定性免疫學(xué)檢驗(yàn)的性能驗(yàn)證與質(zhì)量控制課件

定性免疫學(xué)檢驗(yàn)的性能驗(yàn)證與質(zhì)量控制ISO15189實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可系列培訓(xùn)講座1ISO15189實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可系列培訓(xùn)講座xx定性免疫項(xiàng)目如：ELISA檢測(cè)、自身抗體免疫印跡試驗(yàn)、抗核抗體免疫熒光（IIF）檢測(cè)質(zhì)量控制和性能驗(yàn)證及驗(yàn)證內(nèi)容？如何做？標(biāo)準(zhǔn)？23ISO15189實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可系列培訓(xùn)講座4xx5.5.1.1

檢驗(yàn)方法和程序的分析性能驗(yàn)證內(nèi)容應(yīng)參考試劑盒說明書上明確標(biāo)示的性能參數(shù)進(jìn)行驗(yàn)證，至少

應(yīng)包括：檢出限、符合率（采用國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)血清盤或臨

床診斷明確的陰陽(yáng)性樣品各20份或與其他分析方法比

對(duì)），如為定量方法應(yīng)驗(yàn)證精密度（包括重復(fù)性和中

間精密度）；并應(yīng)明確檢驗(yàn)項(xiàng)目的預(yù)期用途，如篩查、診斷、確認(rèn)。CNAS-CL39：2012《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則在臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)領(lǐng)域的應(yīng)用說明-2014改版ISO15189實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可系列培訓(xùn)講座5xxn

試劑盒說明書（先決條件！）n

國(guó)際和／或國(guó)內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)67ISO15189實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可系列培訓(xùn)講座8xxn篩查試驗(yàn)

n診斷試驗(yàn)

n確認(rèn)實(shí)驗(yàn)

nC50nC5nC95ISO15189實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可系列培訓(xùn)講座9xxn篩查試驗(yàn)用于檢測(cè)整個(gè)人群或部分人群中分析物的存在情況。n一般而言，篩查試驗(yàn)應(yīng)當(dāng)具有較高的臨床敏感性（即臨床檢出率大于95%），對(duì)其特異性的要求（和陽(yáng)性預(yù)測(cè)值）則取決于對(duì)各種因素的綜合考慮。如糞便隱血檢測(cè)ISO15189實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可系列培訓(xùn)講座10xxn用于臨床懷疑某種特定疾病或狀況是否存在。n診斷試驗(yàn)需具有良好的敏感性和特異性。n診斷試驗(yàn)后如需進(jìn)行確認(rèn)試驗(yàn)，對(duì)診斷試驗(yàn)的特異性要求可以稍微降低。如各種微生物培養(yǎng)ISO15189實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可系列培訓(xùn)講座11xxn確認(rèn)試驗(yàn)用于驗(yàn)證篩查試驗(yàn)或者診斷試驗(yàn)結(jié)果的確認(rèn)。n對(duì)于確認(rèn)試驗(yàn)，特異性比敏感性更為重要。如梅毒密螺旋體抗體熒光吸收試驗(yàn)（FTA-ABS）ISO15189實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可系列培訓(xùn)講座n一份樣本，在多次重復(fù)實(shí)驗(yàn)中各有50%的幾率獲得陽(yáng)性或陰性的結(jié)果時(shí)該分析物的濃度。C5012xxISO15189實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可系列培訓(xùn)講座13xxn這里的C50指的是一個(gè)處于試劑檢測(cè)臨界點(diǎn)的樣本濃度，其一旦確定，是不變的。n試劑盒CUT-OFF值指的是一個(gè)判斷某一次測(cè)定結(jié)果的由陰性和陽(yáng)性對(duì)照信號(hào)值按一定公式計(jì)算出來的信號(hào)值，每次測(cè)定都會(huì)有所差異。ISO15189實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可系列培訓(xùn)講座n一份樣本，在多次重復(fù)實(shí)驗(yàn)中有95%的幾率獲得陰性結(jié)果時(shí)該分析物的濃度。C514xxISO15189實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可系列培訓(xùn)講座n一份樣本，在多次重復(fù)實(shí)驗(yàn)中有95%的幾率獲得陽(yáng)性結(jié)果時(shí)該分析物的濃度。C9515xxISO15189實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可系列培訓(xùn)講座16xxn應(yīng)熟悉待驗(yàn)證的試劑或系統(tǒng)n進(jìn)行必要的培訓(xùn)，包括樣本的處理和儲(chǔ)存、試劑的處理和儲(chǔ)存、合理的檢測(cè)方案、對(duì)結(jié)果合理的解釋以及系統(tǒng)的質(zhì)量控制等。n制定質(zhì)量保證計(jì)劃n確定患者樣本的數(shù)量及強(qiáng)弱（評(píng)價(jià)重復(fù)性）n確定比較的方法ISO15189實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可系列培訓(xùn)講座17xxn質(zhì)控品：可為商品質(zhì)控品，有陽(yáng)性和陰性。nC50和可能的C5（低于C50濃度20%）及C95濃度樣本（高于

