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文檔簡介
海南省??谑械谒闹袑W2024屆高三壓軸卷生物試卷注意事項1.考試結(jié)束后,請將本試卷和答題卡一并交回.2.答題前,請務必將自己的姓名、準考證號用0.5毫米黑色墨水的簽字筆填寫在試卷及答題卡的規(guī)定位置.3.請認真核對監(jiān)考員在答題卡上所粘貼的條形碼上的姓名、準考證號與本人是否相符.4.作答選擇題,必須用2B鉛筆將答題卡上對應選項的方框涂滿、涂黑;如需改動,請用橡皮擦干凈后,再選涂其他答案.作答非選擇題,必須用05毫米黑色墨水的簽字筆在答題卡上的指定位置作答,在其他位置作答一律無效.5.如需作圖,須用2B鉛筆繪、寫清楚,線條、符號等須加黑、加粗.一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1.如圖為細胞吸水力隨質(zhì)壁分離程度變化曲線,下列相關敘述正確的是()A.在質(zhì)壁分離復原過程中,細胞吸水力應逐漸升高B.細胞吸水力與質(zhì)壁分離程度呈負相關C.細胞不發(fā)生質(zhì)壁分離就沒有吸水力D.如果增大外界溶液的濃度,則細胞的質(zhì)壁分離程度可能更高2.經(jīng)過半個世紀的改造,勞動者將塞罕壩荒漠改造成了綠色林場,創(chuàng)造了荒漠變林場的人間奇跡。下列有關敘述錯誤的是()A.在一定條件下,人類活動可改變?nèi)郝溲萏娴姆较蚝退俣菳.荒漠生態(tài)系統(tǒng)的組成成分是生產(chǎn)者、消費者和分解者C.隨著森林覆蓋率的上升,塞罕壩林場固定的太陽能逐漸增加D.森林對水土的保持作用體現(xiàn)了生物多樣性的間接價值3.利用無色洋蔥內(nèi)表皮細胞,先后加入適量紅墨水的蔗糖溶液和清水,開展“觀察質(zhì)壁分離及質(zhì)壁分離復原”活動。下列關于該過程的敘述,正確的是()A.本實驗中觀察了兩次,通過前后兩次觀察,采用了自身前后對照B.細胞中液泡顏色變化:淺→深→淺C.細胞吸水能力變化:大→小→大D.視野中紅色區(qū)域變化:小→大→小4.下列關于病毒的敘述中,錯誤的是()A.沒有獨立的代謝活動,因此不能直接在培養(yǎng)液單獨培養(yǎng)B.人體被免疫缺陷病毒感染,可導致獲得性免疫缺陷綜合癥C.逆轉(zhuǎn)錄病毒在宿主細胞內(nèi)增殖,需要由宿主細胞提供的逆轉(zhuǎn)錄酶D.病毒作為基因工程的運載體,利用了病毒的侵染特性5.下列有關細胞分化、衰老、癌變和凋亡的敘述,錯誤的是()A.癌變和正常分化過程中細胞的DNA都發(fā)生了改變B.衰老是多細胞生物體的正?,F(xiàn)象,衰老細胞的細胞核體積增大,核膜內(nèi)折C.分化、衰老和癌變的細胞都發(fā)生了形態(tài)結(jié)構的改變D.正常情況下,機體可以使衰老、癌變的細胞凋亡從而維持內(nèi)部環(huán)境的穩(wěn)定6.據(jù)表分析,下列說法正確的是()組別①②③④⑤⑥質(zhì)量分數(shù)為3%的淀粉溶液(mL)2一2一2一質(zhì)量分數(shù)為3%的蔗糖溶液(mL)一2一2一2質(zhì)量分數(shù)為2%的a-淀粉酶溶液(mL)111111反應溫度(C)006060100100碘液2滴2滴2滴2滴2滴2滴注:表中“-”表示沒有添加。A.α-淀粉酶溶液的用量是無關變量B.①②兩組實驗可用于驗證酶的專一性C.②④⑥三組實驗可說明溫度能影響酶活性D.設計上述實驗的目的是驗證酶的專一性7.真核細胞有邊界,有分工合作的若干組分,有對細胞的遺傳和代謝進行調(diào)控的信息中心,下列有關真核細胞的敘述,正確的是()A.細胞壁是植物細胞的邊界B.細胞的信息中心就是細胞代謝和遺傳的中心C.