坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本制備

坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本制備生理學(xué)實(shí)驗(yàn)課的目的

PurposeofthisCourse驗(yàn)證和鞏固生理學(xué)的基本理論了解獲得生理學(xué)知識的科學(xué)方法掌握生理學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本操作技術(shù)培養(yǎng)嚴(yán)肅的態(tài)度、嚴(yán)格的要求、嚴(yán)密的方法培養(yǎng)對事物觀察、分析、綜合的能力，獨(dú)立思考解決問題的能力以及創(chuàng)新的精神和創(chuàng)新的能力實(shí)驗(yàn)課的要求

RequirementsofthisCourse實(shí)驗(yàn)前:預(yù)習(xí)教材并積極思考實(shí)驗(yàn)中：仔細(xì)觀察并動手操作；愛護(hù)儀器器械和實(shí)驗(yàn)動物實(shí)驗(yàn)后：保持衛(wèi)生清潔，寫好實(shí)驗(yàn)報告并可進(jìn)入論壇討論

實(shí)驗(yàn)報告的一般格式

TheFormatofExperimentalReports姓名、班級、組別(Name,class&group)實(shí)驗(yàn)題目、日期(Title&Date)實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹⒃?Purpose&Principle)實(shí)驗(yàn)對象(Subject)實(shí)驗(yàn)器材和實(shí)驗(yàn)方法(Materials&Methods)實(shí)驗(yàn)結(jié)果(Results)討論(Discussion)結(jié)論(Conclusion)撰寫實(shí)驗(yàn)報告或在以后的科研論文中如何區(qū)分結(jié)果、討論、結(jié)論：

1、結(jié)果:結(jié)果是實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生的純客觀的描述，多以圖表、數(shù)據(jù)形式進(jìn)行表述。

2、討論:①對實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行理論上的分析和論證②對本實(shí)驗(yàn)研究方法的科學(xué)性和局限性的探討③提出可供深入研究的問題，或本實(shí)驗(yàn)尚待進(jìn)一步解決的問題④對未來研究及如何推廣研究提出建議。3、結(jié)論：結(jié)論呈現(xiàn)的是研究中的客觀事實(shí)，應(yīng)是基本肯定的，也可以是否定的，并可以在相同背景下重復(fù)出現(xiàn)；它是對研究工作的一個小結(jié)，交代所研究的問題，所獲得的結(jié)論以及解決問題所達(dá)到的程度，還可以對今后的研究指出方向，提出新的課題。坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本制備PreparationofSciaticNerve-GastrocnemiusMuscleSpecimen1、熟悉并掌握蟾蜍或蛙坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本的制備方法2、熟悉并掌握生理學(xué)實(shí)驗(yàn)常用器械的使用和基本操作技術(shù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康?Purpose)

實(shí)驗(yàn)原理(Principle)

①為什么要做這個實(shí)驗(yàn)？在生理學(xué)實(shí)驗(yàn)中常利用蛙的坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本研究神經(jīng)、肌肉的興奮、興奮性；刺激與反應(yīng)的規(guī)律和肌肉收縮的特征等，制備坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本是生理學(xué)實(shí)驗(yàn)的一項(xiàng)基本操作技術(shù)。②為什么實(shí)驗(yàn)動物選蟾蜍？兩棲動物一些基本生命活動和生理機(jī)能與溫血動物近似，而其離體組織、器官保持活性所需的條件比較簡單，易于控制和掌握，所以生理實(shí)驗(yàn)中常選擇蟾蜍或青蛙的離體組織或器官作為實(shí)驗(yàn)標(biāo)本。③怎樣保持離體器官的活性？

任氏液是—種比較接近兩棲動物內(nèi)環(huán)境的液體，可以用來延長青蛙心臟在體外跳動時間、保持兩棲類其他離體組織器官生理活性等實(shí)驗(yàn)對象(Subject):