C50 濃度

20%

） ：用于重復(fù)性及最低檢出限證，不少于40次檢測(cè)量）n臨床樣本或血清盤（準(zhǔn)確性驗(yàn)證）（不少于50份陽(yáng)性和陰性樣本）ISO15189實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可系列培訓(xùn)講座18xxn進(jìn)行重復(fù)性研究時(shí)，理想情況下需繪制在規(guī)定條件下候選方法的整個(gè)不精密度曲線，然而具體操作時(shí)需要檢測(cè)的樣本數(shù)量較大n可使用一個(gè)簡(jiǎn)單的方法，即為待評(píng)價(jià)的檢測(cè)方法建立分析物的臨界濃度，并判定某一特定濃度范圍，例如C50±20%，是否包含了C5-C95區(qū)間。n若-20%到+20%濃度范圍包含了C5-C95區(qū)間，那么20%或距離C50更遠(yuǎn)濃度的樣本將得到一致的檢測(cè)結(jié)果，即在

C5-C95區(qū)間之外的樣本檢測(cè)結(jié)果可認(rèn)為是精密的，濃度>C95，將持續(xù)得到陽(yáng)性結(jié)果，濃度<C5，將持續(xù)得到陰性結(jié)果。±20%僅用于舉例，實(shí)驗(yàn)室也可根據(jù)檢驗(yàn)?zāi)康暮涂山邮艿木芏冗x擇±10%或±30%。ISO15189實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可系列培訓(xùn)講座n評(píng)價(jià)定性檢測(cè)試劑或系統(tǒng)精密度時(shí)，需采用濃度接近臨界值的分析物作為檢測(cè)材料，不宜采用陰性低值或強(qiáng)陽(yáng)性樣本來評(píng)價(jià)定性檢測(cè)方法的不精密度。n定性測(cè)定精密度分析質(zhì)量指標(biāo)為C5-C95濃度區(qū)間（亦即“灰區(qū)”），這一區(qū)間范圍≤C50±20%。19xxISO15189實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可系列培訓(xùn)講座20xxISO15189實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可系列培訓(xùn)講座21xxISO15189實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可系列培訓(xùn)講座22xxn檢測(cè)試劑或系統(tǒng)的說明書可能會(huì)注明分析物的臨界濃度，但需驗(yàn)證。n如果臨界濃度未知，則可以將陽(yáng)性樣本進(jìn)行一系列稀釋，然后將他們進(jìn)行重復(fù)檢測(cè)以確定能夠獲得50%陽(yáng)性和50%陰性結(jié)果的那個(gè)稀釋度。這一稀釋度的分析物濃度即為臨界點(diǎn)（C50）。CLSI

EP12-A2

User

Protocol

for

Evaluation

of

QualitativeTestPerformance;