含葉綠體的細胞,其色素均存在于原生質(zhì)層內(nèi)D.高等動物體內(nèi)的大多數(shù)細胞不會形成紡錘體8.(10分)下列有關生物膜的敘述,不正確的是A.具有雙層膜的細胞器是線粒體、葉綠體B.粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上有合成磷脂的酶C.細胞膜由磷脂、蛋白質(zhì)和少量的糖類組成,有的還含有膽固醇D.細胞膜能夠進行細胞間的信息交流,主要與膜上分布的糖蛋白有關二、非選擇題9.(10分)2018年,中國科學家成功培育全球首個體細胞克隆猴“中中”和“華華”。體細胞克隆猴的培育過程如下圖所示。(1)據(jù)圖可知,克隆猴培育過程用到了____和________動物細胞核移植技術。體細胞核移植技術的難度明顯高于胚胎細胞核移植技術,原因是體細胞____程度高,很難表現(xiàn)出全能性。(2)上述實驗核移植的受體一般選用A猴減數(shù)第二次分裂中期的________,原因是細胞體積大、易操作、營養(yǎng)物質(zhì)豐富且含有促進___表達的物質(zhì)。(3)圖中Y表示____過程。若將代孕母猴換成代孕母羊,則不能順利生出克隆猴,原因是___,導致胚胎死亡。(4)克隆猴的成功為阿爾茨海默癥、白閉癥等腦疾病以及免疫缺陷、腫瘤等疾病機理研究、干預、診治帶來前所未有的光明前景。與以往用普通猴子做實驗相比,克隆猴作為實驗動物模型的兩大優(yōu)勢是:①_______;②___________________________。10.(14分)回答下列(一)、(二)小題:(一)回答以菊花莖段為材料進行組織培養(yǎng)的有關問題:(1)在配制MS培養(yǎng)基時,通常先將各種藥品配制成濃度為配方5~10倍的__________,這樣配制的主要優(yōu)點是__________(A.便于低溫保存B.延長使用時間C.降低稱量誤差D.減少雜菌污染)。從培養(yǎng)基的作用看,在MS培養(yǎng)基中定量添加BA和NAA后的培養(yǎng)基屬于___________培養(yǎng)基。(2)從自然界中獲取的菊花莖段,須先用70%乙醇等進行消毒,最后用__________進行清洗。將莖段插入培養(yǎng)基的過程須在______中的酒精燈火焰旁進行,以保證無菌環(huán)境。(3)從帶芽的莖段上長出叢狀苗____________(填“需要”或“不需要”)經(jīng)歷脫分化,長出的叢狀苗需__________后,再轉(zhuǎn)入培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng)。(4)實驗中選用BA和NAA而不用植物中存在的天然激素的原因是_____________________。(二)腺病毒能引起人呼吸系統(tǒng)不適等癥狀,但致死率低。研究發(fā)現(xiàn)該病毒可作為基因工程的載體。陳薇等科學家研發(fā)了以人5型腺病毒(Ad5)為載體的重組新冠疫苗,這是國內(nèi)第一個進入臨床試驗階段的新冠疫苗。腺病毒載體疫苗生產(chǎn)過程示意圖如下:回答下列問題:(1)在制備人腎上皮細胞系(293細胞)時,發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)一段時間,細胞鋪滿培養(yǎng)瓶后不再分裂,這種現(xiàn)象稱為__________。出現(xiàn)此現(xiàn)象后,需用__________處理,得到細胞懸液,再進行__________培養(yǎng),以獲得更多的293細胞。(2)新冠病毒為RNA病毒,其遺傳物質(zhì)不能直接拼接到質(zhì)粒上,因此在制備以上疫苗時需先通過___________過程獲得相應的DNA。