蟾蜍或蛙

ToadorFrog

實(shí)驗(yàn)藥品(Drug):

任氏液(Ringer'ssolution)

原液成分:

20%NaCl(ml)32.510%KCl(ml)1.410%CaCl2(ml)1.2

5%NaHCO3(ml)4.01%NaH2PO4(ml)1.0

C6H12O6(g)2.0(可不加,為什么？)H2O加至(ml)1000

實(shí)驗(yàn)器械(Tools)毀髓針：用于破壞蛙的腦和脊髓，怎么破壞？-視頻剪刀：普通剪刀用于剪皮膚、肌肉和骨等粗硬組織；細(xì)剪刀或眼科剪刀用于剪神經(jīng)血管和心包膜等細(xì)軟組織；禁用眼科剪刀剪皮膚、肌肉或其他粗硬物鑷子：圓頭鑷子對組織損傷較小，用于夾捏組織和牽提切口；有齒鑷子用于夾捏骨頭和剝脫蛙皮；眼科鑷子有直彎兩種，用于分離神經(jīng)、血管和夾捏細(xì)軟組織，切不可用鑷子直接夾捏或牽提神經(jīng)血管，為什么？玻璃分針：用于分離血管神經(jīng)等組織，不可用力過猛以防折斷蛙板：用于固定蛙類，以便進(jìn)行解剖和實(shí)驗(yàn)鋅銅弓：用于對標(biāo)本施加刺激，以檢查其興奮性，鋅銅弓的原理？實(shí)驗(yàn)器械(Tools)鋅銅弓用金屬鋅和銅鉚接而成，鋅銅弓在極性溶液中形成回路時，鋅與銅兩極產(chǎn)生約0.5~0.7V的直流電壓，因此可用來刺激神經(jīng)和肌肉，使神經(jīng)或肌肉興奮。這種刺激僅在鋅銅弓與神經(jīng)或肌肉接觸瞬間產(chǎn)生，持續(xù)接觸不能使神經(jīng)或肌肉興奮,為什么？鋅銅弓原理簡介：金屬與溶液之間便產(chǎn)生了電位差——電極電位。如果將Zn和Cu一端接觸，則在接觸部位電流由Cu向Zn方向流動；而在溶液中則相反，由Zn向Cu流動。當(dāng)鋅銅弓接觸組織時（注意：表面必須濕潤），電流便沿Zn→可興奮組織→Cu方向流動，而產(chǎn)生流動作用。這樣，鋅銅弓好像一個電池，Zn如同其陽極，Cu好像陰極而發(fā)揮作用。神經(jīng)或肌肉的電刺激閾值非常小，所以僅用鋅銅弓接觸，即可構(gòu)成刺激，以便檢驗(yàn)組織的機(jī)能活性。Cu和Zn外部電子分布可以由上頁第一段解釋，內(nèi)部怎么理解？實(shí)驗(yàn)方法(Methods)視頻搗毀蟾蜍腦、脊髓小心毒液，雙毀髓時應(yīng)注意使蟾蜍頭部前俯，防止耳后腺分泌物射入實(shí)驗(yàn)者眼內(nèi)，如被射入，應(yīng)立即用生理鹽水沖洗眼睛。剪除蟾蜍軀干上部、內(nèi)臟剝皮

剝皮后蛙的后肢：分離兩腿，制作坐骨神經(jīng)－腓腸肌標(biāo)本

1、分離兩腿(separatethetwolegs)2、游離結(jié)扎腓腸肌(dissociate&ligaturetheGastrocnemius)3、游離坐骨神經(jīng)(dissociatethesciaticnerve)4、游離、剪斷股骨(free&cutthethighbone)5、剪斷膝關(guān)節(jié)(cutthekneejoint)完成制作,用鋅銅弓檢查標(biāo)本興奮性Checktheexcitabilityofthespecimen注意事項(xiàng)（Attention）1、小心