Approved

GuidelineISO15189實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可系列培訓(xùn)講座23xx40次測(cè)試C501陽(yáng)性結(jié)果=<13/40(32.5%)不正確>=27/40(67.5%)2陽(yáng)性結(jié)果（14-26）/40（35%-65%）正確ISO15189實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可系列培訓(xùn)講座24xxISO15189實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可系列培訓(xùn)講座25xxISO15189實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可系列培訓(xùn)講座26xxISO15189實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可系列培訓(xùn)講座27xxn制備評(píng)價(jià)用樣本制備3份樣本。一份濃度為C50，一份為C50+20%，一份為C50-20%。每份樣本的體積需保證40次或更多次重復(fù)檢測(cè)的需要。n評(píng)價(jià)方法每份樣本檢測(cè)40次，確定每一份樣本結(jié)果為陽(yáng)性和陰性的百分比。ISO15189實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可系列培訓(xùn)講座-20%～+20%濃度范圍在C5-C95區(qū)間之內(nèi)；用該方法檢測(cè)，濃度超過C50±20%的樣本檢測(cè)結(jié)果不一致；此結(jié)論錯(cuò)誤率5%，需使用更寬濃度范圍的樣本（如±30%）進(jìn)行另外的試驗(yàn)。28xxISO15189實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可系列培訓(xùn)講座-20%～+20%濃度范圍包含了C5-C95區(qū)間；用該方法檢測(cè)，濃度超過C50±20%的樣本檢測(cè)結(jié)果一致29xxISO15189實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可系列培訓(xùn)講座用該方法檢測(cè)，C50+20%的樣本檢測(cè)結(jié)果一致，C50-20%的樣本不一定能得到一致結(jié)果；需要用低于C50更大百分率濃度的樣本（如-30%）進(jìn)行補(bǔ)充試驗(yàn)。30xxISO15189實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可系列培訓(xùn)講座用該方法檢測(cè)，C50-20%的樣本檢測(cè)結(jié)果一致，C50+20%的樣本不一定能得到一致結(jié)果；需要用高于C50更大百分率濃度的樣本（如+30%）進(jìn)行補(bǔ)充試驗(yàn)。31xxISO15189實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可系列培訓(xùn)講座32xxn檢測(cè)限（

limit

of

detection

）是指檢測(cè)方法可檢測(cè)出的最低被測(cè)量濃度，也稱檢測(cè)低限（lowerdetectablelimit

of

detection ）或最小檢出濃度（

minimumconcentration

），

有時(shí)也稱為分析靈敏度（analytical

sensitivity）。n如前所述，分析物濃度位于C5-C95區(qū)間之外（小于

C5或大于C95）時(shí)，候選方法對(duì)同一樣本的重復(fù)性檢測(cè)將得到相同結(jié)果。因此，C95代表了某一試劑可以測(cè)出的最低被測(cè)量濃度。ISO15189實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可系列培訓(xùn)講座33xxn評(píng)估試劑分析敏感性所使用的樣本，如檢測(cè)項(xiàng)目有國(guó)家參考品，則可使用國(guó)家參考品或經(jīng)國(guó)家參考品標(biāo)化的參考品進(jìn)行檢測(cè)，如沒有國(guó)家參考品，則使用可以溯源或量化的樣本，如國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，或與國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)溯源的樣本，是更有意義的。n處于測(cè)定下限濃度（如C95）的樣本，重復(fù)檢測(cè)20次，應(yīng)至少有18次以上為陽(yáng)性反應(yīng)。34ISO15189實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可系列培訓(xùn)講座35xx概