構建重組腺病毒穿梭質(zhì)粒,可使用雙酶切法,使之產(chǎn)生__________的粘性末端,以提高目的基因與質(zhì)粒重組的成功率。據(jù)圖可知需將___________導入293細胞,從而獲得轉(zhuǎn)基因腺病毒。(3)檢測轉(zhuǎn)基因腺病毒攜帶的目的基因是否在人體細胞內(nèi)表達,可檢測細胞內(nèi)是否含有相應的__________或抗原分子,若檢測抗原分子可用__________技術獲得特異性探針。11.(14分)冰葉日中花是一種原產(chǎn)非洲的植物,長期逆境脅迫下,其光合作用能夠從C3途徑(卡爾文循環(huán))可以變?yōu)镃AM途徑(圖一所示)。請回答下列問題:(1)適宜條件下,冰葉日中花通過C3途徑進行光合作用,白天氣孔處于_________狀態(tài),CO2與_________結(jié)合進入卡爾文循環(huán),卡爾文循環(huán)發(fā)生的場所是_________。(2)長期在高溫、缺水、高鹽等逆境脅迫下,冰葉日中花進行CAM途徑,白天氣孔關閉,CO2來源于_________和_________。逆境脅迫下進行CAM途徑的意義是_________。(3)圖二是長期在兩種條件下生長的冰葉日中花某一天的光合曲線圖,表示C3和CAM光合途徑分別是_________曲線與_________曲線。12.某沙漠中的嚙齒動物和螞蟻都以植物種子為食,嚙齒動物喜歡取食大的種子,螞蟻偏愛小的種子。下圖為實驗區(qū)保留和移走全部嚙齒動物后螞蟻種群數(shù)量的變化。回答下列問題:(1)嚙齒動物和螞蟻是否存在競爭關系?___________,依據(jù)是_____________。(2)當所有的嚙齒動物都從實驗區(qū)域中移走后,螞蟻種群數(shù)量的變化是_________,原因是_________。
參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、D【解題分析】
A、在質(zhì)壁分離復原的過程中,細胞液的濃度逐漸減小,細胞吸水力逐漸降低,A錯誤;B、細胞質(zhì)壁分離程度越大,細胞液濃度越大,吸水力越強,細胞吸水力與質(zhì)壁分離程度呈正相關,B錯誤;C、細胞不發(fā)生質(zhì)壁分離說明細胞液的濃度等于或大于外界溶液的濃度,說明細胞仍有吸水力,C錯誤;D、如果增大外界溶液的濃度,則細胞液和外界溶液的濃度差越大,可能導致細胞失水越多,細胞的質(zhì)壁分離程度可能更高,D正確。故選D。【題目點撥】1、原生質(zhì)層:細胞膜和液泡膜以及兩層膜之間的細胞質(zhì)。2、植物細胞的質(zhì)壁分離原理:當細胞液的濃度小于外界溶液的濃度時,細胞就會通過滲透作用而失水,細胞液中的水分就透過原生質(zhì)層進入到溶液中,使細胞壁和原生質(zhì)層都出現(xiàn)一定程度的收縮,由于原生質(zhì)層比細胞壁的收縮性大,當細胞不斷失水時,原生質(zhì)層就會與細胞壁分離。2、質(zhì)壁分離復原的原理:當細胞液的濃度大于外界溶液的濃度時,細胞就會通過滲透作用而吸水,外界溶液中的水分就通過原生質(zhì)層進入到細胞液中,整個原生質(zhì)層就會慢慢地恢復成原來的狀態(tài),緊貼細胞壁,使植物細胞逐漸發(fā)生質(zhì)壁分離復原。2、B【解題分析】
