇X梗死后的神經(jīng)功能癥狀及預后。擴散峰度成像（diffusionkurtosisimaging,DKI）基于復雜微結(jié)構(gòu)中非高斯特征的水分子擴散分布,應用峰度概念量化水分子擴散偏離高斯模型的程度,較擴散加權(quán)成像、擴散張量成像對組織結(jié)構(gòu)細微變化敏感度高。缺血性病變導致的腦白質(zhì)損傷對遠程部位的繼發(fā)性影響是DKI用于探測神經(jīng)機能聯(lián)系不能的病理基礎(chǔ)。本研究以腦梗死后神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)損傷的發(fā)生機制為主要內(nèi)容,探尋RGMb在腦梗死后原發(fā)灶及遠隔部位（梗死鏡像區(qū)、雙側(cè)小腦半球）的表達變化,應用DKI技術(shù)觀察大鼠腦梗死后相應感興趣區(qū)的信號變化,探討DKI技術(shù)對腦梗病灶及相應遠隔位點病理生理狀態(tài)改變的監(jiān)測價值,為缺血性腦梗死后神經(jīng)機能聯(lián)系不能的發(fā)生機制提供進一步的研究支持。材料與方法健康雄性SD（spraguedawley,SD）大鼠（體重260g-320g）72只,分成兩組:MCAO組（60只,1h、6h、12h、24h、3d每時間點12只）,參考Longa法制備左側(cè)MCAO模型;對照組（12只）,造模方法同MCAO組,但不插入線栓;造模成功后于1h、6h、12h、24h、3d時間點進行神經(jīng)功能評分及磁共振圖像采集。掃描序列包括T₁WI、T₂WI、DWI、DKI。對DKI圖像進行處理分析,分別測量各時間點梗死灶基底節(jié)區(qū)、梗死鏡像側(cè)基底節(jié)區(qū)及雙側(cè)小腦的MD、MK值,計算各時間點MD、MK值相對于對照組的變化率。在對應時間點MCAO組12只大鼠中隨機選取6只大鼠制作腦組織標本,制作感興趣區(qū)切片行HE染色和免疫組化檢測RGMb蛋白表達;對照組于各時間點掃描完成后隨機選取6只大鼠斷頭取腦、制作標本用于HE染色和免疫組化檢測;統(tǒng)計分析均使用SPSS21.0（Chicago,IL）進行。兩樣本均數(shù)比較選擇獨立樣本t檢驗或Mann-WhitneyU秩和檢驗。采用單因素方差分析或Kruskal-Wallis檢驗進行多組樣本間比較,對差異有統(tǒng)計學意義者選擇LSD-t檢驗或Dunn-Bonferroni檢驗進行多重比較。采用Spearmen相關(guān)分析或Pearson相關(guān)分析計算RGMb免疫組化半定量結(jié)果分別與MD值、MK值及神經(jīng)功能評分之間的相關(guān)性。P<0.05時差異有統(tǒng)計學意義。結(jié)果1.梗死灶、梗死鏡像區(qū)及雙側(cè)小腦半球MD值均于12h達最低值,而后升高;梗死灶、梗死鏡像區(qū)、雙側(cè)小腦半球MK值均于12h達最高值,而后降低;2.與對照組比較:MCAO組1h、6h、12h、24h、3d梗死區(qū)MD值顯著降低,MK值顯著升高;梗死鏡像區(qū)6h、12h、24h、3d時MD值顯著降低,1h、6h、12h、24h、3d時MK值顯著升高;梗死同側(cè)及對側(cè)小腦半球1h、6h、12h、24h、3d時MD值顯著降低,且各時間點MK值顯著升高;差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05）;3.MCAO組內(nèi)同一感興趣區(qū)（梗死灶、梗死鏡像區(qū)及雙側(cè)小腦半球）不同時間點間MD、MK值比較,差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）;4.與梗死鏡像區(qū)比較,梗死區(qū)1h、6h、12h、24h、3d時MD值顯著降低,且各時間點MK值顯著升高;與梗死同側(cè)小腦半球相比,梗死對側(cè)小腦半球6h、12h時MD值顯著降低,1h、6h、12h、24h、3d時MK值顯著升高;差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）;5.梗死灶、梗死鏡像區(qū)及雙側(cè)小腦半球不同時間點MK值變化率均高于MD值變化率;6.MCAO組大鼠梗死側(cè)核心區(qū)、梗死灶鏡像區(qū)及雙側(cè)小腦術(shù)后1h起可見RGMb陽性細胞表達增加,24h時陽性細胞數(shù)達高峰;7.與對照組比較:1h、6h、12h、24h、3d時梗死灶、梗死鏡像區(qū)、梗死對側(cè)小腦半球以及6h、12h、24h、3d時梗死同側(cè)小腦半球RGMb平均光密度值顯著升高,差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）;8.MCAO組內(nèi)同一感興趣區(qū)（梗死灶、梗死鏡像區(qū)及雙側(cè)小腦半球）不同時間點間RGMb平均光密度值比較,差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）;9.與梗死鏡像側(cè)比較,梗死區(qū)1h、6h、12h、24h、3d時RGMb平均光密度值顯著升高,差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）;與梗死同側(cè)小腦半球相比,梗死對側(cè)小腦半球1h、6h、12h、24h時RGMb平均光密度值顯著升高,差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）;10.MCAO組大鼠梗死區(qū)、梗死對側(cè)小腦半球RGMb平均光密度值分別與MK值呈顯著正相關(guān)（r=0.892、0.818,P<0.05）;大鼠梗死區(qū)RGMb平均光密度值與MD值呈顯著負相關(guān)（r=-0.814,P<0.05）;11.梗死區(qū)、梗死鏡像區(qū)、梗死同側(cè)小腦半球及對側(cè)小腦半球RGMb平均光密度值分別與神經(jīng)功能評分呈顯著負相關(guān)（r=-0.928、-0.928、-0.928、-0.783,P<0.05）。結(jié)論1.擴散峰度參數(shù)平均擴散峰度MK值較擴散張量參數(shù)平均擴散系數(shù)MD值反映腦梗后大腦神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)連接改變敏感度高;2.DKI可檢測缺血