述特定的定性免疫測(cè)定系統(tǒng)或試劑的準(zhǔn)確度以與臨床診斷、金標(biāo)準(zhǔn)方法和經(jīng)過驗(yàn)證確認(rèn)血清樣本盤的檢測(cè)比較來評(píng)價(jià)，常以敏感性（包括臨床敏感性）/特異性（包括臨床特異性）和陽(yáng)性符合率/陰性符合率來表示。ISO15189實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可系列培訓(xùn)講座36xxn臨床敏感性：在患有明確臨床疾病的患者中，其檢測(cè)結(jié)果呈陽(yáng)性或者超過正常值范圍的比率 （即出現(xiàn)陽(yáng)性結(jié)果和確定患者患?。?；注：該臨床疾病必須由不依賴于被評(píng)價(jià)試驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)確定。n臨床特異性：在沒有特定臨床疾病的患者中，其檢測(cè)結(jié)果呈陰性或者在正常值范圍內(nèi)的比率。ISO15189實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可系列培訓(xùn)講座37xx研究人群有一些研究的人群，僅包括健康人群和疾病嚴(yán)重的人群，而忽略了介于兩種狀態(tài)之間的人群和一些不典型的患病人群。將這部分人群剔除在研究人群之外，會(huì)優(yōu)化評(píng)價(jià)的結(jié)果，造成試劑在實(shí)際應(yīng)用當(dāng)中結(jié)果簡(jiǎn)單明確的假象。因此，研究人群最好符合以下要求：——涵蓋疾病的各個(gè)階段；——涵蓋一些不典型的、較難診斷的患病人群；——各組不同特征的人群均需有一定的數(shù)量?？傊?，研究的人群要能夠代表該檢測(cè)系統(tǒng)或試劑預(yù)期使用的人群，否則給出的數(shù)據(jù)將存在偏倚。ISO15189實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可系列培訓(xùn)講座試劑的檢測(cè)結(jié)果共計(jì)分析物陽(yáng)性分析物陰性陽(yáng)性結(jié)果數(shù)TPFPTP+FP陰性結(jié)果數(shù)FNTNFN+TN共計(jì)TP+FNFP+TNTP+FP+FN+TN敏感性×100%特異性×100%陽(yáng)性預(yù)測(cè)值×100%陰性預(yù)測(cè)值×100%符合率×100%注1:式中：TP—分析物存在時(shí)檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性的數(shù)量。

FP—分析物不存在時(shí)結(jié)果為陽(yáng)性的數(shù)量。

TN—分析物不存在時(shí)檢測(cè)結(jié)果為陰性的數(shù)量。

FN—分析物存在時(shí)檢測(cè)結(jié)果為陰性的數(shù)量。39xxISO15189實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可系列培訓(xùn)講座40xxn作為篩查試驗(yàn)，檢測(cè)的敏感性應(yīng)>95%。作為診斷試驗(yàn)，檢測(cè)敏感性和特異性均應(yīng)>95%。作為確認(rèn)試驗(yàn)特異性應(yīng)>98%-99%。ISO15189實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可系列培訓(xùn)講座以上公式中，1.96是從標(biāo)準(zhǔn)正態(tài)分布對(duì)應(yīng)的95％可信區(qū)間得來的。若置信水平改變，則1.96也應(yīng)被相應(yīng)的百分位點(diǎn)所替代。41xxISO15189實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可系列培訓(xùn)講座表： 待評(píng)價(jià)試劑與診斷標(biāo)準(zhǔn)相比較進(jìn)行敏感性、特異性的計(jì)算舉例42xx待評(píng)價(jià)試劑的檢測(cè)結(jié)果診斷標(biāo)準(zhǔn)分析物存在分析物不存在總計(jì)陽(yáng)性結(jié)果數(shù)88290陰性結(jié)果數(shù)14336350共計(jì)102338440n敏感性=100%×88/102=86.3%

n特異性=100%×336/338

=99.4%n敏感性和特異性的95%置信區(qū)間為敏感性(74.3%,93.2%)和特異性(96.7%,99.9%)。ISO15189實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可系列培訓(xùn)講座43xx概

述n如果沒有可用的診斷標(biāo)準(zhǔn)，那么廠家需提供待評(píng)價(jià)試劑與某一已驗(yàn)證方法進(jìn)行比較的結(jié)果，在這種情況下，則不能夠計(jì)算敏感性和特異性，而是計(jì)算陽(yáng)性符合率和陰性符合率。n這種計(jì)算反映的并非方法的準(zhǔn)確度，而是待評(píng)價(jià)試劑和已驗(yàn)證方法的一致性程度。ISO15189實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可系列培訓(xùn)講座44xx表：待評(píng)價(jià)試劑與已驗(yàn)證方法相比較進(jìn)行陽(yáng)性符合率和陰性符合率的計(jì)算待評(píng)價(jià)試劑的檢測(cè)結(jié)果已驗(yàn)證方法+

-+ab-cd共計(jì)a+cb+d陽(yáng)性符合率=a/(a+c)

×100%。陰性符合率=d/(b+d)