種群是指占有一定空間和時間的同一物種的集合體,群落是指在一定空間內(nèi)所有生物種群的集合體,生態(tài)系統(tǒng)是由生物群落(生產(chǎn)者、消費者、分解者)及非生物環(huán)境(無機物、有機物、氣候、能源)所構成的一個生態(tài)學功能系統(tǒng)。群落演替是指隨著時間的推移一個群落被另一個群落代替的過程??煞譃樵萏媾c次生演替。生物多樣性包括生態(tài)系統(tǒng)多樣性、遺傳多樣性、物種多樣性。關于生物多樣性的價值,科學家一般概括為以下三方面:一是目前人類尚不清楚的潛在價值,二是對生態(tài)系統(tǒng)起著重要調(diào)節(jié)功能的潛在價值(也叫做生態(tài)功能,如森林和草地對水土的保護作用,濕地在蓄洪防旱、調(diào)節(jié)氣候等方面的作用),三是對人類有食用、藥用和工業(yè)原料等實用意義的,以及有旅游觀賞、科學研究和文學藝術創(chuàng)作等非實用意義的直接價值?!绢}目詳解】A、在一定條件下,人類活動可以促進演替也可以破壞演替,可改變?nèi)郝溲萏娴姆较蚝退俣?,A正確;B、荒漠生態(tài)系統(tǒng)的組成成分包括生物成分和非生物成分,生物成分是生產(chǎn)者、消費者和分解者,B錯誤;C、隨著森林覆蓋率的上升,生產(chǎn)者增多,生產(chǎn)者固定的太陽能逐漸增加,C正確;D、森林對水土的保持作用體現(xiàn)了生物多樣性的間接價值,D正確。故選B。3、D【解題分析】
(1)將發(fā)生質(zhì)壁分離的植物細胞置于低濃度的溶液或蒸餾水中,植物細胞會發(fā)生質(zhì)壁分離復原,但如果所用溶液為葡萄糖、KNO3、NaCl、尿素、乙二醇等,發(fā)生質(zhì)壁分離后因細胞主動或被動吸收溶質(zhì)而使細胞液濃度增大,植物細胞會吸水引起質(zhì)壁分離后的自動復原。
(2)質(zhì)壁分離過程中,外界溶液濃度大于細胞液濃度,質(zhì)壁分離程度越大,植物細胞吸水能力越強;質(zhì)壁分離復原過程中,外界溶液濃度小于細胞液濃度。
(3)質(zhì)壁分離與復原過程中水分子的移動是雙向的,總結(jié)果是單向的。
(4)本實驗用顯微鏡觀察了三次,第一次與第二次形成對照,第三次與第二次形成對照,該對照方法為自身對照。【題目詳解】A、本實驗用顯微鏡觀察了三次,第一次與第二次形成對照,第三次與第二次形成對照,該對照方法為自身對照,A錯誤;B、由于用的是無色洋蔥內(nèi)表皮,因此液泡無顏色,B錯誤;
C、細胞失水過程中,吸水能力增強,吸水過程中,吸水能力減弱,即細胞吸水能力變化:小→大→小,C錯誤;
D、細胞失水過程中,細胞縮小,紅色區(qū)域由小變大,吸水過程中,細胞漲大,紅色區(qū)域由大變小,視野中紅色區(qū)域變化:小→大→小,D正確。
故選D。4、C【解題分析】
病毒是非細胞生物,專性寄生在活細胞內(nèi)。病毒依據(jù)宿主細胞的種類可分為植物病毒、動物病毒和噬菌體;根據(jù)遺傳物質(zhì)來分,分為DNA病毒和RNA病毒;病毒由核酸和蛋白質(zhì)組成?!绢}目詳解】A、病毒是專性寄生物,沒有獨立的代謝活動,因此不能直接在培養(yǎng)液單獨培養(yǎng),A正確;B、人體被免疫缺陷病毒如HIV感染,可導致獲得性免疫缺陷綜合癥,B正確;C、逆轉(zhuǎn)錄病毒在宿主細胞內(nèi)增殖,需要的逆轉(zhuǎn)錄酶是在宿主細胞內(nèi)合成的,C錯誤;D、因為病毒具有侵染特性,故能夠作為基因工程的運載體,D正確。故選C。5、A【解題分析】
1、細胞凋亡是由基因決定的細胞編程序死亡的過程。細胞凋亡是生物體正常發(fā)育的基礎,能維持組織細胞數(shù)目的相對穩(wěn)定,是機體的一種自我保護機制。在成熟的生物體內(nèi),細胞的自然更新、被病原體感染的細胞的清除均是通過細胞凋亡完成的。2、細胞分化的概念:在個體發(fā)育中,相同細胞的后代,在形態(tài)、結(jié)構和生理功能上發(fā)生穩(wěn)定性差異的過程。細胞分化過程遺傳物質(zhì)不變,只是基因選擇性表達的結(jié)果。3、衰老細胞的特征:(1)細胞內(nèi)水分減少,細胞萎縮,體積變小,但細胞核體積增大,染色質(zhì)固縮,染色加深;(2)細胞膜通透性功能改變,物質(zhì)運輸功能降低;(3)細胞色素隨著細胞衰老逐漸累積;(4)有些酶的活性降低;(5)呼吸速度減慢,新陳代謝減慢?!