×100%?？偡下?(a+d)/(a+b+c+d)×100%。n需要特別說明的是，陽(yáng)性符合率可以解釋為已驗(yàn)證方法檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性的樣本中待評(píng)價(jià)試劑的陽(yáng)性率，ISO15189實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可系列培訓(xùn)講座45xx表：待評(píng)價(jià)試劑與已驗(yàn)證方法相比較進(jìn)行陽(yáng)性符合率和陰性符合率的計(jì)算舉例待評(píng)價(jià)試劑的檢測(cè)結(jié)果已驗(yàn)證方法總計(jì)+-+801090-8342350共計(jì)88352440陽(yáng)性符合率=80/88

×100%=90.9%。陰性符合率=342/352

×100%=97.2%總符合率=(80+342)/440

×100%=95.9%95%置信區(qū)間為：敏感性(78.8%,96.4%)和特異性(93.5%,98.8%)。ISO15189實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可系列培訓(xùn)講座46xxn每次實(shí)驗(yàn)，應(yīng)立即記錄所有原始檢測(cè)數(shù)據(jù)并復(fù)核，以早期發(fā)現(xiàn)分析系統(tǒng)及人為誤差的來源。n一旦發(fā)現(xiàn)某些結(jié)果是由可解釋的誤差引起的，則應(yīng)將其記錄下來，同時(shí)，這些結(jié)果不能用于數(shù)據(jù)分析。

n如不能確定誤差產(chǎn)生的原因，則保留原始結(jié)果。ISO15189實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可系列培訓(xùn)講座47xxn第三方質(zhì)控品n檢測(cè)系統(tǒng)配套質(zhì)控品

n自制質(zhì)控品質(zhì)控品的來源ISO15189實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可系列培訓(xùn)講座48xxn基質(zhì)：應(yīng)盡量選擇人血清基質(zhì)，工程菌或動(dòng)物源性的基質(zhì)由于人體內(nèi)有大量的異嗜性抗體的存在引起非特異或中和反應(yīng)造成假失控。稀釋液也應(yīng)用人血清，凍干品復(fù)溶可以使用生理鹽水，避免使用動(dòng)物源性的小牛血清等。n穩(wěn)定性：室內(nèi)質(zhì)控需要觀察一段時(shí)間，一般選擇生產(chǎn)者聲明在一定保存條件下如2-8℃或-20℃以下有效期為6個(gè)月以上。要特別注意開瓶有效期和凍干質(zhì)控物復(fù)溶后分裝瓶的有效期與原裝瓶有效期的區(qū)別，通常前二者的有效期要短許多。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)對(duì)這些有效期進(jìn)行驗(yàn)證。質(zhì)控物的選擇ISO15189實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可系列培訓(xùn)講座49xxn質(zhì)控物數(shù)量、實(shí)驗(yàn)位置和頻次：質(zhì)控物數(shù)量應(yīng)滿足一個(gè)批號(hào)至少半年的實(shí)驗(yàn)量。每分析批至少安排一個(gè)弱陽(yáng)性和一個(gè)陰性質(zhì)控，檢測(cè)位置不能固定而應(yīng)隨機(jī)放置。n試劑盒所設(shè)的陰、陽(yáng)性內(nèi)對(duì)照是用來計(jì)算CUT

OFF值或閾值的，也有相應(yīng)的有效性判斷標(biāo)準(zhǔn)，但只能在同批號(hào)試劑內(nèi)使用，不能作為質(zhì)控指標(biāo)，質(zhì)控必須是可以監(jiān)控到不同批號(hào)試劑間的變化的外對(duì)照。ISO15189實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可系列培訓(xùn)講座50xxn高值或超高值陽(yáng)性血清是用來監(jiān)控“HOOK效應(yīng)”的，應(yīng)該在引進(jìn)分析方法或試劑盒時(shí)評(píng)價(jià)，不需要長(zhǎng)期監(jiān)控，同時(shí)其測(cè)定值遠(yuǎn)高于CUT

OFF 值對(duì)邊緣結(jié)果的監(jiān)控也無任何價(jià)值。ISO15189實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可系列培訓(xùn)講座51xxo質(zhì)控品水平：n

陰性質(zhì)控品：特定項(xiàng)目人陰性血清混合物（若為ELISA或CLIA質(zhì)控品濃度宜0.5倍臨界值左右）n

陽(yáng)性質(zhì)控品：特定項(xiàng)目人陽(yáng)性血清混合物o

ANA

1:1000anti-dsDNA 1:100或以上anti-ENA

中強(qiáng)度陽(yáng)性：若組合式檢測(cè)，至少有2個(gè)項(xiàng)目為陽(yáng)性ISO15189實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可系列培訓(xùn)講座52xxo

質(zhì)控品水平：n

弱陽(yáng)性質(zhì)控品：ELISA、CLIA：臨界值2~4倍的樣本IIF:比臨界值高1個(gè)滴度。特定項(xiàng)目人陽(yáng)性血清或陰陽(yáng)性血清混合物。nANA

：1：100～1:320，ANA模型：斑點(diǎn)型，或均質(zhì)型，或核仁型，或胞漿型等（可以每6個(gè)月變換，存儲(chǔ)質(zhì)控品至少有2個(gè)模型?。﹏

anti-dsDNA：1:10～1:32nanti-ENA：低度陽(yáng)性或臨界值2~4倍的樣本（若組合式檢測(cè)，至少有2個(gè)項(xiàng)目為弱陽(yáng)性）ISO15189實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可系列培訓(xùn)講座53xx大量的臨床免疫項(xiàng)目無商品化的質(zhì)控物供應(yīng)，實(shí)驗(yàn)室需自制，其步驟為：收集陽(yáng)性血清(無明顯溶血、黃膽、脂肪血和污染血清)到一定量（至少夠本室使用6個(gè)月以上的量）；傳染性病原體需經(jīng)56℃、10小時(shí)滅活后使用；0.2μm生物濾膜過濾，去除纖維沉淀物和細(xì)菌；稀釋，用正常人血清稀釋；IIF方法ANA弱陽(yáng)性質(zhì)控品（均質(zhì)型），將混合血清濃度調(diào)整到其臨界值（1:100）或高1個(gè)滴度（1:320）或之間；測(cè)定值，與定值參考品進(jìn)行對(duì)比、求值，無參考品時(shí)選擇在2-4倍Cut

Off值附近的陽(yáng)性值；分裝小瓶（每日用量），加蓋、貼簽，-20℃凍存?zhèn)溆?；穩(wěn)定性及瓶間差評(píng)價(jià)。ISO15189實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可系列培訓(xùn)講座54xxn

不同保存條件下以數(shù)值計(jì)算方法：抽樣方法同均一性?2℃-8℃：CV值、累計(jì)CV值，穩(wěn)定期?-80℃：CV值、累計(jì)CV值，穩(wěn)定期室溫：CV值、累計(jì)CV值，穩(wěn)定期以定性判定方法：抽樣方法同均一性?2℃-8℃：滴度的符合率，累計(jì)符合率，穩(wěn)定期?-80℃：滴度的符合率，累計(jì)符合率，穩(wěn)定期室溫：滴度的符合率，累計(jì)符合率，穩(wěn)定期均一性評(píng)估：同批號(hào)質(zhì)控品隨機(jī)抽取5支（瓶），≥80%符合為合格。穩(wěn)定性評(píng)估：評(píng)估1周，1月，3月，6月，1年。有效期一般可標(biāo)定為1年。ISO15189實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可系列培訓(xùn)講座55xxo純定性試驗(yàn)：如免疫印跡、斑點(diǎn)滲濾等，除膜條本身的內(nèi)對(duì)照外：n

每檢測(cè)日或分析批，應(yīng)使用弱陽(yáng)性和陰性質(zhì)控品兩個(gè)水平進(jìn)行質(zhì)控。n

質(zhì)控判定規(guī)則陰性質(zhì)控品的檢測(cè)結(jié)果為陰性弱陽(yáng)性質(zhì)控品的檢測(cè)結(jié)果為弱陽(yáng)性如：抗ENA抗體譜檢測(cè)ISO15189實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可系列培訓(xùn)講座56xxo以滴度或稀釋度判定的試驗(yàn)：如間接免疫熒光法、凝集試驗(yàn)等，n