绢}目詳解】A、正常分化過程中細胞的DNA未發(fā)生改變,癌變的細胞中遺傳物質(zhì)發(fā)生了變化,A錯誤;B、衰老是多細胞生物體的正?,F(xiàn)象,衰老細胞的細胞核體積增大,核膜內(nèi)折,B正確;C、分化、衰老和癌變的細胞都發(fā)生了形態(tài)結(jié)構的改變,C正確;D、正常情況下,機體可以使衰老、癌變的細胞凋亡從而維持內(nèi)部環(huán)境的穩(wěn)定,D正確。故選A。【題目點撥】本題考查細胞分化、細胞凋亡、細胞衰老、細胞癌變等知識,要求考生識記細胞分化的概念,掌握細胞分化的根本原因;識記細胞凋亡的概念及意義;識記衰老細胞的主要特征;識記癌細胞的主要特征,能結(jié)合所學的知識準確判斷各選項,屬于考綱識記和理解層次的考查。6、A【解題分析】
1.分析表格可知,該實驗的自變量是底物的種類和溫度,可以用于探究酶的專一性或探究影響酶活性的因素。2.探究某自變量對因變量的影響實驗中,無關變量要保持相同且適宜?!绢}目詳解】A、根據(jù)表格數(shù)據(jù)可知,該實驗的自變量是底物的種類和溫度,所以α-淀粉酶溶液的用量是無關變量,A正確;B、①②兩組實驗的溫度不是適宜溫度,此溫度下酶不能正常發(fā)揮作用,所以不能用于驗證酶的專一性,B錯誤;C、α-淀粉酶不能催化蔗糖水解,故②④⑥不能說明溫度能影響酶活性,C錯誤;D、該實驗的目的是探究溫度對酶活性的影響以及驗證酶的專一性,D錯誤。故選A?!绢}目點撥】本題結(jié)合表格中實驗步驟,考查了探究影響酶活性的因素以及酶專一性的實驗,要求學生掌握實驗設計的原則,根據(jù)表格確定實驗的自變量,明確無關變量要保持相同且適宜。7、D【解題分析】
真核生物有以核膜為界的細胞核;細胞的邊界是細胞核;細胞內(nèi)的細胞器結(jié)構與功能密切相關?!绢}目詳解】A、細胞生命系統(tǒng)的邊系是細胞膜,A錯誤;B、真核細胞的遺傳中心是細胞核,代謝的中心是細胞質(zhì)基質(zhì),B錯誤;C、植物細胞內(nèi)含色素的細胞器有葉綠體和液泡,原生質(zhì)層包括細胞膜、液泡膜以及兩層膜之間的細胞質(zhì),細胞液中的色素不在原生質(zhì)層內(nèi),C錯誤;D、動物體內(nèi)只有進行有絲分裂和減數(shù)分裂的細胞才會出現(xiàn)紡錘體,而動物體內(nèi)大部分細胞都已高度分化,不具有增殖能力,D正確。故選D。【題目點撥】本題考查真核細胞結(jié)構和功能的關系,解答此題需把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系,結(jié)合題意分析作答。8、B【解題分析】
細胞膜的主要成分是磷脂和蛋白質(zhì),其中磷脂雙分子層構成細胞膜的基本骨架。含有膜結(jié)構的細胞器有:液泡、線粒體、葉綠體、溶酶體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體等?!绢}目詳解】具有雙層膜的細胞器有線粒體(有氧呼吸的主要場所)、葉綠體(光合作用的場所),A正確;光面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上有合成磷脂的酶,B錯誤;細胞膜由磷脂、蛋白質(zhì)和少量的糖類組成,有的還含有膽固醇,其中磷脂雙分子層構成細胞膜的基本骨架,C正確;細胞膜能夠進行細胞間的信息交流,主要與膜上分布的糖蛋白有關,糖蛋白還具有潤滑、保護等作用,D正確。故選B。二、非選擇題9、動物細胞培養(yǎng)胚胎移植分化(次級)卵母細胞細胞核全能性胚胎移植代孕母羊會對移入其子宮內(nèi)的猴的克隆胚胎產(chǎn)生免疫排斥體細胞克隆猴遺傳背景相同,避免個體間差異對實驗的干擾,大大減少實驗動物的使用數(shù)量;體細胞克隆猴制備時間縮短,基因編輯等可在體外培養(yǎng)的細胞進行?!窘忸}分析】