每檢測(cè)日或分析批，應(yīng)使用弱陽(yáng)性和陰性質(zhì)控品兩個(gè)水平進(jìn)行質(zhì)控。n

質(zhì)控判定規(guī)則：陰性質(zhì)控結(jié)果為陰性弱陽(yáng)性質(zhì)控結(jié)果在靶值上下一個(gè)滴度或稀釋度如：ANA、anti-dsDNA、ANCA、AMA、SMA等ISO15189實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可系列培訓(xùn)講座57xxo

用數(shù)值判定結(jié)果的試驗(yàn)：如ELISA、CLIA等。n

濃度：弱陽(yáng)性質(zhì)控品濃度宜在2～4倍臨界值左右，陰性質(zhì)控品濃度宜0.5倍臨界值左右（兩個(gè)水平）。n

頻次：若是ELISA應(yīng)每板做質(zhì)控，若是CLIA每分析批做質(zhì)控。n

質(zhì)控判定規(guī)則：至少利用其多規(guī)則中一個(gè)偶然誤差及一個(gè)系統(tǒng)誤差規(guī)則。12s警告，13s和22s失控。如：anti-PR3、ACL、anti-CCP等ISO15189實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可系列培訓(xùn)講座58xxn發(fā)現(xiàn)問題n分析問題產(chǎn)生的原因n采取糾正措施加以改進(jìn)，進(jìn)而預(yù)防

n驗(yàn)證和追蹤避免同樣的問題出現(xiàn)第二次！ISO15189實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可系列培訓(xùn)講座59xxn陽(yáng)性質(zhì)控品失控的常見原因:穩(wěn)定、偶然誤差。污染、溫育時(shí)間不n陰性質(zhì)控品的常見失控原因：污染、洗板不干凈、標(biāo)本間的交叉污染。n處理措施：全自動(dòng)加樣系統(tǒng)?一次性吸頭的使用，洗板機(jī)的維護(hù)，洗液的定期更換，溫育溫度和溫

育時(shí)間的保證，加樣器的準(zhǔn)確，熒光顯微鏡的維

護(hù)。ISO15189實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可系列培訓(xùn)講座60xxISO15189實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可系列培訓(xùn)講座61xx檢定或校準(zhǔn)：至少每年1次n加樣器的校準(zhǔn)可依據(jù)ISO/DIS8655文件和國(guó)家技術(shù)監(jiān)督局頒發(fā)的有關(guān)定量、可調(diào)移液器的中華人民共和國(guó)國(guó)家計(jì)量檢定規(guī)程《定量、可調(diào)移液器試行檢定規(guī)程》（JJG646-90）規(guī)定的重量測(cè)試方法。這是目前用于此類儀器有效的校準(zhǔn)方法。ISO15189實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可系列培訓(xùn)講座62xxn

測(cè)定波長(zhǎng)：400-750nmn

吸光度范圍：0.0-4.0，線性誤差<2.0%，精密度CV<0.2%n光學(xué)系統(tǒng)：垂直光路多通道（硅膠管或光導(dǎo)纖維）n

檢測(cè)速度：數(shù)秒n

震板功能

n

溫育功能

n

軟件功能ISO15189實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可系列培訓(xùn)講座n

酶標(biāo)儀校準(zhǔn)至少1年1次，可由計(jì)量部門或廠家完成，實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)證核心：比色測(cè)定的

準(zhǔn)確性線性精密性63xxISO15189實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可系列培訓(xùn)講座穩(wěn)定激發(fā)光優(yōu)質(zhì)光路光強(qiáng)校驗(yàn)64xxISO15189實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可系列培訓(xùn)講座65xxn

校準(zhǔn)：至少每年1次，可有廠家完成，實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)證n

汞燈：壽命一般200小時(shí)，及時(shí)更換n

正確使用：尤其開機(jī)、關(guān)機(jī)（兩次開啟光源間隔要在20分鐘以上）ISO15189實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可系列培訓(xùn)講座66xxn5.6.3.1應(yīng)按照CNAS-RL02《能力驗(yàn)證規(guī)則》的要