1、動物細胞培養(yǎng)的條件:(1)無菌、無毒的環(huán)境:①消毒、滅菌;②添加一定量的抗生素;③定期更換培養(yǎng)液,以清除代謝廢物。(2)營養(yǎng)物質(zhì):糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等,還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)。(3)溫度和pH:36.5℃±0.5℃;適宜的pH:7.2~7.4。(4)氣體環(huán)境:95%空氣(細胞代謝必需的)和5%的CO2(維持培養(yǎng)液的pH)。2、動物核移植是將動物的一個細胞的細胞核,移入一個已經(jīng)去掉細胞核的卵母細胞中,使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎,這個新的胚胎最終發(fā)育為動物個體。核移植得到的動物稱克隆動物?!绢}目詳解】(1)據(jù)圖可知,克隆猴培育過程用到了動物細胞培養(yǎng)和胚胎移植、動物細胞核移植技術。體細胞核移植技術的難度明顯高于胚胎細胞核移植技術,原因是體細胞分化程度高,全能性較低。(2)上述實驗核移植的受體一般選用A猴減數(shù)第二次分裂中期的(次級)卵母細胞,原因是卵母細胞體積大、易操作、營養(yǎng)物質(zhì)豐富且含有促進細胞核全能性表達的物質(zhì)。(3)圖中Y表示胚胎移植過程。若將代孕母猴換成代孕母羊,代孕母羊會對移入其子宮內(nèi)的猴的克隆胚胎產(chǎn)生免疫排斥,導致胚胎死亡,則不能順利生出克隆猴。(4)與以往用普通猴子做實驗相比,克隆猴作為實驗動物模型的兩大優(yōu)勢是:①體細胞克隆猴遺傳背景相同,避免個體間差異對實驗的干擾,大大減少實驗動物的使用數(shù)量;②體細胞克隆猴制備時間縮短,基因編輯等可在體外培養(yǎng)的細胞進行?!绢}目點撥】本題考查動物細胞工程的相關知識,要求考生識記核移植的概念及具體過程;識記動物細胞培養(yǎng)的條件,再結(jié)合所學的知識準確答題。10、母液C發(fā)芽(生芽)無菌水超凈臺不需要分株BA和NAA是人工合成激素,植物沒有相關分解酶,作用時間長,效果明顯接觸抑制胰蛋白酶傳代逆轉(zhuǎn)錄不同重組腺病毒穿梭質(zhì)粒和輔助質(zhì)粒mRNA單克隆抗體制備【解題分析】
1、植物組織培養(yǎng)的過程:離體的植物組織、器官或細胞(外植體)脫分化形成愈傷組織,再分化形成胚狀體,最后長出完整植株(新植體)。2、植物組織培養(yǎng)的條件:①細胞離體和適宜的外界條件(如適宜溫度、適時的光照、pH和無菌環(huán)境等);②一定的營養(yǎng)(無機、有機成分)和植物激素(生長素和細胞分裂素)。決定植物脫分化和再分化的關鍵因素是植物激素的種類和比例,特別是生長素和細胞分裂素的協(xié)同作用在組織培養(yǎng)過程中非常重要,被稱為“激素杠桿”。3、動物細胞培養(yǎng)的過程:取動物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個細胞→制成細胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中(原代培養(yǎng))→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細胞用酶分散為單個細胞,制成細胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液(傳代培養(yǎng))→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)。4、基因工程技術的基本步驟:(1)目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術擴增和人工合成;(2)基因表達載體的構建:是基因工程的核心步驟,基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等;(3)將目的基因?qū)胧荏w細胞:根據(jù)受體細胞不同,導入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法;將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法;將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法;(4)目的基因的檢測與鑒定:分子水平上的檢測:①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術;②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術;③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術.個體水平上的鑒定:抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?!绢}目詳解】(一)(1)MS培養(yǎng)基由大量元素、微量元素和有機成分組成,也可將大量元素、微量元素和有機成分分別配制成濃度為配方的5~10倍的母液,用時稀釋,這樣配制的主要優(yōu)點是降低稱量誤差(即C)。MS培養(yǎng)基中定量添加BA和NAA后的培養(yǎng)基屬于發(fā)芽培養(yǎng)基,MS培養(yǎng)基中定量添加NAA后的培養(yǎng)基屬于生根培養(yǎng)基。(2)從自然界中獲取的菊花莖段,須先用70%乙醇等進行消毒,再放入5%次氯酸鈉溶液浸泡,然后用另一5%次氯酸鈉溶液浸泡,最后在超凈臺中用無菌水清洗,將莖的切斷培養(yǎng)在生芽培養(yǎng)基中。(3)從帶芽的莖段上長出叢狀苗不需要經(jīng)歷脫分化,長出的叢狀苗需要分株后,再轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng)。(4)實驗中使用的是人工合成的BA和NAA,是由于植物沒有相關分解酶,作用時間長,效果明顯。(二)(1)細胞鋪滿瓶壁時,會出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象,此時需要胰蛋白酶處理,得到細胞懸液,再進行傳代培養(yǎng),已獲得更多的細胞。(2)新冠病毒是單鏈的RNA病毒,而質(zhì)粒是雙鏈的DNA,因此需要將RNA通過逆轉(zhuǎn)錄得到相應的DNA才能拼接到質(zhì)粒上。構建重組腺病毒穿梭質(zhì)粒,使用雙酶切法產(chǎn)生不同的粘性末端,這樣可以避免目的基因和質(zhì)粒自身連接以及目的基因和質(zhì)粒反向連接,提高目的基因與質(zhì)粒重組的成功率。據(jù)圖可知需將重組腺病毒穿梭質(zhì)粒和輔助質(zhì)粒導入受體細胞293細胞內(nèi)。(3)基因的表達包括轉(zhuǎn)錄和翻譯兩個過程,因此檢測目的基因是否在人體細胞內(nèi)表達,可檢測細胞內(nèi)是否含有相應的mRNA或抗原分子,檢測抗原分子的方法是抗原-抗體雜交
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